RNA transportador. Bruna Antonioli L. Flinto Leticia Jordao Marques de Oliveira : Michele Maria de Souza

Transcrição

1 RNA transportador Bruna Antonioli L. Flinto : Leticia Jordao Marques de Oliveira : Paloma Cunha Ferraz : Michele Maria de Souza :

2 Roteiro Introdução Estrutura do DNA (1ª, 2ª e 3ª) Enzimas aminoacil trna sintetase Encontro e ligação do trna no ribossomo Síntese de proteína Controle do processo Supressao sem sentido Referencias bibliográficas

3 Introdução Dogma central da biologia - Processo de transcrição Enzima helicáse RNA polimerase Outras enzimas

4 Introdução Tipos de RNAs gerados na transcrição: -mrna -rrna -trna Principais funções destes RNAs -Transmitir informações do código genético -Armazenar informações -Atuar como catalisador

5 Introdução Ação destes na síntese proteica -mrna possui informação para a síntese -trna faz a leitura da informação e transfere o aminoácido correto para a cadeia polipeptídica -o processo ocorre no ribossomo (rrna+proteínas) Informações adicionais -trna = 15% do total de RNA celular -trna - diversos nucleosídeos incomuns (I,,UH2 ou D)

6 Estrutura Primária -Uma única cadeia de nucleotídeo; -32 tipos para 20 aminoácidos -73 a 93 pares de bases kda

7 Estrutura Secundária Comum a maioria: - 4 troncos de bases pareadas - - Folha de trevo Terminal 5 sempre fosforilado (PG) Resíduo de Adenosina aceptor de aminoácido Caule CCA - para reconhecimento por enzimas Braço D - resíduos de Diidrouridina Braço T - sequência TΨC Braço do anticodón Braço extra Modificação de algumas bases Alguns pareamento são não Watson-Crick

8 Estrutura Terciária Estrutura compacta; Conformação em L; Arranjo específicos dos braços; Perna do trna - 60 Å; Sítio anticódon/ sítio do aminoácido - 76 Å; Largura de 20 a 25Å

9 Estrutura Terciária Mantida por extensas interações de empilhamento e pareamento de bases dentro e entre as hastes da hélice; Interações não Watson-Crick; Estabilização:- ligações de H entre as bases e os grupos fosfato - entre as bases e os grupos 2 -OH das riboses; Pouca variação das bases entre os diferentes trnas; Bases praticamente inacessíveis ao solvente.; Bases acessíveis: anticódon e do CCA terminal.

10 Aminoacil trna sintetases Enzimas responsáveis pelo acoplamento do AA ao seu trna correspondente; Catalisam a ligação de um aminoácido ao resíduo de ribose terminal do trna correspondente, formando um aminoacil-trna; Sítio de ligação da enzima é altamente específico; Podem ser classificadas em duas classes: classe I e classe II; O Aminoacil-tRNA formado carrega energia livre para a síntese protéica.

11 Como ocorre o reconhecimento do trna pela aars? Ocorre pelo reconhecimento do anti-códon, pelo braço aceptor do AA e pelas bases presentes em outras partes da molécula de trna. Não pode ocorrer somente pelo anti-códon pois no caso de alguns AA, existe mais de um anti-códon correspondente e a enzima teria que ser capaz de reconhecer códons muito diferentes. Reconhecimento do AA Geometria do sítio catalítico Sítio de edição Confirmação do AA

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13 Ativação do aminoácido na enzima aars

14 Aminoacil trna trna carregado com AA

15 Os trnas transportam um AA correspondente à um códon para o ribossomos: 32 tipos de trna para 20 AA; Redundância do código genético; Mais de um trna específica e transporta um mesmo aminoácido.

16 Iniciação da síntese proteica O códon de iniciação AUG é codificado por uma metionina, no entanto a mesma possui dois RNAt Codifica o 5 AUG para dar inicio a síntese de proteínas Codifica resíduos de metionina nas posições internas do polipeptídeo.

17 Alongamento Formação da ligação peptídica entre os AA Uma ligação peptídica é formada entre dois AA ligados ao sítio A e P do ribossomo pelos seus RNAt Há transferência de um grupo N-formilmetionil do RNAt iniciador para o grupo amino do segundo aminoácido (sítio A) que age como um nucleófilo deslocando o RNAt do sítio P para formar a ligação peptídica.

18 Alongamento Translocação O ribossomo move um códon na direção 3 do RNAm e esse movimento move um anticódon do peptidil-rnat do sitio A para o P Este movimento move o RNAt desacilado do sitio P para o E, ocorrendo a liberação do RNAt.

19 Alongamento O polipeptídio permanece ligado ao RNAt do AA mais recentemente incerido. A associação é que mantém a conexão funcional entre a informação contida no RNAm e a produção do polipeptídeo. ligação entre o RNAt e a extremidade carboxil do polipeptídeo nascente, ativa o grupo carboxiterminal para o ataque nucleofílico pelo AA que chega para formar uma nova ligação peptídica.

20 Terminação É sinalizada pela presença de um dos códons de terminação no RNAm: UAA, UAG, UGA. Quando um códon de terminação ocupa o sítio A do ribossomo há liberação de três fatores de terminação: RF-1, RF-2 e RF-3. Eles contribuem para: Hidrólise da ligação peptidil- RNAt-Terminal Liberação do peptídeo e do RNAt Dissociação do ribossomo 70-S em subunidades 30-S e 50-S. 30-S e 50-S começam um novo ciclo de sintese do polipeptídeo.

21 Controle do processo: edição no ribossomo Primeira etapa de alongamento: fundamental para a velocidade e fidelidade do processo; Oportunidade para que ocorra edição das interações códon-anticódon (visando pareamento apropriado); Nao verifica se o aminoácido correto esta ligado ao RNAt; A identidade do aminoácido que chega ao RNAt e que é ligado ao polipeptídeo nunca é conferida.

22 Supressão sem sentido Mutações sem sentido: quando uma mutação produz um códon de parada no interior de um gene, e a tradução é prematuramente interrompida; Duas possibilidades: (1) converter o códon de parada em um códon que especifique um aminoácido, (2) suprimir os efeitos do códon de parada; Mutações restauradoras: supressores sem sentido. Alteração mais comum: muda uma base do anticódon de RNAt

23 Supressão sem sentido A mutação que leva à geração de um trna supressor nem sempre ocorre no anticódon; trnatrp (triptofano)= normalmente codifica UGG; Mutação supressora em um braço do trna afastado do anticódon= faz com que reconheça tanto UGA quanto UGG.

24 Referências Bibliográficas 1. LEHNINGER, A.L.; NELSON, D.L.; COX, M.M. Princípios de Bioquímica. 2. ed. São Paulo: Sarvier, p. 2. VOET, Donald; VOET, Judith G. Bioquímica. 4. ed. Porto Alegre, Artmed,

25 Obrigada! Agradecemos a atenção de todos.