DETERMINAÇÃO DE Cl, K E Na EM SORO SANGUÍNEO DE IDOSOS SAUDÁVEIS DA CIDADE DE SÃO PAULO

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1 2009 Interntionl Nucler Atlntic Conference - INAC 2009 Rio de Jneiro,RJ, Brzil, September27 to October 2, 2009 ASSOCIAÇÃO BRASILEIRA DE ENERGIA NUCLEAR - ABEN ISBN: DETERMINAÇÃO DE Cl, K E N EM SORO SANGUÍNEO DE IDOSOS SAUDÁVEIS DA CIDADE DE SÃO PAULO Nthli Souz de Arujo 1,2 e Mitiko Siki 1 1 Instituto de Pesquiss Energétics e Nucleres, IPEN CNEN/ SP Av. Professor Lineu Prestes, São Pulo, SP, Brsil ntsouzrujo@yhoo.com.br mitiko@ipen.br 2 Fculddes Oswldo Cruz Ru Brigdeiro Glvão, , São Pulo, SP, Brsil RESUMO N áre médic, s pesquiss sobre o ppel dos elementos químicos no orgnismo têm se intensificdo mundilmente de modo que, s nálises de tecidos e fluidos humno presentm grnde interesse. Ests nálises podem fornecer vloross informções sobre súde humn e à exposição os elementos poluentes e sobre ingestão de limentos contmindos. Por ess rzão, s nálises químics e bioquímics do sngue são de grnde relevânci, um vez que ele é um dos líquidos mis importntes do orgnismo. O objetivo deste estudo foi determinr s concentrções sérics de Cl, K e N de um populção de idosos sudáveis d cidde de São Pulo visndo comprção com vlores de referênci usdo nos lbortórios clínicos. As mostrs de soro snguíneo de idosos sudáveis form dquirids do Hospitl ds Clínics d Fculdde de Medicin, USP (FMUSP). Pr colet dests mostrs o presente projeto foi provdo pelo Comitê de Étic d FMUSP e do IPEN-CNEN/SP. A qulidde dos resultdos nlíticos foi vlid pel nálise do mteril de referênci certificdo NIST 1577b Bovine Liver. Os resultdos presentrm bo extidão e precisão, um vez que tiverm erros reltivos inferiores 5,2% e desvios pdrão reltivos inferiores 8,6%. A médi ds concentrções (mmol L -1 ) de Cl no soro nlisdo foi de 99,1; s de K form de 3,9 e s de N form de 136,9. Os ddos obtidos permitirm concluir que miori dos idosos presentou concentrções de Cl, K e N dentro d fix dos vlores de referênci utilizdos nos lbortórios clínicos. 1. INTRODUÇÃO O sngue é um dos fluidos mis importntes do orgnismo, responsável pel nutrição dos tecidos, controle d tempertur corporl, trnsporte de nutrientes e oxigênio e de excreção metbólic (uréi, ácido úrico, dentre outros) [1,2]. Este fluido é considerdo um mteril bstnte dequdo pr nálise um vez que pode fornecer vloross informções sobre condição de súde do indivíduo, sobre exposição d populção os elementos tóxicos, dos efeitos d poluição mbientl e usdo n dignose e trtmento de determinds doençs. Tmbém é de fundmentl importânci estbelecer níveis de concentrções de elementos dequds e segurs no sngue pr súde humn, tendo em vist que diversos elementos são essenciis pr sobrevivênci, porém, dentro de um fix estreit de concentrções [2]. O interesse sobre os efeitos dos elementos no orgnismo humno tem umentdo à procur pels medições cd vez mis confiáveis e preciss pr nálise do sngue totl ou soro

2 snguíeno. Atulmente, váris técnics tis como nálise por tivção com nêutrons (NAA), espectrometri de mss com fonte de plsm copldo indutivmente (ICP-MS) e espectrometri de bsorção tômic (AAS) são comumente utilizds. Diversos elementos presentes no soro snguíneo e no sngue totl vêm sendo determindos fim de vlir correlção entre elementos e determindos tipos de doençs. O N presente no orgnismo é essencil pr o mnter o equilíbrio do ph dos fluidos extrcelulres, d trnsmissão nervos e contrção musculr. Porém em lts concentrções deste elemento pode cusr hipertensão, problems renis e crdícos. Sendo o N um íon de crg positiv, está em equilíbrio com o Cl, um íon negtivo. O potássio tmbém ssocido à hipertensão, têm efeitos diuréticos, tu no sistem nervoso centrl e periférico e em crises hipertensivs, pode evitr o derrme. [3-5]. No Brsil lguns trblhos form relizdos visndo à determinção ds concentrções de elementos como N, Cl, Br, C, Fe e Zn no soro snguíneo de idosos. Os resultdos mostrrm que mior prte ds mostrs nlisds presentv vlores concordntes com litertur, indicndo que s concentrções desses elementos não estvm em deficiênci nem em excesso [6-8]. O objetivo deste trblho foi determinr s concentrções de elementos no soro snguíneo, pr comprção dos resultdos com os vlores utilizdos nos lbortórios clínicos. 2. MATERIAIS E MÉTODOS 2.1 Colet ds Amostrs de Soro Snguíneo As colets ds mostrs de sngue, bem como obtenção do soro snguíneo, form relizds no Hospitl ds Clínics, pelos pesquisdores d Fculdde de Medicin d Universidde de São Pulo (FMUSP). O sngue foi coletdo em tubos de colet proprido pr nálise de elementos trço. N figur 1 é mostrd fotogrfi d colet. O soro obtido foi envido o Lbortório de Análise por Ativção Neutrônic, IPEN, n form de soro congeldo. Pr otimizção ds condições experimentis, miores cuiddos como rmzengem form tomds não somente qunto à contminção ds mostrs, como tmbém, nos processos de secgem por liofilizção e homogeneizção pr que fosse grntid reprodutibilidde dos resultdos. Os dodores de sngue form os idosos de mbos os sexos, residentes n áre metropolitn de São Pulo com fix etári de nos. Os seguintes critérios de exclusão form dotdos pr seleção dos indivíduos: tbgismo, hipertensão, uso de suplementos nutricionis, trnsfusão de sngue nos últimos seis meses, lcoolismo, demênci e doençs como HIV, heptite e nemi. Form nlisds 37 mostrs de soro snguíneo.

3 Figur 1. Fotogrfi d colet de sngue humno. 2.2 Análise do Mteril de Referênci Certificdo Pr o controle d qulidde dos resultdos nlíticos com relção à precisão e extidão foi utilizdo o mteril de referênci certificdo NIST 1577b Bovine Liver do Ntionl Institute of Stndrds & Technology, EUA. 2.3 Preprção dos Pdrões Sintéticos dos Elementos As soluções pdrão dos elementos Cl, K e N utilizds form do Spex CertiPrep, EUA. A prtir ds soluções estoques pdrão form preprds soluções pdrão diluíds simples e multielementres. Pipetou-se líquots de 50µL dests soluções pdrão sobre tirs de ppel filtro Whtmn n o 40, s quis form colocds no dessecdor pr secgem por um período de 24 hors. As quntiddes dos elementos nestes pdrões sintéticos form de 500 µg pr Cl, 500,5 µg pr K e de 500,5 µg pr N. Após complet secgem ds líquots pipetds, esss tirs form dobrds e rmzends em invólucros de polietileno. Esses invólucros form confecciondos com polietileno incolor, previmente lvdos em solução de ácido nítrico p.. diluído e águ purificd. 2.4 Procedimento pr Análise por Ativção com Nêutrons (NAA) Cerc de 150 mg ds mostrs de soro snguíneo ou do mteril de referênci certificdo form pesdos em invólucros de polietileno. Pr irrdição s mostrs, o mteril de referênci e os pdrões sintéticos colocdos em um novo invólucro de polietileno e foi inserido em um dispositivo de polietileno, chmdo de coelho. A irrdição foi relizd n Estção Pneumátic n o 4 do retor nucler de pesquis IEA-R1 do IPEN-CNEN-SP sob um fluxo de nêutrons térmicos d ordem de 6,6 x n cm -2 s -1 por um período de 10 segundos. Pr medição ds tividdes gm, s mostrs, o mteril de referênci e os pdrões form

4 fixdos individulmente em suportes de ço inoxidável. As medições ds tividdes gm form feits em um detector semicondutor de Ge hiperpuro d mrc Cnberr ligdo um espectrômetro de rios gm e sistem eletrônico ssocido. As energis dos rios gm e tempos de mei vid form utilizdos pr identificção dos rdioisótopos nos espectros de rios gm. [10]. Os rdioisótopos encontrdos form: 38 Cl, 42 K, e 24 N. Pr o cálculo ds concentrções dos elementos utilizou-se o método comprtivo plicndo-se seguinte relção [11]: C = 0,693( td tdp )/ t 1 2 m. A. e / [ ] p M. (1) A p Onde A é tx de contgem do rdioisótopo considerdo. Os índices e p indicm mostr e pdrão respectivmente; M é mss totl d mostr; t é mei-vid do rdioisótopo; m p é mss do elemento no pdrão; C é concentrção do elemento n mostr; td e tdp são os tempos de decimento d mostr e pdrão, respectivmente RESULTADOS E DISCUSSÃO N nálise do mteril de referênci certificdo cujos resultdos são presentdos n Tbel 1, os vlores obtidos form concordntes com os vlores certificdos, isto é, os erros reltivos form inferiores 4,1% indicndo bo extidão. Os resultdos obtidos indicrm bo precisão, com desvios pdrão reltivos percentuis inferiores 8,6%. Tbel 1. Concentrções dos elementos no mteril de referênci certificdo NIST 1577b Bovine Liver. Elementos Este Trblho Vlor do Certificdo Médi ± DP DPR b % ER c % Cl, µg g ± 199 6,7 5, ± 60 K, µg g ± 896 8,6 4, ± 20 N, µg g ± 80 3,1 3, ± 60. Desvio Pdrão, b. Desvio Pdrão Reltivo, c. Erro Reltivo N Tbel 2 são presentds s concentrções obtids de Cl, K e N ns nálises em replicts ds mostrs de soro snguíneo juntmente com os vlores de referênci. Os ddos obtidos form concordntes com os utilizdos nos lbortórios clínicos.

5 Tbel 2. Médis, desvios pdrão e fixs de concentrçõs dos elementos Cl, K, e N ns mostrs de soro snguíneo. Elementos Este Trblho Vlores de refênci Médi ± DP Fix [12] Cl, mmol L -1 99,1 ± 6,3 (80,5 133,1) K, mmol L -1 3,9 ± 1,2 (2,49 5,94) 3,5 5,0 N, mmol L ,9 ± 8,4 (122,5 147,5) Desvio Pdrão 4. CONCLUSÃO Os resultdos indicrm vibilidde d plicção d nálise por tivção com nêutrons n determinção de elementos como Cl, K e N no soro snguíneo por meio de irrdições curts. Os ddos obtidos presentrm um bo extidão e um bo precisão. Com bse nos resultdos obtidos empiricmente, conclui-se que miori dos idosos presentou concentrções de Cl, K e N dentro d fix dos vlores de referênci utilizdos nos lbortórios clínicos AGRADECIMENTOS Os utores grdecem o poio finnceiro do CNPq e pel bols PIBIC. REFERÊNCIAS 1. I. Rodushlin, F. Odmn, S. Brnth, J. Rdionl. Nucl. Chem., 364, pp (1999). 2. S. B. Sntos, Elementos trço em soro snguíneos medidos pelos métodos PIXE e ICP- MS, Dissertção (Mestrdo) Instituto de Físic d Universidde de São Pulo, São Pulo, Brsil (2007). 3. J. He, G. S. Tell, Y. C. Tng, P. S. Mo, G. Q. He, Reltion of electrolytes to blood pressure in Men, Americn Hert Assocition, 17, pp , Dlls, Texs (1991). 4. D. M. Junior, A. M. G. Pierin, A. P. Bmbirr, J. H. Assunção, J. M. Monteiro, R. Y. Chinen, R. B. Coser, V. N. Aikw, F. M. Cção, M. Husen, A. F. Vilibor, N. E. Aikw, A. N. Konno, R B. Coser, Hypertension in employees of n University Generl Hospitl, Revist do Hospitl ds Clínics, 59, (2004). 5. H. F. Loyke, Effects of elements in humn blood pressure control, St. Vincent Chrity Hospitl, Deprtment of Medicine, 85, Clevelnd, Ohio (2002). 6. M. Siki, O. Jluul, W. Jcob-Filho, N. M. Sumit, Chrcteriztion of zinc of n elderly popultion in the São Pulo Metropolitn region, So, Brzil by neutron ctivtion nlysis of hed hir nd blood serum, Clinicl Chemistry, 52, Supplement, (2006). 7. N. M. Sumit, M. E. Mendes, O. Jluul, W. Jcob-Filho, M. Siki, Evlution of trce elements concentrtions in blood serum os helthy elderly popultions by neutron ctivtion nlysis, Clinicl Chemistry, 52, Supplement, (2006). 8. N. M. Sumit, M. E. Mendes, O. Jluul, W. Jcob-Filho, M. Siki, Trce element determintion in blood serum smples from elderly popultion in the city of São Pulo, Brzil, Clinicl Chemistry, 51, Supplement, (2005).

6 9. NIST, Ntionl Institute of Stndrds nd Technology. Certificte of Anlysis. Stndrds Mteril 1577b Bovine Liver. Mrylnd: NIST (1991). 10. IAEA, INTERNATIONAL ATOMIC ENERGY AGEN CY. Prcticl spects of operting neutron ctivtion nlysis lbortory. Vien: IAEA, (IAEA TECDOC 564) (1990). 11. D. De Soete, R. Gijels, J. Hoste, Neutron ctivtion nlysis, London: Wiley Interscience (1972). 12. A. H. B Wu, Tietz clinicl guide to lbortory tests, Sunders Elsevier, St. Louis, Missouri (2006).