ALBUMINA BOVINA 22% PROTHEMO. Produtos Hemoterápicos Ltda. PARA TESTES EM LÂMINA OU TUBO SOMENTE PARA USO DIAGNÓSTICO IN VITRO

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1 ALBUMINA BOVINA 22% PROTHEMO Produtos Hemoterápicos Ltda. PARA TESTES EM LÂMINA OU TUBO SOMENTE PARA USO DIAGNÓSTICO IN VITRO Conservar entre: 2º e 8ºC Não congelar Conservante: Azida de Sódio 0,1 % Responsável Técnico: Janaina Martins CRF:

2 PRINCÍPIO DO TESTE A Albumina Bovina a 22% é obtida a partir de plasma bovino, sendo especialmente preparada para ser usada como meio de suspensão em diferentes testes imunohematológicos. A adição de Albumina Bovina a 22% PROTHEMO ao meio potencializa a reação antígeno-anticorpo, proporcionando duas vantagens fundamentais: - Permite revelar anticorpos IgG ligados às hemácias, os quais de outra forma, somente seriam detectados na fase da Antiglobulina. - Na fase de Antiglobulina, a adição de albumina diminui o tempo de incubação e confere maior sensibilidade ao teste. Recomendamos o uso da Albumina Bovina a 22% PROTHEMO nas seguintes técnicas de laboratório e banco de sangue: Teste de Compatibilidade Pré-Transfusional, Pesquisa e Titulação de Anticorpos Bloqueadores (Albuminosos). A formação de rouleaux, aglutininas frias ou auto-anticorpos pode causar falsas reações positivas. DESCRIÇÃO DO PRODUTO O reagente contém: Albumina Bovina, Cloreto de Sódio e Azida de Sódio a 0,1%. O produto deve ser usado como fornecido sem adições ou diluições. O produto é fornecido em frascos de 10 ml, acompanhados de contagotas. Cada gota equivale a 50 µl. ALBUMINA BOVINA 22% PROTHEMO Código Embalagem ml x 10 ml MATERIAIS NECESSÁRIOS NÃO FORNECIDOS Teste em lâmina: lâminas de vidro, pipetas Pasteur e solução salina a 0,9%. Teste em tubo: tubos de vidro (10x75mm ou 12x75mm), pipetas Pasteur, Banho-Maria a 37 C, centrífuga e solução salina 0,9%.

3 ARMAZENAMENTO E PRECAUÇÕES Conservar em geladeira entre 2 e 8 C. Não congelar ou expor o produto a temperaturas elevadas. Não utilizar após o vencimento. Não utilizar o produto se observar nítida turvação, o que pode indicar contaminação bacteriana ou deterioração do produto. Evitar a contaminação do reagente. Não reutilizar os frascos vazios. SOMENTE PARA USO DIAGNÓSTICO IN VITRO. Os materiais de origem biológica devem ser considerados como se fossem potencialmente infectantes. Devem ser estabelecidos métodos adequados para o manuseio e descarte equivalentes aos utilizados para as amostras de sangue. O não seguimento das instruções de uso pode resultar em diminuição da performance ótima do produto. COLETA DA AMOSTRA O sangue deve ser coletado por procedimento asséptico aprovado com ou sem adição de anticoagulante. As hemácias obtidas de coágulo podem ser utilizadas em até 5 dias após sangria. As amostras coletadas em EDTA ou Heparina devem ser utilizadas em até 48 horas. Se a demora para a execução do teste for inevitável, hemácias de sangue coagulado e as colhidas em EDTA ou Heparina devem ser separadas do soro/plasma, lavadas e ressuspendidas em solução preservativa de glóbulos. Estocar a 2 a 8 C, por no máximo, 20 dias. O sangue coletado em anticoagulante ACD, CPD e CPDA-1 pode ser utilizado até a data de expiração se armazenado entre 2 e 8 C. O armazenamento prolongado de hemácias antes da execução do teste pode causar deterioração de antígenos e resultar em reações mais fracas. PROCEDIMENTO DO TESTE I - TESTES DE COMPATIBILIDADE PRÉ-TRANSFUSIONAL A - PROVA DE COMPATIBILIDADE MAIOR A Prova de Compatibilidade Maior Pré-Transfusional é um método eficaz para se oferecer à máxima segurança ao receptor, protegendo-

4 o contra uma reação transfusional e assegurando o aproveitamento da transfusão recebida. Coloca-se em presença das hemácias do doador o soro do receptor. Esta prova nos permite revelar a existência de anticorpos de diferentes grupos sangüíneos, os quais poderiam destruir as hemácias transfundidas. Para isso, devemos realizar os seguintes testes: 1 - Pesquisa de Anticorpos Salinos (à temperatura ambiente) - Em um tubo de hemólise, colocar duas gotas de soro do receptor. - Adicionar uma gota de suspensão a 5% em solução salina a 0,9% de hemácias do doador. Homogeneizar bem. - Ressuspender as hemácias, agitando suavemente o tubo e examinar a presença ou não de aglutinação e/ou hemólise. Registrar o resultado. 2 - Pesquisa de Anticorpos Albuminosos (à temperatura ambiente) - Adicionar ao mesmo tubo duas gotas de Albumina Bovina a 22% PROTHEMO. - Ressuspender as hemácias, agitando suavemente o tubo e examinar a presença ou não de aglutinação e/ou hemólise. Registrar o resultado. 3 - Pesquisa de Anticorpos Albuminosos (à temperatura de 37 C) - Incubar o tubo em Banho-Maria durante minutos a 37 C. - Ressuspender as hemácias, agitando suavemente o tubo e examinar a presença ou não de aglutinação e/ou hemólise. Registrar o resultado. 4 - Pesquisa de Anticorpos IgG pelo Teste da Antiglobulina - Lavar as hemácias do tubo por três vezes com solução salina a 0,9%. - Desprezar o sobrenadante, secando as bordas do tubo para retirar toda solução. - Acrescentar duas gotas de Soro Anti-Humano PROTHEMO e misturar bem. - Agitar suavemente o tubo para pesquisar aglutinação.

5 Interpretação: Não sendo observada reação em alguma das fases do teste, a transfusão poderá ser realizada. B - PROVA DE COMPATIBILIDADE MENOR Este teste complementa a prova anterior e tem como objetivo detectar anticorpos presentes no plasma do doador, os quais, se transfundidos, poderão causar destruição dos glóbulos do receptor. Executar o mesmo procedimento para o teste de compatibilidade Maior Pré-Transfusional, com as seguintes observações: - Utilizar duas gotas de soro do doador ao invés do soro do receptor. - Utilizar suspensão de hemácias a 5% em solução salina à 0,9% do receptor, ao invés da suspensão de hemácias do doador. II - PESQUISA DE ANTICORPOS BLOQUEADORES (IgG) - Colocar em tubo de hemólise uma gota de suspensão de hemácias a 5%, escolhidas para o teste, previamente preparadas em solução salina à 0,9%. - Adicionar duas gotas do soro a ser testado. - Acrescentar duas gotas de Albumina Bovina a 22% PROTHEMO. - Executar as técnicas para Pesquisa de Anticorpos Albuminosos e Bloqueadores, descritas para a Prova de Compatibilidade Maior Pré-Transfusional, conforme os itens 2,3 e 4. III - TITULAÇÃO DE ANTICORPOS BLOQUEADORES (IgG) - Preparar uma suspensão de hemácias a 5% em Albumina Bovina a 22% PROTHEMO. - Distribuir em uma estante uma série de dez tubos de hemólise. - A partir do 2º tubo, distribuir 0,1 ml de Albumina Bovina a 6% (preparar Albumina Bovina a 6%, diluindo 1,5 ml de Albumina Bovina a 22% PROTHEMO em 4 ml de solução salina a 0,9%). - Colocar 0,1 ml de soro do paciente nos tubos n.º 1 e n.º 2. - Misturar bem o conteúdo do 2º tubo e transferir 0,1 ml para o 3º tubo.

6 Misturar bem e transferir para o tubo seguinte e assim sucessivamente. Do 10º tubo, desprezar 0,1 ml da mistura soro e Albumina Bovina a 6%. - Adicionar 0,1 ml de suspensão de hemácias a 5% em todos os tubos. - Incubar durante minutos a 37 C. - Agitar suavemente cada tubo para pesquisar a aglutinação. - Registrar os resultados considerando como título em Albumina o último tubo de reação Executar o teste de Antiglobulina com os tubos cujos resultados em Albumina tenham sido no máximo 1+. Considerar como titulo em Antiglobulina o último tubo que apresentar reação. - Registrar os resultados. Tubos nº Diluição 1:1 1:2 1:4 1:8 1:1 1:3 1:6 1:128 1:256 1: Albumina Antiglobulin N.T N.T N.T a... N.T. = Não Testado INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS Titulo em Albumina: 1:8 Titulo em Antiglobulina: 1:32 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1 - Walker Rh, ed. Technical Manual. 11th Edition. Bethesda: AABB, Race R.R and Sanger R. Blood Groups in Man, 6th Edition Oxford Blackwell Scientific Publishers, Mollison PL. Blood Transfusion in Clinical Medicine. 7th Edition. Oxford Blackwell Scientific, Guidelines for the Blood Transfusion Service H.M.S.O.

7 GARANTIA Este produto é garantido por Prothemo Produtos Hemoterápicos Ltda durante o prazo de validade indicado no rótulo se conservado e utilizado segundo as instruções recomendadas. PROTHEMO PRODUTOS HEMOTERÁPICOS LTDA. CNPJ / Rua Augusto Ferreira de Morais, Socorro - CEP: São Paulo - SP - BRASIL Atendimento ao consumidor: Fone (11) e FAX (11) Data da edição: Nov/2009

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