Cromatografia em Camada Delgada (CCD) Caio César Furuno Carlos Gabriel Gibelli Fernando José Meira da Silva

Transcrição

1 Cromatografia em Camada Delgada (CCD) Caio César Furuno Carlos Gabriel Gibelli Fernando José Meira da Silva

2 Introdução

3 O que é cromatografia? Método Físico Químico Separação de componentes de uma mistura Distribuição dos componentes em duas fases Necessário contato intimo

4 Tipos de Cromatografia

5 Tipos de fases: Fase Estacionária: É formada por um material escolhido para reter de forma diferenciada os componentes da amostra que se deseja separar ; Fase móvel: É um material que se desloca pela fase estacionaria, arrastando os componentes da amostra. O que é Matriz? Material poroso, natural ou sintético, inerte, insolúvel em água e em solventes orgânicos, apresentando ligações covalentes a grupos trocadores iônicos.

6 Princípios das cromatografias: Cromatografia em papel (CP): Pequena quantidade de amostra; Separação e identificação de compostos polares por diferentes solubilidades; Boa capacidade de resolução. Cromatografia em camada delgada: Separação através da migração diferencial sobre uma camada delgada de adsorvente retido; Baixo custo devido sua versatilidade e grande reprodutibilidade em curto espaço de tempo; Fenômenos de adsorção usando fases estacionarias.

7 Cromatografia por adsorção: Liquido-sólido; Coluna recheada com um sólido (fase estacionaria) e uma fase móvel liquida; Sorção isotérmica; Colunas. Por que é utilizada? Tecnicamente mais simples; Não é necessária instrumentação esmerada; Monitorada por cromatografia em camada delgada.

8 Cromatografia por troca iônica: Tentar resolver problemas analíticos de investigação bioquímica; Fase estacionaria altamente carregada; Deslocamento de íons; Afinidade eletrostática; Adsorção reversível e diferencial dos íons da fase móvel; Matriz de trocador ; Superfície de contato; Aplicações: Desionizações de água e de licores açucarados; Análise de íons e sua eliminação; Na pesquisa e Industrias.

9 Cromatografia por Exclusão: Seletiva e dinâmica distribuição das moléculas do soluto; Tamanho dos poros; Volume da matriz da fase móvel estacionaria ; Eluição; Propriedades: Simplicidade técnica; Insensibilidade a solventes e temperatura; Versatilidade. Aplicações: Separação de substancias ou purificação; Dessalificação preparatório para liofilização; Determinação de massa molecular ou tamanho de proteínas; Controle de qualidade; Determinação de constantes de equilíbrio e separação de células e partículas

10 Cromatografia por Bioafinidade: Propriedades biológicas ou funcionais; Isolamento seletivo de macromoléculas biológicas; Imobilização covalente de ligantes; Eluição. Cromatografia gasosa: Distribuição das substancias; Temperaturas; Excelente técnica quantitativa; Pode detectar cerca de g da substancia; Análise de substancias voláteis e estáveis termicamente. Não é uma técnica qualitativa efetiva.

11 Cromatografia liquida de alta eficiência: É a mais importante técnica de separação; Instrumentos muito sofisticados; Pequenas colunas contendo materiais e fase móvel eluída sob altas pressões; Separações e analises quantitativas em pequeno espaço de tempo; Sistemas de bombeamento; Sistemas de detecção Aplicações; Principais características: Versatilidade; Rapidez; Reprodutibilidade; Estabilidade; Sensibilidade.

12 Cromatografia em Camada Delgada (CCD)

13 Tópicos de CCD Principais características Instrumentos Adsorventes RF Técnica Desenvolvimento Influencias Analise quantitativa Aplicações Cromatografia em camada delgada de alta eficiência

14 Fluxograma

15 Referências Bibliográficas Braga, G. L. Introdução a métodos cromatográficos 6 Edição, 1995, Editora da Unicamp;