DIFERENTES FOTOPERÍODOS 1. In vitro DEVELOPMENT OF IMMATURE EMBRYOS FROM PONCÃ MANDARIN 'PERA SWEET ORANGE IN DIFFERENT PHOTOPERIODS

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1 DESENVOLVIMENTO in vitro DE EMBRIÕES IMATUROS ORIUNDOS DE TANGERINEIRA PONCÃ x LARANJEIRA PERA EM DIFERENTES FOTOPERÍODOS 1 MOACIR PASQUAL GUILHERME PEREIRA ALVES 3 LEONARDO FERREIRA DUTRA EDVAN ALVES CHAGAS LUCIENE DE OLIVEIRA RIBEIRO RESUMO Ojetivou-se estudr influênci do fotoperíodo no cultivo in vitro de emriões imturos oriundos do cruzmento entre tngerineir Poncã e lrnjeir Per. Os emriões form extrídos de frutos com 3-4 cm de diâmetro e inoculdos em meio MS, diciondo de GA 3 e crvão tivdo ns concentrções de,3 mg.l -1 e 1 mg.l -1, respectivmente, previmente utoclvdo 11 o C por minutos. Os trtmentos constrm dos seguintes fotoperíodos: 8, 1, 1, 14, 16, 18 e 4 hors de luz contínu, n intensidde luminos de 43 µm.m -.s -1, 7ºC, em estufs tipo B.O.D. O trtmento com 16 hors de luz contínu foi relizdo em sl de crescimento em intensidde luminos de 35 µm.m -.s -1. O experimento foi conduzido em delinemento inteirmente csulizdo, com qutro repetições de três tuos de ensio cd um. Após 6 dis, melhores resultdos pr ltur d prte ére, número de folhs, peso d mtéri fresc d prte ére, comprimento ds rízes e peso d mtéri fresc ds rízes form otidos com fotoperíodos de 8, 1, 1, 14, 18 e 4 hors. Fotoperíodo de 16 hors proporcion menor desenvolvimento de emriões imturos. TERMOS PARA INDEXAÇÃO: Citrus sinensis, Citrus reticult, hiridção, cultur de emriões, fotoperíodo. In vitro DEVELOPMENT OF IMMATURE EMBRYOS FROM PONCÃ MANDARIN 'PERA SWEET ORANGE IN DIFFERENT PHOTOPERIODS ABSTRACT It ws imed to study the influence of the photoperiod on in vitro culture of immture emryos from Poncã mndrin nd Per sweet ornge fruits. The emryos were removed from 3 4- mm wide fruits nd inoculted on the MS medium, supplemented with.3 mg L -1 GA 3 nd 1 mg L -1 ctivted chrcol, previously sterilized t 11 C for minutes. The following photoperiods were evluted: 8, 1, 1, 14, 16, 18, nd 4 hours of continuous light in 43 µm.m -.s -1 intensity, t 7ºC, in B.O.D chmers. The 16 hours continuous light ws performed in growth room t 35 µm m - s -1. The sttisticl nlysis used ws entirely rndomized, with four replictions, ech one constituted of three tues. After 6 dys, etter results for plnt height, numer of leves, ove ground fresh mtter weight, root length, nd root fresh weight were otined with 8, 1, 1, 14, 18 e 4 hours photoperiod. The 16 hours rendered smller immture emryos development. INDEX TERMS: Citrus sinensis, Citrus reticult, hyridiztion, emryo culture, photoperiod. INTRODUÇÃO A cultur de emriões é de grnde importânci no melhormento dos citros, por proporcionr o resgte de emriões híridos imturos, oriundos de cruzmentos interespecíficos e intergenéricos. Incomptiiliddes são, muits vezes, encontrds em tis cruzmentos, o que result em sementes com emriões ortivos (Hu & Ferreir, 1998). 1. Apoio Finnceiro d FAPEMIG.. Deprtmento de Agricultur, Lortório de Cultur de Tecidos UNIVERSIDADE FEDERAL DE LAVRAS/ UFLA Cix Postl Lvrs, MG. mpsqul@ufl.r. 3. Fculdde de Ciêncis Agráris do Prá, Cix Postl Belém, PA.

2 536 A poliemrioni generlizd entre s espécies de Citrus result normlmente em elevd tx de orto do emrião zigótico, devido à competição exercid sore ele pelos emriões nucelres, gerlmente mis vigorosos (Soost & Cmeron, 1975). Entretnto, esses emriões podem ser resgtdos vi cultivo in vitro em meio de cultur dequdo (Shrm et l., 1996). Trlhos têm sido relizdos ojetivndo elucidr os efeitos dos diversos ftores no cultivo in vitro de emriões de citros (Rieiro et l., 1997, 1998, 1999, ). O crescimento ds plnts é controldo por ftores genéticos e mientis, os quis tum conjuntmente medinte processos fisiológicos. A luz, segundo Economou & Red (1987), interfere nos processos fotossintéticos e de fotomorfogênese, por meio d qulidde (comprimento de ond), quntidde (intensidde luminos ou fluxo de fótons) e durção (fotoperíodo). O fotoperíodo fet os níveis hormonis endógenos ds plnts e, conseqüentemente, modific o seu crescimento, tundo diferentemente pr cd espécie (Slisury & Ross, 1991). Pr hver efeito fotoperiódico, quntidde de energi luminos totl necessári é insignificnte, pois, n relidde, durção do período do escuro é que tu como gente controldor de diversos processos fisiológicos ds plnts (Bolonhezi, 1991; Slisury & Ross, 1991; Thoms & Vince-Prue, 1997). Não se dispõe de informções sore o efeito do fotoperíodo no desenvolvimento de emriões imturos de citros. O que se tem é recomendção de que, pós inoculção, os emriões devm permnecer por 48 hors no escuro e, posteriormente, em sl de crescimento à tempertur de 7 ± 1ºC, com fotoperíodo de 16 hors diáris em 35 µmm -.s -1 de intensidde luminos. Entretnto, vários trlhos form desenvolvidos testndo-se o efeito do fotoperíodo em diferentes espécies, como tt-doce (Bonsi et l., 199; McDvid & Almu, 198; Figueiredo, 1995), dáli (Moser & Hess, 1968), mcieir e moreirpret (Souz, 1995). Estudos com plântuls e segmentos culinres de lgums espécies presentrm resultdos conflitntes com relção à influênci de diferentes fotoperíodos (Delgdo et l., 1996), o que tem sido triuído o fto de que luz é um entre vários ftores que interferem no crescimento e desenvolvimento vegetl. Ojetivou-se testr influênci de fotoperíodo sore o cultivo in vitro de emriões híridos oriundos do cruzmento entre tngerineir Poncã e lrnjeir Per. Ciênc. grotec., Lvrs. V.7, n.3, p , mio/jun., 3 MATERIAL E MÉTODOS Sementes de frutos com 3-4 cm de diâmetro de tngerineir Poncã (Citrus reticult Blnco) x lrnjeir Per (Citrus sinensis (L.) Oseck) form removids e trtds com álcool 7% por cinco minutos e hipoclorito de sódio % por minutos, sendo, posteriormente, lvds três vezes em águ idestild e utoclvd. Com uxílio de microscópio estereoscópico, isturi e pinç, os tegumentos ds sementes form seprdos longitudinlmente pel região opost à micrópil, tomndo-se o cuiddo de não provocr dnos os emriões. Todos os emriões, independentemente dos estádios em que se encontrvm, form excisdos e inoculdos individulmente em tuos de ensio contendo 15 ml do meio MS (Murshige & Skoog, 196), crescido de,3 mg.l -1 de GA 3 (ácido gierélico) e de 1 g.l -1 de crvão tivdo e condiciondos em estufs tipo B.O.D., so tempertur constnte de 7 o C e intensidde luminos de 43 µm.m -.s -1, e os trtmentos constrm dos seguintes fotoperíodos: 8, 1, 1, 14, 16, 18 e 4 hors de luz contínu. O trtmento com 16 hors de luz contínu foi relizdo em sl de crescimento em intensidde luminos de 35 µm.m -.s -1. O experimento foi conduzido em delinemento inteirmente csulizdo, com qutro repetições, cd um constituíd por três tuos de ensio. Após 6 dis, s plântuls form vlids com se n ltur d prte ére, número de folhs, peso d mtéri fresc d prte ére, comprimento ds rízes e peso d mtéri fresc ds rízes. RESULTADOS E DISCUSSÃO Houve efeito significtivo de fotoperíodo pr tods s crcterístics nlisds, exceto pr número de folhs (Tel 1). Emriões expostos à luz por pens 8 hors de luz diáris presentrm plântuls com mior ltur d prte ére (Figur 1), pesr de não terem sido identificds diferençs significtivs em relção os trtmentos com 1, 1, 14, 18 e 4 hors de exposição à luz. Não houve diferenç significtiv entre os trtmentos pr número de folhs (Tel 1). Verificouse, no entnto, tendênci de mior número de folhs no trtmento com 4 hors de luz contínu (Figur ). Os melhores fotoperíodos pr peso de mtéri fresc d prte ére form 1, 1 e 14 hors de luz contínu, não diferindo dos trtmentos com 8, 18 e 4 hors (Figur 3). De mneir semelhnte o resultdo otido n ltur d prte ére, o trtmento com 16 hors de luz contínu foi inferior os demis.

3 537 TABELA 1 Análise de vriânci pr ltur d prte ére (APA), número de folhs (NF), peso d mtéri fresc d prte ére (PMFPA), comprimento de rízes (CR) e peso d mtéri fresc ds rízes (PMFR) de plântuls oriunds de emriões cultivdos em diversos fotoperíodos. UFLA, Lvrs-MG,. Cus de Qudrdo Médio Vrição G.L. APA NF PMFPA CR PMFR Trtmento 6,391** 1,594 9,8199**,1374** 1,374** Resíduo 1,8 1,166 18,9663 6,387,9857 C.V (%) 16,6 9,5 13,9 4,4 18, **Significtivo 1% de proilidde. Altur d prte ére (cm) 1,5 1, FIGURA 1 Altur d prte ére de plântuls oriunds de emriões cultivdos em diversos fotoperíodos. UFLA, Lvrs-MG,. Número de folhs FIGURA Número de folhs de plântuls oriunds de emriões cultivdos em diversos fotoperíodos. UFLA, Lvrs-MG,. Ciênc. grotec., Lvrs. V.7, n.3, p , mio/jun., 3

4 538 Os miores comprimentos de riz form otidos com 14 e 4 hors de luz contínu (Figur 4). Por meio dess respost, verific-se que eficiênci do crescimento pode estr relciond à hilidde de dptção ds plnts às condições de luz do miente in vitro. A intensidde de luz (Ferreir & Hu, 1989) ou qulidde dess (Hu & Ferreir, 1989) podem tmém influencir o desenvolvimento emrionário. Os emriões rudimentres no estádio cordiforme em numeross espécies de Ilex são sensíveis à luz, qundo excisdos e cultivdos in vitro (Hu, 1976; Ferreir & Hu, 1984). A sensiilidde desses emriões desprece pós 4 dis de incução no escuro, e eles crescem té mturidde n luz. Dess form, depois de ser inicido, o processo fisiológico não pode ser mis revertido (Hu & Ferreir, 1998), o que notdmente conteceu em relção o trtmento 4 hors de luz contínu, em que os emriões mostrrm totl dptção esse fotoperíodo. Os miores pesos de peso d mtéri fresc ds rízes form otidos com 14 e 4 hors de luz contínu, porém sem diferenç em relção 8, 1 e 18 hors (Figur 5). Novmente o pior resultdo foi verificdo com utilizção de fotoperíodo com 16 hors de luz contínu FIGURA 3 Peso d mtéri fresc d prte ére de plântuls oriunds de emriões cultivdos em diversos fotoperíodos. UFLA, Lvrs-MG,. Comprimento de rízes (cm) FIGURA 4 Comprimento de rízes de plântuls oriunds de emriões cultivdos em diversos fotoperíodos. UFLA, Lvrs-MG,. Ciênc. grotec., Lvrs. V.7, n.3, p , mio/jun., 3

5 539 Peso d mtéri fresc de riz (mg) c FIGURA 5 Peso d mtéri fresc ds rízes (mg) de plântuls oriunds de emriões cultivdos em diversos fotoperíodos. UFLA, Lvrs-MG,. c É interessnte oservr que emriões cultivdos so regime de 16 hors de luz contínu, condição pdrão pr miori dos cultivos relizdos em lortório, proporcionou o pior resultdo em termos de ltur d prte ére de plântuls, peso d mtéri fresc d prte, comprimento e peso d mtéri fresc de rízes. Esse resultdo pode estr relciondo o fto de que n sl de crescimento, onde form mntidos os emriões so 16 hors de luz contínu, há mior desuniformidde com relção às condições de tempertur e luz. Além disso, nesss condições, quntidde de rdição fotossinteticmente tiv é sensivelmente menor (3 µm.m -.s -1 ) do que quel oservd n estuf tipo B.O.D. (43 µm.m -.s -1 ). CONCLUSÃO Ns condições em que o experimento foi conduzido, pode-se concluir que: ) Fotoperíodos com 8, 1, 1, 14, 18 e 4 hors proporcionm melhor desenvolvimento de emriões imturos oriundos do cruzmento lrnjeir Per x tngerineir Poncã; ) Fotoperíodo com 16 hors de luz contínu induz menor desenvolvimento de emriões imturos. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS BOLONHEZI, A. C. Influênci do fotoperíodo sore o desenvolvimento d plnt e produção de rízes tueross de mndioc (Mnihot esculent Crntz) f. Tese (Doutordo em Fitotecni) Escol Superior de Agricultur Luiz de Queirós, Pircic. BONSI, C. K.; LORETAN, P. A.; HILL, W. A.; MORTLEY, D. G. Response of sweet potto to continuous light. HortScience, Alexndri, v. 7, n. 5, p. 471, My 199. DELGADO, G. E.; SALATINO, M. L.; HANDRO, W. Enhncement of nthocynin nd nthocynidin synthesis y light, growth regultors nd sucrose in in vitro plnts of sweet potto. Revist Brsileir de Fisiologi Vegetl, Brsíli, v. 8, n., p , ECONOMOU, A. S.; READ, P. E. Light tretments to improve efficiency of in vitro propgtion systems. HortScience, Alexndri, v., n. 5, p , Oct FERREIRA, A. G.; HU, C. Y. Influênci d luz n emriogênese trdi de Ilex: cultur in vitro. In: CONGRESSO NACIONAL DE BOTÂNICA, 34., 1984, Porto Alegre. Anis... Porto Alegre: SBB, p FERREIRA, A. G.; HU, C. Y. Light-medited inhiition of in vitro lte emryogeny of Ilex. Journl of Americn Society for Horticulturl Science, Alexndri, v. 114, p , FIGUEIREDO, S. A. Influênci de reguldores de crescimento e fotoperíodo no crescimento secundário de rízes de Ipomoe tts (L.) Lm. Brzlândi Brnc em condições in vitro f. Dissertção (Mestrdo em Fitotecni) Universidde Federl de Lvrs, Lvrs. Ciênc. grotec., Lvrs. V.7, n.3, p , mio/jun., 3

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