Conceitos de Genética William S. Klug, Michael R. Cummings, Charlotte A. Spencer & Michael A. Palladino

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1 Transcrição gênica

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3 Conceitos de Genética William S. Klug, Michael R. Cummings, Charlotte A. Spencer & Michael A. Palladino

4 Do DNA à proteína

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6 Transcrição em Procariotos

7 RNA polimerase procariótica Procariontes possuem um único tipo de RNA polimerase Polimerase se liga ao acaso ao DNA e desliza na molécula até encontrar o promotor.

8 Transcrição de um gene bacteriano pela RNA polimerase

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11 Bolha de transcrição RNA polimerase Fita molde Direção da transcrição 5 3

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13 Reconhecimento e Ligação ao promotor Início da Transcrição

14 O RNA é transcrito pela enzima RNA polimerase

15 Terminação da transcrição através da formação do grampo de terminação

16 Terminação da transcrição dependente da proteína Rho Rho (46kDa, ativa como hexâmero) move-se ao longo do RNA acompanhando a RNA polimerase Com a pausa da RNA polimerase na sequência de terminação, Rho alcança a enzima Rho desenrola o híbrido RNA-DNA Sequência de Terminação dependente de Rho: rica em C

17 Transcrição em Eucariotos

18 RNA polimerases:

19 REGULAÇÃO GÊNICA Motivos ligadores de DNA em proteínas Homeodomínio Dedo de zinco Zíper de leucina

20 Estrutura típica de um gene transcrito pela RNApol II Enhancer Promotor Gene

21

22 Promotores de genes transcritos pela RNApol II Tata Binding Protein Complexo TFIID

23 REGULAÇÃO GÊNICA Promotor Iniciação da transcrição de um gene eucariótico pela RNA polimerase II

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29 Alongamento da transcrição

30 Término da transcrição Consenso AAUAAA Regiões GU Fatores de clivagem Poli A polimerase.

31 Vídeo

32 Promotores de genes transcritos pela RNApol III e I: A TBP também é componente dos complexos de iniciação de transcrição destes promotores

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36 Transcrição do gene RNAr 5S pela RNA polimerase III

37 REGULAÇÃO GÊNICA Ativação gênica à distância em eucariotos Promotor Proteínas regulatórias podem aumentar ou diminuir a atividade da RNA polimerase: influenciando a montagem do complexo de iniciação da transcrição

38 REGULAÇÃO GÊNICA Comparação da regulação gênica em procariotos e eucariotos

39 REGULAÇÃO GÊNICA Sequências e proteínas regulatórias Controle combinatorial: Grupos de proteínas trabalham juntos para determinar a expressão de um único gene

40 RNA: processamento

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43 Adição do 5 CAP (modificação da extremidade 5 do hnrna)

44

45 Poliadenilação: Adição da cauda poli (A) na extremidade 3 do hnrna (transcrito primário): ~200 Adeninas Sequencia sinal para poliadenilação

46 ÍNTRONS Genes humanos aprox Proteínas humanas aprox Recomposição alternativa Humano 85% genes

47 Éxons e íntrons: vantagens ou desvantagens?? -permite a recombinação entre éxons -splicing alternativo

48 RNAs mensageiros eucarióticos são interrompidos

49 Transcrição e adição do 5 cap Etapas para geração do transcrito maduro (hnrna) Clivagem, poliadenilação e splicing

50 SPLICING Spliceossomo Regra GU-AG

51 SPLICING Spliceossomo Regra GU-AG

52 trna -Estrutura secundária com grampos e alças formando um trevo -Alto número de bases modificadas depois da sua transcrição

53

54 Processamento do precursor do trna Modificação das bases Processamento trna maduro

55 Ribossomo bacteriano 70S (2,7 x 10 6 ) Ribossomo Eucariótico 80S (4,6 x 10 6 ) rrnas :

56 Processamento do precursor do rrna RNA precursor 30S Metilação das bases snrna snorna Clivagem RNAs maduros

57 Auto-splicing: introns do grupo I

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61 Auto-splicing: introns do grupo II

62 AGGUAAGU-----Pyr---A--NCAGG Remoção de introns pelo spliceossomo : associação de ribonucleoproteínas pequenas (snrnps) formando um complexo de 3x10 3 kda

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66 Splicing alternativo do RNA

67 Padrões complexos de recomposição eucariótica do RNAm. O pré RNAm do gene da α-tropomiosina é recomposto alternativamente em diferentes tipos celulares. Boxe verde íntron, linhas tracejadas - regiões removidas por splicing.

68

69 Edição 1- mudar bases apolipoproteína B, - receptor glutamato - mitocôndria plantas 2- inserir bases mitocôndria tripanossoma

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73 Procariotos Eucariotos Splicing

74 RNAs mensageiros (RNAm) Códon Tradução e Código genético Códons

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