GUIA DE COLETA DE AMOSTRAS
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- Geraldo Ferreira Belo
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2 Diretrizes para coleta da amostra As análises laboratoriais e seus resultados dependem da coleta adequada da amostra, como também, do armazenamento e transporte apropriados até o laboratório. A equipe de Patologistas Clínicos Veterinários do LabsaN está sempre disponível para esclarecer qualquer dúvida em relação as análises laboratoriais, assim como, para a sua facilidade, o LabsaN também disponibiliza em nosso site os detalhes de coleta, interferentes e estabilidade específicas para cada teste. Jejum alimentar Para a grande maioria das amostras recomenda-se jejum alimentar de 8 a 12 horas e água à vontade, ou a critério do médico veterinário solicitante. Coleta de amostras de pacientes em tratamento Para exames de PCR e culturas, as amostras devem ser coletadas antes do tratamento antibiótico, antifúngico e antiviral dirigido contra o organismo de interesse, ou coletadas pelo menos 2 semanas após a interrupção destes tratamentos. Amostras recebidas no prazo de 12 horas para culturas e horas para PCR após a colheita são preferidos. Identificação das amostras e requisições A adequada identificação das amostras (nome paciente, proprietário e clínica) e completo preenchimento da requisição confere segurança no transporte e fidedignidade dos resultados. A requisição deve ser encaminhada juntamente com a amostra e está disponível na forma impressa ou online em nosso site. Requisições devem ser encaminhadas em saquinhos plásticos para evitar que entrem em contato direto com o gelo. Refrigeração Todas as amostras devem ser armazenadas e transportadas refrigeradas, salvo indicação contrária. Verificar nas observações individuais dos testes quando o mesmo deve ser encaminhado em temperatura ambiente ou congelado. Não encostar diretamente os tubos de coleta nos gelos de transporte, pois a exposição direta ao extremo calor ou frio podem promover dano e lise celular. Proteger as lâminas, esfregaços sanguíneos ou citológicos da condensação e contato direto com o gelo de transporte. Preferencialmente encaminhar as lâminas em porta-lâminas. TIPO Tubo com tampa roxa (E.D.T.A) Hemograma Contagem de plaquetas Contagem de reticulócitos Pesquisa de Hemoparasitas Pesquisa de Microfilárias análises Respeitar a proporção de anticoagulante do frasco é importante para um resultado acurado. Após inserir a amostra no frasco homogeneizar por inversão por 8-10 vezes. Manter em refrigeração por até 24 horas.* Plasma em EDTA não pode ser utilizado para muitos bioquímicos. O sangue de algumas aves (avestruzes, emas, mutuns) e de alguns répteis (iguanas, jabutis) sofre hemólise intensa em contato com EDTA, nestes casos usar heparina ou citrato. 01
3 TIPO Tubo com tampa vermelha (seco) Dosagens bioquímicas Dosagens hormonais análise Monitoramento terapêutico de drogas Testes sorológicos Pesquisa de células L.E. Inserir a amostra no frasco, deixar de 5 a 10 minutos em temperatura ambiente e logo após manter em refrigeração por até 24 horas.* Para algumas análises é recomendada centrifugação e separação do soro do coágulo em um curto período de tempo (consulte testes individuais). Ativador de coágulo pode interferir nos exames citológicos. Tubo com tampa amarela (gel separador de coágulo) Dosagens bioquímicas Dosagens hormonais Testes sorológicos Inserir a amostra no tubo e inverter 5 vezes, deixar de 5 a 10 minutos em temperatura ambiente e logo após manter em refrigeração por até 24 horas.* O gel interfere nos testes de monitoramento de certas drogas terapêuticas (fenobarbital, digoxina) e progesterona, por exemplo. Tubo tampa azul (Citrato de Sódio) Testes de coagulação Respeitar a proporção de anticoagulante do frasco é importante para um resultado acurado. Após inserir a amostra no frasco homogeneizar por inversão por 8-10 vezes. * A amostra deve ser centrifugada e o plasma separado do coágulo imediatamente (máximo 20 minutos). Encaminhar ao laboratório sob refrigeração imediatamente. Garrote prolongado e repetidas tentativas de coleta interferem nos resultados. Tubo tampa verde (Heparina) Algumas análises bioquímicas Testes toxicológicos Hemogramas para algumas aves e répteis Após inserir a amostra no frasco tampar e homogeneizar por inversão por 8-10 vezes. Manter em refrigeração por até 24 horas. Algumas análises bioquímicas como a amônia, por exemplo, precisam ser centrifugadas em no máximo 20 minutos após a coleta para obtenção do plasma e transportadas sob refrigeração. Verifique as observações individuais dos testes. Tubo tampa cinza (Fluoreto de Sódio) Glicose Lactato * Quando utilizada seringa, abrir a tampa do tubo, retirar a agulha da seringa e transferir o sangue para o tubo deixando-o escorrer pela parede do frasco. Garrote prolongado e repetidas tentativas de coleta promovem agregação plaquetária e hemólise. Após inserir a amostra no frasco tampar e homogeneizar por inversão por 8-10 vezes. Manter em refrigeração por até 24 horas. Nas amostras tratadas com antiglicolítico a concentração de glicose permanece estável por 8 horas a 25 C e por 48 horas entre 2 a 8 C. 02
4 TIPO Frasco Coletor Parasitológico de fezes Urinálise análise Análise de cálculo urinário Cultura para fungos dermatófitos Volume necessário das amostras: Fezes: 50 gramas, evitar contaminação ambiental Urina: 6-10 ml coletada preferencialmente por cistocentese e evitar exposição à luz Fluidos cavitários: 2-3 ml. Fracionar parte da amostra também em frasco com EDTA Cálculos urinários: lavar os cálculos com solução fisiológica, deixar secar ao ar e encaminhar todos os que foram coletados Pêlos para cultura de fungos dermatófitos: limpar a pêle e pêlos com álcool sem humedecer a pelagem e coletar os pêlos da borda da lesão com raíz. Manter as amostras de fezes, urina e fluidos cavitários sob refrigeração. Cálculos urinários e pêlos manter em temperatura ambiente. Tempo de envio das amostras ao laboratório: Fezes: horas Urina: 4 horas Fluidos cavitários: 2 horas Cálculos urinários e pêlos ficam estáveis por maior tempo Swab Estéril em Meio de Stuart Cultura para bactérias aeróbicas Coletar a amostra com swab estéril e inserir o swab no gel. Manter o tubo em temperatura ambiente após a coleta e encaminhar preferencialmente no prazo de 12 horas. Procedimentos para diferentes sítios: Cultura de lesões profundas fechadas: realizar rigorosa antissepsia da região externa e puncionar com seringa e agulha. Em casos de pouco volume, despejar o material no swab levemente umidecido com solução salina estéril. Fístulas e abscessos abertos: realizar tricotomia e rigorosa antissepsia da região externa e coletar a secreção com swab ou seringa. Ouvidos: realizar rigorosa antissepsia da região externa do pavilhão auricular e coletar diretamente do conducto com swab. Vagina/Útero: realizar rigorosa antissepsia da região vulvar e colher com swab. * Inserir o swab no meio de stwart. 03
5 TIPO Lâminas e porta-lâminas Citologia - Bacterioscopia Após a coleta desacople a agulha da seringa; Preencha a seringa de ar e acople novamente a agulha; Com o orifício do bisel da agulha voltado para lâmina de microscopia, empurre o êmbolo depositando o conteúdo contido na agulha contra esta. Promova a extensão estendendo suavemente uma lamina na outra. Secar as lâminas ao ar e encaminhá-las em porta lâminas. Manter em temperatura ambiente. Nunca refrigeradas e em local úmido. Frasco coletor com Formol a 10% Histopatológico Inserir fragmento de tecido em frasco coletor com formol a 10% e manter em temperatura ambiente. A amostra deve estar completamente submersa no formol a 10% para evitar degradação tecidual. Seringas análises citológicas e/ou bacteriológicas Urina para urinálise O transporte de material biológico em seringas (fluidos cavitários e urina) pode ser realizado, porém não é a forma de escolha pelo risco no transporte de acidente perfurocortante e extravasamento do material. Manter sob refrigeração e encaminhar fluidos em até 2 horas e urina em até 4 horas evitando exposição a luz. Recomenda-se transferir o material coletado para um frasco coletor ou frasco estéril com tampa para evitar extravasamento. Para fluidos cavitários recomenda-se envio de parte da amostra também em EDTA. Tubo Eppendorf Análise de líquor Transporte de soro e/ou plasma para análises Armazenar 0,5 ml de líquor em um frasco de eppendorf e 0,5 ml em frasco com EDTA quando na presença de contaminação por sangue. Armazenar sob refrigeração e encaminhar imediatamente ao laboratório. O envio de líquor apenas em frasco com EDTA pode ser impeditivo para a realização de algumas análises bioquímicas. Este material necessita de rápida análise para preservação da morfologia celular. 04
6 Av. São José, 713. Cristo Rei CEP Curitiba - Paraná - BR Horário de funcionamento LABSAN: Segunda a Sexta-Feira: 8:30h - 19:00h Sábado: 9:00h - 17:00h labsan@labsan.com.br TELEFONES: + 55 (41) (916) Dra. Aline Baumann da Rocha Gizzi Patologista Clínica Veterinária Diretora Executiva alinegizzi@labsan.com.br Fone: +55 (41) Dra. Cynthia Cristina Venancio da Silva Patologista Clínica Veterinária Diretora Técnica cynthiavenancio@labsan.com.br Fone: +55 (41) EM CASO DE DÚVIDAS EM RELAÇÃO À COLETA, ARMAZENAMENTO E ENVIO DAS AMOSTRAS, ENTRE EM CONTATO COM A NOSSA EQUIPE DE PATOLOGISTAS CLÍNICOS VETERINÁRIOS. ESTAMOS A SUA DISPOSIÇÃO!
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