Agilent MassHunter Workstation Software

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1 Agilent MssHunter Worksttion Softwre Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS

2 Avisos Agilent Technologies, Inc Nenhum prte deste mnul pode ser reproduzid de qulquer form ou por qulquer meio (incluindo rmzenmento eletrônico e recuperção ou trdução pr um outro idiom) sem o consentimento prévio, por escrito, d Agilent Technologies, Inc. como regido pels leis de direitos utoris dos EUA e de outros píses. Código do mnul G Edição Revisão A, novemro de 2012 Impresso nos EUA Agilent Technologies, Inc Stevens Creek Blvd. Snt Clr, CA USA Microsoft, Windows 7 e Excel são mrcs mericns registrds d Microsoft Corportion nos EUA e/ou em outros píses. Revisão de Softwre Este gui é válido pr B e pr revisões posteriores do progrm Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv, té que sej sustituído. Grnti O mteril deste documento é fornecido como está e está sujeito lterções sem viso prévio em edições futurs. Além disso, té onde permitido pels leis vigentes, Agilent se isent de qulquer grnti, sej express ou implícit, relciond este mnul e às informções qui contids, incluindo s grntis implícits de comercilizção e dequção um propósito em prticulr, ms não se limitndo ests. A Agilent não deve ser responsilizd por erros ou por dnos incidentis ou consequentes relciondos o suprimento, uso ou desempenho deste documento ou ds informções qui contids. Cso Agilent e o usuário tenhm um outro cordo por escrito com termos de grnti que curm o mteril deste documento e sejm conflitntes com estes termos, devem prevlecer os termos de grnti do cordo em seprdo. Licençs de tecnologi O hrdwre e/ou o softwre descritos neste documento são fornecidos com um licenç e podem ser usdos ou copidos pens em conformidde com os termos de tl licenç. Legend sore direitos restritos Direitos restritos do governo dos EUA. Os direitos de softwre e de ddos técnicos concedidos o governo federl incluem pens queles direitos normlmente concedidos o usuários finis. A Agilent fornece ess licenç comercil costumeir do softwre e dos ddos técnicos conforme FAR (ddos técnicos) e (softwre de computdor) e, pr o Deprtmento de Defes, DFARS (ddos técnicos itens comerciis) e DFARS (direitos sore softwre comercil de computdor ou documentção de softwre de computdor). Avisos de segurnç CUIDADO CUIDADO indic perigo. Ele chm tenção pr um procedimento, prátic ou lgo semelhnte que, se não forem corretmente relizdos ou cumpridos, podem resultr em vris no produto ou perd de ddos importntes. Não prossig pós um viso de CUIDADO té que s condições indicds sejm completmente compreendids e tendids. AVISO AVISO indic perigo. Ele chm tenção pr um procedimento, prátic ou lgo semelhnte que, se não forem corretmente relizdos ou cumpridos, podem resultr em ferimentos pessois ou morte. Não prossig pós um AVISO té que s condições indicds sejm completmente compreendids e tendids. Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Qulittive Anlysis Fmiliriztion Guide for GC/MS

3 Neste gui Este gui contém s informções pr se prender usr o seu Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv com ddos do CG/MS. Antes de começr fzer os exercícios, por fvor, lei s instruções em Antes de começr com estes exercícios... n págin 5. Exercise 1 Exercise 2 Exercise 3 Aprend noções de nálise qulittiv Neste exercício, você explorrá lgums ds muits podeross funções do progrm de Análise Qulittiv. Ests trefs são importntes, não import que tipo de ddos você está usndo. Encontre e Identifique Nos dois primeiros conjuntos de trefs, você locliz e identific medicmentos com ix concentrção de sulf dentro de um mtriz complex e ger sus fórmuls pr os ddos TOF e Q-TOF. Tmém é possível fzer um extrção de recurso moleculr em um digestão de proteín com os ddos TOF e Q-TOF. Ests trefs tmém podem ser executds nos ddos Triple Qud. Utilize fluxos de trlho, exporte e imprim Nests trefs, você prende configurr executr qulquer método de nálise quntittiv. Você tmém prende editr um método pr utomtizr nálise e/ou identificção do composto. Depois, você execut s ções dentro do método utomtizndo qundo re um rquivo de ddos. Você tmém prende crir um método pr executr ções utomtizds com um list de trlho. Cd um dests trefs é executd usndo um fluxo de trlho diferente. Referênci Neste cpítulo, você prenderá noções ásics do progrm de Análise Qulittiv. Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Qulittive Anlysis Fmiliriztion Guide for GC/MS 3

4 O Que é Novo no B Você pode revisr compostos n Visulizção de Detlhes do Composto. Qutro jnels dicionis estão disponíveis n Visulizção de Detlhes do Composto. Qunto à Visulizção de Detlhes do Composto, você pode definir diferentes configurções de linh pr diferentes tipos de cromtógrfos e espectros. O lgoritmo Encontrr Compostos por Integrção está disponível. Você pode procurr em múltipls iliotecs por meio do lgoritmo de usc de iliotec e mss de unidde. No lgoritmo Gerr Fórmuls, você pode selecionr se quer notr os picos de espectro do frgmento com s fórmuls. A notção do frgmento selecion o espectro ser notdo com se no lgoritmo de mingem de composto. O lgoritmo Gerr Fórmuls pode ser executdo em compostos que você encontr por meio do lgoritmo Encontrr pel Deconvolução do Cromtógrfo. O lgoritmo Gerr Fórmul foi modificdo pr permitir que você insir um número máximo de tids pr cd crregdor de crg. No lgoritmo Gerr Fórmuls, você pode grupr tids com mesm fórmul, ms com crregdores de crg distintos. Os compostos podem ser cridos prtir de qulquer espectro de usuário. O lgoritmo de mingem de compostos pr estes compostos é Extrção de Espectro. Qundo você estiver slvndo resultdos com seu rquivo de ddos, você pode selecionr se desej slvr os resultdos de todos os compostos com o rquivo de ddos ou com um conjunto menor de resultdos pr cd composto. Todos os cromtogrms de usuário e espectros de usuário são sempre slvos. O formto do rquivo CEF foi modificdo, de modo que mis informção é incluíd. O m/z e informção de espécie de íon estão disponíveis no primeiro nível d tel de Resultdos de Identificção de Espectro. A tel de Identificção de Espectro foi modificd. Você pode dicionr um filtro pr um colun, e você pode excluir um fil. 4 Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Qulittive Anlysis Fmiliriztion Guide for GC/MS

5 Você pode gor clssificr um pico com Fórmul & Espécie de Íon. Alterr o espectro clssificdo como Melhor n jnel Resultdos de Identificção de Espectro, qundo você tiver um número grnde de entrds, é gor um processo significtivmente mis rápido. Você pode especificr que os cromtogrms de cmd sejm sorepostos no Reltório de Composto. O templte de reltório d Confirmção de Fórmul pdrão foi modificdo pr incluir colun colorid de Mrcções (tgt) e Tel de Frgmentos com colun colorid de Mrcções (tgt). Antes de começr com estes exercícios... Instle o softwre. Consulte o Gui de Instlção pr instruções. Copie s psts nomeds Ddos de seu disco de instlção em formto descomprimido pr qulquer locl em seu disco rígido. Est pst contém todos os rquivos de ddos necessários pr este exercício. Você pode precisr primeiro extrir os rquivos de ddos de seu formto.zip. NOTA Não reutilize os rquivos de ddos de exemplo que já estão em seu sistem, menos que você si que você os copiou dos originis no disco e que você é únic pesso utilizá-los. Se os rquivos de ddos de exemplo já estão no sistem não coincidem com os originis extos no disco, então os resultdos otidos durnte este exercício não coincidirão com queles fornecidos no gui. Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Qulittive Anlysis Fmiliriztion Guide for GC/MS 5

6 6 Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Qulittive Anlysis Fmiliriztion Guide for GC/MS

7 Índice Exercise 1 Aprend noções de nálise qulittiv 9 Ar o progrm Qulittive Anlysis 10 Tref 2. Configurr Interfce de Usuário pr ddos GC/MS 13 Tref 3. Amplir ou reduzir visulizção do cromtogrm 16 Tref 4. Fixr um cromtogrm 17 Tref 5. Modificr lyouts de jnel 18 Tref 6. Extrir cromtogrms 20 Tref 7. Integre intertivmente um cromtogrm GC/MS 22 Tref 8. Clculr vlores do sistem de dptção 27 Tref 9. Extrir espectros de um cromtogrm 30 Tref 10. Adicionr notções 40 Tref 11. Adicione um compsso de mss 44 Exercise 2 Encontre e Identifique 47 Encontre compostos pel deconvolução do cromtogrm 48 Identifique compostos utilizndo o lgoritmo Serch Lirry 52 Tref 14. Encontre compostos por MRM (MRM pens) 57 Tref 15. Encontre compostos por Integrção 61 Tref 16. Gere fórmuls e usque n iliotec por espectros de pico 64 Tref 17. Slvr resultdos 69 Exercise 3 Utilize fluxos de trlho, exporte e imprim 73 Defin e execute o método de nálise qulittiv usndo o fluxo de trlho gerl 74 Tref 19. Defin e execute um método utilizndo o fluxo de trlho GC/Q-TOF Compound Screening 79 Tref 20. Exporte um rquivo CEF 83 Tref 21. Imprim um reltório de nálise 85 Tref 22. Imprim um reltório de composto 88 Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS 7

8 Índice Referênci 91 Trlhe com Jnels 92 Trlhe com os ddos de resultdo em Dt Nvigtor 95 Relize operções do cromtogrm 96 Relize operções em um espectro MS ou MS/MS 97 Trlhe com ddos visuis cromtográficos 98 Trlhe com ddos visuis espectris 99 Fluxos de Trlho 100 Customize um exiição de reltório Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS

9 Agilent MssHunter Worksttion Softwre Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção 1 Aprend noções de nálise qulittiv Ar o progrm Qulittive Anlysis 10 Tref 2. Configurr Interfce de Usuário pr ddos GC/MS 13 Tref 3. Amplir ou reduzir visulizção do cromtogrm 16 Tref 4. Fixr um cromtogrm 17 Tref 5. Modificr lyouts de jnel 18 Tref 6. Extrir cromtogrms 20 Tref 7. Integre intertivmente um cromtogrm GC/MS 22 Tref 8. Clculr vlores do sistem de dptção 27 Tref 9. Extrir espectros de um cromtogrm 30 Tref 10. Adicionr notções 40 Tref 11. Adicione um compsso de mss 44 Neste exercício, você explorrá lgums ds muits potenciliddes do progrm Qulittive Anlysis pr trlhr com ddos GC/Q-TOF e GC/QQQ. Cd exercício é presentdo em um tel com três coluns: Pssos Use instruções geris pr proceder por cont própri, explorndo o progrm. Instruções Detlhds Utilize-s se você precisr de jud ou se preferir um processo de prendizdo psso--psso. Comentário Lei-os pr oter dics e informção dicionl sore cd psso no exercício. 9

10 1 Aprend noções de nálise qulittiv Ar o progrm Qulittive Anlysis Ar o progrm Qulittive Anlysis Nest tref, você re múltiplos rquivos de ddos utilizndo o método tul. Tref 1. Ar o progrm Qulittive Anlysis com múltiplos rquivos de ddos Etps Instruções Detlhds Comentários 1 Ar o progrm Qulittive Anlysis. Ar os rquivos de ddos Pest Scn.d, Pest - STD 200 MRM.d, Pest Strw-01 SPIKED 1 pp - 1 ul inj.d e MSD_mix_4stds_DG_spl200_0 3.d n pst \\MssHunter\Dt ou n pst pr qul você os copiou. Clique dus vezes sore o ícone Agilent MssHunter Qulittive Anlysis B O sistem exie cix de diálogo Open Dt Files. Vá pr pst \\MssHunter\ Dt\GC ou pr pst onde os rquivos-exemplo estão loclizds. O rquivo Pest Scn.d contém ddos MS e o Pest - STD 200 MRM.d e os rquivos Pest Strw-01 SPIKED 1 pp - 1 ul inj.d contêm tnto ddos MS qunto MS/MS (todos GC/QQQ). MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.d contém ddos GC/Q-TOF. Você pode oter jud pr mior prte ds jnels, cixs de diálogo e s pressionndo tecl F1 qundo o tecldo estiver tivo. Tenh certez de que o otão Use current method foi clicdo. Tenh certez de que cix de mrcção Lod result dt está limp. Se cix de mrcção Lod result dt não estiver disponível, então nenhum resultdo foi slvo no rquivo de ddos. Você prende slvr resultdos em Tref 17. Slvr resultdos n págin 69 pr instruções sore como slvr resultdos. Tenh certez de que cix de mrcção Run File Open ctions from selected method está limp. Figur 1 Ar rquivos de ddos qundo rir o softwre 10 Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS

11 Aprend noções de nálise qulittiv 1 Ar o progrm Qulittive Anlysis Tref 1. Ar o progrm Qulittive Anlysis com múltiplos rquivos de ddos (cont.) Etps Instruções Detlhds Comentários c d Pressione e segure tecl Shift qundo você clicr em Pest Scn.d, Pest - STD 200 MRM.d, Pest Strw-01 SPIKED 1 pp - 1 ul inj.d e MSD_mix_4stds_DB_spl200_03.d. Clique em Open. Todos os qutor rquivos de ddos são exiidos n jnel Dt Nvigtor, e de 1 3 cromtogrms são exiidos n jnel Chromtogrm Results. e Clique no ícone List Mode n rr de ferrments Chromtogrm Results. Se você pressionr tecl Ctrl, você pode escolher rquivos que não estão diretmente próxims uns os outros n list. O que você vê n jnel principl, neste momento, depende do método, lyout, exiição e configurções de plot que você utilizou ntes de rir estes rquivos. Qundo você clic sore o ícone List Moe, o plno de fundo do ícone mud pr lrnj. Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS 11

12 1 Aprend noções de nálise qulittiv Ar o progrm Qulittive Anlysis Tref 1. Ar o progrm Qulittive Anlysis com múltiplos rquivos de ddos (cont.) Etps Instruções Detlhds Comentários Ícone Mximum Numer of List Pnes Ícone Disply Options Clique no otão X pr fechr est jnel. Figur 2 A jnel principl d Qulittive Anlysis com o GC/Q-TOF Compound Screening Workflow é crregd. 12 Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS

13 Aprend noções de nálise qulittiv 1 Tref 2. Configurr Interfce de Usuário pr ddos GC/MS Tref 2. Configurr Interfce de Usuário pr ddos GC/MS Nest tref, você ltern ou pr o fluxo Gerl (pr clientes GC/QQQ) ou pr o fluxo de trlho GC/Q-TOF Compound Screening (pr clientes GC/Q-TOF). Estes dois fluxos de trlho são os únicos que ceitm nálise de ddos GC/MS. Em seguid, r cix de diálogo User Interfce Configurtion e mrque s cixs de mrcção proprids pr um sistem GC/QQQ ou um sistem GC/Q-TOF. Tref 2. Configurr Interfce de Usuário pr GC Etps Instruções Detlhds Comentários 1 Se necessário, r o progrm Qulittive Anlysis Clique dus vezes sore o ícone Agilent MssHunter Qulittive Anlysis. O sistem exie cix de diálogo Open Dt Files. Clique sore Cncel n cix de diálogo Open Dt Files. Você pode oter jud pr mior prte ds jnels, cixs de diálogo e s pressionndo tecl F1 qundo jnel estiver ert. 2 Alterne ou pr Generl Workflow, ou pr GC/Q-TOF Compound Screening Workflow. Se você tiver um instrumento GC/QQQ, clique sore o comndo Configurtion > Configure for Workflow > Generl. Se você tiver um instrumento GC/Q-TOF, clique sore o comndo Configurtion > Configure for Workflow > GC/Q-TOF Compound Screening. Clique no otão Lod workflow s defult method e no otão Lod workflow s defult lyout. c Clique em OK. d Clique no ícone List Mode n rr de ferrments Chromtogrm Results. Se o progrm Dt Acquisition pr GC/QQQ ou GC/Q-TOF está instldo no mesmo computdor, o softwre configur Interfce de Usuário utomticmente. A seção GC/Q-TOF Compound Screening pode já estr disponível n jnel Method Explorer. Por definição, os cromtogrms estão sorepostos. Pr estes exemplos, os cromtogrms são exiidos em List Mode. Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS 13

14 1 Aprend noções de nálise qulittiv Tref 2. Configurr Interfce de Usuário pr ddos GC/MS Tref 2. Configurr Interfce de Usuário pr GC Etps Instruções Detlhds Comentários 3 Se você tem um GC/QQQ, configure interfce do usuário pr exiir s funções GC/QQQ pens. c d e f g h Clique em Configurtion > User Interfce Configurtion. Em Seprtion types, mrque pens cix de mrcção GC. Se você tem um instrumento GC/QQQ, então, em tipo de ionizção, mrque cix de mrcção EI or other hrd ioniztion technique e limpe cix de mrcção CI, APCI, ESI, MADLDI or other soft ioniztion technique. So Mss ccurcy, limpe cix de mrcção Accurte mss (TOF, Q-TOF). Mrque s cixs de mrcção Unit mss (Q, QQQ). Em Optionl softwre fetures, limpe cix de mrcção Peptide Sequence Editor e cix de mrcção BioConfirm Softwre. So Non-MS detectors, limpe s cixs de mrcção UV nd ADC. Mrque cix de mrcção Show dvnced prmeters. Clique em OK. Você pode lterr quis comndos estão disponíveis n cix de diálogo User Interfce Configurtion. Se um função não estiver visível, então provvelmente el está escondid qundo um cix de mrcção User Interfce Configurtion. Figur 3 Configurndo interfce de usuário pr usá-l com ddos GC/QQQ. 14 Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS

15 Aprend noções de nálise qulittiv 1 Tref 2. Configurr Interfce de Usuário pr ddos GC/MS Tref 2. Configurr Interfce de Usuário pr GC Etps Instruções Detlhds Comentários 4 Se você tem um instrumento GC/Q-TOF, configure interfce do usuário pr exiir funções GC/Q-TOF pens. c d e f g h i Clique em Configurtion > User Interfce Configurtion. Em Seprtion types, mrque pens cix de mrcção GC. Em tipo de ionizção, mrque ms s cixs de mrcção. Em MS levels, mrque ms s cixs de mrcção. So Mss ccurcy, limpe cix de mrcção Accurte mss (TOF, Q-TOF). Limpe s cixs de mrcção Unit mss (Q, QQQ). Em Optionl softwre fetures, limpe cix de mrcção Peptide Sequence Editor e cix de mrcção BioConfirm Softwre. So Non-MS detectors, limpe s cixs de mrcção UV nd ADC. Mrque cix de mrcção Show dvnced prmeters. Clique em OK. Você pode lterr quis comndos estão disponíveis n cix de diálogo User Interfce Configurtion. Se um função não estiver visível, então provvelmente el está escondid qundo um cix de mrcção User Interfce Configurtion. Figur 4 Configurndo interfce de usuário pr GC/Q-TOF. Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS 15

16 1 Aprend noções de nálise qulittiv Tref 3. Amplir ou reduzir visulizção do cromtogrm Tref 3. Amplir ou reduzir visulizção do cromtogrm Nest tref, você se fmilirizrá com s funções de umentr ou diminuir zoom do progrm Qulittive Anlysis. 16 Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS

17 Aprend noções de nálise qulittiv 1 Tref 4. Fixr um cromtogrm Tref 4. Fixr um cromtogrm Tref 4. Fixr um cromtogrm Nest tref, você fixrá um cromtogrm. Qundo você fix um cromtogrm, o cromtogrm fixo permnece constntemente em exiição enqunto você nveg pelos outros cromtogrms pr exii-los. Etps Instruções Detlhds Comentários Fixr um cromtogrm Exiir todos os cromtogrms Tenh certez de que list de visulizção de cromtogrm está definid pr 1. N jnel Chromtogrm Results, selecione o segundo TIC. Fixe este TIC. Nvegue pelos cromtogrms. Limpr fixção c d e f Em Dt Nvigtor, mrque s cixs de mrcção pr os cromtogrms que você escondeu n tref nterior. Tenh certez de que o número máximo de pinéis está definido como 1 n jnel Chromtogrm Results. N jnel Chromtogrm Results, selecione o segundo TIC. Clique com o otão direito no cromtogrm, em seguid, clique em Set Anchor. Utilize rr de rolgem n jnel Chromtogrm Results pr nvegr pel list de cromtogrms. O segundo TIC permnece sempre visível, como o primeiro cromtogrm. Clique em Chromtogrms > Cler Anchor. Qundo você define um fixgem pr um cromtogrm, um ícone de fixgem prece n jnel do Dt Nvigtor, próximo o nome do cromtogrm fixo. Dois cromtogrms precem n jnel Chromtogrm Results pós você fixr um, mesmo que list de visulizção indique 1. Isto signific, gor, que você visuliz um cromtogrm dicionl o cromtogrm fixo. Você pode tmém clicr com o otão direito e clicr Cler Anchor no menu do tlho. Figur 5 TIC fixo n jnel Chromtogrm Results Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS 17

18 1 Aprend noções de nálise qulittiv Tref 5. Modificr lyouts de jnel Tref 5. Modificr lyouts de jnel Tref 5. Modificr lyouts de jnel Nest tref, você move s jnels n visulizção principl e cri vários lyouts de jnels. Etps Instruções Detlhds Comentários 1 Modifique o lyout de jnel: Modifique o tmnho d jnel. Slve o lyout d jnel. Desloqueie o lyout. Modifique jnel Chromtogrm Results pr que el flutue. Mov jnel Chromtogrm Results. Exi s ferrments pr o reposicionmento ds jnels. Pr modificr o tmnho de um jnel, rrste fronteir entre jnels. Pr slvr um lyout de jnel, clique em Configurtion > Window Lyouts > Sve Lyout. Pr desloquer um lyout de jnel, clique em Configurtion > Window Lyouts > Lock Lyout. Pr fzer um jnel flutur, clique com o otão direito sore jnel, em seguid, clique em Floting no menu de tlhos. Pr mover um jnel, clique n rr de título d jnel e rrste- pr o locl desejdo. Pr exiir s ferrments de reposicionmento, rrste jnel sore um ds outrs jnels. Qundo jnel estiver sorepondo um segund, o progrm exiirá váris ferrments de lyout, como exiids em Figur 6. Se o lyout estiver desloquedo, o sistem não exiirá um mrc de checgem o ldo do menu Lock Lyout. Você pode usr pens s ferrments de reposicionmento qundo o lyout estiver desloquedo. Você tmém pode fzer um jnel flutur clicndo dus vezes sore rr título d jnel. O softwre tem muitos lyouts diferentes cridos. Você tmém pode tentr crir lyouts diferentes. O softwre tem diferentes fluxos de trlho. Cd fluxo de trlho crreg um lyout diferente. Alterr pr um fluxo de trlho diferente tmém modific o lyout. Figur 6 Ferrments de reposicionmento de jnel. 18 Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS

19 Aprend noções de nálise qulittiv 1 Tref 5. Modificr lyouts de jnel Tref 5. Modificr lyouts de jnel (cont.) Etps Instruções Detlhds Comentários 2 Reposicionmento n jnel Chromtogrm Results. Mov jnel de modo que el permneç o topo, à esquerd, à direit e, em seguid, n prte inferior d jnel. Mov dus jnels conjuntmente de modo que um estej o topo d outr e disponível pens por meio de s n prte inferior. Recupere o lyout pdrão. Se você rrstr o cursor sore um dos ícones menores, jnel que você está rrstndo será posiciond cim, à direit, ixo ou à esquerd de tods s outrs jnels. Arrste o cursor sore o ícone mior. A jnel pode tmém ser posiciond cim, à direit, ixo ou à esquerd de um outr jnel rrstndo o cursor sore s ords de um ícone mior. Pr grupr dus jnels junts, rrste o cursor sore o centro do ícone mior. Você verá um versão somred ds dus jnels grupds. Pre de rrstr o mouse. AS dus jnels serão colocds conjuntmente em s. Clique em Configurtion > Window Lyouts > Restore Defult Lyout. O cursor deve estr sore um ds sets em um cix, pr que o reposicionmento conteç. Clicr sore o comndo Restore Defult Lyout restur o lyout que é utilizndo pelo fluxo de trlho Generl e pelo fluxo de trlho GC/Q-TOF Compound Screening. Se você está usndo um fluxo de trlho diferente, você precis crregr o lyout que é usdo pr este fluxo de trlho. Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS 19

20 1 Aprend noções de nálise qulittiv Tref 6. Extrir cromtogrms Tref 6. Extrir cromtogrms Nest tref, você extri e funde os cromtogrms do TIC originl. Tref 6. Extrir cromtogrms Etps Instruções Detlhds Comentários 1 Extri e fund os cromtogrms de íon extrídos (EICs) de dus msss no rquivo de ddos Pest Scn.d. Os vlores m/z são e Não fund os picos de msss individuis em um cromtogrm. N jnel Dt Nvigtor, limpe s cixs de mrcção dos rquivso de ddos exceto por Pest Scn.d. Ar cix de diálogo Extrct Chromtogrms, usndo opção ixo ou um ds opções à direit: Clique em Chromtogrms > Extrct Chromtogrms. c Em List of opened dt files, clique em Pest Scn.d. d N cix de list Type, selecione EIC. e No cmpo m/z vlue(s), digite 129.0, f Se necessário, limpe cix de checgem Merge multiple msses into one chromtogrm pr fundir os EICs. g Clique em OK. h Defin Mximum numer of list pnes pr 3 n rr de ferrments Chromtogrm Results. Você pode tmém extrir cromtogrms de um ds seguintes mneirs: Clique com o otão direito no cromtogrm e clique em Extrct Chromtogrms. Prtindo de Dt Nvigtor, selecione TIC Scn pr sulfs_posms.d, em seguid, clique com o otão direito sore TIC Scn e clique em Extrct Chromtogrms. Você pode utilizr o nível do MS ou All ou MS. Oserve que você tmém pode escolher fzer com que o cromtogrm extrído utomticmente sej integrdo pós extrção. Você tmém pode extrir um cromtogrm prtindo de um espectro de mss. Figur 7 A cix de diálogo Extrct Chromtogrms 20 Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS

21 Aprend noções de nálise qulittiv 1 Tref 6. Extrir cromtogrms Tref 6. Extrir cromtogrms (cont.) Etps Instruções Detlhds Comentários Figur 8 Cromtogrms de íon extrídos fundidos (EICs) comprdos o TIC originl Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS 21

22 1 Aprend noções de nálise qulittiv Tref 7. Integre intertivmente um cromtogrm GC/MS Tref 7. Integre intertivmente um cromtogrm GC/MS Nest tref, você prende modos diferentes de se integrr um cromtogrm, ltere os prâmetros de integrção pr modificr os resultdos e clculr relção Sinl-Ruído pr os picos integrdos pr ddos MS/MS. Tref 7. Integre intertivmente um cromtogrm GC/MS Etps Instruções Detlhds Comentários 1 Integre o rquivo de ddos TIC Scn chromtogrm for the Pest Scn.d, utilizndo qulquer um ds opções listds ixo. 2 Exi pens dois cromtogrms o mesmo tempo. Mrque o rquivo de ddos Pest Scn.D n jnel Dt Nvigtor. Selecione o cromtogrm TIC Scn e utilize um dos seguintes comndos: A prtir d rr de menu, clique em Chromtogrms > Integrte Chromtogrm. Clique com o otão direito em qulquer lugr n jnel de cromtogrm, e clique em Integrte Chromtogrm. N jnel Dt Nvigtor, selecione Pest Scn.D > User Chromtogrms > TIC Scn, em seguid, clique com o otão direito em TIS Scn e clique em Integrte Chromtogrm. Selecione 2 d cix Mximum numer of list pnes n rr de ferrments Chromtogrm Results. Oserve que o progrm integrou prticmente todos os picos no cromtogrm. Selecione o integrdor ser usdo pr os ddos de MS, ddos de MS/MS e ddos de GC n jnel Method Editor. O cromtogrm é um cromtogrm MS, de modo que os vlores que são definidos n seção Integrte (MS) do Method Editor são usdos qundo se integr o cromtogrm. Muitos picos pequenos são integrdos. Figur 9 TIC Scn Chromtogrm integrdo com muitos picos pequenos. 22 Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS

23 Aprend noções de nálise qulittiv 1 Tref 7. Integre intertivmente um cromtogrm GC/MS Tref 7. Integre intertivmente um cromtogrm GC/MS (cont.) Etps Instruções Detlhds Comentários 3 Modifique o limite pr integrr picos menores. Modifique o limite pr reter pens três picos miores. c d A prtir d jnel Method Explorer, clique Chromtogrm > Integrte (MS) pr exiir Integrte (MS). Selecione o integrdor Agile. Clique n Pek Filters. So Mximum numer of peks, mrque Limit (y height) to the lrgest, e digite 3. Oserve o triângulo zul que prece qundo você modific configurção do vlor slvo pr o método tul. Qundo você slvr o método, os triângulos desprecem. Figur 10 A Pek Filters com Limit (y height) to the lrgest mrcdo. 4 Reintegrr o cromtogrm e Clique sore o otão n rr de ferrments do Method Editor pr integrá-lo utilizndo nov configurção. Oserve que pens os três principis picos estão gor integrdos. O pico em tem um ltur superior o pico em minutos, de modo que o pico seleciondo é o terceiro. Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS 23

24 1 Aprend noções de nálise qulittiv Tref 7. Integre intertivmente um cromtogrm GC/MS Tref 7. Integre intertivmente um cromtogrm GC/MS (cont.) Etps Instruções Detlhds Comentários Figur 11 O cromtogrm integrdo TIC Scn qundo se limit o número de picos. 5 Integrr o cromtogrm TIC MRM pr o rquivo de ddos Pest - STD 200 MRM.D. c d N jnel Dt Nvigtor, selecione TIC MRM pr o rquivo de ddos Pest - STD 200 MRM.d. Utilize um dos seguintes comndos pr integrr os cromtogrms. A prtir d rr de menu, clique em Chromtogrms > Integrte Chromtogrm. Clique com o otão direito em qulquer lugr n jnel de cromtogrm, e clique em Integrte Chromtogrm. N jnel Dt Nvigtor, clique com o otão direito no cromtogrm destcdo e clique em Integrte Chromtogrm. Aumente visulizção de 5.8 pr 8.5 minutos. Defin o Mximum numer of list pnes pr 2. Pressione tecl Ctrl pr destcr mis do que um cromtogrm n jnel Dt Nvigtor. Oserve que o progrm integrou prticmente todos os picos no cromtogrm. Estes cromtogrms são cromtogrms MS/MS, portnto, os vlores que são definidos n seção Integrte (MS/MS) d jnel Method Editor são usds qundo se utiliz integrção do cromtogrm. Você pode selecionr um integrdor ser utilizdo pr se integrr os cromtogrms MS e um integrdor diferente, pr ser usdo n integrção dos cromtogrms MS/MS. 24 Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS

25 Aprend noções de nálise qulittiv 1 Tref 7. Integre intertivmente um cromtogrm GC/MS Tref 7. Integre intertivmente um cromtogrm GC/MS (cont.) Etps Instruções Detlhds Comentários Figur 12 Cromtogrms MRM integrdos 6 Selecione o integrdor MS/MS (GC). Modifique o filtro pr ceitr pens picos com um ltur solut mior ou igul 20,000. c d e f N jnel do Method Explorer, selecione Chromtogrm > Integrte (MS/MS). Selecione MS/MS (GC) como Integrtor. Clique n Pek Filters. So Filter on, clique em Pek height. So Height filters, mrque cix de seleção Asolute height. Digite como Asolute height. Oserve o triângulo zul que prece qundo você modific configurção do vlor slvo pr o método tul. Qundo você slvr o método, os triângulos desprecem. Figur 13 A Pek Filters com Asolute height mrcdo 7 Reintegrr o cromtogrm g Clique no otão n rr de ferrments Method Editor. Oserve que pens os picos miores estão gor integrdos. Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS 25

26 1 Aprend noções de nálise qulittiv Tref 7. Integre intertivmente um cromtogrm GC/MS Tref 7. Integre intertivmente um cromtogrm GC/MS (cont.) Etps Instruções Detlhds Comentários O menor pico 5.8 minutos não está incluído mis nos resultdos de integrção porque ltur solut pr este pico é inferior contgens. Figur 14 Cromtogrms TIC e EIC MS/MS integrdos com um limite mis lto. 8 Resture s configurções que estão slvs no método tul e feche o Method Editor. Selecione seção Chromtogrm > Integrte (MS/MS) no Method Explorer. Clique sore o ícone no Method Editor. c Selecione seção Chromtogrm > Integrte (MS) no Method Explorer. d Clique sore o ícone no Method Editor. e Feche jnel Method Editor. Pr cncelr sus modificções e resturr os vlores do método crregdo, clique no ícone Restore to lst sved vlues from file n rr de ferrments Method Editor. 9 Exclu todos os cromtogrms, exceto o originl. Exclu os resultdos d integrção do cromtogrm originl. c d So User Chromtogrms, n jnel Dt Nvigtor, selecione todos os cromtogrms, exceto o originl. Clique com o otão direito sore os cromtogrms, e clique em Delete. Selecione todos os cromtogrms TIC. Clique em Chromtogrms >Cler Results. Qundo você utilizr o comndo Cler Results, os cromtogrms não serão excluídos; os resultdos que são conectdos os cromtogrms serão removidos. Neste cso, os vlores de integrção serão limpos. 26 Agilent MssHunter Worksttion Softwre - Análise Qulittiv Gui de Fmilirizção pr GC/MS

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