Métodos de Calibração
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- Flávio Arantes Monsanto
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1 Método de Clbrção Sn obtdo por equpmento e ntrumento devem er clbrdo pr evtr erro n medd. Clbrção, de cordo com o INMETRO, é o conjunto de operçõe que etbelece, ob condçõe epecfcd, relção entre o vlore ndcdo por um ntrumento de medção ou tem de medção ou vlore repreentdo por um medd mterlzd ou mterl de referênc, e o vlore correpondente d grndez etbelecd por pdrõe. Modo de clbrção: ) Clbrção Pontul determn-e o vlor de um contnte K com um únco pdrão, qul expre relção entre medd ntrumentl e concentrção do nlto de nteree. Et hpótee deve er tetd expermentlmente. b) Clbrção Multpontul clbrção com m de do pdrõe. O método m empregdo conte n clbrção multpontul com té 5 níve de concentrção, podendo preentr um relção lner (enbldde contnte n fx de concentrção de trblho) ou não-lner (enbldde é função d concentrção do nlto).
2 Método de Clbrção Pr muto tpo de nále químc, repot pr o procedmento nlítco deve er vldo pr quntdde conhecd de conttunte (chmdo pdrõe), de form que repot pr um quntdde deconhecd po er nterpretd. 1. Curv de clbrção extern ou curv nlítc. Curv de dção de pdrão 3. Pdrão nterno CURVA DE CALIBRAÇÃO OU CURVA ANALÍTICA Um curv de clbrção motr repot de um método nlítco pr quntdde conhecd de conttunte. Soluçõe contendo concentrçõe conhecd de conttunte ão chmd de olução pdrão. Soluçõe contendo todo o regente e olvente udo n nále, em dção do conttunte que e deej nlr, ão chmd de olução em brnco. O brnco mede repot ntrumentl do procedmento nlítco pr mpurez ou epéce nterferente no regente.
3 Brnco O brnco ndcm nterferênc de outr epéce n motr e o trço de nlto encontrdo no regente udo n preervção, preprção e nále. Medd frequente de brnco tmbém permtem detectr e nlto provenente de motr prevmente nld etão contmnndo nov nále, por etrem derdo o recpente ou o ntrumento. 1. Brnco do método. Brnco pr regente 3. Brnco de cmpo Brnco de método: é um motr que contém todo o conttunte exceto o nlto, e deve er ud durnte tod etp do procedmento nlítco. Brnco pr regente: é emelhnte o brnco de método, m ele não fo ubmetdo todo o procedmento de prepro de motr. Brnco de cmpo: é emelhnte um brnco de método, m ele fo expoto o locl de motrgem. Ob.: O brnco de método é etmtv m complet d contrbução do brnco pr repot nlítc, endo que u repot deve er ubtríd d repot de um motr rel nte de clculrmo quntdde de nlto n motr.
4 Clbrção Pontul Determnção de ácdo córbco (vtmn C) em medcmento: Brnco: oxdção 0,10 µa Pdrão: [AA] µmol/l; oxdção,39 µa oxdção K [AA] pdrão (,39-0,10) K () K 1,145 µa.l/µmol K 1,145 A.L/mol Amotr: [AA] x µmol/l; oxdção 6,11 µa oxdção K [AA] pdrão (6,11-0,10) 1,145 [AA] [AA] 5,4 µmol/l
5 Curv de Clbrção Extern 1 ª Etp: Soluçõe pdrão: Prepr-e oluçõe de concentrçõe conhecd e dferente do conttunte em nále. Gerlmente et oluçõe ão obtd por convenente dlução de um olução pdrão etoque. ª Etp: Medd de nl nlítco: Medd do nl ntrumentl pr oluçõe pdrão e brnco (5 níve de concentrção no mínmo). 3 ª Etp: Contrução do gráfco do nl obtdo x concentrção do nlto. Exemplo: Determnção mperométrc de ácdo córbco (vtmn C) em medcmento. [AA], µmol/l corrente de oxdção, µa fx corrente corrgd, µa méd em ddo Corrente de oxdção, µa ,98 1,61 Q 1,98 1,59 Q clc > Q tb (0,94) 0, Concentrção de ácdo córbco, µmol/l
6 Ajute d curv de clbrção extern: Conte em trçr melhor ret que e jute o ponto experment que pouem lgum erro e não decrevem extmente um ret. MÉTODO DOS MÍNIMOS QUADRADOS Corrente de oxdção, µa oxdção [AA] + b [AA] devo vertcl oxdção Concentrção de ácdo córbco, µmol/l Preupõe que o erro no vlore de y ão muto more que o erro no vlore de x. A ncertez (devo-pdrão) em todo o vlore de y ão emelhnte. Corrente de oxdção, µa b n x y x n x ( x ) y x oxdção [AA] + b oxdção 1.60 [AA] -0.9 [AA] devo vertcl oxdção Concentrção de ácdo córbco, µmol/l y
7 Etmtv d ncertez pr nclnção, ntereção e y [AA] ox [AA].ox [AA].[AA] d ox [AA] d.d E Devo pdrão y: Devo pdrão : y d 0,39 n y D n 0,04 Y b + * X D 586 Prmeter Vlue Error b Devo pdrão b: Incertez de x x b y D x 0,4 ( yc y) ( x x) y k n R SD N P < Onde; k é o número de veze que motr deconhecd é medd, n é o número de ponto d curv de clbrção Ob.: A prmer c decml do devo-pdrão é o últmo lgrmo gnfctvo do coefcente ngulr e do coefcente lner.
8 COEFICIENTE DE CORRELAÇÃO O coefcente de correlção ndc o gru de correlção entre du vráve, ou qunto ret de regreão e jut o ponto. Um correlção de + 1,0 ou um correlção de - 1,0 ndc um perfeto jute. Correlção é medd d ocção lner entre du vráve. r n x y x y [ ( ) ] n x x n y ( y ) [ ] r r r 0.0 r 0.0
9 16 (µa) (-0.07/0.07) + (1.56/0.01) * C AU (µmol/l) R y 0.1 Corrente, µa Concentrção de ácdo úrco, µmol/l 5,7 0,07 + 1,56C C C 1,56 0,07 + 1,56C enbld de _ nlítc 156µ AL / µ mol AU 0,01 AU AU AU 3,71µ mol / L (3,71 ± 0,04) µ mol / L 3 LD 10 LQ 3x0,07 1,56 10x0,07 1,56 0,13µ mol / L 0,45µ mol / L
10 ADIÇÃO DE PADRÃO N curv de dção de pdrão, quntdde conhecd de conttunte ão dcond à motr deconhecd. Do umento do nl ntrumentl, deduz-e qunto de conttunte etv n motr orgnl. Ete método requer um repot lner pr o conttunte. Umo o método d dçõe de pdrão qundo for dfícl ou mpoível fzer um cóp d mtrz d motr. Em gerl, motr é contmnd com um quntdde ou quntdde conhecd de um olução pdrão contendo o nlto. Clbrção Pontul - du porçõe d motr ão tomd, um porção é medd como de cotume, m um quntdde conhecd d olução pdrão é dcond à egund porção. Aum-e um relção lner entre repot e concentrção do nlto. [ X ] I X [ S] [ ] f + X f I S + X X motr S pdrão Pr um volume ncl V 0 d motr deconhecd e pr o volume dcondo V de pdrão com concentrção [S], o volume totl é V V 0 + V e concentrçõe ão: V V 0 [ X ] f [ X ] [ S] f [ S] V V
11 Exemplo: Um motr de vtmn C preentou um corrente de oxdção de 6,11 µa. Então 5,00 ml de um olução µmol/l de um pdrão de vtmn C fo dcondo 95 ml d motr de vtmn C. E motr reforçd forneceu um nl de 8,15 µa. Encontre concentrção orgnl de vtmn C no medcmento. x [ AA] [ AA] [ AA] [ ] 0, ,715 AA [ AA] 0,6µmol / L + x ,11 8,15
12 Curv de dção de pdrão São fet dçõe de quntdde conhecd d olução pdrão do nlto vár porçõe d motr e um curv nlítc com múltpl dçõe é obtd. Procedmento gráfco pr dção de pdrão: 3.0 5,0 ml de motr deconhecd em cd blão volumétrco V fnl 50,00 ml Snl nlítco Pdrão Adcondo Adcon-e 0, 5, 10, 15 e 0 ml de pdrão 0, mol/l 1.0 Amotr Concentrção, mol/l 3.0 Complete o blão té mrc de ferção Snl nlítco Pdrão Adcondo Amotr Blão [S], mol/l 0,00 0,0 0,04 0,06 0, Volume de pdrão, ml
13 Curv de dção de pdrão undo concentrçõe d oluçõe-pdrão: Snl nlítco Pdrão Adcondo Amotr Concentrção, mol/l y b + X y 0 b + X b X b V X x V totl motr X concentrção do nlto n motr c ( ) y ( x x) y 1 + n Onde; n é o número de ponto
14 Curv de dção de pdrão undo volume d oluçõe-pdrão: nlto nlto nlto pdrão [ P] V K V V + pdrão pdrão totl motr + b + K V motr V totl [ X ] onde; K b [ P] V totl V K motr V totl [ X ] b V motr [ X ] K[ P] KV [ X ] motr [ X ] b[ P] b[ P] V V motr [ P] ( yc ) ( x x) y 1 v + n c v motr Snl nlítco Pdrão Adcondo Amotr Volume de pdrão, ml
15 Determnção de cobre em cchç: Áre de pco [Cu], ppm áre 0,5 3,59 4 4,66 6 5,73 8 6,80 áre áre Concentrção de cobre, ppm,5 + 0,535x 0 [ Cu] 4,71ppm,5 + 0,535 [ Cu] x[ Cu] Anále pontul: [ Cu],5 4 + [ Cu] 4,66 4,66[ Cu] [ Cu] 10,08 +,5 [ Cu] 4,71ppm
16 SENSIBILIDADE ANALÍTICA: É cpcdde de reponder de form confável e menurável à vrçõe de concentrção do nlto. Tmbém expre cpcdde técnc em dferencr do vlore de concentrção próxmo, m enbldde do método depende d nclnção d curv. Exemplo: 10,1 g/l e 10, g/l nl nlítco φ 1 nl nlítco φ C 1 C C 1 C Concentrção enbldde nlítc enbldde _ d _ clbrção Concentrção
17 SELETIVIDADE OU ESPECIFICIDADE: Depende de qunto o método é ndferente à preenç n motr de epéce que poderm nterferr n determnção do nlto. A epéce de nteree deve ter nl nlítco ento de nterferênc que pom levr confuão n dentfcção ou dr mrgem não confbldde o reultdo fnl. LIMITE DE DETECÇÃO: O lmte de detecção (LD) é menor concentrção que pode er dtngud com um certo nível de confnç. Tod técnc nlítc tem um lmte de detecção. Pr o método que empregm um curv nlítc, o lmte de detecção é defndo como concentrção nlítc que ger um repot com um ftor de confnç k uperor o devo pdrão do brnco (motr com concentrção de 1 5 veze mor que o lmte de detecção etmdo),. LD k é enbldde d clbrção () e k é ecolhdo como (9,1 %) ou 3 (98 %). Snl<LD Epéce não detectd o lmte de detecção d concentrção x, porém há preenç de nl nlítco não preente no brnco.
18 LIMITE DE QUANTIFICAÇÃO OU DETERMINAÇÃO: O lmte de quntfcção (LQ) é menor concentrção que pode er determnd em confbldde de precão e extdão cetáve, pr quel condção nlítc. Pr o lmte de quntfcção conder-e que não e tngu o lmte d técnc/método ou equpmento. Pr o método que empregm um curv nlítc, o lmte de quntfcção é defndo como concentrção nlítc que ger um repot com um ftor de confnç gul 10. LQ 10 Snl<LQ Epéce não detectd o lmte de determnção ou quntfcção d concentrção x, porém há preenç de nl nlítco não preente no brnco. O cálculo do devo pdrão do brnco pode er feto com be n vrção d medd do brnco nlítco, d lnh de be ou de um pdrão de concentrção muto bx d() epéce() nld(). A ecolh depende d técnc e/ou ntrumentção nlítc, endo função do prâmetro que etá endo meddo.
19 RECUPERAÇÃO OU FORTIFICAÇÃO: Conte n dção de um quntdde conhecd de nlto à motr pr tetr e repot d motr correponde o eperdo prtr d curv de clbrção. A motr fortfcd ão nld d mem form que deconhecd. Deve-e dconr pequeno volume de um pdrão concentrdo pr evtr mudnç gnfctv no volume de motr. % recuperção C motr _ fortfcd C C dcond motr _ não _ fortfcd x100 Exemplo: Sbe-e que em um motr deconhecd extem 10,0 µg de um nlto por ltro. Um dção ntenconl de 5,0 µg/l fo fet num porção dêntc d motr deconhecd. A nále d motr modfcd forneceu um concentrção de 14,6 µg/l. Determne o percentul de recuperção d ubtânc ntenconlmente dcond.
20 REPETIBILIDADE OU REPETIVIDADE: Máxm dferenç cetável entre du repetçõe, vle dzer do reultdo ndependente, do memo eno, no memo lbortóro e ob mem condçõe. ) Mem motr; b) Memo nlt; c) Memo equpmento; d) Memo momento; e) Memo jute; f) Mem clbrção REPRODUTIVIDADE OU REPRODUTIBILIDADE: Máxm dferenç cetável entre do reultdo ndvdu pr um memo proceo e com dem condçõe como epecfcdo. ) Amotr dferente do memo ponto motrl, ou b) Dferente nlt, ou c) Dferente equpmento, ou d) Dferente técnc, ou e) Dferente clbrçõe, ou jute.
21 EXATIDÃO: 1. Tete de clbrção: cd dez nále relzd um pdrão de concentrção conhecd e dferente do udo pr contrur curv de clbrção deve er nldo.. Recuperção d ubtânc fortfcd. 3. Amotr de controle de quldde: ão medd do controle de quldde que jud elmnr víco ntroduzdo pelo nlt, que be concentrção d motr de verfcção de clbrção. Amotr de compoção conhecd ão fornecd o nlt como e foem deconhecd. 4. Brnco. PRECISÃO: 1. Amotr repetd (repetbldde).. Porçõe repetd d mem motr (reprodutbldde).
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