VIABILIDADE E ATIVIDADE ANTIOXIDANTE DE SEMENTES DE GENÓTIPOS DE FEIJÃO-MIÚDO SUBMETIDOS AO ESTRESSE SALINO 1

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1 711 VIILIDDE E TIVIDDE NTIOXIDNTE DE SEMENTES DE GENÓTIPOS DE FEIJÃO-MIÚDO SUMETIDOS O ESTRESSE SLINO 1 Cristine Deuner 2 ; Mnoel de Souz Mi 3 ; Sidnei Deuner 4 ; ndréi d Silv lmeid 5 ; Géri Edurdo Meneghello 6 RESUMO - O presente trlho teve por ojetivo vlir o efeito de diferentes onentrções slins n germinção, produção iniil de iomss e estresse oxidtivo de qutro genótipos de feijão-miúdo de uso omum n região de São José do Norte-RS. s sementes dos genótipos mendoim, Mosquedo, io e Preto form semeds em rolos de ppel germitest emeido em solução de loreto de sódio ns onentrções de zero, 5, 1, 15 e 2 mm e olodos pr germinr tempertur onstnte de 25 ºC. Os prâmetros vlidos form: germinção, primeir ontgem de germinção, omprimento e mss se d prte ére e de rízes ds plântuls, peroxidção de lipídios e tividde espeífi ds enzims ntioxidntes superóxido dismutse, sorto peroxidse e tlse. O umento d onentrção de sl usou efeito negtivo à germinção e primeir ontgem ds sementes dos qutro genótipos de feijão-miúdo prtir do trtmento om 1 mm de sl. Qunto os prâmetros de resimento, nálise onjunt ds urvs de regressão, mostrou hver igul tendêni pr os qutro genótipos, om redução expressiv no resimento onomitnte o umento do estresse slino. Os efeitos desse estresse tmém form evidenidos pelo umento n peroxidção de lipídios no trtmento om 2 mm de sl, seguido pel menor pidde ntioxidnte ds enzims, um vez que, ns onentrções intermediáris de sl, s enzims ntioxidntes turm de form efiiente n eliminção ds espéies retivs de oxigênio (EROs), evitndo o estresse oxidtivo. Estes resultdos permitem onluir que, ns doses intermediáris de sl, houve um om desenvolvimento iniil pr os qutro genótipos de feijão-miúdo, sendo melhor respost otid no genótipo mendoim. Termos pr indexção: Vign unguiult L., slinidde, germinção, resimento e estresse oxidtivo. VIILITY ND NTIOXIDNT CTIVITY IN SEEDS OF COWPE GENOTYPES SUMITTED TO SLT STRESS STRCT - This study imed to evlute the effet of different slt onentrtions on the germintion, initil iomss nd oxidtive stress of four owpe genotypes, ommonly grown in the São José do Norte region, RS. The seeds of the genotypes mendoim, Mosquedo, 1 Sumetido em 23/12/21. eito pr pulição em 9/5/ Eng. gr., mestrnd do Progrm de PPG em Ciêni e Tenologi de Sementes, Deprtmento de Fitoteni, Universidde Federl de Pelots (UFPel), Cmpus Universitário S/N, 961-9, Pelots, RS. E-mil: deuner@yhoo.om.r 3 Eng. gr., Dr., Prof. ssoido do Deprtmento de Fitoteni d Fuldde de gronomi Eliseu Miel, Progrm de PPG em Ciêni e Tenologi de Sementes - UFPel. Cmpus Universitário S/N, 961-9, Pelots, RS. E-mil: mims@ufpel.edu.r 4 Eng. gr., Dr., Pesquisdor Emrp Cerrdos, R 2, km18, Cx. Postl 8223, , Plnltin, DF. E-mil: sidnei.deuner@p. emrp.r 5 iólog, doutornd do Progrm de PPG em Ciêni e Tenologi de Sementes, Deprtmento de Fitoteni - UFPel, Cmpus Universitário S/N, 961-9, Pelots, RS. E-mil: ndreilmeids@hotmil.om 6 Eng. gr., Dr., Deprtmento de. Fitoteni d Fuldde de gronomi Eliseu Miel, Progrm de PPG em Ciêni e Tenologi de Sementes - UFPEL. Cmpus Universitário S/N, 961-9, Pelots, RS. E-mil: geriem@ufpel.edu.r * utor pr orrespondêni. Revist rsileir de Sementes, vol. 33, nº 4 p , 211

2 712 C. DEUNER et l. io nd Preto were plnted in rolls of germitest pper, soked in solution of sodium hloride t onentrtions of zero, 5, 1, 15 nd 2 mm nd pled to germinte t onstnt temperture of 25 o C. Vriles studied were: germintion, first ount, length nd dry mss of the shoots nd roots of seedlings, lipid peroxidtion nd the speifi tivity of superoxide dismutse, sorte peroxidse nd tlse. Inresing slt onentrtion dversely ffeted seed germintion nd lso the first ount of the four owpe genotypes for the 1 mm slt tretment. Joint nlysis of the regression urves for the growth prmeters showed the sme tendeny for the four genotypes, with signifint growth redution s slt stress inresed. Stress effets were lso evident from inresed lipid peroxidtion in the2 mm slt tretment, followed y redued enzyme ntioxidnt tivity, sine in the intermedite slt onentrtions, the ntioxidnt enzymes effiiently eliminted retive oxygen speies (ROS), preventing oxidtive stress. These results indite tht, t intermedite doses of slt, there ws good initil development of the four owpe genotypes nd the est response ws oserved in the mendoim genotype. Index terms: Vign unguiult L., slinity, germintion, growth nd oxidtive stress. INTRODUÇÃO O feijão-miúdo (Vign unguiult (L.) Wlp), importnte leguminos nul, é enontrdo em todo território nionl. No Rio Grnde do Sul (RS) mior produção enontr-se nos muniípios de São José do Norte, Tvres e Mostrds, onde há pouo mis de um déd, form identifidos genótipos om elevd produção de iomss, ltmente dptdos solos om ix fertilidde, onforme oorrêni n plníie osteir do Estdo e tmém no nordeste rsileiro (evilqu et l., 27). Estim-se que estes genótipos tenhm sido introduzidos n região om hegd dos olonizdores çorinos, em Ns regiões Norte e Nordeste do pís, o feijão-miúdo é muito utilizdo n limentção humn. N região Sul, é empregdo omo oertur mort, reuperção de solos e limentção niml (rújo et l., 1984), espeilmente pel su importâni n melhori d qulidde e produtividde ds pstgens, resultndo em mior produção de rne e leite por niml, tnto em ultivo singulr omo em onsorição om milho ou milheto (evilqu et l., 27). Entretnto, estudos er do omportmento fisiológio ds sementes frente ondições dverss prtimente são inexistentes. Há ftores mientis, denomindos estresses ou distúrios mientis, que limitm produtividde gríol (shrf e Hrris, 24). slinidde é um dos mis importntes ftores de estresse iótio, fetndo diversos spetos d fisiologi e ioquími ds plnts, reduzindo signifitivmente seus rendimentos. lts onentrções exógens de sl fetm germinção ds sementes, usndo défiit hídrio e desequilírio iônio ns éluls, resultndo em toxiidde e estresse osmótio (Khn e Pnd, 28). Condições de elevd slinidde podem ser usds por diversos ftores, omo prátis indequds de irrigção, inundção do solo pel águ do mr em regiões osteirs, omo tmém depósito de lts onentrções de loreto de sódio (NCl) em regiões om reente históri geológi mrinh (Tester e Dvenport, 23). O termo slino pli-se solos uj ondutâni elétri é mior que 4 mmhos m C (llison et l., 1985). Enqunto plnts hlófits são pzes de reser em solos om onentrções de sis de té 2%, s gliófits, que envolvem miori ds plnts ultivds, têm seu resimento iniido em onentrções d ordem de,3%,5%. tolerâni de plnts à slinidde é vriável em função do ilo fenológio ou do seu estádio de desenvolvimento. Espéies omo sorgo, milho, feijão e trigo são menos fetds durnte fse iniil do seu ilo (Ms et l., 1986), entretnto, outrs espéies, são stnte sensíveis durnte florção e frutifição. Dest form, menismos de defes ntioxidnte podem onstituir-se em estrtégi pr umentr tolerâni o estresse slino (Hernández et l., 21). O feijão-miúdo é onsiderdo moderdmente tolernte à slinidde, toler irrigção om águ slin om ondutividde elétri de té 3,3 ds m -1 e um ondutividde elétri do solo de 4,9 ds m -1 (yers e Westot, 1999), sem redução n produtividde. No entnto, esse vlor limir pode ser vriável em função d existêni de vriilidde genéti intrespeífi em relção ess rterísti, ds ondições limátis d região e Revist rsileir de Sementes, vol. 33, nº 4 p , 211

3 SLINIDDE E QULIDDE FISIOLÓGIC DE SEMENTES DE FEIJÃO-MIÚDO 713 do método de irrigção utilizdo (Cost et l., 23). s onentrções de sis que restringem o resimento do feijão vrim mplmente entre s vrieddes, e dependem não só do tipo de sl, ms tmém do tempo de exposição e do seu estádio de desenvolvimento. Segundo mdor et l. (26), o feijão-miúdo present tolerâni à slinidde superior à do milho, ms inferior o trigo, evd, eterr çureir e lgodão. Pr os genótipos de feijão-miúdo ultivdos n região sul do rsil, há pouos estudos sore seu omportmento em mientes slinos. Dest form, su rterizção permite mplir o onheimento er dest espéie, servindo de ferrment pr identifição de possíveis vrições que uxiliem n seleção dos genótipos mis dptdos ondição de slinidde. Estes resultdos são importntes um vez que, espéie possui ppel fundmentl n eonomi d região de São José do Norte- RS, devido o seu ultivo ser destindo priniplmente à otenção de forrgem pr o renho leiteiro e melhori d fertilidde do solo em áres mrginis. Dest form, o ojetivo dest pesquis foi vlir o efeito de diferentes onentrções slins n germinção, produção iniil de iomss e resposts ntioxidntes de qutro genótipos de feijão-miúdo de uso omum n região de São José do Norte-RS. MTERIL E MÉTODOS O trlho foi desenvolvido no Lortório Didátio de nálise de Sementes do Deprtmento de Fitoteni, d Fuldde de gronomi Eliseu Miel, Universidde Federl de Pelots (UFPel), Pelots-RS. O mteril estuddo form sementes de qutro genótipos de feijão-miúdo denomindos populrmente de mendoim, Mosquedo, io e Preto, produzidos n sfr 29 no muniípio de São José do Norte-RS. s sementes de d genótipo form semeds em rolos de ppel germitest emeido n quntidde de 2,5 vezes o seu peso iniil om solução de loreto de sódio (NCl) pr simulr o estresse slino, ns onentrções de 5, 1, 15, 2 mm, lém do trtmento ontrole, sem sl. Depois de esteleidos os diferentes trtmentos, s sementes form olods pr germinr em germindor om tempertur onstnte de 25 ºC. s vriáveis estudds form: germinção, primeir ontgem de germinção, omprimento e mss se d prte ére e ds rízes ds plântuls, peroxidção de lipídios e tividde espeífi ds enzims ntioxidntes, superóxido dismutse (SOD), sorto peroxidse (PX) e tlse (CT). Teste de germinção - onduzido om qutro repetições de 5 sementes e três repetições por trtmento. s vlições form relizds os ino e oito dis pós semedur, onforme s Regrs pr nálise de Sementes - RS (rsil, 29). Primeir ontgem do teste de germinção - relizd juntmente o teste de germinção vlid no quinto di pós semedur, segundo s RS (rsil, 29). Comprimento de prte ére e rdiulr - form utilizds três repetições de 25 sementes por trtmento, ds quis mediu-se o omprimento d prte ére e d riz prinipl, no oitvo di pós semedur (finl do teste de germinção), om uxílio de um régu grdud (mm). Mss se ds prtes ére e rdiulr - s mesms plântuls utilizds pr determinção do omprimento d prte ére e rdiulr tiverm sus prtes seprds e olods em sos de ppel pr ser em estuf 7 ºC ± 2 C té peso onstnte, qundo foi determind mss se. Os otilédones form desrtdos e não form onsiderdos n vlição deste prâmetro. Peroxidção de lipídios - quntifid por meio d determinção de espéies retivs o áido tioritúrio (TRS), onforme desrito por uege e ust (1978). Teidos folires form merdos em N 2 líquido resido de 2% de PVPP e homogeneizdo em áido triloroétio (TC),1% (p/v). O homogeneizdo foi entrifugdo 1.g, por 1 minutos. Duzentos e inqüent mirolitros do sorendnte form diiondos 1 ml do meio de reção (,5% (p/v) de áido tioritúrio (T) e 1% (p/v) de TC), inundo-se, em seguid, 95 o C, por 3 minutos. reção foi prlisd por resfrimento rápido em gelo e s leiturs determinds em espetrofotômetro, 535 nm e 6 nm. onentrção do omplexo entre ldeído mlônio/áido tioritúrio (MD/T) foi luld usndo o oefiiente de extinção 1,55 mm -1 m -1. tividde enzimáti - determind prtir d merção de 2 mg de teido vegetl n presenç de 5% de polivinilpolipirolidon (PVPP) e homogeneizdo em 1,8 ml do tmpão de extrção omposto por: fosfto de potássio 1 mm (ph 7,8), EDT,1 mm e áido sório 1 mm. pós entrifugção 12.g por 15 minutos, 4 o C, o sorendnte foi oletdo. O extrto otido pel entrifugção foi utilizdo pr quntifição ds proteíns em espetrofotômetro 595 nm pelo método de rdford (1976) e determinção d tividde espeífi ds enzims ntioxidntes, desrit seguir. Revist rsileir de Sementes, vol. 33, nº 4 p , 211

4 714 C. DEUNER et l. tividde d SOD foi vlid pel pidde d enzim em iniir fotorredução do zul de nitrotetrzólio (NT) (Ginnopolitis e Ries, 1977), em um meio de reção omposto por fosfto de potássio 1 mm (ph 7,8), metionin 14 mm, EDT,1 μm, NT 75 μm e rioflvin 2 μm. s leiturs form relizds 56 nm. Um unidde d SOD orresponde à quntidde de enzim pz de iniir em 5% fotorredução do NT ns ondições de ensio. tividde d PX foi determind segundo Nkno e sd (1981), pel vlição d tx de oxidção do sorto 29 nm. O meio de reção inudo 28 o C foi omposto de tmpão fosfto de potássio 1 mm (ph 7,), áido sório,5 mm e H 2,1 mm. tividde d CT foi determind onforme zevedo et l. (1998), estimd pelo derésimo n sorâni 24 nm durnte 2 min em um meio de reção ontendo fosfto de potássio 1 mm (ph 7,) e H 2 12,5 mm. Os ddos form sumetidos à nálise de vriâni e regressão utlizndo-se metodologi desrit pr regressão polinomil trvés do Progrm Esttístio WinStt 1.. RESULTDOS E DISCUSSÃO nlisndo os ddos trvés d nálise de regressão, foi oservdo efeito signifitivo ds onentrções slins sore germinção e o resimento de plântuls pr os qutro genótipos de feijão-miúdo (Figur 1). Germinção (%) Comprimento Prte ére (m) Mss Se Prte ére (g) ,2 1,,8,6,4 mendoim Mosquedo io Preto y = -4,743x 2 +,4x + 1,22 R² =,99 y M = -4,93x 2 +,5x + 1,23 R² =,96 y = -5,27x 2 +,5x + 1,28 R² =,97 y P = -4,761x 2 +,4x + 1,27 R² =,97 y = -,x 2 -,3x + 8,471 R² =,98 y M = -,x 2 -,52x + 14,73 R² =,96 y = -3,571x 2 -,52x + 11,86 R² =,99 y P = -,x 2 -,36x + 13,65 R² =,79 y = -1,987x2 + 6,4x +,721 R² =,91 y M = -2,135x2 -,x +,852 R² =,94 y = -1,362x2 -,2x +,976 R² =,9,2 y P = -1,754x2-,x +,761 R² =,84, Conentrções de NCl (mm) 1º Contgem de Germinção (%) Comprimento Riz (m) Mss Se Rdiulr (g) ,3,25,2,15,1 mendoim Mosquedo io Preto y M = -,81x 2 -,5x + 1,32 R² =,83 y = -,63x 2 -,129x + 1,37 R² =,85 y P = -,6x 2 -,148x + 1,39 R² =,86 y = -,54x 2 -,147x + 1,31 R² =,86 y = -3,21x 2 -,41x + 9,76 R² =,96 y M =,x 2 -,139x + 18,71 R² =,98 y =,x 2 -,98x + 15,2 R² =,96 y P = 7,47x 2 -,91x + 15,52 R² =,95 y = -3,438x2 -,x +,188 R² =,92 y M = -3,971x2 -,x +,244 R² =,92 y = -4,542x2 -,x +,249 R² =,91,5 y P = -4,517x2-,x +,2 R² =,88, Conentrções de NCl (mm) FIGUR 1. Germinção (), primeir ontgem de germinção (), omprimento d prte ére (C), omprimento de riz (D), mss se de prte ére (E) e mss se de riz (F) de qutro genótipos de feijãomiúdo identifidos pel letr iniil (mendoim, io, Mosquedo e Preto) sumetidos diferentes onentrções de NCl. Revist rsileir de Sementes, vol. 33, nº 4 p , 211

5 SLINIDDE E QULIDDE FISIOLÓGIC DE SEMENTES DE FEIJÃO-MIÚDO 715 N usêni de sl, os genótipos presentrm médi de germinção ds sementes de 93% (Figur 1). Estes vlores se mntiverm té onentrção de 1 mm de NCl, rterizndo não hver efeito signifitivo dos trtmentos slinos om onentrções iguis ou inferiores 1 mm sore germinção ds sementes. Por outro ldo, ns onentrções mis elevds, 15 e 2 mm de NCl, houve redução grdul n germinção, hegndo vlores inferiores 1% n mior onentrção testd pr os genótipos mendoim, io e Preto e 15% pr o Mosquedo. primeir ontgem do teste de germinção, vlid ino dis pós semedur (Figur 1) rterizou o efeito do estresse slino no retrdo d germinção, onde, prtir d onentrção de 5 mm de NCl foi oservd tendêni de redução pr est vriável. Dest form, ssim omo n vlição finl (Figur 1), pr o trtmento ontrole e om 5 mm de NCl germinção prtimente já se enontrv estilizd, porém, ns onentrções de 15 e 2 mm ind não hvim sementes germinds, demonstrndo o efeito negtivo do estresse slino sore est vriável. Resultdos semelhntes form enontrdos por Mores e Menezes (23) em sementes de soj e por Mhdo et l. (26) em sementes de feijão, onfirmndo diminuição d germinção om redução do potenil osmótio ds soluções no sustrto. Em rroz, Lim et l. (25) verifirm derésimo n germinção em tods s ultivres, em função do umento n onentrção slin, e sugerirm que slinidde fet o desenvolvimento de plântuls normis e diminui viilidde e o vigor ds sementes. Pr Vn Der Moezel e ell (1987), o NCl fet germinção pelo efeito osmótio e/ou pelo efeito iônio, difiultndo sorção de águ ou filitndo penetrção de íons ns éluls. Porém, o omportmento ds plnts om relção à slinidde pode vrir de ordo om o seu estádio de desenvolvimento, emor não sej lro se isto é devido à suseptiilidde à slinidde em um determindo estádio de resimento ou o longo do período em que plnt fiou expost o sustrto slino, ou interção entre esses ftores. nlisndo o omprimento d prte ére (Figur 1C) e rdiulr (Figur 1D), trvés do juste ds urvs de regressão pr os qutro genótipos, foi oservdo que os mesmos presentrm tendêni semelhnte frente os trtmentos esteleidos. Pr s medids efetuds ns plântuls do trtmento ontrole, os vlores oservdos entre os qutro genótipos presentrm onsiderável diferenç, porém, om plição do estresse slino e o umento ds sus onentrções, houve qued onstnte ns vriáveis omprimento de prte ére e rdiulr, hegndo vlores próximos entre os genótipos ns miores onentrções de sl testds. É importnte destr que pr onentrção de 2 mm de NCl, houve pens o iníio d protrusão d riz primári, não sendo, dest form, mensurdos seus prâmetros de resimento. Nem tods s prtes d plnt são igulmente fetds pel slinidde, em omo, dptção o estresse slino vri entre espéies e em um mesmo genótipo pode vrir entre estádios fenológios (Morles et l., 21). Dest form, os efeitos d slinidde são mnifestdos n redução ds txs de germinção e de resimento, diminuição do rendimento, e, em ertos sos severos, podem usr morte generlizd ds plnts (ernrdo et l., 25). De ordo om Ms (1993), muits ulturs são suseptíveis à injúri durnte emergêni no solo e durnte o resimento iniil d plântul. Um vez esteleids, s plnts umentm tolerâni durnte os estádios de resimento seguintes. vlindo dus ultivres de feijão-miúdo, Vit 3 e Vit 5, um tolernte e outr sensível à slinidde, respetivmente, sumetids o trtmento om 1 mm de NCl, rgão et l. (25) verifirm mior influêni d slinidde n ultivr Vit 5, oorrendo redução no resimento ds rízes, d prte ére e n áre folir. No entnto, os onteúdos de lorofil, em omo os prâmetros de fluoresêni não form fetdos. Reduções no número de folhs, áre folir, ltur e diâmetro do ule tmém form oservds por Lim et l. (27) em plnts de feijão-miúdo pelo umento d slinidde d águ de irrigção. iniição do resimento osiond pel slinidde, segundo Priso e O lery (197), não é devid pens o efeito tóxio dos sis, ms tmém à se fisiológi produzid, pois o oorrer umento d onentrção de sis no sustrto, há diminuição do potenil osmótio e, onseqüentemente, qued no potenil hídrio, podendo fetr inéti de sorção de águ pels sementes (efeito osmótio), omo tmém elevr níveis tóxios onentrção de íons no emrião (efeito tóxio). No presente trlho, em respost à redução do resimento ds plântuls, slinidde tmém fetou produção de mss se de ms s prtes ds Revist rsileir de Sementes, vol. 33, nº 4 p , 211

6 716 C. DEUNER et l. plântuls pr os qutro genótipos de feijão-miúdo. Com o umento ds onentrções slins houve qued onstnte n produção de mss se tnto n prte ére (Figur 1E) qunto ns rízes (Figur 1F), ssim omo oservdo n vriável omprimento ds prtes. Estes resultdos demonstrm que elevds onentrções de sl fetm signifitivmente o desenvolvimento norml ds plântuls de feijão-miúdo. Emor, trvés do juste ds urvs de regressão, os qutro genótipos tenhm presentdo mesm tendêni, é possível oservr que o mendoim tendeu um menor delividde ds urvs pr os prâmetros nlisdos, sendo, dest form, o genótipo que menos foi fetdo pelo efeito slino. sensiilidde os diferentes níveis de estresse pode vrir de genótipo pr genótipo e em função do tempo de exposição o mesmo. Durnte o ondiionmento osmótio oorrem inrementos no teor de proteíns solúveis e enzims espeífis, segundo Smith e Co (1991), o que proporion mior onentrção de solutos, podendo resultr em resimento mis rápido e mior úmulo de iomss. Porém, este omportmento é mis reorrente em onentrções slins menores, não tóxis, o que pode explir menor redução no omprimento d prte ére e produção de mss ns onentrções mis ixs de sl pr os genótipos estuddos. Qundo em onentrções mis elevds, o estresse slino provo redução no resimento ds plântuls, exemplo do oservdo pr os qutro genótipos de feijãomiúdo. Este ftor é triuído à diminuição n sorção de águ, seguido por hidrólise limitd de reservs limentres prtir de teidos de rmzenmento, em omo devido à trnsloção defiiente ds reservs limentres dos teidos de rmzenmento pr o eixo em desenvolvimento (Khn e Pnd, 28). Em plnts de Vign rdit doses de té 15 mm de NCl expressrm umento de mss se de ule, enqunto o mesmo foi oservdo pr s folhs té dose de 1 mm. Ns rízes o estresse slino não fetou mss se, destndo que s plnts deste experimento permneerm so efeito slino somente por 24 hors (Pnd e Khn, 29). Lim et l. (27) oservrm omportmento distinto, om derésimo liner d mss se d prte ére e ds rízes de feijão-miúdo, v Qurentinh, à medid que se umentou slinidde d águ de irrigção, sendo s vlições relizds 45 dis pós semedur, om plição d águ slin prtir do sexto di. Estes resultdos omprovm que ondição experimentl e tmém o estádio de desenvolvimento do vegetl, podem resultr em resposts distints, o que pode ser minimizdo e mis representtivo trvés d indução do estresse slino desde germinção, omo foi relizdo no presente trlho. vlindo tolerâni de 5 genótipos de feijãomiúdo, em ondições de s de vegetção, sumetidos diferentes níveis de slinidde, Dnts et l. (22) onluírm que, om o umento d slinidde oorreu redução n produção de mss se em todos os genótipos estuddos. ind, os mesmos utores, itm que o teor de proteíns nos grãos, em função d slinidde do solo, independe d tolerâni do genótipo à slinidde n fse de resimento. Em estudo sore o efeito do sl no resimento e metolismo de feijão-miúdo, Ferreir (25) onsttou que houve redução d mss se de riz ns onentrções de 25 mm e 5 mm e de ule pens em 5 mm. Pesquiss om diferentes espéies tmém têm demonstrdo o efeito negtivo d slinidde sore o resimento ds plnts, exemplo, em pepino (Torres et l., 2), em trigo (Durte et l., 26), melni (Torres, 27), dentre outros. toxiidde iôni é outro ftor que pode usr redução do resimento ds plnts so estresse slino, desendendo dnos às memrns, redução d tividde de enzims hidrolítis, umento nos níveis de peroxidção de lipídios e estimulr formção de EROs (Ess, 28). Os dnos usdos pelo sl às memrns elulres, devido à peroxidção dos lipídios, estão representdos pelo umento dos níveis de mlondildeído (MD) (Figur 2). Os resultdos mostrm que todos os genótipos de feijão-miúdo presentrm umento signifitivo n peroxidção de lipídios n onentrção de 2 mm de NCl, sendo que, os dnos form mis expressivos nos genótipos Mosquedo, io e Preto, diferindo do genótipo mendoim. Ns demis onentrções testds, em relção o ontrole, somente o genótipo Preto expressou umento signifitivo om 15 mm. Isto demonstr que onentrções elevds, omo no presente so, 2 mm de NCl, podem usr dnos irreversíveis s memrns elulres, fetndo severmente su funionlidde e integridde (Edrev, 25). Estes resultdos estão de ordo om Pnd e Khn (29), onde os utores oservrm umentos n peroxidção de lipídios em Vign rdit so estresse slino, sendo signifitivo em relção o ontrole ns rízes, ules e folhs pr tods s doses de NCl testds (5, 1 15 mm). Revist rsileir de Sementes, vol. 33, nº 4 p , 211

7 SLINIDDE E QULIDDE FISIOLÓGIC DE SEMENTES DE FEIJÃO-MIÚDO 717 MD, nmol g -1 MF mendoim Mosquedo io Preto SOD (U mg -1 Prot) PX (mmol S min -1 mg -1 Prot) 3, 2,5 2, 1,5 1,,5, Conentrções de NCl (mm) CT (µmol H 2 min -1 mg -1 Prot),3,25,2,15,1,5, C C Conentrções de NCl (mm) FIGUR 2. Peroxidção de lipídios () e tividde espeífi ds enzims superóxido dismutse - SOD (), sorto peroxidse - PX (C) e tlse - CT (D) em plântuls de qutro genótipos de feijão-miúdo sumetids diferentes onentrções de NCl. Médis seguids pel mesm letr miúsul (entre genótipos) e minúsul (entre trtmentos) não diferem entre si pelo teste de Tukey (p,5). Com o umento do estresse, formção de EROs é intensifid e su eliminção deve oorrer de form onstnte pr evitr o estresse oxidtivo. Dest form, ção sinronizd ds enzims responsáveis pel remoção ds EROs onfere mior tolerâni s plnts so ondições de estresse. superóxido dismutse (SOD), primeir enzim tur no sistem ntioxidnte, relizndo dismutção do rdil superóxido ( - ) peróxido de hidrogênio (H 2 ), presentou tividde signifitivmente superior o ontrole em tods s doses de NCl vlids (Figur 2), rterizndo um efiiente detoxifição ds EROs, priniplmente té onentrção de 15 mm de NCl, onde su tividde foi máxim. Por outro ldo, tividde d SOD entre os genótipos em d trtmento não diferiu. O H 2, gerdo pel tividde d SOD tmém é tóxio élul, podendo filmente permer trvés ds memrns, devendo ser detoxifido (Meloni et l., 23). Revist rsileir de Sementes, vol. 33, nº 4 p , 211

8 718 C. DEUNER et l. Este proesso é feito pel sorto peroxidse (PX) e/ ou tlse (CT), s quis pertenem dus diferentes lsses de enzims de limpez devido s sus diferençs n finidde pelo H 2, om PX n ordem de μm e CT em mm. ssim, enqunto PX seri responsável pel modulção refind ds EROs pr sinlizção, CT seri responsável pel remoção do exesso de EROs gerdo durnte o estresse (Mittler, 22). Entre os qutro genótipos de feijão-miúdo estuddos, foi oservdo omportmento distinto n tividde d PX e CT. tividde d PX (Figur 2C) foi signifitivmente superior o ontrole no trtmento 5 mm de NCl pr os genótipos io e Preto, já em 1 mm de NCl, todos os genótipos presentrm umento signifitivo, rterizndo um efetiv eliminção do H 2 origindo pel tividde d SOD (Figur 2). Por outro ldo, no trtmento om 15 mm, onde houve máxim tividde d SOD, PX já não tuou mis de form efiiente, sendo mis evidente no trtmento om 2 mm de NCl, om tividde inferior oservd no ontrole. umentos n expressão d PX tem sido reltdos em plnts sumetids trtmentos om NCl por (Kwski et l., 21). tividde d CT (Figur 2D), em gerl, foi inferior PX, o que é justifido pel su menor finidde pelo H 2, tendo ssim, PX sido mis efiz n su remoção. Dest form, miores tividdes d CT form oservds no trtmento om 5 mm de NCl pr os genótipos Mosquedo e io e nos trtmentos om 1 e 15 mm de NCl pr o mendoim, sendo que nests onentrções, em omprção os demis genótipos, foi o que expressou melhor tividde. De ordo om Zhng e Kirkhm (1996), pidde de mnutenção, em níveis elevdos, d tividde d SOD, PX e CT, so ondições de estresses mientis, é essenil pr mnutenção do equilírio entre formção e remoção do H 2 do miente intrelulr. Segundo Ckmk e Horst (1991), redução n tividde d CT e o umento ns tividdes ds peroxidses indim que, em plnts mntids so ondições de estresse, o H 2 gerdo é mis onsumido em proessos oxidtivos, omo n peroxidção de lipídios, do que elimindo do metolismo. relção entre redução n tividde ds enzims ntioxidntes e onseqüente mior peroxidção tmém foi oservd por Pnd e Khn (29) em Vign rdit so estresse slino, hvendo derésimos n tividde d SOD em rízes, ule e folhs so onentrções de 1 e 15 mm de NCl. Est mesm redução foi oservd pr PX ns rízes, sendo que CT não expressou vrição signifitiv. De mneir gerl os resultdos mostrm que n onentrção de 2 mm de NCl houve signifitiv redução n tividde ds enzims ntioxidntes. Comprtivmente est respost, houve umento n formção de mlondildeído (MD) trvés d peroxidção de lipídios (Figur 2), o que rterizd dnos s memrns elulres, intivndo s enzims ntioxidntes pelo úmulo exessivo de EROs, levndo s plântuls não resistirem os potenis dnos oxidtivos usdos pel exposição o NCl (Khn e Pnd, 28). Este omportmento expli redução n germinção e no resimento dos genótipos de feijão-miúdo ns miores doses de sl testds. CONCLUSÕES s sementes dos qutro genótipos de feijão-miúdo mntém lt germinção té onentrção de 1 mm de NCl. O desenvolvimento ds plântuls é fetdo negtivmente pels miores onentrções slins. Ns onentrções intermediáris de sl, s enzims ntioxidntes presentm tividde efiiente n proteção ontr o estresse slino, porém, este efeito não é mntido pr mior dose testd melhor respost o estresse slino se verifi no genótipo mendoim, om menor peroxidção dos lipídios, resultdo do menor estresse oxidtivo. REFERÊNCIS LISSON, S.E.; ROWN, J.W.; HYWRD, H.E.; RICHRDS, L..; ERSNSTEIN, L.; FIREMN, M.; PERSON, G..; WILCOX, L.V.; OWER, C..; HTCHER, J.T.; REEVE, R.C. Suelos Slinos y Sodios. L.. Rihrds, Editor, p. MDOR,.M.; DIEGUEZ, E.T.; HERNNDEZ, J.L.G.; GUILR, R.L.; SERRNO, N.Y..; SLGDO, S. Effet of NCl slinity in the genotypi vrition of owpe (Vign unguiult) during erly vegettive growth. Sienti Hortiulture, v.18, n.4, p , 26. RGÃO, M.E.F.; GUEDES, M.M.; OTOCH, M.L.O.; GUEDES, M.I.F.; MELO, D.F.; LIM, M.G.S. Differentil responses of riulose-1,5-isphosphte roxylse/ oxygense tivities of two Vign unguiult ultivrs Revist rsileir de Sementes, vol. 33, nº 4 p , 211

9 SLINIDDE E QULIDDE FISIOLÓGIC DE SEMENTES DE FEIJÃO-MIÚDO 719 slt stress. rzilin Journl of Plnt Physiology, v.17, n.2, p , 25. RÚJO, J.P.P.de.; RIOS, G.P.; WTT, E.E.; NEVES,.P.ds; FGERI, N.K.; OLIVEIR, P.de.; GUMRÃES, C.M.; SILVEIR FILHO,. Cultur do upi, Vign unguiult (L) Wlp., desrições e reomendções de ultivo. Goiâni EMRP/CNPF, p. (EMRP-CNPF. Cirulr Téni, 18). SHRF, M.; HRRIS, P.J.C. Potentil iohemil inditors of slinity tolerne in plnts. Plnt Siene, v.166, n.1, p.3-16, 24. ZEVEDO, R..; LS, R.M.; SMITH, R.J.; LE, P.J. Response of ntioxidnt enzymes to trnsfer from elevted ron dioxide to ir nd ozone fumigtion, in the leves nd roots of wild-type nd tlse-defiient mutnt of rley. Physiologi Plntrum, v.14, p , YERS, R.S.; WESTCOT, D.W. qulidde d águ n griultur. Trd. GHEYI, H.R.; MEDEIROS, J.F.; DMSCENO, F..V. Cmpin grnde: UFP, p. (Estudos FO: Irrigção e Drengem, 29). ERNRDO, S.; SORES,..; MNTOVNI, E.C. Mnul de Irrigção. 7. Edição, Viços: Editor UFV, p. EVILQU, G..P.; GLHO,.M.; NTUNES, I.F.; MRQUES, R.L.L.; MI, M.S. Mnejo de sistems de produção de sementes e forrgem de feijão-miúdo pr griultur fmilir. Pelots: Emrp Clim Temperdo, 27. 6p. (Emrp Clim Temperdo. Doumentos, 24). RDFORD, M.M. rpid nd sensitive method for the quntittion of mirogrm quntities of protein utilizing the priniple of protein-dye inding. nlytil iohemistry, v.72, p , RSIL. Ministério d griultur, Peuári e steimento. Regrs pr nálise de sementes. Ministério d griultur, Peuári e steimento. Seretri de Defes gropeuári. rsíli, DF: Mp/ CS, p. UEGE, J..; UST, S.D. Mirosoml lipids peroxidtion. Methods in Enzymology, v.52, p.32-31, CKMK, I.; HORST, W.J. Effet of luminum on lipid peroxidtion, superoxide dismutse, tlse, nd peroxidse tivities in root tips of soyen (Glyine mx). Physiologi Plntrum, v.83, p , COST, P.H..; SILV, J.V.; EZERR, M..; FILHO, E.J.; PRISCO, J.T.; FILHO, E.G. Cresimento e níveis de solutos orgânios e inorgânios em ultivres de Vign unguiult sumetidos à slinidde. Revist rsileir de otâni, v.26, n.3, p , 23. DNTS, J.P.; MRINHO, F.J.L.; FERREIR, M.M.M.; MORIM, M.S.N.; NDRDE, S.I. O.; SLES,.L. vlição de genótipos de upi so slinidde. Revist rsileir de Engenhri gríol e mientl, v.6, n.3, p , 22. DURTE, G.L.; LOPES, N.F.; MORES, D.M.; SILV, R.N. Physiologil qulity of whet seeds sumitted to sline stress. Revist rsileir de Sementes, v.28, n.1, p , 26. EDREV,. The importne of non-photosyntheti pigments nd innmi id derivtives in photoprotetion. griulture Eosystems & Environment, v.16, p , 25. ESS, T.. Effet of slinity stress on growth nd nutrient omposition of three soyen (Glyine mx L. Merrill) ultivrs. Journl of gronomy Crop Sine, v.188, p.86-93, 28. FERREIR, M..C. Efeito do sl no metolismo e resimento de Vign unguiult L. Wlp. e Vign luteol (Jq.) enth f. Dissertção (Mestrdo em iologi Vegetl) - Instituto de iologi, Universidde Estdul de Cmpins (UNICMP), Cmpins, 25. GINNOPOLITIS, C.N.; RIES, S.K. Superoxide dismutse. I. Ourrene in higher plnts. Plnt Physiology, v.59, p , HERNÁNDEZ, J..; FERRER, M..; JIMÉNEZ,.; RCELÓ,.R.; SEVILL, F. ntioxidnt systems nd - /H 2 prodution in the poplsto of pe leves. Its reltion with slt indued neroti lesions in minor veins. Plnt Physiology, v.127, p , 21. KWSKI, S.; ORCHERT, C.; DEYHOLOS, M.; WNG, H.; RZILLE, S.; KWI, K.; GLRITH, D.; OHNERT, H. J. Gene expression profiles during the initil phse of slt stress in rie. Plnt Cell, v.13, p , 21. KHN, M.H.; PND, S.K. ltertions in root lipid peroxidtion nd ntioxidtive responses in two rie ultivrs under NCl-slinity stress. t Physiologie Plntrum, v.3, n.1, p.81-89, 28. LIM, M.G.S.; LOPES, N.F.; MORES, D.M.; REU, C.M. Qulidde fisiológi de sementes de rroz sumetids estresse slino. Revist rsileir de Sementes, v.27, n.1, p.54-61, 25. Revist rsileir de Sementes, vol. 33, nº 4 p , 211

10 72 C. DEUNER et l. LIM, C.J.G.S.; OLIVEIR, F..; MEDEIROS, J.F.; OLIVEIR, M.K.T.; LMEID JÚNIOR,.. Respost do feijão-upi slinidde d águ de irrigção. Revist Verde, v.2, n.2, p.79-86, 27. MS, E.V.; POSS, J..; HOFFMN, G.J. Slinity sensitivity of sorghum t three growth stges. Irrigtion Siene, v.7, n.1, p.1-11, MS, E.V. Testing Crops for Slinity Tolerne. In: MRNVILLE, J.W. et l. (Ed.). Workshop on dpttion of Plnts to Soil Stresses INTSORMI. 1993, Nersk. Proeedings Linoln: University of Nersk, p MCHDO NETO, N.; CUSTÓDIO, C.C.; COST, P.R.; DONÁ, F.L. Defiiêni hídri induzid por diferentes gentes osmótios n germinção e vigor de sementes de feijão. Revist rsileir de Sementes, v.28, n.1, p , 26. MELONI, D..; OLIV, M..; MRTINEZ, C..; CMRI, J. Photosynthesis nd tivity of superoxide dismutse, peroxidse nd glutthione redutse in otton under slt stress. Environmentl Experimentl otny, v.49, p.69-76, 23. MITTLER, R. Oxidtive Stress, ntioxidnts nd stress tolerne. Trends Plnt Siene, v.7, p.45-41, 22. MORES, G..F.; MENEZES, N.L. Desempenho de sementes de soj so ondições diferentes de potenil osmótio. Ciêni Rurl, v.33, n.2, p , 23. MORLES, M..; OLMOS, E.; TORRECILLS,.; LRCON, J.J. Differenes in wter reltions, lef ion umultion nd exretion rtes etween ultivted nd wild speies of Limonium sp. grown in onditions of sline stress. Flor, Jen, v.196, n.5, p , 21. NKNO, Y.; SD, K. Hydrogen peroxide is svenged y sote-speifi peroxidse in spinh hloroplsts. Plnt Cell Physiology, v.22, n.5, p , PND, S.K.; KHN, M.H. Growth, oxidtive dmge nd ntioxidnt responses in greengrm (Vign rdit L.) under short-term slinity stress nd its reovery. Journl of gronomy & Crop Siene, v.195, p , 29. PRISCO, J.T.; O LERY, J.W. Osmoti nd toxi effets of slinity on germintion of Phseolus vulgris L. seeds. Turril, v.2, n.2, p , 197. SMITH, P.T.; CO,.G. elerted germintion of pepper seed y priming with slt solutions nd wter. HortSiene, v.26, n.4, p , TESTER, M.; DVENPORT, R. N + tolerne nd N + trnsport in higher plnts. nnls of otny, v.91, n.5, p , 23. TORRES, S..; VIEIR, E.L.; MRCOS FILHO, J. Efeitos d slinidde n germinção e no desenvolvimento de plântuls de pepino. Revist rsileir de Sementes, v.22, n.2, p.39-44, 2. TORRES, S.. Germinção e desenvolvimento de plântuls de melni em função d slinidde. Revist rsileir de Sementes, v.29, n.3, p.68-72, 27. VN DER MOEZEL, P.G.; ELL, D.T. The effet of slinity on the germintion of some Western ustrlin Eulyptus nd Melleu speies. Seed Siene & Tehnology, v.15, n. 1, p , ZHNG, J.; KIRKHM, M.. Lipid peroxidtion in sorghum nd sunflower seedlings s ffeted y sori id, enzoi id, nd propyl gllte. Journl of Plnt Physiology, v.149, n.5, p , Revist rsileir de Sementes, vol. 33, nº 4 p , 211