ANEMIAS HEMOLÍTICAS AUTO-IMUNES

Transcrição

1 ANEMIAS HEMOLÍTICAS AUTO-IMUNES ASPECTOS SOROLÓGICOS Maria do Carmo Valgueiro Costa de Oliveira FUNDAÇÃO HEMOPE

2 Resultado da produção de anticorpos contra constituintes do próprio organismo.

3 - Quente - Frio - Induzida por drogas

4 Parâmetros BIOQUÍMICOS Parâmetro IMUNOHEMATOLÓGICO Parâmetros CITOLÓGICOS

5 INTERPRETAÇÃO dos parâmetros laboratoriais Reticulócitos, bilirrubina, DHL Haptoglobina, reticulócitos Teste direto da antiglobulina humana: 98%

6 Teste Direto da Antiglobulina POSITIVO não significa necessariamente que o paciente apresenta hemólise (TDA)

7 TDA positivo: Auto-anticorpos contra antígenos intrínsecos das hemácias Aloanticorpos fixados às hemácias Proteínas ou drogas adsorvidas às hemácias Anticorpos contra drogas ou produzidos pelos linfócitos transplantados Patologias Indivíduos sadios

8 Outras drogas Metildopa IgG IgG + C 3 QUENTE FRIO IgM IgM + C 3

9 Caso 1 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem. B Hem. O TDA 0 2 a 4% dos pacientes AHAI Quantidade insuficiente de moléculas de autoanticorpo fixadas às hemácias AHAI por anticorpos IgA Baixa afinidade do anticorpo IgG

10 Caso 2 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem. B Hem. O

11 INTERFERÊNCIA DE AGLUTININAS FRIAS COM PROVÁVEL ATUAÇÃO DO COMPLEMENTO DIAGNÓSTICO Discrepância ABO Controle Rh positivo Teste direto da antiglobulina positivo AHAI por anticorpos frios Caso 2 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem. B Hem. O

12 Caso 3 Caso 3.1 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem. B Hem. O PAI 0 Caso 3.2 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem. B Hem. O PAI +++

13 PRESENÇA DE ANTICORPOS IgG FIXADOS ÀS HEMÁCIAS, COM OU SEM INTERFERÊNCIA DO COMPLEMENTO Controle Rh positivo Teste direto da antiglobulina positivo DIAGNÓSTICO AHAI por anticorpos quentes Caso 3.1 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem. B Hem. O PAI Caso 3.2 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem. B Hem. O PAI

14 aloanticorpo + autoanticorpo

15 TDA ( ) Eluir à 37ºC TDA (+) Classificação do autoanticorpo Dispersão DTT Caso 2 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem. B Hem. O

16 Adsorver auto-aglutininas frias do soro com hemácias autólogas não tratadas ou tratadas com ZZAP Pesquisar e identificar o aloanticorpo no soro absorvido Caso 2 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem.B Hem. O

17 TDA ( 0 ) Dispersar aglutininas com salina a TA TDA ( + ) Classificar o autoanticorpo em tubo ou gel Retipar com anti-d salino ou monoclonal Dissociar os autoanticorpos quentes pela cloroquina Eluir: alo ou auto-anticorpos? Caso 3.1 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem. B Hem. O Caso 3.2 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem. B Hem. O PAI 0 PAI +++

18 Cloroquina DISSOCIAÇÃO Glicina ácida EDTA Vantagens Dissocia anticorpos IgG Fenotipagem Adsorção Tratamento das hemácias Remove antígenos Bg

19 DISSOCIAÇÃO Cloroquina Não dissocia complemento Pode desnaturar antígenos Rh Pode não remover totalmente o anticorpo Fenotipagem com reagentes proteicos Desvantagens Glicina ácida EDTA Destruição dos antígenos do sistema Kell Uso exclusivo: AGH IgG Danos irreversíveis à membrana, se exceder o tempo de incubação

20 Adsorver autoanticorpos quentes hemácias autólogas ou homólogas enzimas, ZZAP, PEG Diluir soro 1/2 ou 1/5 0 identificação 0 de aloanticorpos Caso 3.1 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem. B Hem. O PAI Caso 3.2 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem.B Hem. O PAI

21 Técnica do pré-aquecimento Anemia hemolítica a frio Uso de AGH IgG Autoadsorção a frio Adsorção autóloga a quente (ZZAP ou PEG) autocontrole (+) sem história de transfusão recente Adsorção homóloga (ZZAP ou PEG) Anemia hemolítica a quente Diluição do soro

22 Anemia hemolítica a quente autocontrole (+) com história de transfusão recente Eluição Adsorção autóloga a quente (ZZAP ou PEG) Adsorção homóloga (ZZAP ou PEG): remoção somente de auto-anticorpos

23 ELUIÇÃO Fenotipagem Tratamento enzimas Adsorção Adsorção Investigação DHRN-ABO Pequenos volumes de hemácias Fenotipagem (exceto antígenos desnaturados) ÁCIDO CÍTRICO ÁCIDO A FRIO (Glicina HCL) CALOR 56ºC LUI ZZAP Enfraquecimento dos antígenos do Sistema Kell Menos sensível para alo/auto-anticorpos quentes Pobre para reconhecer outros alo/autoanticorpos Pobre para reconhecer outros alo/autoanticorpos Desnatura antígenos M, N, S, Fya, Fyb, K, s

24 IDENTIFICAÇÃO DE AUTO-ANTICORPOS NO ELUATO ESPECIFICIDADE Anticorpos IgG Rh, anti-lw, -U, -K, -Kpa, -Jsa, -Ge Anticorpos IgG (metildopa) Rh Negativo anti-drogas

25 VANTAGEM Eliminação da interferência dos autoanticorpos ADSORÇÃO ZZAP PEG SORO ADSORVIDO Teste: hemácias triagem I e II DESVANTAGENS Paciente recentemente transfundido Adsorção de aloanticorpos clinicamente significantes Negativo: anticorpo adsorvido Positivo: novas adsorções

26 VANTAGEM Praticidade DILUIÇÃO DESVANTAGENS Leger e Garratty 22% autoanticorpos não reativos 27% aloanticorpos significantes não identificados

27 Desnatura os antígenos dos sistemas MNS, Duffy, Kell ZZAP PEG Genotipagem do paciente R1R1 Jk(a- b+) Fy (a+ b-) S+ s- R1R1 Jk(a- b+) 1/1.400 doadores 1/33 doadores Fenotipagem do paciente Tempo Custo Realce de anticorpos fracos DILUIÇÃO

28 Obrigada