Artigo Completo. Resumo. Abstract

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1 doi: /rbpv.018e1002 Rev. Brs. Prsitol. Vet., Jboticbl, v. 18, supl. 1, p. 7-13, dez ISSN (eletrônico) Artigo Completo Seleção de isoldos do fungo entomoptogênico Beuveri bssin (Ascomycetes: Clvicipitcee) pr o controle de Rhipicephlus (Boophilus) microplus (Acri: Ixodide) Selection of isoltes of entomopthogenic fungus Beuveri bssin (Ascomycetes: Clvicipitcee) for control of Rhipicephlus (Boophilus) microplus (Acri: Ixodide) Leil A. G. Brci 1 *; José Edurdo M. de Almeid 2 ; Adrin H. de Cmpos Nogueir 3 ; Lucino O. Zppelini 2 ; Angelo P. do Prdo 4 1 Instituto Biológico, Centro de Pesquis e Desenvolvimento de Snidde Animl CPDSA 2 Instituto Biológico, Centro Experimentl do Instituto Biológico CEIB 3 Apt Regionl, Polo Extremo Oeste 4 Deprtmento de Prsitologi, Universidde Estdul de Cmpins UNICAMP Recebido em 2 de Outubro de 2008 Aceito em 15 de Setembro de 2009 Resumo O presente estudo foi conduzido com o objetivo de selecionr isoldos do fungo entomoptogênico Beuveri bssin com potencil ptogênico pr utilizção no controle do crrpto Rhipicephlus (Boophilus) microplus. Num primeir etp, foi vlid eficiênci de trint isoldos n concentrção de conídios.ml 1. Destes, oito (IBCB01, IBCB02, IBCB07, IBCB17, IBCB21, IBCB74, IBCB149, IBCB165) presentrm eficiênci entre 90 e 99%; treze (IBCB03, IBCB14, IBCB16, IBCB24, IBCB95, IBCB97, IBCB102, IBCB141, IBCB146, IBCB147, IBCB150, IBCB154, IBCB157), indicrm percentuis de eficiênci entre 80 e 89,5%; seis (IBCB47, IBCB75, IBCB84, IBCB145, IBCB161, IBCB164), entre 70 e 79% e pens dois, (IBCB13 e IBCB143) revelrm-se pouco virulentos com porcentgens bixo de 70%. N segund etp do trblho, form nlisdos comprtivmente ddos de mortlidde cumuld dos cinco melhores isoldos obtidos n primeir fse (IBCB01, IBCB07, IBCB21, IBCB66, IBCB165). Anlisndo-se os resultdos obtidos in vitro, pode-se imputr que os isoldos IBCB21 e IBCB66 são os que presentm mior potencil pr utilizção cmpo, tendo em vist o controle de R. (B.) microplus. Os isoldos seleciondos, n primeir fse, tmbém form testdos qunto à potencilidde de produção mssl em meio de rroz pré-cozido. A melhor produção mssl foi obtid com o isoldo IBCB66. Plvrs-chve: Crrpto, controle biológico, bovinos. Abstrct This study ws crried out to select isoltes of the entomopthogenic fungus Beuveri bssin with pthogenic potentil to control the Rhipicephlus (Boophilus) microplus tick. The effectiveness of thirty isoltes ws first tested t concentrtion of conidi.ml 1. Of these, eight were evluted (IBCB01, IBCB02, IBCB07, IBCB17, IBCB21, IBCB74, IBCB149, IBCB165) nd showed n effectiveness between 90 nd 99%; thirteen (IBCB03, IBCB14, IBCB16, IBCB24, IBCB95, IBCB97, IBCB102, IBCB141, IBCB146, IBCB147, IBCB150, IBCB154, IBCB157) between 80 nd 89,5%; six (IBCB47, IBCB75, IBCB84, IBCB145, IBCB161, IBCB164) between 70 nd 79%, nd only two (IBCB13 nd IBCB143) hd lower pthogenicity (70% or below). In the second step of the study, the five more effective strins in the first phse of the experiment (IBCB01, IBCB07, IBCB21, IBCB66, IBCB165) were nlyzed comprtively. Bsed on in vitro results, it cn be concluded tht IBCB66 nd IBCB21 re the isoltes with higher potentil for field control of R. (B.) microplus. IBCB01, IBCB07, IBCB21, IBCB66 e IBCB165 isoltes were submitted to conidil production test using rice-bsed substrte. The best mss production of the entomopthogenic fungus ws obtined with the IBCB66 strin. Keywords: Tick, biologicl control, cttle. *Autor pr correspondênci: Leil Aprecid Grdimn Brci Centro de Pesquis e Desenvolvimento de Snidde Animl CPDSA, Instituto Biológico, Av. Conselheiro Rodrigues Alves 1.252, CEP , São Pulo - SP, Brsil e-mil: brci@biologico.sp.gov.br

2 8 Brci, L.A.G. et l. Rev. Brs. Prsitol. Vet. Introdução O crrpto Rhipicephlus (Boophilus) microplus é um dos principis ectoprsits de bovinos dos rebnhos tropicis e subtropicis. Cus consideráveis perds econômics relcionds o próprio prsitismo, trnsmissão de gentes ptogênicos, redução n produção de leite, crne e couro e ltos custos com produtos destindos o seu combte e às doençs por ele trnsmitids (HORN; ARTECHE, 1985). Atulmente, o controle do crrpto é bsedo, principlmente, no emprego de produtos químicos plicdos com o objetivo de eliminr s fses prsitáris que infestm os nimis. A má utilizção dos produtos, ssocid à questão d resistênci, vem umentndo em lrg escl os problems relciondos esses ectoprsits. Os efeitos gerdos por ess situção estão ssocidos o crescente uso de diferentes crrpticids químicos e o esgotmento rápido de moléculs que demndm ltos custos e necessitm de muito tempo pr serem desenvolvids ntes d comercilizção. Outrs questões, não menos séris, estão relcionds à contminção do homem, do meio mbiente e dos resíduos nos produtos serem comercilizdos (FRANCO, 2000). Considerndo-se o mundo globlizdo, cujo mercdo é cd vez mis competitivo e exigente em termos de certificção de qulidde, esses ftores são entrves determinntes qundo se pretende tribuir índices mis ltos de vlor gregdo os produtos. Entre s opções de controle lterntivo de crrpto, destc se o emprego do controle microbino que, n áre grícol, já vem sendo utilizdo há muito tempo, individulmente ou em progrms de mnejo integrdo de prgs (ALMEIDA, 1994; ALMEIDA et l. 1997; BATISTA FILHO et l., 1998; TAMAI et l., 2002; MOINO JUNIOR et l., 2002). Publicções veiculds n litertur ncionl e interncionl pontm os fungos entomoptogênicos como os mis promissores pr utilizção como método de controle do crrpto R. (B.) microplus, sendo s espécies Metrhizium nisoplie e Beuveri bssin s mis pesquisds (BARCI, 1997; SAMISH et l., 2004). Estudos desenvolvidos com diverss estirpes de fungos mostrrm que vribilidde genétic dos isoldos, principlmente qunto prâmetros moleculres e de ptogenicidde, determinm diferençs no gru de virulênci do ptógeno, interferindo, dess mneir, nos percentuis de eficiênci de controle de insetos e ácros (ALMEIDA et l., 1997; TAMAI et l., 2002; FERNANDES et l., 2006). Ddos divulgdos em periódicos ncionis pontm diferentes índices de eficiênci de isoldos de Metrhizium nisoplie pr ovos, lrvs e fêmes de crrptos de bovinos (BITTENCOURT, 1992; BITTENCOURT et l., 1992, 1994, 1994b, 1995b). Em relção à B. bssin, Bittencourt et l. (1995, 1996, 1997, 1997b) reltrm, em condições de lbortório, ção ptogênic de diferentes isoldos dess espécie de fungo nos estágios de vid livre de R. (B.) microplus. Descreverm lterções nos períodos de pré-postur, postur, eclosão, percentul de eclosão, índice de eficiênci reprodutiv e nutricionl ns diverss etps d fse não prsitári de crrptos pós terem sido submetids trtmentos com diferentes concentrções de conídios do fungo B. bssin. Fernndes et l. (2006) estudrm ptogenicidde de isoldos de B. bssin pr lrvs não limentds de R. (B.) microplus. Relcionrm o efeito deletério produzido nesses instres à vribilidde genétic ds estirpes e consttrm que lguns isoldos, pesr de ptogênicos, não são eficzes, pois, mesmo qundo utilizdos em lts concentrções, não produzirm índices de mortlidde stisftórios. Dess mneir, é primordil que se desenvolvm pesquiss direcionds à seleção de isoldos pr que se conheç potencilidde dos diferentes mteriis genéticos e se poss eleger o(s) mis dequdo(s) pr su utilizção em progrms de controle biológico de crrptos. Levndo-se em cont que coleção do Instituto Biológico cont com grnde número de isoldos os quis são mplmente utilizdos no combte de prgs grícols (ALMEIDA et l., 1997; ALMEIDA et l., 1998; MOINO JUNIOR et l., 2002; TAMAI et l., 2002), o presente trblho teve por objetivo vlir in vitro suscetibilidde de lrvs não limentds de R. (B.) microplus à ção ptogênic de 30 isoldos de B. bssin. Mteril e Métodos Os testes experimentis form conduzidos no Instituto Biológico nos lbortórios de Prsitologi Animl (Centro de Pesquis e Desenvolvimento de Snidde Animl) e Controle Biológico (Centro Experimentl do Instituto Biológico). Fêmes ingurgitds form coletds diretmente do niml infestdo experimentlmente, levds o lbortório, onde form seprds e identificds qunto o gênero e espécie, segundo critérios preconizdos pel chve de Argão e Fonsec (1961), lvds com águ destild, secs em ppel mcio, colocds em plcs de Petri e mntids em estuf BOD sob 26,5 C de tempertur e 80% de umidde reltiv. Quinze dis pós o início d oviposição, s posturs form seprds em líquots de 500 mg e colocds em frscos de vidro com cpcidde pr 3 ml fechdos com tecido de orgnz. Os ovos e s lrvs deles eclodids form mntids sob s mesms condições, em estuf BOD. Nos bioensios, form utilizds lrvs infestntes com idde entre 15 e 18 dis. Form vlidos 30 isoldos de B. bssin os quis se encontrm depositdos no Bnco de Microrgnismos Entomoptogênicos Oldemr Crdim Abreu do Lbortório de Controle Biológico/ Centro Experimentl do Instituto Biológico. As suspensões de conídios form preprds prtir dos fungos removidos do meio btt-dextrose-gr (BDA), diluídos em águ destild crescid de Tween 80 0,1% e quntificdos por meio de contgem em câmr de Neubuer (ALVES; MORAES, 1998). A prtir d suspensão-mãe, form preprds suspensões dos diferentes isoldos n concentrção de conídios.ml 1, de cordo com CL90 definid pr o isoldo pdrão IBCB66. O experimento foi desenvolvido em dus fses: Fse 1: Nesse estágio, os isoldos form vlidos somente qunto à eficiênci. Os trint isoldos form divididos em grupos de cinco isoldos mis o pdrão e testdos n concentrção de conídios.ml 1. O grupo testemunh recebeu como trtmento águ destild com esplhnte desivo Tween 80. A vlição do ensio foi relizd 16 dis pós o início do bioensio.

3 v. 18, supl. 1, dez Seleção de isoldos do fungo entomoptogênico Beuveri bssin (Ascomycetes: Clvicipitcee) 9 Fse 2: Após determinr eficiênci dos 29 isoldos, juntmente com o pdrão IBCB66, os que presentrm percentul de mortlidde superior 95% form novmente testdos. Ness fse, s leiturs form feits dirimente com o objetivo de se conhecer distribuição d mortlidde cumuld. Pr o desenvolvimento do experimento foi utilizd metodologi descrit por Brci e Nogueir (2006), que permite observção diári de indivíduos de um mesmo trtmento, pelo menos por 20 dis, sem que hj lterção significtiv nos percentuis de mortlidde do grupo controle. O delinemento experimentl utilizdo foi o inteirmente csulizdo, constndo de 10 repetições por trtmento, sendo utilizds 20 lrvs em cd repetição, perfzendo um totl de 200 indivíduos por trtmento. Os resultdos obtidos n fse 1 e 2 form nlisdos utilizndo o teste ANOVA. As médis form comprds pelo teste de comprção múltipl de Tukey 5% de significânci. A mortlidde corrigid foi clculd segundo fórmul descrit por Abbott (1925). Procedimentos referentes à produção mssl de fungos em meio de rroz cozido form conduzidos no Lbortório de Controle Biológico do Centro Experimentl do Instituto Biológico, situdo em Cmpins, SP. Os isoldos dos fungos B. bssin IBCB01, IBCB07, IBCB21, IBCB66 e IBCB165 form produzidos conforme descrição de Leite et l. (2003). Pr quntificção dos conídios, foi retirdo 1 g do rroz produzido de cd isoldo, o qul foi diluído em 10 ml de suspensão utoclvd de águ destild e Tween 80. Os frscos contendo s suspensões form gitdos e diluídos cerc de vezes pr retird de um pequen líquot, suficiente pr contgem em câmr de Neubuer. Os bioensios form relizdos utilizndo-se cinco repetições pr cd isoldo. Os vlores consigndos form trnsformdos em riz qudrd (x + 0,5) e submetidos à nálise de vriânci, utilizndo-se o teste de Tukey (α = 0,05) pr comprr s médis de produção de conídios. Resultdos Fse 1: As porcentgens de mortlidde de lrvs de R. (B.) microplus trtds com os conídios.ml 1 dos isoldos de B. bssin testdos encontrm-se reunids n Tbel 1. Dos trint isoldos testdos, sete (23,33%) presentrm percentuis de eficiênci iguis ou superiores 90%; treze (43,33) pontrm índices de eficiênci iguis ou superiores 80 e inferiores 90%; oito (23,3%) registrrm percentuis iguis ou superiores 70 e inferiores 80%. Em pens um isoldo (3,3%) foi registrdo percentul de mortlidde entre 60 e 70%; ssim como em um isoldo foi consttdo índice de mortlidde entre 20 e 40%. Nenhum isoldo registrou percentuis de mortlidde inferiores 20% nem entre fix compreendid entre 40 e 60% (Figur 1). Dos 20 isoldos que presentrm percentuis de eficiênci cim de 81%, treze: (IBCB03, IBCB14, IBCB24, IBCB66, IBCB95, IBCB97, IBCB102, IBCB141, IBCB146, IBCB147, IBCB150, IBCB154 e IBCB157) estão grupdos n fix entre Número de isoldos >0 <20 20 <40 40 <60 60 <70 70 <80 80 < Percentul de mortlidde Figur 1. Percentuis de mortlidde obtidos nos trtmentos de lrvs de Rhipicephlus (Boophilus) microplus inoculds com conídios de 30 isoldos de Beuveri bssin (Fse 1). Tbel 1. Mortlidde (%) de lrvs de Rhipicephlus (Boophilus) microplus trtds com suspensões de conídios.ml 1 de trint isoldos de Beuveri bssin (ordem decrescente). Isoldo Mortlidde (%) Isoldo Mortlidde (%) IBCB01 98,5 IBCB14 82,0 IBCB21 97,0 IBCB154 82,0 IBCB07 96,0 IBCB97 81,0 IBCB165 95,5 IBCB146 81,0 IBCB17 95,0 IBCB16 80,0 IBCB02 92,0 IBCB66 80,8* IBCB149 92,0 IBCB75 78,0 IBCB03 89,5 IBCB47 77,0 IBCB102 89,0 IBCB145 77,0 IBCB141 89,0 IBCB84 76,0 IBCB95 88,0 IBCB161 74,0 IBCB150 87,0 IBCB164 73,0 IBCB147 86,0 IBCB74 72,0 IBCB24 85,0 IBCB13 65,5 IBCB157 85,0 IBCB143 33,0 *Médi ds porcentgens de mortlidde do isoldo pdrão obtid nos cinco experimentos. 81 e 90% e sete (IBCB01, IBCB02, IBCB07, IBCB17, IBCB21, IBCB149 e IBCB165) mostrrm porcentgens cim de 91%. Fse 2: Os resultdos obtidos possibilitrm observr que os percentuis de mortlidde de lrvs trtds com conídios.ml 1 dos isoldos IBCB01, IBCB07, IBCB21, IBCB165 e IBCB66 vrirm entre 70,5 e 92,5%. A mortlidde do grupo controle foi de 1,5%. Os índices de mortlidde cumuld e corrigid form muito próximos (Figur 2). Os resultdos descritos encontrm-se grupdos n Tbel 2. A produção de conídios dos isoldos IBCB01, IBCB07, IBCB21, IBCB66 e IBCB165 de Beuveri bssin em meio de rroz pré-cozido, estão representdos n Figur 3. O isoldo IBCB66 presentou mior produção que os demis isoldos, tendo lcnçdo quse o dobro d produção do segundo melhor, o IBCB07. Já os isoldos IBCB01, IBCB 21 e IBCB165 obtiverm s menores produções de conídios por grm de rroz.

4 10 Brci, L.A.G. et l. Rev. Brs. Prsitol. Vet. Discussão % IBCB01 IBCB07 CB21 IBCB66 IBCB165 Controle 0,015 0,015 0,015 0,015 0,015 Mortlidde cumuld 0,705 0,710 0,925 0,770 0,775 Mortlidde corrigid 0,700 0,705 0,924 0,766 0,771 Figur 2. Porcentgem de mortlidde cumuld e corrigid de lrvs de Rhipicephlus (Boophilus) microplus inoculds com suspensão de conídios.ml 1 dos isoldos IBCB01, IBCB07, IBCB66 e IBCB165 de Beuveri bssin. Nº de conídios 10 8.g IBCB 01 IBCB 07 IBCB 21 IBCB 66 IBCB 165 Isoldos de Beuveri bssin Figur 3. Produção de conídios dos isoldos IBCB01, IBCB07, IBCB21, IBCB66 e IBCB165 de Beuveri bssin em meio de rroz pré-cozido. N áre grícol, seleção de isoldos de orgnismos entomoptogênicos é um procedimento bstnte comum, qundo se pretende estbelecer estrtégis de mnejo integrdo de prgs s quis considerm o controle microbino como um elemento do conjunto de etps serem implementds. A utilizção de linhgens e/ou isoldos propridos de gentes biológicos é de fundmentl importânci pr o desenvolvimento de um progrm de controle microbino. Pr tnto, é imprescindível contr com um bom bnco de isoldos, devidmente preservdo e com vribilidde genétic comprovd, pr, então, inicir o progrm prtir d seleção dos mteriis promissores. A vribilidde genétic dos isoldos d coleção de entomoptógenos do Instituto Biológico já foi comprovd, principlmente, qunto à virulênci e ptogenicidde pr insetos e ácros prgs (ALMEIDA et l., 1997; TAMAI et l., 2002.), constituindo-se, dess mneir, em reservtórios diversificdos pr estudos com enfoque n seleção de mteriis que presentem crcterístics dequds pr su utilizção em progrms de controle biológico de prgs grícols e veterináris. Os percentuis de mortlidde obtidos n Fse 1 permitem inferir que os isoldos de B. bssin, depositdos n Coleção de Entomoptógenos do Instituto Biológico, presentm cpcidde de produzir infecção em lrvs de R. (B.) microplus e, portnto, têm potencil de utilizção em progrms de controle do crrpto de bovinos. Esss observções vão o encontro dos reltos d litertur ncionl que registr excelentes resultdos de experimentções conduzids em condições de lbortório, o vlir o efeito de diverss estirpes de B. bssin pr lrvs de R. (B.) microplus (FERNANDES et l., 2006). As observções relizds n presente pesquis estão em concordânci com quels mostrds por Bittencourt et l. (1996), que estudrm eficiênci de dois isoldos de B. bssin 986 e 747 sobre ovos e lrvs de R. (B.) microplus. Os utores concluírm que os isoldos 986 e 747 erm ptogênicos pr lrvs de R. (B.) microplus e que se trtv de um inimigo nturl com potencil pr ser usdo no combte o ectoprsit. As mesms firmções form reportds por Pião et l. (2001), que, o pesquisr suscetibilidde do crrpto bovino frente isoldos de B. bssin, observrm um créscimo n tx de mortlidde de lrvs trtds de 0,8 70,49%. Os mesmos utores pontrm os isoldos AM09, CB07 e JAB07 como os mis efetivos. Os ddos registrdos neste trblho tmbém corroborm os resultdos publicdos por Fernndes et l. (2003), que isolrm três estirpes Bb28, Bb29 e Bb30 de fêmes ingurgitds de R. (B.) microplus coletds cmpo. Testes relizdos em condições de lbortório, conduzidos com os isoldos suprmenciondos, permitirm verificr lts porcentgens de mortlidde de lrvs trtds em comprção o grupo controle. Anlisndo-se os percentuis de eficiênci dos isoldos de B. bssin testdos pr lrvs de R. (B.) microplus, pode-se verificr que, dos trint isoldos vlidos, sete presentrm índices entre 90 e 99%, treze indicrm vlores entre 80 e 89%, oito entre 70 e 79% e pens dois revelrm-se menos ptogênicos com porcentgens bixo de 70%. Com bse nesses ddos, obtidos em condições de lbortório, pode-se concluir que 93,3% dos isoldos vlidos demonstrrm elevd eficiênci no controle de lrvs de R. (B.) microplus. ( 70%). Dependendo d formulção utilizd, os 20 isoldos que presentrm índices superiores 80%, possivelmente, terim potencil ptogênico suficiente pr serem utilizdos cmpo, o que represent um possibilidde de utilizção de 66,6%. Ao confrontr os resultdos obtidos n Fse 2, que teve por finlidde estbelecer comprção entre os melhores isoldos, resslt-se que o percentul de mortlidde do grupo-controle foi extremmente bixo, resultdo que permitiu inferir grnde confibilidde o bioensio e estbelecer prlelos comprtivos com reltiv mrgem de segurnç. A nálise esttístic do número de mortos cumuldos de lrvs de R. (B.) microplus submetids os diferentes trtmentos permitiu estbelecer um comprção diári entre os isoldos utilizdos n experimentção.

5 v. 18, supl. 1, dez Seleção de isoldos do fungo entomoptogênico Beuveri bssin (Ascomycetes: Clvicipitcee) 11 Tbel 2. Número cumuldo de lrvs de Rhipicephlus (Boophilus) microplus morts pós trtmento com diferentes isoldos de Beuveri bssin no período compreendido entre o 1º e o 16º DAÍ. Trtmento Dis pós o trtmento Controle 0,1 ± 0,3162 0,1 ± 0,3162 0,1 ± 0,3162 0,1 ± 0,3162 0,1 ± 0,3162 0,1 ± 0,3162 IBCB01 0,1 ± 0,3162 0,1 ± 0,3162 b 0,1 ± 0,3162 0,1 ± 0,3162 0,2 ± 0,4216 0,4 ± 0,5164 0,5 ± 0,5270 0,8 ± 0,6325 IBCB07 0,2 ± 0,6325 0,4 ± 0,6992 IBCB21 0,3 ± 0,4830 0,7 ± 0,8233 1,3 ± 1,3375 b 1,5 ± 1,4337 b 1,7 ± 1,7670 b 2,5 ± 2,3214 b 3,2 ± 2,7809 b 4,1 ± 3,1073 b IBCB66 0,2 ± 0,4216 0,3 ± 0,4830 b 0,4 ± 0,5164 0,4 ± 0,5164 0,4 ± 0,5164 0,6 ± 0,6992 0,7 ± 0,8233 0,8 ± 0,7888 IBCB165 0,1 ± 0,3162 b 0,1 ± 0,3162 0,1 ± 0,3162 0,1 ± 0,3162 0,1 ± 0,3162 0,4 ± 0,6992 0,5 ± 0,8498 CV 19,1 26,2 29,2 30,4 32,2 35,2 36,8 37,8 F 2,04 3,6 6,9 7,7 7,1 9,6 9,2 10,5 Trtmento Dis pós o trtmento Controle 0,1 ± 0,3162 0,1 ± 0,3162 0,2 ± 0,4216 0,2 ± 0,4216 0,2 ± 0,4216 0,2 ± 0,4216 0,2 ± 0,4216 0,3 ± 0,6749 IBCB01 1,2 ± 0,6325 1,8 ± 1,1353 b 1,8 ± 1,1353 b 2,5 ± 1,7795 b 3,7 ± 2,9078 b 5,2 ± 3,7357 b 7,0 ± 3,8297 b 9,0 ± 4,0000 b IBCB07 0,7 ± 0,8233 1,,8165 b 1,5 ± 0,9718 b 2,7 ± 1,3375 b 3,9 ± 1,9120 b 5,0 ± 1,8856 b 7,6 ± 2,2706 b 10,0 ± 3,3665 b IBCB21 5,2 ± 3,7357 b 7,1 ± 4,9989 c 8,2 ± 5,3500 c 10,2 ± 5,0067 c 11,9 ± 5,0870 c 13,3 ± 5,1435 c 14,3 ± 4,9453 c 15,7 ± 3,5606 c IBCB66 1,1 ± 0,8756 1,4 ± 0,9661 b 1,6 ± 1,1738 b 2,1 ± 1,7288 b 3,4 ± 1,8379 b 5,3 ± 3,1640 b 6,2 ± 3,3928 b 8,4 ± 4,0607 b IBCB165 1,1 ± 0,9944 2,3 ± 1,6364 b 3,0 ± 1,4142 b 3,9 ± 1,5239 b 6,0 ± 3,0185 b 7,2 ± 2,6998 b 8,6 ± 2,9889 b 10,5 ± 2,9907 b CV 36,7 34,3 31,6 27,8 27,0 25,4 20,4 17,1 F 10,8 14,0 17,1 23,7 22,9 23,7 34,3 47,0329 Ddos originis seguidos do erro pdrão d médi; Médis seguids d mesm letr n colun não diferem esttisticmente entre si pelo teste de Tukey (5%); Teste: One Wy ANOVA; Ddos trnsformdos em Riz qudrd (x + 0,5) pr fins de nálise esttístic; DAI Dis pós inoculção; CV coeficiente de vrição; e F Teste F. O fto de não hver diferençs esttístics entre os trtmentos nos dis 1 e 2 er esperdo, um vez que ção do fungo é fundmentlmente mecânic e, de cordo com Alves (1998), em relção insetos, o tempo necessário pr colonizção pode vrir de hors, dependendo do hospedeiro, do ptógeno e ds condições mbientis. Os ddos purdos entre os dis 3 té 9, sob ótic d nálise esttístic, permitirm deduzir que, durnte esse período, com exceção do isoldo IBCB21, todos os outros trtmentos presentrm processo de colonizção pelo entomoptógeno semelhnte, o qul não foi suficientemente deletério pr promover percentul de mortlidde cpz de discrepr esttisticmente dquele presentdo nos indivíduos que compuserm o grupo controle. No 10º DAI, os isoldos IBCB01 e IBCB165 começrm se diferencir d testemunh, indicndo que, provvelmente, esse sej o tempo necessário pr que esses isoldos presentem ção ptogênic suficiente pr controlr lrvs do crrpto sob condições controlds. Entretnto, mesm observção no 11º DAI foi válid pens pr o isoldo IBCB 165. Os vlores observdos no período compreendido entre o 12º e 16º DAI, segundo nálise esttístic, permitirm consolidr o possível perfil de comportmento dos isoldos no decorrer d experimentção. Todos os grupos trtdos presentrm potencil ptogênico suficiente, pr induzir percentuis de mortlidde significtivmente divergentes em relção os purdos no grupo controle. A ção mis eficz foi detectd no grupo que foi submetido o isoldo IBCB21. Os outros isoldos não presentrm diferençs significtivs entre si qunto à ção ptogênic pr lrvs de R. (B.) microplus. A nálise esttístic dos ddos de mortlidde cumuld de lrvs de R. (B.) microplus trtds com os isoldos IBCB01, IBCB07, IBCB21, IBCB66 e IBCB165 de B. bssin, purdos no finl d experimentção, indicrm que o IBCB21 foi o isoldo que mis se destcou durnte tod evolução d experimentção, por presentr mior percentul de mortlidde nos indivíduos que compuserm s dez prcels do ensio e, tmbém, evolução crescente e coerente dos percentuis em put. A nálise suprcitd permitiu inferir que, ness experimentção, o isoldo IBCB21 foi o que presentou melhor desempenho sobre lrvs não limentds do crrpto R. (B.) microplus. Os vlores dos coeficientes de vrição (CV) form mis ltos n fse intermediári em rzão dos bixos vlores ds médis dos trtmentos, principlmente ns fses iniciis do experimento. Anlisndo-se os ddos publicdos por Tmi et l. (2002), que selecionrm isoldos de B. bssin procedentes do mesmo bnco de ptógenos pr o controle do Tetrnichus urtice (ácro rjdo), pode-se verificr que não houve concordânci ns dus pesquiss qunto à conclusão referente à eleição dos melhores isoldos. Ess consttção, provvelmente, pode ser explicd com bse ns diferençs inerentes às peculiriddes ntomofisiológics entre ácros fitófgos e hemtófgos. A demonstrção mior, reveld pelos resultdos obtidos ns dus pesquiss, é que, n Coleção de Entomoptógenos do Instituto

6 12 Brci, L.A.G. et l. Rev. Brs. Prsitol. Vet. Biológico, estão depositdos isoldos de Beuveri bssin de grnde potencil de utilizção como controldores de prgs que cometem culturs vegetis e explorções nimis. Entre s quliddes desejds pr um fungo entomoptogênico, Alves (1998) destc s seguintes: lt eficiênci no controle, grnde cpcidde de disseminção, resistênci às condições dverss, lém de quliddes industriis como ótim produção de conídios e tx de crescimento elevd. Em relção os ddos referentes à produção mssl de conídios em rroz pré-cozido, o isoldo IBCB66 foi o que presentou melhor desempenho ness nálise, seguido pelo IBCB07. Os isoldos IBCB01, IBCB21 e IBCB165 não diferirm esttisticmente entre si qunto o sistem de produção em lrg escl. Levndo-se em cont que tods s condições disponíveis pr o crescimento dos fungos n mss de rroz form s mesms, tis como, entre outrs: teor de umidde, tempo de cozimento do rroz, flutução d tempertur n sl de produção e exposição o mesmo nível de contminção o nlisr os ddos obtidos, pode-se inferir que todos os isoldos testdos presentrm níveis de produção de conídios muito próximos. Testes dicionis são necessários pr se vlir o potencil de cd um desses isoldos, visndo su utilizção como formulções micocricids. Conclusões Todos os isoldos testdos são eficientes e cpzes de promover infecção em lrvs de R. (B.) microplus mntids em condições controlds de tempertur e umidde (27 C ± 1 e UR 80%). A miori ds ceps de Beuveri bssin testds (73%) tem potencil pr utilizção no controle de lrvs do crrpto R. (B.) microplus. Os isoldos IBCB01, IBCB07, IBCB21, IBCB47, IBCB66 e IBCB165 de B. bssin são ltmente ptogênicos pr fse de lrv não limentd do crrpto B. microplus. O isoldo IBCB 21 é o mis virulento e presentou melhor desempenho qunto à evolução de colonizção de lrvs não limentds do crrpto R. (B.) microplus. O isoldo IBCB66 presentou melhores índices de produção mssl em meio de rroz pré-cozido. Referêncis ABBOTT, W. S. A method for computing the effectiviness of insecticides. Journl of Economic Entomology, v. 18, n. 15, p , ALMEIDA, J. E. M. Avlição de fungos entomoptogênicos visndo o controle do cupim subterrâneo Heterotermes tenuis (Hgen, 1858) (Isopter, Rhinotermitide). Pircicb, p. Dissertção (Mestrdo em Entomologi) - Universidde de São Pulo - USP. ALMEIDA, J. E. M.; ALVES, S. B.; PEREIRA, R. M. Selection of Beuveri spp. isoltes for control of the termite Heterotermes tenuis (Hgen, 1858). Journl of Applied Entomology, v. 121, n. 9/10, p , ALMEIDA, J. E. M. et l. Controle do cupim subterrâneo Heterotermes tenuis (Hgen) com iscs Termitrp impregnds com inseticids ssocidos o fungo entomoptogênico Beuveri bssin (Bls.) Vuill. 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