AS IMPRESSÕES DIGITAIS DO DNA (DNA FINGERPRINTING)

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Benedita de Escobar Alencar
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1 AS IMPRESSÕES DIGITAIS DO DNA (DNA FINGERPRINTING)

2 IMPRESSÕES DIGITAIS DO DNA (DNA FINGERPRINTS) - O QUE SIGNIFICA? - Com base no estudo de uma bateria de microssatélites, é possível obter perfis genéticos praticamente indivíduo-específicos, muito úteis na investigação de paternidade, identificação de vítimas e criminosos.

3 IMPRESSÕES DIGITAIS DO DNA (DNA FINGERPRINTS) - TÉCNICAS - RFLP (Restriction Fragment Lenght Polymorphism). PCR (Polymerase Chain Reaction).

outros. 2) Extração e purificação do DNA.

4 RFLP Polimorfismo de Comprimento de Fragmento de Restrição: 1) Coleta de amostras biológicas que podem ser saliva, sangue, esperma, cabelo, entre outros. 2) Extração e purificação do DNA. 3) Corte com enzimas de restrição (tesouras moleculares que reconhecem e cortam seqüências específicas do DNA).

5 4) Eletroforese: onde, através de uma corrente elétrica, são separados os fragmentos de DNA por tamanho. A partir daí, é formada uma espécie de código de barras que é a identificação individual e intransferível de cada indivíduo.

6 CORRIDA DO GEL - + Os fragmentos de DNA migram para o pólo positivo fragmentos menores ( ) migram mais rápido, fragmentos maiores ( )migram mais devagar.

7 VISUALIZAÇÃO DO DNA

8 5) Transferência para membrana de nylon (southern blotting).

9 6) Uso de sondas: pequenos segmentos de DNA radioativados, cuja seqüência de bases é conhecida. Acoplam-se às seqüências de DNA das quais são complementares, ligando-se às mesmas.

10 TIPOS DE SONDAS SLP (single-locus probe) e MLP (multi-locusprobe). SLP: detecta um único segmento de DNA repetitivo em um único cromossomo. Seu uso resulta em um padrão que contém no máximo duas bandas: uma para cada segmento de DNA reconhecido em cada membro do par de cromossomos homólogos. Para a obtenção de padrões mais característicos de cada pessoa, são necessárias várias sondas. Devido à sua sensibilidade, são empregadas nas investigações criminais. MLP (multi-locus-probe): detectam vários segmentos de DNA repetitivo localizados em muitos cromossomos. O padrão obtido consiste em aproximadamente 20 a 30 bandas. Por isso, a probabilidade de duas pessoas tomadas ao acaso apresentarem todas as bandas exatamente com a mesma posição é extremamente baixa (1:10 trilhões).

11 RESULTADO DO TESTE 1- Análise forense: assassinato

12 RESULTADO DO TESTE 2- Análise forense: estupro

13 RESULTADO DO TESTE 3- Paternidade: A simulação acima demonstra que, biologicamente, há apenas um filho e uma filha do casal. No caso acima, a mãe não sabe quem é o pai biológico.

14 PCR Reação em Cadeia da Polimerase): permite que um fragmento específico da molécula de DNA seja amplificado milhares de vezes em apenas algumas horas.

15 PCR GEL DE POLIACRILAMIDA Eletroforese vertical

16 ANÁLISE CRIMINAL: O DNA FORENSE Estupro Mary Higgins foi violentada no Central Park em Nova York. Três suspeitos foram presos. O exame de DNA revelou o verdadeiro agressor. As evidências (sangue do agressor e um fio de cabelo) foram usadas no teste para achar o culpado. O indivíduo 3 foi condenado.

17 ANÁLISE CRIMINAL: O DNA FORENSE Estupro múltiplo M. C. foi vítima de assalto e assassinato em sua própria casa. O laudo da Polícia Civil confirmou também que M. C. foi estuprada. Peritos identificaram lesões vaginais e anais e recolheram amostras de secreção para analisar (E), bem como da vítima (V) e dos três suspeitos (S1, S2 e S3).

18 UM CRIME (QUASE) PERFEITO. Assassinato Uma esposa desaparecida. Um marido desesperado. Ingredientes de uma trama quase perfeita para eliminar uma pessoa. Phillipe Landmeier tinha planejado tudo. Só não contava que oito anos depois o seu crime viria à tona. Phillipe aguarda a execução desde 1995.

O ASSASSINATO DA MODELO INFANTIL JONBENNET RAMSEY: UM CRIME SEM SOLUÇÃO?

estrangulamento e espancamento no porão de sua casa, em Boulder (Colorado): principais suspeitos os pais, Patsy e

Mais de uma década após o assassinato e o caso ainda parece inacabado: O professor John Mark Karr (41 anos)

19 O ASSASSINATO DA MODELO INFANTIL JONBENNET RAMSEY: UM CRIME SEM SOLUÇÃO? No dia seguinte ao Natal de 1996, JonBenet Ramsey (6 anos), supostamente seqüestrada, foi encontrada morta por estrangulamento e espancamento no porão de sua casa, em Boulder (Colorado): principais suspeitos os pais, Patsy e John Ramsey: inocentados pelo exame de DNA. Mais de uma década após o assassinato e o caso ainda parece inacabado: O professor John Mark Karr (41 anos) confessou que drogou e estuprou JonBenet e acabou matandoa acidentalmente. A autópsia não encontrou evidências de ingestão de drogas. Foram encontradas feridas vaginais, mas não é certo que a menina tenha sido estuprada. Os pais John Mark Karr

modelo infantil: DNA do professor não corresponde ao do sangue encontrado na

20 O ASSASSINATO DA MODELO INFANTIL JONBENNET RAMSEY: UM CRIME AINDA SEM SOLUÇÃO? As promotoria do Colorado retirou as acusações contra Karr pelo assassinato da modelo infantil: DNA do professor não corresponde ao do sangue encontrado na roupa íntima da vítima. Suspeito de matar miss mirim foi inocentado por exame de DNA

estuprada) - é achado baleado na cabeça (bala de rifle calibre 30) em

21 O ASSASSINO DE RODMAN DAM, : casal de noivos Matthew Brock e Kelly Lynn Perry (também estuprada) - é achado baleado na cabeça (bala de rifle calibre 30) em Rodman Dam, área de recreação na Flórida. Principais suspeitos: os adolescentes Randall Scott Jones e Chris Reesh.

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1 Enzimas de restrição: tesouras moleculares que clivam o DNA em locais específicos denominados sítios de restrição, constituídos por quatro a oito pares de bases, distribuídos ao longo da molécula