Tumores Gastrointestinais BIOLOGIA MOLECULAR
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- Edison Fagundes Ximenes
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1 Tumores Gastrointestinais BIOLOGIA MOLECULAR JOSE CLAUDIO CASALI DA ROCHA Oncogeneticista Clinica COI Clinica Salus
2 Renovação e diferenciação epitelial. A Renovação do epitélio através da divisão mitótica de células-tronco na base da cripta. B Diferenciação das células-tronco à medida que vão chegando à superfície intestinal. Adaptado de Radtke & Clevers, 2005.
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5 Polipose colônica: pólipo com transformação maligna
6 esparsa FAP profusa atenuada Variações fenotípicas dependem da localização e do tipo da mutação no gene APC
7 FAP - Correlação genótipo-fenótipo Gene APC Codon 1309 curso agressivo Codon 1 Codon 1465 Codon 2846 Codon 1249 Codon Polipose profusa Polipose esparsa Polipose esparsa Pigmentação retiniana Tu desmóide
8 Síndrome Risco familiar Herança Penetrância Genes Testes genéticos Câncer de mama e câncer de ovário hereditário (HBOC) Câncer de mama e câncer colorretal hereditário (HBCC) Li-Fraumeni (LFS) & Li-Fraumeni-like (LFL) Cowden Câncer colorretal hereditário sem polipose (HNPCC ou síndrome de Lynch) Câncer gástrico difuso hereditário (HDGC) câncer de mama; câncer de ovário; carcinomatose peritoneal primária; câncer de próstata; câncer de pâncreas; melanoma; câncer colorretal. câncer de mama; câncer colorretal câncer de mama; sarcoma; tumor de SNC; carcinoma adrenocortical; leucemia; melanoma; câncer colorretal; câncer de pâncreas câncer de tireóide; câncer de endométrio; câncer gênitourinário; pólipos colônicos câncer de mama; câncer colorretal; câncer de ovário; câncer de estômago; tumor de SNC; pólipos gástricos e adenomas colônicos câncer de mama tipo lobular; câncer gástrico tipo difuso Autossômica dominante Autossômica dominante Autossômica dominante Autossômica dominante Autossômica dominante Autossômica dominante alta BRCA1 BRCA2 Sequenciamento, MLPA moderada CHEK2 Mutação *1100delC alta TP53 CHEK2 Sequenciamento dos éxons 4 ao 10 Mutação *1100delC alta PTEN Sequenciamento alta alta MLH1 MSH2 MSH6 PMS2 CDH1 Sequenciamento Sequenciamento, MLPA
9 SÍNDROMES DE CÂNCER COLORRETAL HEREDITÁRIO SÍNDROME Polipose Adenomatosa Familial (FAP) TUMORES Adenomas colorretais múltiplos Câncer de cólon, periampular pancreático, tireóide, SNC CROMOSSOMO 5q21 GENE APC Síndrome de Gardner ~FAP, cistos epidermóides, osteomas, tumor desmóide 5q21 APC Síndrome de Turcot Polipose Adenomatosa Familial Atenuada (AFAP) Câncer colorretal hereditário sem polipose (HNPCC) Síndrome de Muir- Torre Adenomas colorretais em número variável, tumores de SNC Usualmente 1-50 pólipos (<100) no colon, gástrico, duodenal, carcinoma periampular, Câncer de cólon, reto, estômago, endométrio, ovário, urogenital, SNC ~HNPCC, adenoma e carcinoma sebáceo, CCB, ceratoacantoma 5q21 5q21 2p16 3p21 2q q11.2 2p16 3p21 2q q11.2 APC APC hmsh2, hmlh1, hpms1, hpms2 hmsh2, hmlh1, hpms1, hpms2
10 SÍNDROMES RARAS DE CCR HEREDITÁRIO COM HAMARTOMAS SÍNDROME Peutz-Jeghers Polipose juvenil Síndrome de Cowden Bannayan-Zonana (Ruvalcaba-Myhre- Smith) TUMORES Hamartomas (intestino delgado, estômago e colon), câncer colorretal, gástrico, mama, útero, ovario, testículo Hamartomas e pólipos tipo juvenil (delgado, colon), câncer colorretal, mama e tireóide; cardiopatia congênita Hamartomas intestinais e tireóide, câncer colorretal, mama e tireóide; triquilemoma facial, hiperplasia gengival nodular Pólipos intestinais hamartomatosos, câncer colorretal, macrocefalia, pigmentação da glande CROMOSSOMO GENE 19p13.3 STK11 18q q23.3 SMAD4 PTEN 10q23.3 PTEN 10q23.3 PTEN
11 KRAS e BRAF (V600E) Via MAPK RAS BRAF MAPKinase
12 KRAS e BRAF (V600E) Via MAPK RAS BRAF MAPKinase -EGFR: Panitumumab, cetuximab * Outcomes Response rate (%) Stable disease (%) Median time to progression, wk * KRAS Mutations KRAS selvagem (Khambata-Ford S et al. J Clin Oncol. 2007;25: ) Jose Baselga, MD, Vall d'hebron University Hospital, in Barcelona, Spain
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15 Mutacao BRAF V600E MegaBACE sequencing equipment
16 Amplificação do microssatélite por PCR
17 Pesquisa no DNA do tumor X DNA tecido normal
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19 Marcador Classificação Localização Gene Microssatélite Cromossômica BAT-25 Mononucleotídeo 4q12 c-kit, intron 16 BAT-26 Mononucleotídeo 2p16.3-p21 hmsh2, intron 5 D2S123 Dinucleotídeo 2p16 MSH2 D5S346 Dinucleotídeo 5q21/22 APC D17S250 Dinucleotídeo 17q11.2-q12 BRCA1
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21 carcinoma colorretal Kaplan-Meier survival curves for patients with and without MSI
22 HNPCC (sindrome de Lynch) Critérios de Amsterdam I Pelo menos 3 membros de uma mesma família com CCR Um dos membros parente em primeiro grau dos outros 2 Pelo menos 2 gerações acometidas Pelo menos 1 dos membros com CCR e idade menor que 50a Exclusão de polipose adenomatosa familiar Critérios de Amsterdam II Mesmos Critérios de Amsterdam I Adenocarcinoma de endométrio Adenocarcinoma de intestino delgado Carcinoma de células transicionais (pelve renal) Adenocarcinoma gastrico
23 Critérios de Bethesda 1. Paciente dentro de família de HNPCC pelos Critérios de Amsterdam 2. Paciente com CCR e menos de 45 anos 3. Paciente com tumor extracolônico relacionado ao HNPCC e menos de 45 anos 4. Paciente com adenoma colorretal e menos de 40 anos 5. Atenção para CCR em jovens, indiferenciados ou com células em anel de sinete
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25 5-FU DPD 5-FU Metabolism Fluoro-5,6-dihydrouracil FdUMP Fluoro- -alanine dump TS dtmp dtdp dttp DNA CH 2 -THF DHF MTHFR THF CH 3 -THF Methionine Homocysteine Mauritz & Peters (2006)
26 5-FU LIVER METABOLISM 5-FU Dose 5-FU DPD 5- FUH 2 INACTIVE 5-FU FOR ANABOLISM DPD= DIHYDRO PIRIMIDINE DEHYDROGENASE (polymorphic) = NORMAL PATIENTS => 80-90% ARE INACTIVATED = 10-20% AVAILABLE DOSE
27 5-FU LIVER METABOLISM 5-FU Dose 5-FU DPD 5- FUH 2 INACTIVE 5-FU FOR ANABOLISM 0,1%= COMPLETELY DEFICIENT 3-5%= PARCIALY DEFICIENT DPD SEVERE TOXICITY
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