Profa. Leila Larisa Medeiros Marques

Tamanho: px

Começar a partir da página:

Download "Profa. Leila Larisa Medeiros Marques"

Felipe de Sequeira Desconhecida
6 Há anos
Visualizações:

1 Profa. Leila Larisa Medeiros Marques

2 Processo de fazer cópias exatas de um organismo ou de qualquer elemento.» Clonagem celular;» Clonagem molecular.

3 Clonagem celular Vitória em 2011:

4 Clonagem celular

5 Clonagem celular

6 » Surgiu a Dolly, que teve seu nascimento anunciado em 1997, tornando-se um marco na Era Biotecnológica.

$» A ovelha Dolly só nasceu depois de 276 tentativas que fracassaram. A equipe retirou uma célula embrionária normal de uma ovelha e removeu seu núcleo.$

7 » A ovelha Dolly só nasceu depois de 276 tentativas que fracassaram. A equipe retirou uma célula embrionária normal de uma ovelha e removeu seu núcleo. Depois, retiraram o núcleo de uma célula da glândula mamária de outra ovelha e usaram corrente elétrica para fundi-la com a célula enucleada. Além disso, dentre as 277 células da mãe de Dolly que foram inseridas em um óvulo sem núcleo, 90% não alcançaram nem o estágio de blastocisto. De todos os outros embriões que conseguiram se dividir e ser implantados, apenas Dolly nasceu.

8 Clonagem celular

celular A ovelha Dolly foi sacrificada no Instituto Roslin, na Escócia (14/02/2003), após ser diagnosticada com uma doença pulmonar progressiva comum em animais mais velhos.

9 celular A ovelha Dolly foi sacrificada no Instituto Roslin, na Escócia (14/02/2003), após ser diagnosticada com uma doença pulmonar progressiva comum em animais mais velhos. A hipótese que tem sido discutida é que essa doença, comum em animais mais velhos, poderia estar associada ao encurtamento dos telômeros (seqüências de DNA que ficam na ponta dos cromossomos).

10 » O maior feito dos cientistas, foi fazer com que uma célula adulta se tornasse totipotente (células-tronco) de novo. As células-tronco (ou totipotentes) possuem a capacidade de se diferenciarem em diferentes tipos de célula;» Estava aberto o caminho para a clonagem terapêutica e a terapia por células-tronco.

13 » Utilização da técnica de clonagem para obtenção de células tronco a fim de restaurar a função de um órgãos ou tecido;» A clonagem "terapêutica" teria a vantagem de não oferecer riscos de rejeição se o doador fosse a própria pessoa. (ex.: reconstituir a medula em alguém que se tornou paraplégico após acidente);» Ajudaria casais inférteis que não podem ter filhos, mesmo após anos de tratamento de infertilidade;» Melhoramento animal, resgate de material genético, maximização do potencial genético de uma raça.

14 » Conceito: É a técnica que fabrica embriões a partir da transferência do núcleo da célula já diferenciada, de um adulto ou embrião, para um óvulo sem núcleo;» Não há o implante em um útero, logo não pode reproduzir seres humanos.

15 » Vantagem: Possibilita a obtenção de célulastronco embrionárias pluripotentes, potencialmente capazes de produzir qualquer tecido em laboratório, o que poderá permitir o tratamento de doenças cardíacas, doenças degenerativas (Alzheimer, Parkinson), câncer, além da reconstituição de medula óssea, de tecidos queimados ou tecidos destruídos etc, sem o risco de rejeição, caso o doador seja o próprio beneficiado com a técnica.

» A clonagem humana no Brasil é proibida atualmente (Lei nº 11.105, de 24 de março de 2005) com pena de reclusão de dois a cinco anos e multa para quem realizá-la.

16 » A clonagem humana no Brasil é proibida atualmente (Lei nº , de 24 de março de 2005) com pena de reclusão de dois a cinco anos e multa para quem realizá-la. Entretanto, segundo a mesma lei, é permitida, para fins de pesquisa e terapia, a utilização de célulastronco embrionárias obtidas de embriões humanos produzidos por fertilização in vitro e não utilizados no respectivo procedimento. Vale frisar que esses embriões devem estar inviáveis ou congelados há três anos ou mais.

17 Envolve a manipulação dos genes e criação de inúmeras combinações entre genes de organismos diferentes. - O melhoramento genético tradicional é imprevisível e demorado. - Através da engenharia genética consegue-se resultados mais previsíveis e em tempo bem menor.

18 resultado obtido a partir de pedaços de DNA de fontes diferentes ligados entre si. Para se conseguir DNA recombinante, é preciso cortar as moléculas de DNA que se quer recombinar e em seguida, "colar" um no outro. Para isso, os pesquisadores contam com ferramentas extremamente úteis chamadas ENZIMAS DE RESTRIÇÃO.

19 Ex. produção de um produto de interesse

20 » Expressar um gene significa produzir a proteína que ele codifica;» Para expressão de gene eucarioto em procarioto: cdna.

21 » Para começar precisamos aumentar a quantidade do gene de interesse: PCR (Polymerase Chain Reaction)» Precisamos saber: - Sua sequência de nucleotídeos; - Organismos que o contenham; - Em que tecidos é encontrado.

22 A PCR encontra sua principal aplicação em situações onde a quantidade de DNA disponível é reduzida. Uma das principais aplicações do PCR é na medicina forense, onde pequenas amostras de DNA retiradas da cena de um crime (pedaços de cabelo, gotas de sangue ou saliva, etc.) são amplificadas para serem analisadas. A PCR também é utilizada em procedimentos científicos de Biologia Molecular como amplificação para gerar mutagênese, detecção de mutações ou preparação de fragmentos de DNA para clonagem.

23 » Extrair o material genético da célula sem danificá-lo;» Adicionar uma mistura (também conhecida como prémix) que contém os dntps (desoxirribonucleotídeos trifosfatos), que são as bases nitrogenadas ligadas com um fosfato. Os primers também chamados de oligonucleotídeos (ou iniciadores) e a enzima taq polimerase em uma solução tampão;» Toda esta mistura é colocada na máquina de PCR, o termociclador, que faz ciclos de temperatura préestabelecidos com tempos exatos.

RT-PCR» Fase de desnaturação (94-96 o C): fase onde ocorre o desenrolamento da fita dupla de DNA através da quebra das pontes de H entre as bases, dando origem a duas fitas simples de DNA;» Fase de

24 RT-PCR» Fase de desnaturação (94-96 o C): fase onde ocorre o desenrolamento da fita dupla de DNA através da quebra das pontes de H entre as bases, dando origem a duas fitas simples de DNA;» Fase de hibridização ou anelamento (50-54 o C): nesta fase os primers se ligam, especificamente, às suas sequências homólogas correspondentes no DNA;» Fase de extensão do DNA (72-76 o C): fase onde ocorre a síntese de uma nova fita antiparalela sobre a fita anteriormente desnaturada, reação esta catalisada pela taq-polimerase.» Após 30 ciclos: 1 fragmento de DNA de cópias Rotina da PCR no lab

25 Estudo dirigido (duplas)- preencher e entregar.

26 » O resultado da PCR é analisado através de uma eletroforese em gel de agarose ou de poliacrilamida

27 Separação de moléculas pelo tamanho e carga elétrica quando submetidas a um campo elétrico; Gel de suporte para migração: agarose ou acrilamida; Existem também suporte de papel (papel de filtro e acetato de celulose). OBS.: a fricção com o suporte que as macromoléculas experimentam é pequena, o que faz com que o tamanho da molécula não influencie profundamente a sua velocidade de migração. Sendo assim, as moléculas são preferencialmente separadas com base em suas cargas não separa bem o DNA

30 Dinâmica: 2 grupos

BORÉM, A.; SANTOS, F. R. Entendendo a biotecnologia. Viçosa: UFV, 2008. Capítulo 6. Clonagem celular. SERAFINI, L. A.; BARROS, N. M.; AZEVEDO, J. L. Biotecnologia: avanços na agricultura e na agroindústria.

31 BORÉM, A.; SANTOS, F. R. Entendendo a biotecnologia. Viçosa: UFV, Capítulo 6. Clonagem celular. SERAFINI, L. A.; BARROS, N. M.; AZEVEDO, J. L. Biotecnologia: avanços na agricultura e na agroindústria. Caxias do Sul: EDUCS, Capítulo 1. LIMA, N.; MOTA, M. Biotecnologia- Fundamentos e aplicações. Lisboa: Lidel, Capítulo VII. BORZANI, W. et al. Biotecnologia Industrial. V. 1. Fundamentos. São Paulo: Blucher, Capítulo 4. Links: PCR: Rotina da PCR: eletroforese: Clone bovino: /noticia/ /bezerra-brasilia-e-o-novo-clone-da-embrapa

Documentos relacionados

Polimerase Chain Reaction PCR

Polimerase Chain Reaction PCR Reação em cadeia da polimerase Técnica in vitro utilizada para sintetizar muitas cópias de DNA Amplificar uma seqüência alvo específica Termociclador DNA molde dntp DNA polimerase