Cinética Michaeliana [E] [A] é difícil de determinar em muitas situações, pelo que se. ) pode ser ajustada a uma. . É o valor máximo de

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Wilson Zagalo Leveck
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1 Cinética Michaeliana Diz-se que u enzia apresenta ua cinética Michaeliana sepre que a variação da velocidade inicial edida (v i ) pode ser ajustada a ua expressão da fora: v [E] 0 0 Cinética Michaeliana não iplica a aderência a u ecaniso do tipo Henri-Michaelis-Menten. Cinética Michaeliana designa u coportaento fenoenológico. 0 te diensões de constante de prieira orde (s -1 ) e representa-se frequenteente coo O valor de [E] 0 é difícil de deterinar e uitas situações, pelo que se usa frequenteente V ax e lugar de 0 [E] 0. É o valor áxio de velocidade inicial que pode ser edido (saturação) para ua deterinada quantidade de [E] 0

2 Diferentes ecanisos, a esa equação S 4 E + A EA EA' EA'' E + P s 1 ' ' 1 ' S 2 3 E + A EA EA' E + P 2 3 s ca t P 1 v [E] + 0 Os ecanisos acia, tais coo uitos outros, serão ipossíveis de distinguir u do outro através de u siples ensaio de cinética de equilíbrio ou steady-state '

3 O significado de Definição: a constante de Michaelis,, é a concentração de substrato para a qual a velocidade inicial edida é igual a etade da velocidade áxia (para ua esa concentração de enzia). O é ua edida inversa da afinidade do enzia para o seu substrato O é característico de cada enzia e substrato, e independente da concentração deste últio Ebora não seja igual a s na aioria das condições, pode ser usado coo ua edida relativa de afinidade, já que corresponde à concentração para a qual etade dos sítios de ligação do enzia se encontra saturados e condições de steady state. Variações no valor de de u enzia (alterações das condições do eio, utações, etc), pode noralente ser atribuídos a ua alteração da capacidade do enzia de ligar o substrato. A expressão do e teros do ecaniso cinético pode ser ais ou enos coplexa, as este te que ter sepre diensões de concentração. v [E] 0

4 s de alguns enzias e substratos

5 O significado de Definição: o, constante alítica ou turnover nuber é igual ao quociente entre a velocidade áxia observada e a quantidade de enzia da aostra V [E] 0 ax O não te que necessariaente corresponder (ou depender) a ua única constante cinética do ecaniso de álise, as pode ser visto coo ua constante de prieira orde aparente para a dissociação do coplexo enzia-substrato O te diensões inversas de tepo (frequência) e pode ser visto coo o núero de ciclos alíticos do enzia por unidade de tepo V ax não é característico de u deterinado enzia, pois depende da concentração do eso na aostra Variações no valor de de u enzia (alterações das condições do eio, utações, etc), pode noralente ser atribuídos a ua alteração da capacidade alítica do enzia. A expressão do e teros do ecaniso cinético pode ser ais ou enos coplexa, as este te que ter sepre diensões inversas de tepo v [E] 0

6 s de alguns enzias

7 Constante de especificidade e eficiência alítica v [E] 0 quando << M te-se tabé [E] 0 [E] e a eq. de M.-M. fica v [E] e o tero / pode ser visto coo ua constante de segunda orde para o processo: E + A E + P A uito baixas concentrações de substrato o passo liitante do processo de álise passa a ser o encontro entre enzia e substrato! E condições in vivo é frequente ter valores de entre 0.1-1

8 Constante de especificidade e eficiência alítica -1-1 eficiência alítica (M s ) E A EA E + P 1 logo: Quando 2 é uito grande, a álise torna-se efectivaente u processo colisional de segunda orde, controlado apenas por 1 constante de especificidade eficiência alítica representa-se usualente coo A

9 Equação de Michaelis-Menten e teros de A v [E] 0 A v [E] 0 A [E] v [E] + A 0 1 A cinética enziática pode ser forulada usando coo quantidades fundaentais A e e vez de e.. Muitas relações torna-se ais siples quando expressas desta fora.

10 Constante de especificidade e eficiência alítica Existe u liite superior teórico para / O substrato te que encontrar o centro activo por difusão. Para oléculas típicas e solução, a constante difusiva te u valor da orde de M -1 s -1

11 Constante de especificidade para alguns enzias Enzia Substrato / Acetil colina esterase Acetilcolina 9.50E E E+08 Anidrase carbónica CO2 1.20E E E+07 Catalase H2O2 2.50E E E+08 Fuarase Fuarato 5.00E E E+08 Urease Ureia 2.50E E E+05 Crotonase Crotonil-CoA 2.00E E E+08 b-lactaase Benzilpenicilina 2.00E E E+08 Triose-P-isoerase Gliceraldeido-3-P 4.70E E E+06 Quiotripsina N-Ac-Gly Ester 4.40E E E-01 N-Ac-Val Ester 8.80E E E+00 N-Ac-Tyr Ester 6.60E E E+05 Os valores a verelho denota constantes de especificidade próxias do liite difusivo do substrato.

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