Português - Español. Este documento destina-se aos usuários dos Ensaios de Proficiência para Laboratórios de Hemoterapia.

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1 Português - Español Este documento destina-se aos usuários dos Ensaios de Proficiência para Laboratórios de Hemoterapia. Este documento se destina a los usuarios de los Ensayos de Aptitud para Laboratorios de Hemoterapia. Revisão / Versión

2 Este documento complementa o Manual do Participante. A seguir, são descritos os itens de ensaio, as instruções de uso, as regras para reportar os resultados e os Critérios Específicos de Avaliação. Alguns desses itens podem ser suprimidos quando não houver necessidade de instrução de uso ou na ausência de regras e/ou critérios adicionais. Este complementa el Manual del Participante. A continuación, son descritos los ítems de ensayo, las instrucciones de uso, las reglas para reportar los resultados y los Criterios Específicos de Evaluación. Algunos de esos ítems pueden ser suprimidos en un área, cuando no hubiera necesidades de instrucción de uso o en la ausencia de reglas y/o criterios adicionales. Segurança e Manipulação dos Itens de Ensaio Os materiais de controle de qualidade são comumente de origem humana. Por esta razão, devem ser tratados como potencialmente infectantes e patogênicos, capazes de transmitir doenças, e manuseados de acordo com as Boas Práticas de Biossegurança Padrão OSHA sobre Patógenos Transmitidos por Via Sanguínea. As medidas de segurança adotadas usualmente na manipulação de amostras de paciente frente a agentes contagiosos, como Hepatite e HIV, devem ser estendidas aos itens de ensaio para proteção do usuário e do ambiente. Algumas recomendações: Áreas de risco devem ser identificadas de maneira clara, atendendo aos padrões de segurança definidos na legislação. Os funcionários precisam ser treinados, e, nessas áreas, devem existir instruções de segurança por escrito e procedimentos de emergência. A utilização de equipamentos de proteção individual (EPI) deve ser considerada essencial, recomendando-se o uso de luvas descartáveis, vestuário de proteção aventais, protetores de face adequados para olhos/face, colocados antes da abertura da amostra/item e mantidos durante o manuseio. As mãos devem ser lavadas antes da colocação das luvas, depois de sua retirada e antes de sair da área técnica. Os itens devem ser abertos em cabine de segurança biológica (EPC), e a pipetagem não deve ser feita com a boca. Ter um lava-olhos próximo ao local de manuseio da amostra/item. Não se deve comer, beber, fumar, usar cosméticos, lentes de contato nem tomar remédios nas áreas técnicas do laboratório. Amostras/itens, reagentes ou rejeitos de equipamentos usados para o ensaio devem ser descontaminados para posterior descarte. No caso de derramamento sobre a bancada, usar hipoclorito de sódio a 1% para limpá-la. Em caso de contato com a pele e olhos por meio de respingo ou corte, lavar imediatamente e abundantemente com água e sabão. Em seguida consulte um especialista. Seguridad y Manipulación de los Ítems de Ensayo Los materiales de control de calidad son comúnmente de origen humano. Por esta razón, deben ser tratados como potencialmente infectantes y patogénicos, capaces de transmitir enfermedades y manipulados de acuerdo con las Buenas Prácticas de Bioseguridad - Patrón OSHA sobre Patógenos Transmitidos por Vía Sanguínea. Las medidas de seguridad adoptadas usualmente en la manipulación de muestras de paciente frente a agentes contagiosos, como Hepatitis y HIV, deben ser extendidas a los ítems de ensayo para la protección del usuario y del ambiente. Algunas recomendaciones: Las áreas de riesgo deben ser identificadas de manera clara, atendiendo a los patrones de seguridad definidos en la legislación. Los funcionarios necesitan estar entrenados, y, en esas áreas, deben existir instrucciones escritas de seguridad y procedimientos de emergencia. La utilización de equipamientos de protección individual (EPI) debe ser considerada esencial, recomendándose el uso de guantes desechables, vestuario de protección - delantales, protectores faciales adecuados para la cara y los ojos, colocados antes de la apertura de la muestra/ítem y mantenidos durante la manipulación. Las manos deben ser lavadas antes de colocarse los guantes, después de retirarlos y antes de salir del área técnica. Los ítems deben ser abiertos en cabina de seguridad biológica (EPC), y el pipeteo no debe ser realizado con la boca. Se debe tener un dispositivo para el lavado de ojos próximo al local de manipulación de la muestra/ítem. No se debe comer, beber, fumar, usar cosméticos, lentes de contacto, ni tomar medicamentos en las áreas técnicas del laboratorio. Las muestras/ítems, reactivos o rechazo de equipamientos usados para ensayos deben ser descontaminados para su posterior desecho. En el caso de ocurrir derramamiento sobre la meseta, usar hipoclorito de sodio al 1% para limpiarla. En caso de contacto con la piel y los ojos por medio de goteo o herida, lavar inmediatamente con agua y jabón abundante. Enseguida consulte un especialista. Bibliografia US Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration, 29 CFR Part , Occupational Exporue to Bloodborne Pathogens; Final Rule. Federal Register 1991:56 (235): US Department of Health and Human Services. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. HHS Publication No. (CDC) Washington, DC: US Government Printing OFFICE, May World Health Organization.Laboratory Biosafety Manual.Geneva:World Health Organization, National Committee for Clinical Laboratory Standards. Protection odf Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infectious; Approved Guideline Second Edition. NCCLS Document M29-A Wayne, PA:NCCLS, /8

3 Hemocomponentes Item de Ensaio Balança (BSPE): bolsa de coleta de sangue com solução estéril. Procedimento de Uso: realizar a verificação do peso em gramas conforme rotina na balança utilizada para o controle dos hemocomponentes. Reporte de Resultado: reportar o peso lido na balança, sem descontar o peso da bolsa vazia. Item de Ensaio Fator VIII (FAT): crioprecipitado liofilizado. Item de Ensaio Fibrinogênio e TTPA (FIT): plasma humano liofilizado. Procedimento de Uso (FAT): (1) deixar à temperatura ambiente (15º a 30ºC) por 20 minutos; (2) reconstituir adicionando água reagente (CLSI/NCCLS) em temperatura ambiente, conforme o volume indicado no rótulo utilizando pipeta calibrada; (3) homogeneizar suavemente (4) deixar em banho-maria a 37ºC até 15 minutos (5) realizar uma nova homogeneização suavemente até dissolução completa; (6) realizar imediatamente o ensaio. Procedimento de Uso (FIT): (1) deixar à temperatura ambiente (15º a 30ºC) por 20 minutos; (2) reconstituir adicionando água reagente (CLSI/NCCLS) conforme o volume indicado no rótulo, utilizando pipeta calibrada; (3) deixar em repouso por 20 minutos e, em seguida, homogeneizar suavemente até dissolução completa; (4) realizar imediatamente os ensaios. Para reconstituição de liofilizados, retirar a tampa de borracha com muito cuidado, para que o material a ela aderido não seja perdido. Ao retirar a tampa, deve-se colocá-la virada para cima na bancada. Após acrescentar a água para dissolução no frasco, recolocar a tampa com o mesmo cuidado, para que nenhuma porção do produto liofilizado seja perdida. Item de Ensaio Grau de Hemólise (CHH): plasma. Item de Ensaio Hemácia e Plaqueta Residual (HPLR): plasma fresco congelado. Item de Ensaio Hemoglobina e Hematócrito (HBHT): concentrado de hemácias, concentrado de hemácias lavadas e concentrado de hemácias desleucocitados. Consultar o documento Dados da Rodada e/ou formulário, para identificar o item de ensaio distribuído para cada lote. Item de Ensaio Leucócito (LEU): concentrado de plaquetas. Item de Ensaio Leucócito Residual (LEUR): concentrado de hemácias desleucocitado, concentrado de plaquetas desleucocitado e plasma fresco congelado. Consultar o documento Dados da Rodada e/ou formulário, para identificar o item de ensaio distribuído para cada lote. Item de Ensaio Plaqueta (PLT): concentrado de plaquetas e concentrado de plaquetas desleucocitado. Consultar o documento Dados da Rodada e/ou formulário, para identificar o item de ensaio distribuído para cada lote. Procedimento de Uso CHH, HPLR, HBHT, LEU, LEUR e PLT: (1) o material deve ser analisado imediatamente após o recebimento; (2) homogeneizar em homogeneizador orbital por 2 minutos ou, rolar entre as palmas das mãos 12 vezes ou por 20 segundos, invertendo o frasco e repetindo o rolamento até que todo o conteúdo esteja bem homogeneizado; (3) retirar a tampa e proceder conforme rotina. Reporte de Resultado HPLR e LEUR: não é recomendado o uso de contadores hematológicos automatizados. Será aceito apenas as contagens realizadas por Câmara de Neubauer, Câmara de Nageotte e Citômetros de Fluxo. Hemocomponentes Item de Ensayo - Balanza (BSPE): bolsa de colecta de sangre con solución estéril. Procedimiento de Uso: realizar una verificación del peso en gramos de acuerdo a la rutina en la balanza utilizada para el control de los hemocomponentes. Reporte de Resultado: reportar el peso leido en la balanza, sin descontar el peso de la bolsa vacía. Item de Ensayo Factor VIII (FAT): crioprecipitado liofilizado. Item de Ensayo Fibrinógeno y TTPA (FIT): plasma humano liofilizado. Procedimiento de Uso (FAT): (1) dejar a la temperatura ambiente (15º a 30ºC) por 20 minutos; (2) reconstituir adicionando agua con calidad reactivo (CLSI/NCCLS) en temperatura ambiente, de acuerdo al volumen indicado en el rótulo utilizando pipetas calibradas; (3) homogeneizar suavemente (4) dejar en baño de maría a 37ºC hasta 15 minutos (5) realizar una nueva homogeneización suavemente hasta disolución completa; (6) realizar inmediatamente lo ensayo. Procedimiento de Uso (FIT): (1) dejar a la temperatura ambiente (15º a 30ºC) por 20 minutos; (2) reconstituir adicionando agua con calidad reactivo (CLSI/NCCLS) de acuerdo al volumen indicado en el rótulo, utilizando pipetas calibradas; (3) dejar en reposo por 20 minutos y, seguidamente, homogeneizar suavemente hasta la disolución completa; (4) realizar inmediatamente los ensayos. En los casos de reconstitución de liofilizados, retirar la tapa de goma con mucho cuidado, para que el material adherido a ella no se pierda. Al retirar la tapa, debe colocarse virada hacia arriba en la meseta. Después de añadir la agua para disolución en el frasco, recolocar la tapa con el mismo cuidado, para que no se pierda ninguna porción del liofilizado. Item de Ensayo - Grado de Hemólisis (CHH): plasma. Item de Ensayo Hematíes y Plaqueta Residual (HPLR): plasma fresco congelado. Item de Ensayo Hemoglobina y Hematocrito (HBHT): concentrado de hematíes, concentrado de hematíes lavados y concentrado de hematíes sin leucocitos. Consultar el documento Datos del Envío y/o formulario, para identificar el ítem de ensayo distribuido para cada lote. Item de Ensayo - Leucocito (LEU): concentrado de plaquetas. Item de Ensayo - Leucocito Residual (LEUR): concentrado de hematíes sin leucocitos, concentrado de plaquetas sin leucócitos y plasma fresco congelado. Consultar el documento Datos del Envío y/o formulario, para identificar el ítem de ensayo distribuido para cada lote. Item de Ensayo Plaqueta (PTL): concentrado de plaquetas y concentrado de plaquetas sin leucócitos. Consultar el documento Datos del Envío y/o formulario, para identificar el ítem de ensayo distribuido para cada lote. Procedimiento de Uso CHH, HPLR, HBHT, LEU, LEUR y PLT: (1) realizar el análisis inmediatamente después de recibir las muestras; (2) homogeneizar en homogeneizador orbital por 2 minutos o, rodar entre las palmas de las manos 12 veces o por 20 segundos, invirtiendo el frasco y repitiendo el rodamiento hasta que todo el contenido este bien homogeneizado; (3) retire la tapa y proceda de acuerdo a la rutina. Reporte de Resultados HPLR y LEUR: no es recomendado el uso de contadores hematológicos automatizados. Será aceptado exclusivamente el conteo realizado por Cámara de Neubauer, Cámara de Nageotte y Citómetros de Flujo. 2/8

4 Hemocomponentes (continuação) Item de Ensaio Análise Microbiológica (BSBA): concentrado sintético de hemácias ou plaquetas Procedimento de Uso: atenção para os procedimentos de biossegurança. (1) homogeneizar em homogeneizador orbital por 2 minutos ou, rolar entre as palmas das mãos 12 vezes ou por 20 segundos, invertendo o frasco e repetindo o rolamento até que todo o conteúdo esteja bem homogeneizado; (2) promover a desinfecção na borda do tubo com álcool a 70%; (3) realizar o ensaio conforme rotina para hemocultura. Reporte de Resultado: deve-se reportar "positivo/negativo" para análise microbiológica (bactérias e/ou fungos). No caso de resultado "positivo", realizar a identificação e o Gram. Apenas para os casos de presença de mais de um microrganismo no mesmo material, deve-se reportar resultados nos campos "Identificação 2" e "Gram 2". Caso contrário, mantê-los em branco. Participantes que deixam de responder os ensaios Identificação e Gram para os itens com ausência de crescimento bacteriano recebem NR* (não conta para o ano cumulativo). Item de Ensaio phmetro (ph): solução tampão. Procedimento de Uso: verificar o resultado do ph das soluções conforme rotina a 25ºC. Item de Ensaio Proteína Residual (PTR): solução biológica líquida com adição de constituintes químicos e biológicos de origem humana. Procedimento de Uso: (1) retirar o material da geladeira e deixar a temperatura ambiente (15º a 30ºC) para climatizar; (2) realizar o ensaio de forma rotineira, da mesma maneira que os soros dos pacientes e conforme procedimentos utilizados no laboratório. Hemoglobina S Item de Ensaio: Sangue total liofilizado. Procedimento de uso: (1) deixar à temperatura ambiente (15ºC-30ºC) por 20 minutos; (2) para itens liofilizados, reconstituir adicionando água reagente (CLSI/NCCLS), conforme o volume indicado no rótulo, utilizando pipeta calibrada; (3) deixar em repouso por 20 minutos e, em seguida, homogeneizar suavemente até dissolução completa; (4) realizar imediatamente os ensaios. Nos casos de reconstituição de liofilizados, retirar a tampa de borracha com muito cuidado, para que o material a ela aderido não seja perdido. Ao retirar a tampa, deve-se colocá-la virada para cima na bancada. Após acrescentar a água para dissolução no frasco, recolocar a tampa com o mesmo cuidado, para que nenhuma porção do produto liofilizado seja perdida. Hemocomponentes (continuación) Item de Ensayo Análisis Microbiológico (BSBA): concentrado sintético de hematíes o plaquetas. Procedimiento de Uso: atención para los procedimientos de bioseguridad. (1) homogeneizar en homogeneizador orbital por 2 minutos o, rodar entre las palmas de las manos 12 veces o por 20 segundos, invirtiendo el frasco y repitiendo el rodamiento hasta que todo el contenido este bien homogeneizado; (2) realizar la desinfección con alcohol al 70% en la tapa del tubo; (3) realizar el ensayo de acuerdo a la rutina para hemocultivo. Reporte de Resultado: se debe reportar "positivo/negativo" para análisis microbiológicos (bacterias y/u hongos). En el caso de resultado "positivo", realizar la identificación y el Gram. Exclusivamente para los casos de presencia de dos microorganismos en el mismo material, se debe reportar resultados en los campos " Identificación 2" y "Gram 2". Caso contrario, debe dejarse en blanco. Participantes que dejan de responder los ensayos identificación e Gram para los items con ausencia de crecimiento bacteriano recebem NR* (no cuenta para el año acumulado). Item de Ensayo phmetro (ph): solución tampón. Procedimiento de Uso: verificar el resultado del ph de las soluciones de acuerdo a la rutina a 25ºC. Item de Ensayo Proteína Residual (PTR): solución biológica líquida con adición de constituyentes químicos y biológicos de origen humano. Procedimiento de Uso: (1) retirar el ítem de refrigeración y dejar a la temperatura ambiente (15º a 30ºC) para climatizar; (2) realizar el ensayo de acuerdo a la rutina, de la misma manera que los sueros de los pacientes y conforme procedimientos utilizados en el laboratorio. Hemoglobina S Item de Ensaio: Sangre total liofilizado. Procedimiento de uso: (1) dejar a temperatura ambiente (15ºC-30ºC) por 20 minutos; (2) reconstituir adicionando agua con calidad reactivo (CLSI/NCCLS), de acuerdo al volumen indicado en el rótulo, utilizando pipeta calibrada. (3) dejar en reposo por 20 minutos y, seguidamente, homogeneizar suavemente hasta la disolución completa; (5) realizar los ensayos. En los casos de reconstitución de liofilizados, retirar la tapa de goma con mucho cuidado, para que el material adherido a ella no se pierda. Al retirar la tapa, debe colocarse virada hacia arriba en la meseta. Después de añadir el agua para disolución en el frasco, recolocar la tapa con el mismo cuidado, para que no se pierda ninguna porción del liofilizado. 3/8

5 Imunohematologia Item de Ensaio: soro e suspensão de hemácias (conservadas em preservativo celular) que são fornecidos em conjunto ou separadamente de acordo com o programa específico. Procedimento de uso - hemácias: A suspensão de hemácias é fornecida pronta para o uso, em proporção ideal para ser trabalhada em tubo e em gel centrifugação. (1) homogeneizar em homogeneizador orbital por 2 minutos ou, rolar entre as palmas das mãos 12 vezes ou por 20 segundos, invertendo o frasco e repetindo o rolamento até que todo o conteúdo esteja bem homogeneizado; (2) retirar a tampa e proceder conforme rotina. Procedimento de uso - soro: (1) homogeneizar o material até ter certeza de que todo o conteúdo do tubo foi bem homogeneizado; (2) retirar a tampa e proceder conforme rotina. Reporte de Resultado: Eluato - devem ser reportados os resultados da conclusão do ensaio Coombs Direto (caráter orientativo). Após este, reportar o resultado final da prova de Eluato (positivo, negativo ou inconclusivo. Em caso de Eluato positivo, o laboratório deverá reportar a identificação do anticorpo (IAI) presente. NOTA: Para os ensaios de Eluato e Identificação IAI, o participante é avaliado apenas quando o item é reativo (segundo Resultado Aceito ). Quando o item é não-reativo, só é avaliado o participante que responder. Fenotipagem - devem ser reportados os anticorpos presentes e ausentes referentes aos sistemas Rh e Kell. Possíveis Genótipos do sistema Rh relacionados com os resultados da fenotipagem também devem ser reportados. Geral e TAD - devem ser reportadas todas as leituras parciais (análises intermediárias) até a obtenção do resultado final (conclusão). IAI - devem ser reportados os anticorpos presentes referentes aos sistemas Rh, Kell, Duffy, Kidd, Lewis, P, MNS, Luth ou Di. A opção Ausência de Anticorpo é disponibilizada para casos em que não for identificado anticorpo. Prova Cruzada - devem ser reportados os resultados parciais (análises intermediárias) e conclusão dos ensaios do sistema ABO e Rh da hemácia enviada, assim como o resultado da Prova Cruzada para cada um dos soros correspondentes. Opções de resposta são disponibilizadas para casos em que a prova cruzada não for realizada. Critérios Específicos de Avaliação: são considerados os resultados de aprovação do material e a estatística de consenso. O participante é avaliado em relação à conclusão de cada ensaio. As leituras parciais não contam para avaliação, mas são utilizados para definir a avaliação e orientar os participantes quanto à realização dos ensaios em suas diversas etapas. Fenotipagem - O participante é avaliado em relação à presença ou ausência dos anticorpos. Os possíveis genótipos do sistema Rh são oferecidos com o propósito orientativo. IAI: O participante é avaliado em função do resultado aceito. Qualquer outro anticorpo identificado pelos participantes não será avaliado. Prova Cruzada - O participante é avaliado em relação ao resultado da Prova Cruzada. Os ensaios do sistemas ABO e Rh são utilizados para definir a avaliação e orientar os participantes quanto à realização dos ensaios em suas diversas etapas. A solicitação dos isogrupos mais indicados para a transfusão do sangue do doador (hemácia) é oferecida com o propósito orientativo. Titulação Anti-D: O título do Rh deve ser reportado apenas à temperatura de 37ºC (corpórea) por ser um anticorpo quente e clinicamente mais significativo esta forma de avaliação do título, conforme descrito na Portaria 1353 de Junho de 2011 (Ministério da saúde). Orientações complementares: consulte o documento "Orientações sobre Imunohematologia" disponível no link Educação do Sistema Online. Inmunohematología Ítem de Ensayo: suero y suspensión de hematíes (conservados en preservativo celular) que son enviadas en conjunto o por separado de acuerdo con el programa específico. Procedimiento de uso hematies: La suspensión de hematíes es suministrado con rapidez para su uso, en la proporción ideal para ser trabajada en tubo o en gel de centrifugación. (1) Homogeneizar en homogeneizador orbital por 2 minutos o, rodar entre las palmas de las manos 12 veces o por 20 segundos, invirtiendo el frasco y repitiendo el rodamiento hasta que todo el contenido esté bien homogeneizado; (2) retirar la tapa y proceder según la rutina. Procedimiento de uso - suero: (1) homogeneizar el material hasta tener la certeza de que todo el contenido del tubo fue bien homogeneizado; (2) retirar la tapa y proceder de acuerdo ala rutina. Reporte de Resultado: Eluvato deben ser reportados los resultados de la conclusión del ensayo de Coombs Directo (carácter orientativo). Después de este, reportar el resultado final de la prueba de Eluvato (positivo, negativo o sin conclusión). En caso de Eluvato positivo, el laboratorio deberá reportar la identificación de anticuerpo (IAI) presente. NOTA: Para los ensayos del Eluvato y Identificación IAI, el participante es evaluado apenas cuando la muestra es reactiva (según Resultado Aceptado ). Cuando una muestra es no reactiva, sólo es evaluado el participante que responde Fenotipaje deben ser reportados los anticuerpos presentes y ausentes relacionados a los sistemas Rh y Kell. Los Genotipos posibles del sistema Rh relacionados con los resultados del fenotipaje también deben ser reportados. General y TAD deben ser reportadas todas las lecturas parciales (análisis intermediarios) hasta la obtención del resultado final (conclusión). IAI deben ser reportados los anticuerpos presentes relacionados a los sistemas Rh, Kell, Duffy, Kidd, Lewis, P, MNS, Luth o Di. La opción Ausencia de anticuerpo está disponible para los casos en que no sea identificado el anticuerpo. Prueba Cruzada deben ser reportados los resultados parciales (análisis intermediario) y conclusión de los ensayos del sistema ABO y Rh de los hematíes enviados, así como el resultado de la Prueba Cruzada para cada uno de los sueros correspondientes. Las opciones de respuesta están disponibles para los casos en que la prueba cruzada no sea realizada. Criterios Específicos de Evaluación: son considerados los resultados de aprobación del material y la estadística de consenso. El participante es evaluado en relación a la conclusión de cada ensayo. Las lecturas parciales no cuentan para la evaluación, pero son utilizados para definir la evaluación y orientar los participantes en cuanto a la realización de los ensayos en sus diversas etapas. Fenotipaje El participante es evaluado en relación a la presencia o ausencia de los anticuerpos. Los posibles genotipos del sistema Rh son ofrecidos con el propósito orientativo. IAI: El participante es evaluado en función al resultado aceptado. Cualquier otro anticuerpo identificado por los participantes no será válido Prueba Cruzada El participante es evaluado en relación al resultado de la Prueba Cruzada. Los ensayos de los sistemas ABO y Rh son utilizados para definir la evaluación y orientar los participantes así como la realización de los ensayos en sus diversas etapas. La solicitud de los isogrupos más indicados para la transfusión de sangre del donante (hematíes) es ofrecida con el propósito orientativo. Título Anti-D: El título del Rh debe ser reportado solo a temperatura corporal de 37ºC por ser un anticuerpo caliente y clinicamente es más significativo esta forma de evaluación del título, según lo descrito en Potaria 1353 de junio de 2011 (Ministerio de Salud). Orientaciones complementares: consulte el documento "Orientações sobre Imunohematologia, disponible en el link Educación del Sistema Online. 4/8

6 CMV Item de Ensaio: soro humano liofilizado. Procedimento de Uso: (1) deixar à temperatura ambiente (15º-30ºC) por 20 minutos; (2) reconstituir adicionando água reagente (CLSI/NCCLS) conforme o volume indicado no rótulo, utilizando pipeta calibrada; (3) deixar em repouso por 20 minutos e, em seguida, homogeneizar suavemente até dissolução completa; (4) realizar os ensaios. Para reconstituição de liofilizados, retirar a tampa de borracha com muito cuidado, para que o material a ela aderido não seja perdido. Ao retirar a tampa, deve-se colocá-la virada para cima na bancada. Após acrescentar a água para dissolução no frasco, recolocar a tampa com o mesmo cuidado, para que nenhuma porção do produto liofilizado seja perdida. É esperado que alguns itens apresentem resultados superiores à faixa de detecção. Neste caso, é necessário realizar diluições até chegar ao resultado real, exceto se contra-indicado nas instruções (bula) do reagente. Reporte de Resultado: deve ser reportado um sistema analítico único para cada ensaio. O laboratório deve identificar qual a metodologia aplicada em sua análise e reportar a leitura e/ou interpretação obtida. Notas (1) Para fins de comparação, kits que liberam o resultado em Absorbância ou Densidade ótica devem reportar o resultado final calculando a razão DO/CO (Índice). (2) O valor de corte (cut-off) somente deve ser reportado quando o sistema utilizado liberar este valor. CMV Item de Ensayo: suero humano liofilizado. Procedimiento de Uso: (1) dejar a la temperatura ambiente (15º-30ºC) por 20 minutos; (2) reconstituir adicionando agua con calidad reactivo (CLSI/NCCLS) de acuerdo al volumen indicado en el rótulo, utilizando pipetas calibradas; (3) Dejar en reposo por 20 minutos y, seguidamente, homogeneizar suavemente hasta la disolución completa; (4) realizar los ensayos. En los casos de reconstitución de liofilizados, retirar la tapa de goma con mucho cuidado, para que el material adherido a ella no se pierda. Al retirar la tapa, debe colocarse virada hacia arriba en la meseta. Después de añadir el agua para disolución en el frasco, recolocar la tapa con el mismo cuidado, para que no se pierda ninguna porción del liofilizado. Es esperado que algunos ítems presenten resultados superiores a la faja de detección. En este caso, es necesario realizar diluciones hasta llegar al resultado real, excepto si está contraindicado en las instrucciones (documento) del reactivo. Reporte de Resultado: Debe ser reportado un sistema analítico único para cada ensayo. El laboratorio debe identificar cual es la metodología aplicada en su análisis y reportar la lectura y/o interpretación obtenida. Notas (1) Para fines de comparación, los kits que liberan el resultado en Absorbancia o Densidad óptica deben reportar el resultado final calculando a relación DO/CO (índice). (2) El punto de corte (cut-off) solamente debe ser reportado cuando el sistema utilizado libera este valor. 5/8

7 Nucleic Acid Tests (NAT I e II) Biologia Molecular Item de Ensaio: plasma humano liofilizado. Cada ensaio possui um material específico e os itens devem ser processados individualmente (não em pool). Procedimento de Uso: (1) deixar à temperatura ambiente por 20 minutos; (2) reconstituir adicionando água reagente (CLSI/NCCLS) conforme o volume indicado no rótulo, utilizando pipeta calibrada; (3) deixar em repouso por 20 minutos e, em seguida, homogeneizar suavemente até dissolução completa; (4) realizar os ensaios. Para reconstituição de liofilizados, retirar a tampa do frasco com muito cuidado, para que o material a ela aderido não seja perdido. Ao retirar a tampa, deve-se colocá-la virada para cima na bancada. Após acrescentar a água (livre de RNAse) para dissolução no frasco, recolocar a tampa com o mesmo cuidado, para que nenhuma porção do produto liofilizado seja perdida. Reporte de Resultado: em adição aos resultados, deve-se identificar o sistema analítico, com cuidado especial a metodologia PCR e Rt-PCR. Nucleic Acid Tests (NAT I y II) Biología Molecular Ítem de Ensayo: plasma humano liofilizado. Cada ensayo posee un material específico y los items deben ser tratados de forma individual (no en pool). Procedimiento de Uso: (1) dejar a la temperatura ambiente por 20 minutos; (2) reconstituir adicionando agua con calidad reactivo (CLSI/NCCLS), de acuerdo al volumen indicado en el rótulo, utilizando pipetas calibradas; (3) Dejar en reposo por 20 minutos y, seguidamente, homogeneizar suavemente hasta la disolución completa; (4) realizar los ensayos. En los casos de reconstitución de liofilizados, retirar la tapa de goma con mucho cuidado, para que el material adherido a ella no se pierda. Al retirar la tapa, debe colocarse virada hacia arriba en la meseta. Después de añadir el agua (libre de RNAse) para disolución en el frasco, recolocar la tapa con el mismo cuidado, para que no se pierda ninguna porción del liofilizado. Reporte de Resultado: adicionando a los resultados, se debe identificar el sistema analítico, con cuidado especial a la metodología PCR y Rt-PCR. Seleção de Doadores Item de Ensaio - Geral: sangue humano. Item de Ensaio - HemoCue: sangue total liofilizado. Este material pode apresentar aparência diferente devido à manipulação. Isto não configura deterioração e não inviabiliza o seu uso. Procedimento de Uso - Geral: (1) o material deve ser analisado imediatamente após o recebimento; (2) homogeneizar em homogeneizador orbital por 2 minutos ou, rolar entre as palmas das mãos 12 vezes ou por 20 segundos, invertendo o frasco e repetindo o rolamento até que todo o conteúdo esteja bem homogeneizado; (3) retirar a tampa e proceder conforme rotina. Procedimento de Uso - HemoCue: (1) deixar à temperatura ambiente por 20 minutos; (2) retirar a tampa do frasco com muito cuidado, para que o material a ela aderido não seja perdido. Ao ser retirada, a tampa deve ser colocada virada para cima na bancada; (3) reconstituir adicionando água reagente (CLSI/NCCLS) conforme o volume indicado no rótulo, utilizando pipeta calibrada; (4) recolocar a tampa com o mesmo cuidado, para que nenhuma porção do produto liofilizado seja perdida; (5) deixar em repouso por 20 minutos e, em seguida, homogeneizar suavemente até dissolução completa; (6) realizar imediatamente as análises conforme rotina. Selección de Donantes Item de Ensayo - Geral: sangre humana. Item de Ensayo - HemoCue: sangre total liofilizada. Este material puede presentar apariencia diferente debido a la manipulación. Esto no conforma deterioro y no inviabiliza su uso. Procedimiento de Uso: (1) realizar el análisis inmediatamente después de recibir las muestras; (2) homogeneizar en homogeneizador orbital por 2 minutos o, rodar entre las palmas de las manos 12 veces o por 20 segundos, invirtiendo el frasco y repitiendo el rodamiento hasta que todo el contenido este bien homogeneizado; (3) retire la tapa y proceda de acuerdo a la rutina. Procedimiento de uso - HemoCue: (1) dejar a temperatura ambiente (15ºC- 30ºC) por 20 minutos; (2) retirar la tapa de goma con mucho cuidado, para que el material adherido a ella no se pierda. Al retirar la tapa, debe colocarse virada para arriba sobre la meseta; (3) reconstituir adicionando agua con calidad reactivo (CLSI/NCCLS), de acuerdo al volumen indicado en el rótulo, utilizando pipeta calibrada; (4) recolocar la tapa con el mismo cuidado, para que no se pierda ninguna porción del liofilizado; (5) dejar en reposo por 20 minutos y seguidamente, homogeneizar hasta su completa disolución; (4) realizar inmediatamente los ensayos. 6/8

8 Sorologia Item de Ensaio: soro humano líquido. Itens individuais por ensaio. Procedimento de Uso: (1) deixar 30 minutos à temperatura ambiente (15º- 30ºC) para descongelar; (2) homogeneizar; (3) se houver formação de precipitado, centrifugar o material e trabalhar com o sobrenadante; (4) realizar as análises. Não são usados conservantes na preparação desses materiais. Por isso, devem ser mantidos congelados e usados rapidamente, a fim de evitar contaminação bacteriana durante a armazenagem. NOTA: Para fins deste controle, não é feita uma nova coleta do material, e o painel é composto por itens únicos. Reporte de Resultado: deve ser reportado um sistema analítico único para cada ensaio. O laboratório deve identificar qual a metodologia aplicada em sua análise e reportar a leitura e/ou interpretação obtida. Notas (1) Para fins de comparação, kits que liberam o resultado em Absorbância ou Densidade ótica devem reportar o resultado final calculando a razão DO/CO (Índice). (2) O valor de corte (cut-off) somente deve ser reportado quando o sistema utilizado liberar este valor. Cada resultado é avaliado individualmente. O participante deve responder apenas aos ensaios realizados na rotina do laboratório. No caso de terceirizar os confirmatórios, não reportar resultados para esse teste. O campo "resultados" deve ser preenchido e deve ser reportado ao menos um sistema analítico com todos os dados. Mesmo que tenha apenas um sistema analítico e a "interpretação" já contenha o resultado final, estes dados devem ser transpostos para o campo "resultados", a partir do qual será feita a avaliação. Critérios Específicos de Avaliação: são considerados os resultados de caracterização e validação dos itens de ensaio, e também os obtidos pelos participantes. A avaliação e o grau de desempenho são feitos separadamente para cada ensaio. NOTAS: (A) Nos testes de triagem, é exigida apenas a execução de um teste; (B) Para os testes confirmatórios, o participante é avaliado apenas quando o item é reativo (segundo Resultado Aceito ). Quando o item é não-reativo, só é avaliado o participante que responde; (C) Participantes que deixam de responder o confirmatório de itens reativos recebem NR (vale como inadequado). Esse NR não conta como avaliação se o participante nunca responder o confirmatório; (D) Para todos os ensaios que possuem confirmatório (exceto Chagas, Hepatite B e Sífilis): (1) é exigida a identificação do kit e (2) é verificado se o kit é apropriado para triagem ou confirmatório. Serología Item de Ensayo: suero humano líquido. Items individuales por ensayo. Procedimiento de Uso: (1) descongelar el material, dejando 30 minutos a temperatura ambiente (15º-30ºC); (2) homogeneizar; (3) si hubiera formación de precipitado, centrifugar el material y trabajar con el sobrenadante; (4) realizar los análisis. No son usados preservativos en la preparación de esos materiales. Por eso, deben ser mantenidos en congelación y usados rápidamente, con el fin de evitar la contaminación bacteriana durante el almacenaje. NOTA: Para fines de este control, no se realiza una nueva colecta del material y el panel está compuesto por muestras únicas. Reporte de Resultado: Debe ser reportado un sistema analítico único para cada ensayo. El laboratorio debe identificar cual es la metodología aplicada en su análisis y reportar la lectura y/o interpretación obtenida. Notas (1) Para fines de comparación, los kits que liberan el resultado en Absorbancia o Densidad óptica deben reportar el resultado final calculando a relación DO/CO (índice). (2) El punto de corte (cut-off) solamente debe ser reportado cuando el sistema utilizado libera este valor. Cada resultado es evaluado individualmente. El participante debe responder apenas a los ensayos realizados en la rutina del laboratorio. En caso de terceros, los confirmatorios no reportar resultados para este test. El campo resultados debe ser llenado y reportado, al menos, un sistema analítico con todos los datos. Aunque tenga sólo un sistema analítico y la interpretación ya contenga el resultado final, estos datos deben ser traspasados para el campo resultados a partir del cual será hecha la evaluación. Criterios Específicos de Evaluación: son considerados los resultados de caracterización y validación de las muestras de ensayo, y también los obtenidos por los participantes. La evaluación y el grado del desempeño son realizadas por separado para cada ensayo. NOTAS: (A) En los test de selección, es exigida apenas la ejecución de un test; (B) Para los test confirmatorios, el participante es evaluado apenas cuando la muestra es reactiva (según Resultado Aceptado ). Cuando una muestra es no reactiva, sólo es evaluado el participante que responde; (C) Participantes que dejan de responder el confirmatorio de muestras reactivas reciben NR (equivale como inadecuado). Ese NR no cuenta como evaluación y el participante nunca responde el confirmatorio; (D) Para todos los ensayos que poseen confirmatorio (excepto Chagas y Hepatitis B y Sífilis): (1) es exigida la identificación del kit y (2) es verificado si el kit es apropiado para selección o confirmatorio. 7/8

9 Fatores de Comversão Gerais Fatores de Conversão por Ensaio Unidade Atual x Fator = Unid Desejada Ensaio Unid Atual X Fator = Unid Desejada Unid x 10 3 (1.000) = m Unid Ácido Lático mg/dl x 0,111 = mmol/l (grama, x 10 6 ( ) = µ Unid Acido Úrico µmol/l x 0,0168 = mg/dl mol, ou UI) x 10 9 ( ) = n Unid Acido Úrico mmol/l x 16,8 = mg/dl x ( ) = p Unid Albumina µmol/l x 0,0069 = g/dl... NUMERADOR... DENOMINADOR m Unid x 10-3 (0,001) = Unid α-glicoproteína ácida µmol/l x 4,1 = mg/dl x 10 3 (1.000) = µ Unid Bilirrubina µmol/l x 0,0585 = mg/dl x 10 6 ( ) = n Unid Cálcio Total mmol/l x 4,01 = mg/dl x 10 9 ( ) = p Unid Cap Tot FixFerro µmol/l x 5,587 = µg/dl µ Unid x 10-6 (0,000001) = Unid Cloretos mg/dl x 0,282 = mmol/l x 10-3 (0,001) = m Unid Cloretos mg/dl em NaCl x 0,171 = meq/l x 10 3 (1.000) = n Unid Cobre µmol/l x 6,354 = µg/dl x 10 6 ( ) = p Unid Colesterol mmol/l x 38,67 = mg/dl n Unid x 10-9 (0, ) = Unid Creatinina µmol/l x 0,0113 = mg/dl x 10-6 (0,000001) = m Unid Ferro µmol/l x 5,587 = µg/dl x 10-3 (0,001) = µ Unid Fósforo mmol/l x 3,097 = mg/dl x 10 3 (1.000) = p Unid Glicose mmol/l x 17,99 = mg/dl p Unid x (0, ) = Unid Magnesio meq/l x 1,215 = mg/dl x 10-9 ( ) = m Unid Magnesio mmol/l x 2,43 = mg/dl x 10-6 (0,000001) = µ Unid Triglicéridos mmol/l x 88,50 = mg/dl x 10-3 (0,001) = n Unid Urea mmol/l x 6,024 = mg/dl Unid/ dl x 10 1 (10) = Unid/ L Cortisol nmol/l x 0,0363 = µg/dl x 10-2 (0,01) = Unid/ ml T3 Livre pmol/l x 0,651 = pg/ml Unid/ L x 10-1 (0,1) = Unid/ dl T3 Total nmol/l x 65,10 = ng/dl x 10-3 (0,001) = Unid/ ml T4 Livre pmol/l x 0,0777 = ng/dl Unid/ ml x 10 3 (1000) = Unid/ L T4 Total nmol/l x 0,0777 = µg/dl x 10 2 (100) = Unid/ dl 100mL = dl = % Factores de Conversión Generales Factores de Conversión por Ensayo Unidad Atual x Factor = Unid Deseada Ensaio Unidad Atual X Fator = Unid Deseada Unid x 10 3 (1.000) = m Unid Ácido Lático mg/dl x 0,111 = mmol/l (grama, x 10 6 ( ) = µ Unid Uratos µmol/l x 0,0168 = mg/dl mol, ou x 10 UI) ( ) = n Unid Uratos mmol/l x 16,8 = mg/dl x ( ) = p Unid Albúmina µmol/l x 0,0069 = g/dl m Unid x 10-3 (0,001) = Unid α-glicoproteína ácida µmol/l x 4,1 = mg/dl x 10 3 (1.000) = µ Unid Bilirrubinas µmol/l x 0,0585 = mg/dl x 10 6 ( ) = n Unid Cálcio Total mmol/l x 4,01 = mg/dl x 10 9 ( ) = p Unid Cap Tot Fij Ferro µmol/l x 5,587 = µg/dl µ Unid x 10-6 (0,000001) = Unid Cloruros mg/dl x 0,282 = mmol/l x 10-3 (0,001) = m Unid Cloruros mg/dl em NaCl x 0,171 = meq/l x 10 3 (1.000) = n Unid Cobre µmol/l x 6,354 = µg/dl x 10 6 ( ) = p Unid Colesteroles mmol/l x 38,67 = mg/dl n Unid x 10-9 (0, ) = Unid Creatinina µmol/l x 0,0113 = mg/dl x 10-6 (0,000001) = m Unid Hierro µmol/l x 5,587 = µg/dl x 10-3 (0,001) = µ Unid Fósforo mmol/l x 3,097 = mg/dl x 10 3 (1.000) = p Unid Glucosa mmol/l x 17,99 = mg/dl p Unid x (0, ) = Unid Magnesio meq/l x 1,215 = mg/dl x 10-9 ( ) = m Unid Magnesio mmol/l x 2,43 = mg/dl x 10-6 (0,000001) = µ Unid Triglicéridos mmol/l x 88,50 = mg/dl x 10-3 (0,001) = n Unid Urea mmol/l x 6,024 = mg/dl Unid/ dl x 10 1 (10) = Unid/ L Cortisol nmol/l x 0,0363 = µg/dl x 10-2 (0,01) = Unid/ ml T3 Libre pmol/l x 0,651 = pg/ml Unid/ L x 10-1 (0,1) = Unid/ dl T3 Total nmol/l x 65,10 = ng/dl x 10-3 (0,001) = Unid/ ml T4 Libre pmol/l x 0,0777 = ng/dl Unid/ ml x 10 3 (1000) = Unid/ L T4 Total nmol/l x 0,0777 = µg/dl x 10 2 (100) = Unid/ dl 100mL = dl = %... NUMERADOR... DENOMINADOR Exemplo: Resultado inicial de 2345 µui/dl, deseja-se passar para mui/l µ UI mui x0,001x10 = 0,01 dl L O resultado final é: 2345 x 0,01 = 23,45 mui/l Ejemplo: Resultado inicial de 2345 µui/dl, se desea pasar para mui/l µ UI mui x0,001x10 = 0,01 dl L El resultado final es: 2345 x 0,01 = 23,45 mui/l 8/8