Monitoramento da Suscetibilidade a Inseticidas em Populações de Bemisia tabaci (Gennadius) (Hemiptera: Aleyrodidae) no Brasil

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1 6 Jnury - Ferury 2009 CROP PROTECTION Monitormento d Suscetiilidde Inseticids em Populções de Bemisi tci (Genndius) (Hemipter: Aleyrodide) no Brsil LEONARDO D SILVA, CELSO OMOTO 2, ERVINO BLEICHER, PATRICK M DOURADO 2 Univ. Federl do Cerá, Mister Hull, 2977, Cmpus do Pici, Bloco 805, , Fortlez, CE; dntsleo@yhoo. com.r, ervino@ufc.r; 2 L. Resistênci de Artrópodes Pesticids, Escol Superior de Agricultur Luiz Queiroz, Av. Pádu Dis,, C. Postl 9, , Pircic, SP; celomoto@eslq.usp.r Edited y Herert Álvro Areu de Siqueir UFRP Neotropicl Entomology 38():6-25 (2009) Monitoring the Susceptiility to Insecticides in Bemisi tci (Genndius) (Hemipter: Aleyrodide) Popultions from Brzil ABSTRACT - Monitoring the susceptiility of pest popultion to pesticides is essentil for resistnce mngement progrms. The ojective of this reserch ws to evlute the genetic vriility in pesticide susceptiility in popultions of Bemisi tci (Genndius) collected from different Brzilin griculturl regions through the use of two different tests. Four whitefly popultions, two from Goiás stte (GO- nd GO-2) e two from Bhi stte (BA- nd BA-2), were tested ginst susceptile reference one (SusIAC). A residul contct iossy ws used to evlute the pesticide susceptiility of ech popultion y using dignostic concentrtion iossys nd y estimting the seline susceptiility dt to ech one of the tested insecticides, cetmiprid, imidcloprid, thimethoxm, chlorpyrifos nd endosulfn. Adult insects of unknown ge nd sex were tested. Evlutions were performed fter 24h for endosulfn nd 48h for the other chemicls. Both procedures showed significnt differences in the susceptiility to the pesticides mong B. tci popultions. However, the discrimintion mong B. tci popultions ws more evident with the use of dignosis tests. The popultion GO-2 ws significntly less susceptile to the tested pesticides thn SusIAC, minly to neonicotinoids. The most criticl resistnce sitution of B. tci ws detected to thimethoxm, followed y imidcloprid. KEY WORDS: Whitefly, iotype B, seline susceptiility, chemicl control, monitoring resistnce RESUMO - O monitormento d suscetiilidde de prgs prguicids é essencil pr progrms de mnejo d resistênci. O ojetivo deste trlho foi verificr vriilidde genétic de populções de Bemisi tci (Genndius), oriunds de diferentes áres grícols, qunto suscetiilidde inseticids no Brsil, por meio de dois testes diferentes. Qutro populções de mosc-rnc form testds em relção um populção suscetível de referênci (SusIAC); dus oriunds de Goiás (GO- e GO-2) e outrs dus d Bhi (BA- e BA-2). Um técnic de ioensio do tipo contto residul foi empregd pr relizção dos testes: ) teste dignóstico d resistênci; e 2) teste pr otenção ds linhs de suscetiilidde ds populções. Os produtos utilizdos form cetmipride, imidclopride, timetoxm, clorpirifós e endosulfm. Utilizrm-se insetos dultos não seprdos por sexo e nem por idde nos testes. As vlições form relizds em 24h, pr o teste com endosulfm, e em 48h, pr os demis produtos. Amos os testes revelrm vriilidde genétic qunto à suscetiilidde de mosc-rnc os inseticids. No entnto, discriminção entre s populções de B. tci foi mis evidente com o uso de testes dignósticos. A populção GO-2 foi significtivmente menos suscetível os produtos testdos que SusIAC, principlmente em relção os neonicotinóides. A situção mis crític de resistênci de mosc-rnc foi com timetoxm, seguid pelo imidclopride. PALAVRAS-CHAVE: Mosc-rnc, iótipo B, linh ásic de referênci, controle químico, mnejo d resistênci Desde 99, grndes surtos d mosc-rnc Bemisi tci (Genndius) ocorrerm em áres grícols de todo o mundo (Prhker et l 2005). A prtir de então, espécie tem se destcdo como um ds principis prgs em vários cultivos de regiões tropicis e sutropicis d Áfric, Ási, Europ e Américs (Ahmd et l 2002, Nuen & Deholm 2005).

2 Jnury - Ferury 2009 Neotropicl Entomology 38() 7 A mosc-rnc é cpz de provocr tnto dnos diretos qunto indiretos váris culturs de importânci econômic, como por exemplo, melão, lgodão, soj, feijão, tomte e diverss outrs olerícols. Cus dnos diretos devido à sucção d seiv d plnt, deixndo- deilitd, e devido à injeção de toxins contid em su sliv durnte limentção, o que pode provocr, por exemplo, o mdurecimento irregulr de tomte. Pode ind reduzir qulidde do produto, como fir de lgodão, devido à excreção de sustânci çucrd ou honeydew (Lourenção & Ngi 994, Ellsworth et l 999). Indiretmente, os principis dnos são ocsiondos porque mosc-rnc é vetor de muits espécies de vírus; lém disso, mosc-rnc propici condições fvoráveis à fumgin, fungo que se desenvolve sore o honeydew e que pode deprecir o vlor comercil de frutos, como melão e tomte (Morles 200, Ahmd et l 2002, Jones 2003, De Brro 2005). O controle d prg tem dependido principlmente de inseticids, que são plicdos prticmente durnte todo o no (Prhker et l 996, Toscno et l 200). Entretnto, estudos já confirmrm o desenvolvimento de resistênci, em condições de cmpo ou de lortório, de B. tci inseticids de diversos grupos químicos, tis como orgnofosfordos (Ahmd et l 2002, Omer et l 993, ), crmto (Omer et l 993), piretróides (Omer et l 993, Chill et l 995, Ahmd et l 2002), ciclodieno (Perry 985, Ahmd et l 987), reguldores de crescimento (Chill et l 994, 996, Dennehy & Willims 997) e neonicotinóides (Chill et l 996, Elert & Nuen 2000, Dennehy et l 2005). B. tci é considerd um complexo de espécies com 24 iótipos já determindos (Perring 2000). De cordo com ffrench-constnt & Roush (990), suscetiilidde inseticids pode vrir dentro de um complexo de espécies. Estudos já confirmrm suscetiilidde diferencid inseticids em função do iótipo de B. tci ser A, B ou Q (Cost et l 993, Dennehy et l 2005). Dest mneir, em um progrm de monitormento e mnejo de resistênci de B. tci há necessidde de se confirmr o iótipo usdo nos testes. O mnejo d resistênci tem como finlidde retrdr ou reverter evolução d resistênci em prgs (Omer et l 993). O sucesso de qulquer progrm de mnejo d resistênci está relciondo meios rápidos e eficientes pr detectr e monitorr resistênci em populções de prgs no cmpo (Bush et l 993). Estudos sore determinção de linhs ásics de suscetiilidde e detecção de resistênci de populções de mosc-rnc inseticids já form relizdos em lguns píses, tis como EUA, Isrel, Sudão, Espnh, Reino Unido e Pquistão (Dittrich et l 985, Prhker et l 985, Adeldffie et l 987, Horowitz & Ishy 994, Chill et l 996, Horowitz et l 2004). No Brsil, pesquis ind é incipiente, pesr de prg ser considerd de grnde importânci econômic em muitos cultivos. Assim sendo, o ojetivo deste trlho foi o de verificr vriilidde genétic de populções de B. tci de diferentes áres grícols do Brsil qunto à suscetiilidde inseticids medinte o uso de dois tipos de teste pr fins de monitormento d resistênci B. tci. Mteril e Métodos Populções de B. tci. Form relizdos ioensios com um populção de B. tci suscetível de referênci (SusIAC) e qutro diferentes populções de plntios comerciis, sendo s mesms coletds em Goiás e n Bhi, sendo um em tomteiro de cultivo protegido (GO-2 - Hidrolândi) e s demis em cmpos ertos de cultivo, sendo BA- (São Desidério) e GO- (Cristlin) coletds em feijoeiro e BA-2 (Rod Velh) em lgodoeiro. A colet foi feit trvés d retird de folhs infestds, s quis form rmzends em scos plásticos, condicionds em cix de isopor e trnsportds imeditmente o lortório. Após o receimento, s folhs infestds com os insetos form trnsferids pr giols de tel ntifídic e crílico ( cm) contendo qutro vsos com plnts de lgodão Delt Opl. Form cultivds dus ou três plnts de lgodão por vso, seguindo o modo de cultivo ds plnts utilizds n crição d populção SusIAC. Os insetos d populção SusIAC form provenientes de um populção crid em plnts de soj e couve no Instituto Agronômico de Cmpins (IAC), Cmpins, SP, que não hvi sofrido nenhum plicção de inseticids há pelo menos cinco nos. A populção SusIAC foi mntid em plnts de lgodão (Gossypium hirsutum Delt Opl ) cultivds em vsos d mrc Nutripln número 4 (3,75 L) preenchidos com um mistur de solo e sustrto comercil pr produção de muds de hortliçs (Plntimx HT - Euctex Ltd., Pulíni, SP) n proporção de 2:3 (solo:sustrto comercil) em condições de cs de vegetção. Durnte o tempo de relizção deste trlho, nenhum plicção de inseticid foi feit sore s plnts de crição de B. tci. Pr determinção do iótipo de B. tci, insetos dultos de cd populção form envidos à Emrp Hortliçs, Brsíli, DF. A técnic empregd pr determinção foi de mplificção de DNA vi PCR (Sseruwgi et l 2005). Bioensios. A técnic de ioensio utilizd foi do tipo contto residul sed nquel de Dittrich et l (985) com dultos de mosc-rnc. Discos de folhs do tipo trifolid de plnts de feijão-de-porco, Cnvli ensiformis, form usdos como sustrto do ioensio. Pr isso, plnts de feijão-deporco form cultivds em vso d mrc Nutripln n. 2 (0,9 L), em condições de cs de vegetção e livre de infestção de inseto, com mesm mistur usd pr o cultivo de plnts de lgodão. Folhs provenientes de plnts de feijão-de-porco com idde entre qutro e dez semns pós germinção form retirds, lvds em águ corrente e imerss em águ por 0 min. Em seguid, s folhs form enxugds com ppel tolh e cortds em form de discos de 2, cm de diâmetro. Os discos form postos sore um ndej com ppel tolh umedecido com águ destild, deixndo-se prte xil d folh em contto com o ppel umedecido. Qutro discos folires de feijão-de-porco form trtdos por imersão (5 s) pr cd concentrção de um dos cinco inseticids testdos. O controle constou d imersão de qutro discos em águ com surfctnte. Posteriormente, os discos form postos secr, com fce xil do disco vird pr cim, sore um ndej forrd com folhs de ppel tolh

3 8 Silv et l - Monitormento d Suscetiilidde Inseticids em Populções de Bemisi tci... sec. Cd disco trtdo foi colocdo sore um cmd de,2 ml de solução ágr-águ 2,8% no fundo de um tuo de vidro de fundo chto (Covdis, Pircic, SP) (diâmetro = 23 mm e comprimento = 83 mm) de form que fce dxil do disco ficsse em contto com solução ágr-águ. O excesso d solução ágr-águ que eventulmente ficv n ord do disco folir trtdo e/ou n prede intern do tuo do ioensio foi retirdo com uxílio de um pinç e ppel higiênico, pr evitr que os insetos ficssem deridos o mesmo e, consequentemente, evitr mortlidde cusd pel umidde no interior do tuo. Pr cd inseticid, o ioensio foi repetido três ou qutro vezes, dependendo d quntidde de insetos disponíveis. Dentro de 4h pós o prepro dos tuos de ioensio, procedeu-se à infestção com dultos de B. tci. Os tuos form tmpdos com um disco de ppel tolh e sore este um lâmin de filme de PVC pr uxilir n fixção do disco de ppel. Os ensios form conduzidos em condições controlds de tempertur de 25 ± 2ºC e fotoperíodo de 4:0 (hors de luz:escuro). Inseticids testdos. Cinco inseticids form utilizdos, sendo três neonicotinóides (cetmipride, imidclopride e timetoxm), um orgnofosfordo (clorpirifós) e um ciclodieno (endosulfm) (Tel ). Pr os testes dignósticos d resistênci pens um únic concentrção (concentrção dignóstic) de cd produto mis um controle form preprds. Pr os testes com o ojetivo de crcterizr s linhs de suscetiilidde, cinco sete concentrções logritmicmente espçds form preprds, proporcionndo mortlidde entre 0% e 95%, mis um controle (águ destild). Pr tods s concentrções inseticids mis o controle de cd ioensio foi diciondo 0,% de surfctnte (Triton ). Testes dignósticos d resistênci. As concentrções letis pr 95% d SusIAC (CL 95 s) dos diferentes produtos, estimds em estudos prévios, form usds como concentrções dignóstics com o ojetivo de comprovr vriilidde genétic qunto à sucetiilidde ds diferentes populções de B. tci provinientes de cmpo os diferentes inseticids em relção à populção suscetível de referênci (SusIAC). As concentrções dignóstics usds form: 320 ppm pr cetmipride, 40 ppm pr imidclopride, 80 ppm pr timetoxm, 600 ppm pr clorpirifós e 320 ppm pr endosulfm. Cd ioensio foi repetido três ou qutro vezes. O número de insetos dultos por tuo vriou de 7 2, sendo médi de 3 insetos dultos por tuo. Testes pr otenção ds linhs de suscetiilidde ds populções de cmpo. Foi utilizdo o mesmo método de ioensio descrito nteriormente, vlindo-se de cinco sete concentrções de cd inseticid mis o controle. Em cd ioensio form utilizdos três ou qutro repetições. O número de insetos dultos por tuo vriou de 6 25, sendo médi de insetos dultos por tuo. Avlição dos ioensios e nálise dos ddos. A mortlidde foi vlid 24h pós infestção dos discos folires trtdos nos ioensios com o endosulfm, e 48h pr os demis produtos, sendo-se nos estudos relizdos por Chill et l (996), Prhker et l (996) e (2005) e Dennehy et l (2005). Como critério de mortlidde esteleceu-se que, no momento d vlição, o inseto que não presentsse sinl de movimento ou presentsse movimentos lentos e desordendos (moriundo), pós ser tocdo levemente por um pincel de cerds fins, er considerdo morto. Os ddos otidos nos testes de dignósticos d suscetiilidde form sumetidos à nálise de vriânci (SAS Institute 989), sendo s médis comprds pelo teste de Tukey (P < 0,05). Os ddos de mortlidde form sumetidos à nálise de Proit, medinte o uso do progrm Polo-PC (Leor Softwre 987), prtir do qul form estimds s concentrções letis 50 ( ) e 95 (CL 95 ), o coeficiente ngulr e χ 2 (vlor do qui-qudrdo). O vlor do qui-qudrdo (χ 2 ) clculdo pelo progrm Polo-PC foi comprdo o vlor do χ 2 pré-estelecido em tel. Qundo o vlor do χ 2 clculdo foi igul ou menor do que o χ 2 teldo, os ddos do ioensio form considerdos dequdos o modelo proit. A diferenç dos vlores de ou CL 95 foi considerd significtiv (P < 0,05) qundo não houve soreposição dos intervlos de confinç 95%. A rzão de resistênci (RR) de cd populção de cmpo foi clculd dividindo-se respectiv (ou CL 95 ) pelo vlor d (ou CL 95 ) d populção SusIAC. Tel Crcterístic comerciis dos produtos usdos nos ioensios d pesquis. Nome técnico Nome comercil Grupo químico Formulção g de i.. Fricnte Acetmipride Mospiln Neonicotinóide Pó solúvel 200 / kg Quntidde de ingrediente tivo (em g) / kg ou L do produto comercil Ihrrás S.A. Indústris Químics Imidclorpride Provdo 200 C Neonicotinóide Suspensão concentrd 200 / L Byer CropScience Ltd. Timetoxm Actr 250 WG Neonicotinóide Grnuldo dispersível 250 / kg Clorpirifós Lorsn 480 BR Orgnofofosrdo Endosulfm Thiodn EC Ciclodieno Concentrdo emulsionável Concentrdo emulsionável 480 / L Syngent Proteção de Cultivo Ltd. Dow Agrosciences Industril Ltd. 350 / L Byer CropScience Ltd.

4 Jnury - Ferury 2009 Neotropicl Entomology 38() 9 Resultdos e Discussão Biótipo de B. tci. O resultdo d mplificção de DNA vi PCR revelou que tods s mostrs de B. tci erm composts pelo iótipo B. O iótipo de B. tci fet su tolerânci inseticids, pois o iótipo B é mis tolernte inseticids do que o iótipo A (Guirão et l 997), pesr de menos tolernte do que o Q (Dennehy et l 2005, Horowitz et l 2005). Dess form, informção de que tods s populções de B. tci estudds erm composts pelo mesmo iótipo (B) tem importânci pr se firmr que diferenç n suscetiilidde desss populções os inseticids não foi influencid pelo ftor iótipo. Dignósticos d resistênci de mosc-rnc inseticids. Em relção à concentrção dignóstic de cetmipride, pens populção de B. tci oriund de cultivo de tomte em estuf (GO-2) diferiu significtivmente d populção suscetível de referênci (SusIAC), com 35,6% de sorevivênci, enqunto que sorevivênci foi de 7,8% n SusIAC. Ns demis populções, sorevivênci vriou de 7,9%, pr populção BA-2, 4,2%, pr populção GO- (Fig ). Pr imidclopride, pens populção BA-, com sorevivênci de 8,6% dos dultos n concentrção dignóstic, foi semelhnte à populção SusIAC, cuj sorevivênci tingiu 9,6%. Entre s demis populções testds com concentrção dignóstic de imidclopride, sorevivênci chegou 52,7%pr populção GO-2. No teste com timetoxm, oservou-se que únic populção com sorevivênci semelhnte SusIAC (2,97% de sorevivênci) foi tmém BA-, com 3,2% de sorevivênci. Entre s outrs populções testds com timetoxm, GO-2 (populção de estuf) destcouse como mis resistente timetoxm, com 82,9% de sorevivênci. No teste com endosulfm, populção GO- foi únic quese mostrou semelhnte SusIAC (3,34% de sorevivênci). A populção GO-2 se revelou mis resistente à concentrção dignóstic de endosulfm do que SusIAC e GO-, porém mis sensível do que s populções oriunds d Bhi. No teste dignóstico com clorpirifós, tods s populções tiverm sorevivênci igul à de SusIAC (3,08%), exceto GO-2, que presentou sorevivênci de 26,2%. Ns outrs populções de B. tci, sorevivênci máxim foi de 0,8% pr populção BA-. De modo gerl, populção BA- foi que mis se ssemelhou SusIAC em relção suscetiilidde às concentrções dignóstics dos inseticids testdos. A sorevivênci de BA- diferiu d SusIAC somente no teste com endosulfm. A populção BA-2 mostrou-se mis tolernte dois neonicotinóides (imidclopride e timetoxm) e endosulfm. A populção GO- presentou mior tolerânci esses dois neonicotinóides e suscetiilidde semelhnte SusIAC nos testes com os demis inseticids. Entretnto, populção GO-2 destcou-se como populção mis resistente os inseticids testdos. Nos testes com todos os produtos, GO-2 presentou sorevivênci superior SusIAC, o que foi evidencido no teste dignóstico com timetoxm. As miores sorevivêncis de dultos de mosc-rnc form otids com timetoxm. Linhs de suscetiilidde ds populções de cmpo. Todos os vlores de χ 2 clculdos estiverm dentro dos limites préestelecidos, ou sej, form inferiores os vlores de χ 2 teldos. Sendo ssim, os ddos nlisdos dequrm-se o modelo proit (Roertson & Preisler 992). Os vlores ds s de cetmipride pr s populções BA-2 e GO-2 diferirm d pr SusIAC, não hvendo soreposição de seus intervlos de confinç (IC 95%) (Tel 2). Apesr dess diferenç, rzão de resistênci à d c Sorevivênci (%) Acetmipride 320 ppm Imidclopride 40 ppm Timetoxm 80 ppm Endosulfm 320 ppm Clorpirifós 600 ppm Populção SusIAC Populção BA- Populção BA-2 Populção GO- Populção GO-2 Fig Sorevivênci (em %) de mosc-rnc de diferentes populções às concentrções dignóstics de inseticids. Pr cd inseticid, coluns seguids pel mesm letr não diferem significtivmente entre si (P < 0,05). c c

5 20 Silv et l - Monitormento d Suscetiilidde Inseticids em Populções de Bemisi tci... Tel 2 Respost de concentrção-mortlidde de qutro populções de Bemisi tci oriunds de cmpo e um populção suscetível de referênci cetmipride (tempertur de 25 ± 2ºC e fotoperíodo de 4h). Populção n Coeficiente ngulr (± EPM 2 ) SusIAC 6, (± 0,074) BA- 742 BA GO- 533 GO-2 455,775 (± 0,3),65 (± 0,065),994 (± 0,68),998 (± 0,225) χ 2 (g.l.) 3 4 (IC 95%) 5,25 4,87 3,8 7,27 5,43 23,0 (6,56-3,9) 34,54 (22,28-49,67) 46,32 (38,8-55,73) 30,42 (2,24-44,60) 28,52 (7,77-87,02) RR 5,50 2,0,32 5,56 CL 95 4 (IC 95%) 330,73 (92,2-734,6) 29,62 (73,52-693,52).96,80 (853, ,94) 203,3 (4,78-560,69) 855,78 (543,42-958,0) n = número de insetos sumetidos o teste; 2 EPM = Erro pdrão d médi; 3 Vlor do qui-qudrdo clculdo (χ 2 ) e número e grus de lierdde (g.l.); 4 Concentrção letl (CL) 50 ou 95 e seu intervlo de confinç (IC) 95%; 5 RR = Rzão de resistênci, otid pel divisão do vlor d CL de cd populção pelo vlor d CL de SusIAC, ou 95; 6 Vlores de suscetiilidde d populção suscetível de referênci (SusIAC). RR 5 CL 95 0,88 3,6 0,6 2,59 populção BA-2 foi de pens 2,0, enqunto RR à d populção GO-2 foi de 5,6. Entretnto, pens populção BA-2 presentou vlor de CL 95 diferente de SusIAC, com RR CL 95 de 3,6. Tods s populções de B. tci de cmpo e SusIAC tiverm coeficientes ngulres d regressão liner inferiores 2,0, o que, de cordo com Roertson & Preisler (992), seri respost de um populção geneticmente heterogêne qunto à su suscetiilidde o inseticid, no cso, o cetmipride. A otenção de vlores ixos de coeficiente ngulr d regressão (< 2,0) é o comportmento típico de um populção de cmpo e indic heterogeneidde genétic de respost pr o desenvolvimento de resistênci (Ahmd et l 2002). As s de imidclopride pr s populções de cmpo diferirm d de SusIAC (Tel 3). O imidclopride foi menos tóxico às populções de Goiás que às d Bhi. Apesr disso, RR d BA- foi reltivmente ix (RR = 2,). As CL 95 s de imidclopride pr tods s populções de cmpo tmém diferirm d CL 95 pr SusIAC, exceto pr populção BA-. Em relção CL 95, s populções GO-2 e GO- form s que presentrm mior rzão de resistênci imidclopride, com RR s de 0,8 e 4,6, respectivmente. Tods s linhs de suscetiilidde ds populções de B. tci de cmpo e d SusIAC tmém presentrm coeficientes ngulres inferiores 2,0. Em relção à de timetoxm, tods s populções Tel 3 Respost de concentrção-mortlidde de qutro populções de Bemisi tci oriund de cmpo e um populção suscetível de referênci imidclopride (tempertur de 25 ± 2ºC e fotoperíodo de 4h). Populção n Coeficiente ngulr (± EPM 2 ) SusIAC 6, (± 0,066) BA- 56 BA GO- 677 GO-2 54,294 (± 0,38),453 (± 0,09),852 (± 0,83),577 (± 0,36) χ 2 (g.l.) 3 4 (IC 95%) 3,2 0,57 5,6 5,62 8,22 4,554 (3,439-5,809) 9,52 (6,30-3,0) 28,57 (9,75-38,84) 8,9 (54,75 -,73) 35,34 (77,83-208,64) RR 5 2,09 6,27 CL 95 4 (IC 95%) 38,5 (97,66-22,84) 77,084 (66,42-323,93) 387,45 (234,56-842,03) 7,99 632,90 (387,87-528,92) 29,72 494,20 (796, ,50) n = número de insetos sumetidos o teste; 2 EPM = Erro pdrão d médi; 3 Vlor do qui-qudrdo clculdo (χ 2 ) e número e grus de lierdde (g.l.); 4 Concentrção letl (CL) 50 ou 95 e seu intervlo de confinç (IC) 95%; 5 RR = Rzão de resistênci, otid pel divisão do vlor d CL de cd populção pelo vlor d CL de SusIAC, ou 95; 6 Vlores de suscetiilidde d populção suscetível de referênci (SusIAC). RR 5 CL 95,28 2,80 4,58 0,82

6 Jnury - Ferury 2009 Neotropicl Entomology 38() 2 diferirm de SusIAC e, com exceção d populção BA-, tods presentrm elevdos vlores de RR (Tel 4). A populção GO-2 foi mis resistente timetoxm (Tel 4). Os coeficientes ngulres tmém form inferiores 2,0 ns populções SusIAC e BA-; porém, s demis populções presentm vlores de coeficiente ngulr mior que 2,0 (Tel 4), o que indic mior homogenidde genétic ns populções BA-2, GO- e GO-2 qunto à respost desss populções o umento n concentrção do timetoxm. Tomndo-se de clorpirifós como prâmetro de resistênci de B. tci, tods s populções de cmpo form tão suscetíveis qunto populção SusIAC ( = 246,59 ppm), presentndo ixos vlores de RR (<,) (Tel 5). As RR à CL 95 ds populções de B. tci de cmpo presentrm ixos vlores (< 2,0). Os coeficientes ngulres de tods s populções, inclusive SusIAC, foi superior 2,0, o que reflete homogeneidde desss populções em relção à respost ds mesms o clorpirifós. A de endolsulfn pr populção BA-2 foi únic diferir de SusIAC (Tel 6), sendo mesm mis tolernte do que GO-. Em termos de CL 95 de endosulfm, nenhum ds populções de cmpo diferiu de SusIAC. Entretnto, em relção CL 95, s populções oriunds d Bhi form menos suscetíveis do que s populções de Goiás (Tel 6). Os coeficientes ngulres de tods s populções foi superior 2,0, com exceção d populção BA-. Tel 4 Respost de concentrção-mortlidde de qutro populções de Bemisi tci oriund de cmpo e um populção suscetível de referênci timetoxm (tempertur de 25 ± 2ºC e fotoperíodo de 4h). Populção n Coeficiente ngulr (± EPM 2 ) SusIAC 6 073,46 (± 0,067) BA- 508,842 (± 0,56) BA ,392 (± 0,65) GO- 65 2,847 (± 0,22) GO ,9 (± 0,242) χ 2 (g.l.) 3 4 (IC 95%) 4,79 4,5 2,53 8,87 2,45 2,9 (,65-4,66) 0,07 (7,22-3,33) 64,2 (56,74-7,94) 66,95 (49,35-86,45) 35,65 (6,22-56,63) RR 5 3,46 22,03 23,0 46,62 CL 95 4 (IC 95%) 79,23 (4,73-22,47) 78,69 (5,82-49,20) 32,29 (256,52-400,8) 253,22 (77,85-465,66) 498,33 (405,93-649,80) n = número de insetos sumetidos o teste; 2 EPM = Erro pdrão d médi; 3 Vlor do qui-qudrdo clculdo (χ 2 ) e número e grus de lierdde (g.l.); 4 Concentrção letl (CL) 50 ou 95 e seu intervlo de confinç (IC) 95%; 5 RR = Rzão de resistênci, otid pel divisão do vlor d CL de cd populção pelo vlor d CL de SusIAC, ou 95; 6 Vlores de suscetiilidde d populção suscetível de referênci (SusIAC). RR 5 CL 95 0,99 3,94 3,20 6,29 Tel 5 Respost de concentrção-mortlidde de qutro populções de Bemisi tci oriund de cmpo e um populção suscetível de referênci clorpirifós (tempertur de 25 ± 2ºC e fotoperíodo de 4h). Populção n Coeficiente ngulr (± EPM 2 ) SusIAC ,225 (± 0,239) BA ,485 (± 0,273) BA ,33 (± 0,296) GO ,87 (± 0,348) GO ,935 (± 0,292) χ 2 (g.l.) 3 4 (IC 95%) 4,56 9,44 6,20 (5) 3,8 (5) 3,0 246,59 (25,26-278,95) 238, (4,77-32,52 95,59 (60,47-228,8) 209,0 (86,58-230,65) 268,6 (230,38-305,87) RR 5 0,97 0,79 0,85,09 CL 95 4 (IC 95%) 604,42 (504,66-784,20) 093,23 (703, ,83).96,80 (853, ,94) 555,998 (482,04-672,60) 976,25 (800,08-288,0 n = número de insetos sumetidos o teste; 2 EPM = Erro pdrão d médi; 3 Vlor do qui-qudrdo clculdo (χ 2 ) e número e grus de lierdde (g.l.); 4 Concentrção letl (CL) 50 ou 95 e seu intervlo de confinç (IC) 95%; 5 RR = Rzão de resistênci, otid pel divisão do vlor d CL de cd populção pelo vlor d CL de SusIAC, ou 95; 6 Vlores de suscetiilidde d populção suscetível de referênci (SusIAC). RR 5 CL 95,8,98 0,92,62

7 22 Silv et l - Monitormento d Suscetiilidde Inseticids em Populções de Bemisi tci... Tel 6 Respost de concentrção-mortlidde de qutro populções de Bemisi tci oriund de cmpo e um populção suscetível de referênci endosulfm (tempertur de 25 ± 2ºC e fotoperíodo de 4h). Populção n Coeficiente ngulr (± EPM 2 ) SusIAC ,20 (± 0,255) 5,37 (2) BA- 607,939 (±0,67) BA ,587 (± 0,32) GO ,045 (± 0,275) GO ,328 (± 0,330) χ 2 (g.l.) 3 4 (IC 95%) 6,05 6,70,52 3,96 03,79 (62,43-57,02) 200,55 (20,2-29,93) 295,22 (250,47-344,84) 90,90 (79,2-03,00) 62,70 (4,20-83,33 RR 5,93 2,84 0,88,57 CL 95 4 (IC 95%) 337,70 (205, ,7) 43,53 (88, ,42),276,30 (99, ,70) 35,28 (259,95-408,74) 507,72 (426,40-646,24) n = número de insetos sumetidos o teste; 2 EPM = Erro pdrão d médi; 3 Vlor do qui-qudrdo clculdo (χ 2 ) e número e grus de lierdde (g.l.); 4 Concentrção letl (CL) 50 ou 95 e seu intervlo de confinç (IC) 95%; 5 RR = Rzão de resistênci, otid pel divisão do vlor d CL de cd populção pelo vlor d CL de SusIAC, ou 95; 6 Vlores de suscetiilidde d populção suscetível de referênci (SusIAC). RR 5 CL 95 4,9 3,78 0,93,50 Adotndo um ftor mínimo de resistênci (RR 5,0), lém d soreposição nos intervlos de confinç ds s dos inseticids ds populções de cmpo em relção à de SusIAC, form oservds similriddes entre os resultdos ds linhs de suscetiilidde e os otidos nos testes dignósticos pr os três inseticids neonicotinóides: populção BA- mostrou-se igulmente suscetível SusIAC todos os inseticids testdos; s populções BA-2 e GO- presentrm indícios de prolem pr serem controlds com imidclopride e timetoxm; e populção GO-2 revelou indício de prolem de resistênci pr ser controld com os neonicotinóides vlidos. De cordo com s linhs de sustentilidde, endosulfm e clorpirifós mostrrm-se igulmente eficientes no controle de tods s populções, o que não foi verddeiro nos testes dignósticos. Entretnto, medinte os testes dignósticos, os quis revelrm diferençs entre s populções pr os dois produtos (Fig ). Trdicionlmente, o monitormento d resistênci de prgs inseticids tem envolvido comprção de concentrções letis (por exemplo, e CL 95 ) e coeficientes ngulres entre populções suscetíveis de lortório e de cmpo (ffrench-constnt & Roush 990). Entretnto, em lguns csos, pr distinção precis de populções suscetíveis ds supostmente resistentes, o uso de CL s e coeficientes ngulres tem sido ineficiente qundo comprdo os testes dignósticos, por serem, tnto s CL s qunto os coeficientes ngulres, insensíveis pequens mudnçs n freqüênci de indivíduos resistentes, prticulrmente no início d evolução d resistênci, ou sej, qundo frequênci de resistênci ind é ix (Roush & Miller 986). Outrs desvntgens do uso de s são o tempo e o número de indivíduos usdos pr otenção desses vlores (Hllidy & Burnhm 990). O tempo pr otenção dos resultdos de testes dignósticos é mis curto do que pr otenção dos vlores de CL s e coeficientes ngulres. Nos testes dignósticos todos os indivíduos são testdos num determind concentrção, não sendo desperdiçdos indivíduos com outrs concentrções, cujs percentgens de mortlidde não serim de interesse (ffrench-constnt & Roush 990). Em termos práticos, o teste dignóstico poderi ser usdo pr indicr suscetiilidde de populções de B. tci, principlmente num situção em que há restrição de tempo e de insetos disponíveis pr relizção de outros tipos de testes. A mis provável cus de s populções de cmpo terem presentdo diferenç em relção SusIAC é que s populções de cmpo sofrerm pressão de seleção locl com o intenso uso de inseticids, principlmente de neonicotinóides. A região de Brreirs, n Bhi, é crcterizd pelo cultivo em lrg escl de diverss espécies de grndes culturs, tis como, lgodão, soj, milho e feijão. Ness região, em 2006, ocorrerm grndes surtos de mosc-rnc em plntios de lgodão, feijão e soj. O uso de neonicotinóides, tis como cetmipride e timetoxm, lém de crosulfno, difentiurom, endosulfm, lmd-cilotrin e zetcipermetrin, form intenso no comte prgs (B. tci, Aphis gossypii Glover, e Anthonomus grndis Bohemn) n sfr 2005/06 de lgodão dess região. Apesr de pertencerem à mesm região, s populções BA- e BA-2 presentrm suscetiiliddes diferentes os inseticids. Isso poderi ser devido o fto de que BA- foi coletd em cultivo de feijão e dois meses ntes de BA-2, que foi coletd em lgodoeiro. O fto de hver sido coletd mis cedo no no grícol é um indictivo de que BA- tenh sofrido menor pressão de seleção pelos inseticids. Como mostr o trlho de Sivsuprmnim et l (997), há um tendênci no umento d resistênci de mosc-rnc inseticids do início pr o fim d sfr se não houver um mnejo dequdo de inseticids. O outro fto é que, gerlmente, n região de Brreirs, em rzão de um mior gm de prgs e do mior vlor grícol, o cultivo de lgodoeiro recee mis plicções

8 Jnury - Ferury 2009 Neotropicl Entomology 38() 23 de inseticids que o feijoeiro. As áres de colet d mosc-rnc em Goiás erm crcterizds tmém pelo uso intensivo de inseticids pr o controle de prgs, principlmente de Hidrolândi (cultivo de tomte em estuf). A populção de mosc-rnc que crcterizou situção mis crític de resistênci foi GO-2, coletd em tomteiro so sistem de cultivo protegido (estuf) n região de Hidrolândi. Nesse cultivo, timetoxm e imidclopride erm os dois principis produtos utilizdos pr o controle de mosc-rnc, sendo que outros produtos, como o clorpirifós, não erm usdos por não serem mis tão eficientes contr prg nquel loclidde. Georghiou & Tylor (977) rgumentm que o refúgio d prg pode ser um fto especilmente importnte no retrdmento d evolução d resistênci. So intens pressão de seleção, evolução d resistênci ocorre mis rpidmente em populções isolds (Georghiou & Tylor 977). So condições de cultivo protegido, populção de mosc-rnc pode ser considerd isold, um vez que é menor imigrção de indivíduos suscetíveis em relção cultivos em condições de cmpo. Além disso, em estuf é menos provável que mosc-rnc encontre refúgio durnte s plicções de inseticids. Nos EUA, segundo Sivsuprmnim et l (997), populções de mosc-rnc de cultivo de poinséti em condições de cs de vegetção (estuf) presentrm ltos níveis de resistênci inseticids. Isso pode explicr rzão de populção GO-2, oriund de cultivo de tomte em estuf, ter se destcdo como menos suscetível os neonicotinóides, principlmente nos testes com concentrções dignóstics. A populção oriund do cultivo de tomte em estuf foi mis resistente té mesmo cetmipride, inseticid que não tinh sido usdo pr o controle de mosc-rnc nquele locl. A ocorrênci de resistênci cruzd poderi explicr isso, um vez que outros dois neonicotinóides (timetoxm e imidclopride) form muito usdos pr o controle d prg n áre onde GO-2 foi coletd. Prolems de resistênci cruzd de populções de mosc-rnc inseticids neonicotinóides já form registrdos por Prhker et l (2005). Esses utores verificrm que, entre qutro inseticids neonicotinóides, lgums populções de B. tci presentvm níveis elevdos de resistênci timetoxm e, principlmente, imidclopride nos EUA. Diverss outrs pesquiss, ns quis ioensios form utilizdos, tmém revelrm diferençs entre populções de mosc-rnc neonicotinóides em vários lugres, tis como Pquistão (Ahmd et l 2002), Reino Unido (Rowlnd et l 99; Chill et l 996, ), Sudão (Ahmd et l 987) e Isrel (Horowitz & Ishy 994, Horowitz et l 2004) e, tmém, nos EUA (Dennehy & Willims 997, Dennehy et l 2005). Deve ser ressltdo tmém que os ioensios form relizdos de dois cinco meses pós dt de cptur do inseto. Assim, há possiilidde de ocorrênci de diminuição d frequênci d resistênci durnte esse período, pois, segundo Rnsighe & Georghiou (979), n usênci de pressão de seleção, pode ocorrer redução n tolerânci inseticid num crição de insetos em lortório pós váris gerções. Hvendo instilidde d resistênci d mosc-rnc um determindo inseticid, os resultdos qui presentdos poderim não condizer com relidde em cmpo, já que s populções de lortório são mntids n usênci d pressão de seleção. Entretnto, remoção d pressão de seleção e crição contínu em lortório não fetou respost de populções de mosc-rnc ifentrin e o zinfosmetil (Bush et l 993, Riley & Tn 2003). Por isso, o desenvolvimento e uso de técnics de ioensios que melhor reflitm relidde no cmpo é fundmentl pr o monitormento e mnejo d resistênci de moscrnc inseticids, no tempo e no espço, num pís de importânci grícol como o Brsil. Tem sido justmente medinte o emprego desss técnics que, há mis de um décd, pequiss em vários píses têm conseguido monitorr e mnejr resistênci de mosc-rnc inseticids em diversos cultivos. Por consequênci, pode-se firmr que esss pesquiss norteim produtores grícols o uso mis rcionl dos inseticids, prolongndo su vid útil e evitndo prejuízos que má utilizção desses produtos possm ocsionr. Bsedo nos resultdos qui otidos, pr o controle de B. tci, poder-se-i recomendr: o uso de qulquer um dos três neonicotinóides e de clorpirifós n áre de cultivo de feijão do município de São Desidério, onde populção BA- foi coletd; o uso de pens cetmipride e de clorpirifós n áre de lgodão do município de Rod Velh, onde populção BA-2 foi coletd; utilizção de pens cetmipride e de clorpirifós n áre de feijão do município de Cristlin, um vez que o uso de endosulfm não é recomenddo pr uso ness cultur; e o uso de pens clorpirifós e endosulfm n áre de cultivo de tomte em estuf no município de Hidrolândi, locl de colet d populção GO-2. Além disso, outros produtos, com modos de ção diferentes, e outrs tátics de controle, tis como de controle iológico e de controle culturl, devem ser testds e incluíds no mnejo d mosc-rnc. Conclui-se que há vriilidde genétic entre s populções de B. tci provenientes de diferentes regiões grícols do Brsil qunto à suscetiilidde os inseticids cetmipride, imidclopride, timetoxm, clorpirifós e endosulfm. Ess vriilidde genétic é mostrd tnto pelo teste dignóstico qunto pelo teste pr otenção ds linhs de suscetiilidde, sendo, porém, mis percetível no primeiro teste. Pr os inseticids testdos, o prolem de resistênci de B. tci é mior pr timetoxm, seguido por imidclopride. Agrdecimentos Às pesquisdors Geni L Vills Bos e Mri Esther de N F Boiteux d Emrp Hortliçs, pel identificção do iótipo ds populções de B. tci usds neste trlho. Ao Deprtmento de Entomologi, Fitoptologi e Zoologi Agrícol d Eslq/USP, por conceder o uso de seus equipmentos e instções pr relizção desse trlho. Ao CNPq e à UFC, pel ols de doutordo concedid o primeiro utor. Referêncis Adeldffie E Y A, Elhg E A, Bshir N H H (987) Resistnce in the cotton whitefly, Bemisi tci (Genn.), to insecticide

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