Instituto de Assistência Médica ao Servidor Público Estadual IAMSPE IV Congresso de Iniciação Científica do IAMSPE

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Milton Bergmann Sanches
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1 Instituto de Assistência Médica ao Servidor Público Estadual IAMSPE IV Congresso de Iniciação Científica do IAMSPE São Paulo 2010

2 Níveis séricos e imunoexpressão tecidual do marcador CA19-9 no carcinoma colorretal e comprometimento linfonodal (Marcador tumoral CA 19-9 e comprometimento linfonodal no carcinoma colorretal) Orientador: Prof.Dr.Jaques Waisberg Orientanda: Acadêmica Mariane Martins Manso

CA 19-9 e comprometimento linfonodal no carcinoma colorretal)

3 Introdução

4 Introdução O carcinoma colorretal está apresentando aumento da incidência no mundo Jantscheff P, et al. J Clin Oncol. 2003; 21(19): No Brasil, é o 3º tumor mais frequente Inca, 2007.

5 Introdução Estadiamento de Dukes: fator prognóstico mais importante Wiggers T, et al. Dis Colon Rectum. 1988; 31(1): Ponz de Leon M. et al. Cancer. 1992; 69(3): Marcadores tumorais: indicadores de prognóstico, monitorização de tratamento e recidiva Coelho, 2005.

Ponz de Leon M. et al. Cancer. 1992; 69(3): 626-35.

6 Introdução CA19-9 antígeno carboidratado Antígeno carboidratado de superfície celular expressado no grupo sanguíneo Lewisª Magnani J, et al. J Biol Chem. 1982; 257: Tempero e col.: pacientes Lewisª com níveis normais de CA 19-9 Tempero M, et al. Cancer Res. 1987; 47:

al. J Biol Chem. 1982; 257: 14365-9. Tempero e col.

7 Introdução CA19-9 antígeno carboidratado Valor de referência: até UI /ml Metástases de câncer de pulmão, urotelial e melanoma Rottenberg Y, et al. Isr Med Assoc J. 2009; 11:

8 Introdução Imunoexpressão do CA19-9 tecidual: relação com neoplasias gastrointestinais Nakagoe T, et al. J Clin Gastroenterol. 2002; 34(4): Associação com aspectos morfológicos do carcinoma colorretal Nakayama T, et al.. J Surg Oncol. 1997; 66(4): Matsui T. Jpn J Clin Oncol. 2004; 34(10):

Associação com aspectos morfológicos do carcinoma colorretal Nakayama T, et

9 Objetivo

10 Objetivo Analisar a relação entre os níveis séricos préoperatórios do CA19-9 e sua imunoexpresão tecidual com o comprometimento linfonodal e com a invasão linfática no carcinoma colorretal.

11 Método

12 Método Projeto de pesquisa aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa (CEP) - Hospital do Servidor Público Estadual (São Paulo-SP) Francisco Morato de Oliveira e registrado sob o nº 028/06 Estudo realizado de acordo com os padrões éticos aceitos pela Declaração de Helsinki da Associação Médica Mundial, adotado em 1964 e emendado em 1996

registrado sob o nº 028/06 Estudo realizado de acordo com os padrões éticos aceitos

13 Método Casuística 45 doentes com carcinoma colorretal operados com intenção curativa ou paliativa entre outubro/2006 e janeiro/2008 no Serviço de Gastrocirurgia do HSPE. Incluídos apenas doentes com confirmação histopatológica e excluídos menores de 18 anos

janeiro/2008 no Serviço de Gastrocirurgia do HSPE.

14 Método Estadiamento: determinação sérica do CEA e do CA19-9, colonoscopia com biópsia, enema opaco, raio X de tórax, TC abdome total e USG abdome Estadiamento clínico-patológico: TNM TNM Classification of Malignant Tumours - 6th ed. Edited by L.H. Sobin and Ch. Wittekind. John Wiley & Sons, INC., Publication Nível de corte (cut-off): CA UI/ml

clínico-patológico: TNM TNM Classification of Malignant Tumours - 6th ed. Edited by L.H.

15 Método Estudo histológico Espécimes cirúrgicos: fixados em solução de formol a 10% e incluídos em blocos de parafina e corados pela técnica de hematoxilina-eosina para diagnóstico anatomopatológico Linfonodos: hematoxilina-eosina

parafina e corados pela técnica de hematoxilina-eosina

16 Método Estudo imuno-histoquímico As lâminas foram coradas com anticorpo monoclonal anti- CA19-9. Foi utilizado o complexo estreptavidina-biotinaperoxidase (ABC), anticorpo específico anti-ca19-9 (GI- MA, clone L2KGI2, Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd., United Kingdom) em albumina bovina ( Sigma) e incubadas com anticorpo secundário biotinilado (anti-ig) ( Dako) em albumina bovina.

(GI- MA, clone L2KGI2, Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd.

17 Método Análise histopatológica das lâminas imunocoradas Microscópio óptico comum com lente de 100x e magnificação final de 200x Reação positiva: expressão de modo difuso, distribuição homogênea Intensidade semi-quantificada: leve (+/+++), moderada (++/+++), intensa (+++/+++) e ausente (0)

positiva: expressão de modo difuso, distribuição homogênea Intensidade

18 Figura 1 (Imuno-histoquímica CA 19.9, 400x): Imunoexpressão positiva representada pelo colorido acastanhado no citoplasma das células neoplásicas do carcinoma colo-retal.

19 Figura 2 (Imuno-histoquímica CA 19.9, 400x): Transição carcinoma-mucosa adjacente. Imunoexpressão fortemente positiva no citoplasma das células neoplásicas do carcinoma colo-retal e fracamente positiva na mucosa adjacente.

20 Método Análise estatística O nível de significância adotado foi de 5% (p 0,05). Foram realizados cálculos paramétricos e não paramétricos, de acordo com a natureza das variáveis e o N de cada grupo estudado. Os modelos estatísticos foram: média aritmética e respectivo desvio padrão, porcentuais, teste t de Student, teste de Mann-Whitney, teste exato de Fisher, análise de variância (Anova). O programa estatístico utilizado foi: SPSS for Windows 16.0 (SPSS Inc., USA).

21 Resultados

22 Resultados Níveis séricos do CA19-9 CA19-9: Valor sérico médio: 120,5±440,6UI/ml 37UI/ml: 22,2% do doentes

23 Resultados Relações entre os marcadores séricos e a imunoexpressão do CA19-9 no tecido neoplásico Imunoexpressão do CA19-9: Ausente: 11,1% Leve: 26,7% Moderada: 37,8% Intensa: 24,4% CA19-9 sérico imunoexpressão tecidual do CA19-9 (p=0,06)

24 Ca 19-9 sérico (média em ng/ml) 0 Ausente Leve Moderada Intensa P=0,06

25 Resultados Localização da lesão 29 doentes: cólon 16 doentes: reto CA19-9 sérico neoplasias de reto (p=0,05)

26 Resultados Diâmetro da lesão colorretal < 5,0cm: 28 (62,2%) doentes CA19-9 elevado: 6 CA19-9 tecidual: 0/+: 11 e ++/+++: 17 5,0cm: 17 (37,8%) doentes CA19-9 elevado: 4 CA19-9 tecidual: 0/+: 6 e ++/+++: 11

27 Resultados Acometimento de linfonodos Média de linfonodos ressecados: 17±11 Linfonodos +: 22 (48,9%) doentes CA19-9 elevado: 6 CA19-9 tecidual: 0/+: 11 e ++/+++: 11 Linfonodos -: 23 (51,1%) doentes CA19-9 elevado: 4 CA19-9 tecidual: 0/+: 6 e ++/+++: 17

28 Resultados Invasão vascular linfática Presente: 16 (35,5%) doentes CA19-9 elevado: 5 CA19-9 tecicual: 0/+: 7 e ++/+++: 9 Ausente: 29 (64,4%) doentes CA19-9 elevado: 5 CA19-9 tecidual: 0/+: 10 e ++/+++: 19

29 Resultados CA19-9<37UI/ml N=35 CA UI/ml N=10 Idade (anos) 68,77±13,05 72,20±9,68 0,44 Sexo M: 19 F: 16 M: 4 F: 6 0,49 Local Cólon:23 Reto: 12 Cólon:6 Reto: 4 0,72 Diâmetro (cm) <5,0: 22 5,0: 13 <5,0: 6 5,0: 4 0,99 Linfonodos acometidos P= -: 19 +: 16 -: 4 +: 6 0,49 Inv. vasc. linfática -: 24 +: 11 -: 5 +: 5 0,45 Imunoexpressão do CA /+=16 (45,7% ) ++/+++ =19 (54,3% ) 0/+=1 (10,0%) ++/+++ =9 (90,0% ) 0,06

30 Resultados CA19-9 tecidual 0/+ N=17 CA19-9 tecidual ++/+++ N=28 Idade (anos) 69,71±11,90 69,43±12,45 0,94 Sexo M: 9 F: 8 M: 14 F: 14 0,99 Local Cólon:11 Reto: 6 Cólon:18 Reto:10 0,99 Diâmetro (cm) <5,0: 11 5,0: 6 <5,0: 17 5,0: 11 0,99 Linfonodos acometidos P= -: 6 +: 11 -: 17 +: 11 0,12 Inv. vasc. linfática -: 10 +: 7 -: 19 +: 9 0,74 CA 19-9 sérico (UI/ml) <37 N=16 (94,1%) >37 N=1 (5,9%) <37 N=19 (67,9%) >37 N=9 (32,1%) 0,06 (NS)

31 Conclusões

32 Conclusões 1. Os níveis séricos do marcador CA19-9 não mostraram relação com sua imunoexpressão tecidual. 2. Os níveis séricos pré-operatórios do CA19-9 e o grau de imunoexpressão tecidual do CA19-9 não mostraram relação com os aspectos morfológicos. 3. Os níveis séricos pré-operatórios e a imunoexpressão tecidual do marcador CA19-9 no carcinoma colorretal não mostraram relação com o comprometimento linfonodal e com a invasão linfática.

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