HEMOCENTRO RP PROCEDIMENTO OPERACIONAL
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- Sebastião Castilhos
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1 P.: 1/14 1. OBJETIVO Padronização do recebimento, inspeção e conferência dos procedimentos em amostra de sangue de doadores do Laboratório de Imuno-Hematologia. 2. APLICAÇÃO Aplicado às amostras de sangue de doadores de coletas manuais e informatizadas do Hemocentro, Postos de Coletas, Coletas Externas e Núcleos de Hemoterapia. *6 3. RESPONSABILIDADES Recebimento (SBS), execução e conferência: Gerente do Laboratório,, Assistente de Laboratório, e Aprimorando. *13 *19 Para a rotina processada de forma manual: o funcionário que realizou a tipagem confere listagem de usuário em paralelo com outro funcionário que confere a tipagem na microplaca realizando a primeira conferência. A segunda conferência é realizada no momento em que o funcionário concluir a tipagem sanguínea no sistema S.B.S., através dos resultados anotados no tubo (etiqueta de código de barras). *2 *19 Para amostras processadas em sistema automatizado a primeira conferência será realizada a cada liberação de resultados pelo equipamento comparando o registro fotográfico e interpretação do resultado emitido pelo equipamento com a listagem emitida pelo SBS através da ATV Para amostras processadas em sistema automatizado a Segunda Conferência será realizada pelo SBS no momento da conclusão, pois a Fenotipagem ABO/RhD não estará anotada no tubo. *6 *19 4. CONDIÇÕES GERAIS Seqüência padrão na realização diária dos procedimentos e registros. Rotina Diária: - Classificação ABO/RhD; *3 - Pesquisa de anticorpos irregulares anti-eritrocitários (PAI); *3 - Triagem de Hemoglobina S (Hb s); - Pesquisa de Hemaglutinina. *12 *13 *18 Condição Específica para Rotina Diária: - Fenotipagem Eritrocitária (Determinado na rotina do dia). - TAD (Realizado quando necessário). *9 *13 - Identificação de Anticorpos Irregulares (IAI), realizado para todos os doadores com PAI positivo. *6 *3
2 P.: 2/14 5. SIMBOLOGIA TEIH Técnicas Imuno-Hematológicas POIH Procedimentos Imuno-Hematológicos TP Tipagem PAI Pesquisa de Anticorpos Irregulares IAI Identificação de Anticorpos Irregulares (Painel) TAD Teste de Antiglobulina Direto *6 Hb s Hemoglobina S AGH Antiglobulina Humana (Fase de Coombs). IOIH - Instruções Operacionais Imuno-Hematológica *19 6. DOCUMENTOS COMPLEMENTARES Procedimentos Operacionais da Imuno-Hematologia (POIH): 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 011, 015. Instruções Operacionais da Imuno-Hematologia (IOIH): 008 *3 *12 *13 *19 7. PROCEDIMENTO 7.1 Planejamento do Trabalho Priorizar o recebimento de amostras: 1º) As amostras que foram fracionadas em Concentrado de Plaquetas *3 *13 2º) Pela data de coleta mais antiga. *3 7.2 Recebimento da Amostra Colhidas no Hemocentro : Pegar amostras do monta carga da coleta diária, já separada em estantes de grade específica. Imprimir e conferir com a listagem através da ATV *2 *11 Colhidas em outros postos de coleta e Núcleos : Conferir com a listagem que vem com as amostras ou se necessário imprimi-la através da ATV *19 *19 Conferir: O tubo: amostra com anticoagulante (tubo pequeno 12x75mm) *19 Integridade da amostra e da etiqueta do código de barras. Verificar se não há amostra trocada. Verificar a necessidade de descarte de amostras impróprias para rotina por motivos: *5 I 01 - Amostra imprópria para pesquisa Hemólise *5 I 02 - Amostra imprópria para pesquisa Lipêmica *5 I 03 - Tubo quebrado *5 I 04 - Amostra insuficiente para pesquisa *5 I 05 - Amostra não recebida pelo Laboratório de Imunohematologia *5 As amostras serão descartadas pelo Gerente do Laboratório, Supervisor do Laboratório ou Assistente de Laboratório (substituta) através da ATV *5 *13 Numerar (com Nº de posição) conferindo o código do tubo. Entrar no terminal do Sistema SBS, na próxima tela digitar iniciais do nome do responsável (letra minúscula) e senha. *6 *19
3 P.: 3/14 Recebimento no SBS através da ATV conferir código e posição) e respeitar sempre a data e o horário padrão. *19 Imprimir a listagem de recebimento de amostra (Geral) através da ATV conferindo os números de posições e Hb s para triar, onde o teste estará como aguardando e também para separar as amostras para a realização da Pesquisa de Hemaglutinina. *6 *8 *13 *17 Imprimir, conferir e armazenar em pasta própria a listagem da ATV para conferência das amostras colhidas no próprio serviço. *12 Conferir e armazenar em pasta própria a listagem da ATV para conferência das amostras provenientes dos núcleos. *19 *8 7.3 Sequência de Realização das TEIH Fazer Tipagem ABO direta e reversa (TEIH 1.1.3); Fazer Tipagem RhD (TEIH se negativo TEIH e TEIH 2.2); Durante a fenotipagem ABO/RhD, se uma discrepância for observada, a mesma deverá ser resolvida antes da liberação dos resultados no SBS e a investigação deve ser registrada no Livro de Resolução de Discrepâncias ABO/RhD ; para a rotina de forma automatizada, se uma discrepância for detectada, ela deverá ser resolvida antes da liberação dos resultados no SBS, devendo ser repetida do equipamento automatizado, caso haja resolução proceder normalmente a importação dos resultados, caso a discrepância se mantenha durante a repetição no equipamento automatizado, a mesma deverá ser investigada de forma manual e os resultados registrados no Livro de Discrepâncias - NEO. (Livro Específico: Livro de Painel) *16 *19 Fazer PAI (TEIH 1.6 se positivo TEIH 3.2 ou TEIH 4.5). Fazer testes adicionais quando indicado; Fazer Triagem de Hemoglobina S (Hb s ) (TEIH 3.9); Fazer a Pesquisa de Hemaglutinina (TEIH 3.32) ; *12 *13 *18 Todos os lotes dos soros/reagentes com suas respectivas validades, amostras controles, utilizados na rotina deverão ser registrados diariamente através do ANEXO I; *7 A rotina automatizada no equipamento NEO deverá ser validada com controles positivos e negativos diariamente para as rotinas de Fenotipagem ABO/RhD, PAI e pesquisa de aglutinina; *19 Realizar controle diário, positivo e negativo, para as rotinas de Fenotipagem ABO/RhD, PAI e aglutinina *14 *19 As hemácias controles (AB positivo e O negativo) deverão ficar armazenadas em conservante cell stab por 30 dias (solução a 5% pronta para uso). O soro/plasma controle (PAI positivo e negativo) deverá ser aliquotado e congelado. Cada alíquota para inspeção diária, uma vez descongelada, deverá ser mantida sob-refrigeração (geladeira) sendo assim utilizada até seu fim, quando deverá ser descongelada nova alíquota. Estas amostras controles descritas acima validam a técnica manual. *12 *14 *19 Realizar controle diário com hemácias Hemoglobina S positivo e negativo que deverão ficar armazenadas em conservante cell stab por 30 dias (proporção volume/volume). *14 Sempre que a Pesquisa de Hemaglutinina for realizada, deverá ser incluído um plasma do tipo O como controle positivo e um plasma do tipo AB como controle negativo. Para rotina processada de forma manual o plasma do tipo O a ser utilizado como controle positivo deverá ser uma amostra conhecida cujo resultado de hemaglutinina seja positivo 1+ na diluição de 1:100 *19 Para rotina de forma automatizada utilizar plasma de amostra conhecida do tipo O cujo resultado de hemaglutinina seja positivo na diluição 32 ou acima como controle positivo e amostra conhecida
4 P.: 4/14 do tipo O com resultado de hemaglutinina seja menor ou igual a 16 como controle negativo. *14 *17 Obs.: Para realização da Fenotipagem ABO/RhD processada de forma automatizada deverá ser realizado um controle positivo e negativo diário de reação e a processada de forma manual deverá ser realizado um controle positivo e negativo por microplaca. *14 *19 Para realização da PAI processada de forma automatizada deverá ser realizado um controle positivo e negativo diário e a manual deverá ser realizado um controle positivo e negativo por microplaca. *14 *19 Para realização da Triagem de Hemoglobina S e Pesquisa de Hemaglutinina deverá ser colocado um controle positivo e negativo por microplaca. *14 *18 Os equipamentos utilizados na rotina deverão ser registrados diariamente através do ANEXO II. *7 *10 Obs.: Para cada rotina confirmatória de discrepância de pesquisa de D fraco e pesquisa de CDE deve-se ao final da sequência de tubos adicionar um controle positivo e um controle negativo, composto por uma hemácia RhD positiva e uma hemácia RhD negativa respectivamente, ficando então como controle para a sequência de tubos da bateria de testes, D Blend, CRh Blend, D IgG, CRh IgG, CDE. *19 A pesquisa de D fraco realizada com reagente ID Diaclon para gel deve ser validada com um controle positivo (amostra conhecida RhD positiva) e um controle negativo ( amostra conhecida RhD negativa). A pesquisa de CDE dos doadores deve ser validada com um controle positivo e um controle negativo ao final da sequência de tubos. *12 *19 Registro dos resultados para amostras processadas de forma manual *6 1 Transferir os resultados ABO e RhD, anotados nos tubos (para tipagem RhD anotar os resultados em cruzes nos tubos) de códigos de barras para o SBS, através da ATV Se for necessário realizar repetição de tipagem, usar a ATV Transferir os resultados da PAI para o SBS através da ATV (PAI = Neg.) e/ou ATV (PAI = Pos.). Se for necessário realizar repetição de PAI, usar ATV Obs.: Quando ocorrer PAI positivo, registrar o Painel (IAI) no Livro de Painel de Doadores. *3 3 Os resultados positivos da Triagem de Hemoglobina S (Hb s ) deverão ser atualizados através da ATV e concluídos através da ATV *8 *9 Os resultados negativos da Triagem de Hemoglobina S (Hb s ) poderão ser atualizados através da ATV e concluídos através da ATV ou serem registrados diretamente através da ATV *9 Emitir o relatório através da ATV das amostras que deverão ser enviadas ao Laboratório de Anemias Hereditárias. Separar, conferir e encaminhar as amostras junto com o relatório para realização do exame de Eletroforese de Hemoglobina. *8 4 Anotar os resultados da Pesquisa de Hemaglutinina no tubo de código de barras ( N : Negativo e P : Positivo) e transferir estes para o SBS através da ATV Caso seja necessário realizar a repetição da Pesquisa de Hemaglutinina no SBS, usar a ATV (Repetição de Hematologia) e selecionar o item ISOHE - ISOHEMAGLUTININA. *13 *18 5 Emitir a Listagem Geral de TP, PAI, Hb s e Hemolisina através da ATV 00610, por ordem de Recebimento, onde as amostras aparecem Em aberto na coluna Conclusão e realizar a primeira
5 P.: 5/14 conferência dos resultados por duas pessoas, uma pessoa confere a microplaca e a outra pessoa confere a listagem, as amostras Rh negativo na microplaca deverão ter a pesquisa de D fraco e CDE conferidas com o tubo. Após primeira conferência, concluir a rotina das amostras de forma individual utilizando a ATV e/ou concluir a rotina das amostras por lote" utilizando a ATV 01306, realizando a segunda conferência através do SBS. *9 *13 6 Emitir novamente a Listagem Geral de TP, PAI, Hb s e Hemaglutinina através da ATV 00610, por ordem de Recebimento, verificar se todos as amostras aparecem como Concluída através da coluna Conclusão e assinar ambas as pessoas que realizaram as conferências. Emitir listagem dos resultados positivos através da ATV e assinar ambas as pessoas que realizaram as conferências. As duas listas deverão ficar arquivadas em pastas específicas. Registro da Qualidade. *9 *13 *18 7 Após realizar toda a rotina padrão para amostras de doadores (recebimento, execução, conferência e emissão da listagem geral) descartar as amostras em recipiente apropriado. *2 Registro dos resultados para amostras processadas de forma automatizada *6 *9 *13 1 Utilizar a ATV no módulo SBS gráfico - Interface NEO Imuno selecionando o ensaio que deseja liberar nas opções disponíveis: Tipagem / PAI ou Isohemaglutinina, liberar através do ícone importar. Conferir as amostras processadas na tela que será aberta após a seleção do ícone importar. Fechar a janela que foi aberta após a importação e verificar a mensagem importação finalizada. *13 *19 *19 2 Registrar os resultados das amostras com pesquisa de Subgrupo, TAD e as tipagens RhD negativas que foram realizadas pesquisas de D fraco e CDE através da ATV Obs. Casos de discrepância RhD de doadores, deverão ser convocados os receptores do sexo feminino em idade fértil (até 45 anos).outros receptores poderão ser convocados se o médico achar necessário por alguma condição específica, mas não será obrigatório. *19 3 Para amostra com PAI positivo a identificação deverá ser registrada através da ATV Obs.: Registrar o Painel (IAI) no Livro de Painel de Doadores. 4 Emitir a Listagem Geral de TP, PAI, Hb s e Hemaglutinina através da ATV 00610, por ordem de Recebimento, onde as amostras aparecem Em aberto na coluna Conclusão e realizar a primeira conferência dos resultados por duas pessoas, uma pessoa confere o registro fotográfico e a interpretação da microplaca e a outra pessoa confere a listagem, as amostras RhD negativo na microplaca deverão ter a pesquisa de D fraco e CDE conferidas com o cartão-gel e o tubo respectivamente. Após primeira conferência, concluir a rotina das amostras de forma individual utilizando a ATV e/ou concluir a rotina das amostras por lote" utilizando a ATV 01306, realizando a segunda conferência através do SBS. *13 *18 *19 5 Emitir novamente a Listagem Geral de TP, PAI, Hb s e Hemaglutinina Hemolisina através da ATV 00610, por ordem de Recebimento, verificar se todos as amostras aparecem como Concluída através da coluna Conclusão e assinar ambas as pessoas que realizaram as conferências. Emitir listagem dos
6 P.: 6/14 resultados positivos através da ATV e assinar ambas as pessoas que realizaram as conferências. As duas listas deverão ficar arquivadas em pasta específica. Registro da Qualidade. *13 *18 5 Após realizar toda a rotina padrão para amostras de doadores (recebimento, execução, conferência e emissão da listagem geral) descartar as amostras em recipiente apropriado. Procedimento e registro dos resultados para amostras do Banco de Sangue de Cordão Umbilical processadas de forma manual *9 Procedimento para amostras de RN Fazer tipagem ABO direta (TEIH e/ou TEIH 1.1.3); Fazer tipagem RhD (TEIH e/ou TEIH e se negativo TEIH e TEIH 2.2); Fazer TAD (TEIH 3.1 e/ou TEIH 4.4). *13 Obs.: No caso de sangue de cordão umbilical, lavar as hemácias no mínimo sete vezes e seguir técnica normal. Registro dos resultados das amostras de RN no SBS 1 Para amostras de RN será colhido tubo com iniciais de numeração LOCAL: B *12 *13 2 Transferir os resultados ABO, RhD e TAD, anotados nos tubos (para tipagem RhD anotar os resultados em cruzes nos tubos) de códigos de barras para o SBS, através da ATV Se for necessário realizar repetição de tipagem, usar a ATV *13 3 Emitir a Listagem Geral de TP através da ATV 02423, por ordem de Recebimento, Local: 88, onde as amostras aparecem Em aberto na coluna Conclusão e realizar a primeira conferência dos resultados por duas pessoas, uma pessoa confere a microplaca e/ou tubo e a outra pessoa confere a listagem, as amostras RhD negativo na microplaca e/ou tubo deverão ter a pesquisa de D fraco e CDE conferidas com o tubo. Após primeira conferência, concluir a rotina das amostras de forma individual utilizando a ATV 01198, realizando a segunda conferência através do SBS. *12 4 Emitir novamente a Listagem Geral de TP através da ATV 02423, por ordem de Recebimento, Local: 88, verificar se todos as amostras aparecem como Concluída através da coluna Conclusão e assinar ambas as pessoas que realizaram as conferências. A lista deverá ficar arquivada em pasta específica mensal. Registro da Qualidade. *12 5 Após realizar toda a rotina padrão para amostras de doadores (recebimento, execução, conferência e emissão da listagem geral) descartar as amostras em recipiente apropriado. Obs.: Quando uma amostra de RN apresentar TAD positivo, avisar imediatamente o médico responsável do Banco de Sangue de Cordão Umbilical. 8. CONDIÇÕES ESPECÍFICAS 8.1 Condições Específicas do SBS para Procedimento: Consultas: TP e CD ATV (PF), ATV (PF), ATV (amostra) e ATV (amostra). *11
7 P.: 7/14 PAI e IAI ATV (PF), ATV (PF), ATV (amostra) e ATV )1064 (amostra). *11 Hb s ATV (PF) e ATV (amostra). *13 Fenotipagem ATV (amostra / bolsa) e ATV (PF). 8.2 Condições Específicas para Amostras de Doadores com PAI positivo: *11 Para amostras com PAI positivo a identificação de anticorpos deverá ser realizada e um Pedido de Exames para o Laboratório de Imunohematologia (FH 2.66) deverá ser preenchido pelo Assistente de Laboratório responsável pela realização deste exame. *14 Após, enviar o pedido de exame ao médico do serviço para assinatura, autorizando a realização do Painel de Hemácias (identificação do provável anticorpo). Arquivar o pedido de exame (FH 2.66) no laboratório de imunohematologia evidenciando a solicitação do exame pelo médico do serviço. 9. REGISTROS DA QUALIDADE Relatório Geral: ATV Amostras com Resultados Tipagem (R) ATV Amostras com Resultados Positivos (R) ATV Amostras com Resultados Tipagem (SCUP) (R) *9 Soros/Reagentes e Amostras Controles Utilizados na Rotina. (Anexo I) *10 *11 *12 *13 *14 *15 *17 *18 Livro de Painel *9 Equipamentos Utilizados na Rotina *9 FH 2.66 Pedido de Exame. (Anexo III) *11 Livro de Resolução de Discrepâncias ABO/RhD. (Anexo IV) *16 Livro de Resolução de Discrepâncias equipamento NEO : Livro Específico- Livro de Painel. *19 Aprovação Gerente do Laboratório de Imuno-Hematologia *7 Data / / Diretor Responsável Data / / Implementação Gestão da Qualidade Data / /
8 P.: 8/14 ANEXO I *10 *11 *12 *13 *14 *15 *17 *18
9 P.: 9/14 ANEXO I (continuação) *10 *11 *12 *13 *14 *15 *17 *18
10 P.: 10/14 ANEXO II *10
11 P.: 11/14 ANEXO III *11 *12 *13
12 P.: 12/14 ANEXO III (continuação) *11 *12 *13
13 P.: 13/14 ANEXO IV *16
14 P.: 14/14 ANEXO IV (continuação) *16
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