Profa. Dra. Viviane Nogaroto

Transcrição

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2 ESTRUTURA DO GENE

3 GENE: Região do DNA capaz de ser transcrita a fim de produzir uma molécula de RNA funcional ou uma proteína -inclui sequências codificadoras e regulatórias transcrição tradução DNA RNA PROTEÍNA

4 Sequenciamento do genoma humano: 3 bilhões de nucleotídeos ~ genes genes proteínas diferentes??? Número parece insuficiente para suprir a ampla quantidade de funções que ocorre nas células humanas Características da estrutura e função do gene EUCARIOTO: Muitos genes são capazes de gerar múltiplas proteínas diferentes splicing alternativo até 1 milhão de proteínas diferentes

5 Genoma nuclear: - ~ 25% genes (e sequências a ele relacionadas) - 75% DNA extragênico: conteúdo de DNA que não faz parte de genes

6 Tamanho dos cromossomos humanos (1 milhão de pb = 1 Mb) Número de genes já identificados em cada cromossomo

7 Gene procarioto - Operon P O A B C terminador Operon

8 Gene eucarioto - RNAm -ÍNTRONS: sequências intercalares -ÉXONS: sequências expressas Gene humano DMD (distrofina): quando mutado causa Distrofia Muscular de Duchenne -maior gene humano: 2,5 milhões nts e 78 íntrons

9 RNAs mensageiros eucarióticos são interrompidos

10 Estrutura de gene Promotores de procariotos Regiões promotoras Locais de ligação da RNA polimerase início da transcrição

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12 Transcrição gênica

13 Se os genes eucariotos estão no núcleo e as proteínas são sintetizadas no citoplasma, como os genes controlam as sequências de aminoácidos??? Síntese de mrnas

14 TRANSCRIÇÃO Processo em que ocorre a síntese de RNA a partir de DNA molde Baseia-se no pareamento complementar de bases Processo catalisado pela RNA polimerase Os nucleotídeos são sempre adicionados na ponta 3 crescente (orientação 5 3 )

15 Do DNA à proteína

16 DO DNA À PROTEÍNA Resumo das etapas que vão do gene até a proteína

17 - RNAs nucleares pequenos (snrna): processamento do pré-rnam - RNAs citoplasmáticos pequenos (scrna): endereçamento de proteínas para retículo endoplasmático rugoso para posterior secreção celular.

18 Tipos de RNA e Funções (EUCARIOTOS): a- RNA mensageiro (mrna) sintetizado pela RNA pol II Transporte da informação genética do núcleo para o citoplasma onde ocorrerá a síntese proteica b- RNA ribossômico (rrna) sintetizado pela RNA pol I Transcrito a partir do DNA, na região organizadora do nucléolo. Associa-se com proteínas ribossômicas no núcleo e migra para o citoplasma para formar o RIBOSSOMO c- RNA transportador (trna) sintetizado pela RNA pol III Moléculas pequenas de RNA c/ nucleotídeos transporte de aminoácidos p/ síntese proteica pelo menos 1 t-rna para cada um dos 20 aminoácidos estrutura diferente dos demais tipos de RNA formato de folha de trevo modificado

19 trna -Estrutura secundária com grampos e alças formando um trevo -Alto número de bases modificadas depois da sua transcrição

20 Transcrição: produz um RNA complementar a uma fita de DNA

21 Apenas 1 fita usada como molde Não necessita de primer para iniciação mrna complementar à fita molde e idêntico à fita não-molde (T substituída por U)

22 Bolha de transcrição RNA polimerase Fita molde Direção da transcrição 5 3

23 Transcrição de genes bacterianos OPERON: Grupamento de genes bacterianos transcritos de um único promotor

24 Início da transcrição de um gene eucariótico pela RNA polimerase II RNA pol não consegue iniciar cadeia auxiliada por fatores de transcrição Fatores de transcrição ligados ao promotor formação de complexo de iniciação ligação da RNA pol TRANSCRIÇÃO

25 RNAs dos eucariotos são processados no núcleo: -adição do CAP 5`: nucleotídeo modificado (7-metil guanosina) revestimento -adicionados à cadeias de RNAm ~30 nts -poliadenilação: adição de adeninas à extremidade 3

26 -retirada dos íntrons: splicing O mecanismo de recomposição deve ser preciso garantir que códons em éxons distais a íntrons sejam corretamente lidos na tradução! ÍNTRON Éxon GT...AG Éxon

27 Rompimento de ligação fósfodiéster Retirada de íntrons de prémrnas são realizadas por spliceossomos: estruturas complexas de pequenos RNAs (snrna) + 40 proteínas diferentes Nova ligação fósfodiéster

28 Éxons e íntrons: vantagens ou desvantagens?? -permite a recombinação entre éxons -splicing alternativo

29 RNAs mensageiros (RNAm) Códon Tradução e Código genético Códons