Transcrição: Síntese de RNA Tradução: Síntese Proteica

Transcrição

1 Transcrição: Síntese de RNA Tradução: Síntese Proteica

2 A estrutura química da molécula de RNA apresenta pequenas diferenças em relação ao DNA.

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4 Absorbância em 260 nm Porcentagem de pares GC DNA fita simples DNA dupla fita Essa reversibilidade da desassociação das fitas de DNA permite que a fita se separe para que ocorra a transcrição gênica ou a replicação e volte em seguida à sua estrutura em dupla hélice.

5 RNA contém uracila no lugar da timina. RNA tem um grupo OH no carbono 2, onde o DNA não tem. O RNA é mais reativo que o DNA. Sequência primária A sequência primária do RNA se dobra para formar a estrutura secundária. Dobramento Que se deve ao pareamento entre bases complementares da sequência primária.

6 No DNA, a fita que tem a mesma sequência do RNA é a fita codificadora. A fita complementar ao RNA é a fita molde.

7 A RNA pol cataliza a formação ligação fosfodiéster que une os nucleotídeos. O DNA é transcrito pela enzima RNA polimerase (RNA pol). A RNA pol se move ao longo do DNA, desfazendo a dupla hélice e acrescentando um nucleotídeo por vez ao RNA.

8 Existem genes codificados nas duas fitas do DNA. A RNA pol vai sempre ler a fita molde de 3 para 5.

9 Diversas RNA polimerases podem transcrever simultaneamente um mesmo gene, como mostra a micrografia eletrônica acima.

10 Em bactérias, só há um tipo de RNA pol para todos os RNAs. A transcrição em eucariotos apresenta diferentes enzimas, de acordo com o tipo de RNA produzido. Tipo de RNA polimerases RNA pol I RNA pol II RNA pol III Genes que transcreve 5.8S, 18S, and 28S rrna genes Todos os mrnas, e alguns RNAs regulatórios trnas, 5S rrna, RNAs regulatórios

11 Fita codificadora Promotor Região codificadora do RNA Fita molde Sítio de início de transcrição Terminador Sítio de terminação de transcrição Transcrito de RNA A RNA polimerase se liga ao DNA nos PROMOTORES.

12 A transcrição do DNA apresenta uma fase de iniciação, uma fase de elongação e uma fase de terminação. INICIAÇÃO RNA pol Fita codificadora 1. A RNA polimerase se liga ao promotor e começa a abrir as fitas de DNA. Sítio de início de transcrição Sítio de terminação de transcrição Reassociação das fitas de DNA Fita molde Promotor Abertura das fitas de DNA

13 ELONGAÇÃO 2. A RNA polimerase lê a fita molde de 3 para 5 e produz o transcrito de RNA adicionando nucleotídeos à extremidade 3. Direção da transcrição Transcrito de RNA

14 TERMINAÇÃO 3. Quando a RNA pol alcança o sítio de terminação, o transcrito de RNA é separado da fita molde.

15 O DNA apresenta uma sequência promotora denominada TATA box, onde se liga um fator de transcrição denominado TFIID. Isso causa uma alteração estrutural no DNA que permite que outros fatores de transcrição (TFIIA, TFIIB, etc) se unam ao TATA box, criando um complexo de iniciação da transcrição. Com a abertura da fita de DNA e a fosforilação da RNA pol II pelo TFIIH, a enzima se desprende do complexo de iniciação e passa para a fase de elongação.

16 Os genes podem ser expressos em diferentes quantidades, pois existem mecanismos de regulação da transcrição.

17 Depois de transcritos, os RNAs muitas vezes passam por processamentos adicionais antes de se tornarem funcionais.

18 A RNA pol I produz um transcrito precursor 45S, que deverá ser processado para gerar 3 tipos de rrna.

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20 Cap 5

21 O cap 5 permite à célula distinguir os mrnas dos outros tipos de RNA. O cap 5 fica ligado a proteína CBC que auxilia o processamento, exportação e tradução do mrna.

22 No genoma de eucariotos, as sequências codificadoras podem estar espalhadas. Éxons: são regiões codificadoras, traduzidas Íntrons: são regiões não codificadoras, não traduzidas

23 O splicing alternativo permite ao organismo fazer proteínas variantes a partir de um mesmo gene.

24 Ribonucleoproteinas (snrnps ) e proteínas constituem a maquinaria de splicing.

25 O mrna é clivado e uma poli-a polimerase adiciona cerca de 200 A à região 3 do mrna. Proteínas (PABPs) se ligam à cauda poli-a.

26 Quando o RNA mensageiro está pronto, ele migra para o citoplasma, onde se associará aos ribossomos para produzir proteínas.

27 Quando não estão ativamente produzindo uma proteína, as duas subnidades do ribossomo ficam dissociadas no citoplasma.

28 Um mesmo mrna pode em teoria ter diferentes fases de leitura. No entanto, só uma das fases codifica a proteína.

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31 INICIAÇÃO DA TRADUÇÃO 1. A subunidade menos do ribossomo se liga a uma sequência de reconhecimento no mrna. 2. Um trna carregado com metionina (trna-met) se liga ao códon AUG, completando o complexo de iniciação. 3. A subunidade maior do ribossomo se liga ao complexo de iniciação, sendo que o trna-met ocupa o sítio P.

32 A síntese proteica ocorre sequencialmente no ribossomo. O ribossomo possui sítios específicos onde os trnas são mantidos próximos e o rrna pode catalizar a ligação peptídica.

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34 1. trna-met ocupa o sítio P 2. Outro trna carregado é associado a GTP e fatores de elongação auxiliares e 3. entram no sítio A do ribossomo. 4. Quando o trna se liga corretamente ao sítio A, o GTP é clivado e os fatores são liberados. 5. Os fatores de elongação ser reassociam a GTP e ser ligarão a outros trnas.

35 6. Uma ligação peptídica é formada entre os aminoácidos nos sítios P e A e o peptídeo passa do trna no sítio P para o trna no sítio A. 7. O ribossomo se move ao longo do mrna, o que requer quebra de um GTP e a presença do fator de elongação EF-G. 8. O trna do sítio P passa para o sítio E, e o do sítio A para o sítio P. O sítio A fica liberado para receber um novo trna carregado.

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