TÍTULO: PERFIL MICROBIOLÓGICO DE SWABS CUTÂNEOS REALIZADOS DURANTE O PERÍODO DE ANTISSEPSIA NAS CIRURGIAS

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1 Anais do Conic-Semesp. Volume 1, Faculdade Anhanguera de Campinas - Unidade 3. ISSN TÍTULO: PERFIL MICROBIOLÓGICO DE SWABS CUTÂNEOS REALIZADOS DURANTE O PERÍODO DE ANTISSEPSIA NAS CIRURGIAS CATEGORIA: EM ANDAMENTO ÁREA: CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E SAÚDE SUBÁREA: MEDICINA VETERINÁRIA INSTITUIÇÃO: UNIVERSIDADE DO GRANDE ABC AUTOR(ES): TESSIA CAGNONI, JULIANA CRISTINA PAJOSSE DE PAULA, ROSELI BERTO SABBADINI ORIENTADOR(ES): RODRIGO CASEMIRO PINTO MONTEIRO

2 Perfil microbiológico de swabs cutâneos realizados durante o período de antissepsia nas cirurgias de rotina do Hovet Anhanguera ABC. Resumo O presente estudo visa realizar uma análise comparativa entre o perfil microbiológico de swabs cutâneos realizados antes e durante o período de antissepsia em cirurgias realizadas no HOVET Anhanguera ABC para avaliar a eficácia e eficiência ao longo do tempo cirúrgico, destes momentos de antissepsia e dos antissépticos comumente utilizados na rotina do hospital veterinário. Introdução Na medicina veterinária, assim como na medicina humana, antes de todo e qualquer procedimento cirúrgico se faz necessária a antissepsia da área cirúrgica do paciente. A maioria das infecções pós-cirúrgicas é encontrada, normalmente, no período de uma semana a 30 dias depois do procedimento, e representam um importante componente na avaliação das infecções relacionadas à assistência à saúde em um hospital veterinário. Segundo Slatter (2007) Cerca de 5% de pequenos animais de sofrem cirurgia desenvolvem infecção pós-operatória na ferida. Apesar de todos os esforços que vem sendo empregados nos últimos anos em termos de se obter cirurgias assépticas ou com um grau de assepsia aceitável, este número ainda é muito grande se compararmos com os dados de cirurgias humanas. O processo de antissepsia nada mais é do que um conjunto de medidas que tem por objetivo a diminuição ou eliminação de microrganismos presentes no ar, em fômites, nos profissionais que realizarão o procedimento e até no organismo dos pacientes. Esta última envolve desde a remoção de pelos do animal, até a limpeza da área que será submetida à cirurgia, objeto desta pesquisa. Para a realização da correta antissepsia, podemos utilizar álcoois, compostos halogenados, compostos oxidantes ou derivados do furano. Em medicina veterinária, os produtos mais utilizados são Clorexidine e Iodo-Povidona, motivo pelo qual estes serão os antissépticos de eleição para a referida pesquisa. A infecção da ferida e o sucesso do pós-operatório dependem, em última análise, além do estado geral de saúde do paciente, do risco de infecção a que o paciente

3 foi submetido durante o procedimento. Por exemplo, se um paciente for submetido a uma cirurgia simples, porém com alto risco de contaminação, o pósoperatório pode envolver complicações decorrentes desta antissepsia incorreta. O risco de infecção é diretamente proporcional ao tempo do procedimento (dobra a cada hora), portanto, a realização da análise comparativa entre o perfil microbiológico de swabs cutâneos irá auxiliar na confirmação da necessidade de uma correta antissepsia no pré-operatório, confirmando a sua eficácia ao longo do procedimento cirúrgico. Cabe lembrar que na pele, há predomínio de cocos, em especial Staphylococcus spp, de leveduras, principalmente Malassezia e de bastonetes, geralmente contaminantes. (Bichard & Sherding, 1998) Objetivos Este projeto tem por objetivo analisar o perfil microbiológico de swabs cutâneos coletados antes e durante a antissepsia de pacientes submetidos a procedimentos cirúrgicos em três momentos da cirurgia. Segundo Silva et al.(2000), os antissépticos comumente utilizados em Medicina Veterinária possuem um efeito residual, verificado em até duas horas após a correta aplicação do mesmo, esta pesquisa tem o objetivo de corroborar com este estudo, mas demonstrando os diferentes crescimentos microbiológicos, em diferentes passagens da aplicação pré-operatória dos antissépticos. Buscamos mostrar não somente que a antissepsia correta (sem que etapas sejam negligenciadas) é de suma importância nesses procedimentos, evitando complicações para os pacientes e para a equipe cirúrgica, mas também analisar a real necessidade e eficácia das etapas de antissepsia pré-cirurgica preconizadas atualmente. De nada adianta a cirurgia ser bem sucedida, se houver complicações pósoperatórias decorrentes de infecções por microrganismos presentes durante o procedimento. Metodologia

4 Para obter os dados esperados, utilizou-se a seqüência de trabalho que envolve, além da metodologia descrita a seguir, alguns materiais do HOVET Anhanguera ABC: Clorexidine 2% - degermante; Clorexidine 0,5% - alcoólico; Swabs estéreis; BHI (Brain Heart Infusion Broth) caldo de enriquecimento; Placas de Agar base sangue para promover o crescimento de bactérias Gram (+) e Gram (-); Placas de Agar base MacKonkey para promover o crescimento de bactérias Gram (-), e Placas de Agar dextrosa de Sabouraud Difco Para promover o crescimento de fungos. Conjunto para coloração de Gram (não utilizado no momento pela falta dos demais itens citados abaixo, no ambiente do HOVET-Anhanguera ABC) Ainda para conseguir identificar os tipos microorganismos que crescem nas placas é necessário obter alguns materiais, que a universidade não tem disponível: Teste bioquímico para Gram (-) EPM-Mili-Citrato; Teste bioquímico para Gram (+) Staphy-Test, e Enquanto a equipe de pesquisadores aguarda a requisição dos materiais, optouse por fazer esta identificação em laboratório particular, para a coleta de validação do método efetuada no dia 19/06/2013, custeado pelos pesquisadores, de forma a avaliar a presença dos microorganismos esperados, os resultados serão mostrados no item resultados preliminares. O método utilizado envolve a escolha aleatória de 15 animais a serem submetidos a procedimentos cirúrgicos, também aleatórios, subdividido em três etapas distintas: Etapa 1: Coletas de 3 swabs cutâneos, em três momentos do procedimento de antissepsia pré-cirurgica:

5 1ª. Coleta: efetuada após a tricotomia do paciente; 2ª.Coleta: após a antissepsia do volante que utiliza luva de procedimento e gaze não estéril para aplicar Clorexidine 2% por 3 minutos, e 3ª.Coleta: após a antissepsia do cirurgião com luva e gaze estéril, aplicando Clorexidine 0,5% por 3 minutos. Etapa 2: Semeadura e cultura, realizada no laboratório de análises clínicas do HOVET- Anhanguera ABC: 1ª. colocar os swabs identificados no meio de enriquecimento BHI em estufa à 35 C por 24h; 2ª. retirar o conteúdo do meio de enriquecimento e semear as três placas previamente preparadas: em Agar Sangue, Em Agar MacKonkey e Agar Sabouraud, em estufa à 35 C, por 24h. Etapa 3: Identificação dos microorganismos realizados por laboratório particular RK diagnósticos no município de São Bernardo do Campo: Desenvolvimento A pesquisa iniciou com a revisão da bibliografia existente, incluindo pesquisa de artigos com propostas semelhantes, validando assim o início da pesquisa e definição dos materiais e métodos a serem utilizados. A seguir, optou-se para a execução de um caso, utilizando a metodologia descrita acima, a fim de validar o método e os materiais identificados como necessários ao bom desenvolvimento da pesquisa e fidelidade dos resultados. Optou-se por fazer a primeira e a segunda etapa do método nas dependências do HOVET Anhanguera ABC, uma vez que o processo poderia ser totalmente acompanhado pelos pesquisadores, porém, pela falta de material no HOVET Anhanguera ABC, optou-se por fazer a etapa 3 em laboratório particular, onde não foi possível, neste primeiro momento, o acompanhamento de toda a etapa pelo grupo de pesquisadores, restringindo-se apenas a obtenção dos resultados. O método de obtenção dos dados está descrito a seguir: CASO validação da pesquisa

6 Cirurgia realizada em 19/06/2013 nas dependências HOVET Anhanguera ABC Animal: Bobby - Canino Chowchow 1,5 anos Estado geral: ASA 1-2 Indicação clínico-cirúrgica: Colocefalectomia em membro posterior direito Etapa 1: foram feitas as 3 coletas, conforme demonstradas nas figuras abaixo: Figura 01-1ª. Coleta: efetuada após a tricotomia do paciente

7 Figura 02 Antissepsia do volante com clorexidine 2% Figura 03 2ª.Coleta: após a antissepsia do volante

8 Figura 04 antissepsia do cirurgião com clorexidine 0,5% Figura 05 3ª.Coleta: após a antissepsia do cirurgião Etapa 2: Os três swabs oram inseridos, imediatamente após a coleta, em meio de enriquecimento (BHI) e encaminhados à estufa do laboratório

9 Figura 6 Identificação das três coletas, mergulhadas em meio BHI Após 24h, os meios foram retirados da estufa e procedeu-se à semeadura das placas nos três meios disponíveis, ou seja, três semeaduras para cada meio a fim de verificar o possível crescimento microbiano em cada uma das fases da coleta e em cada um dos meios. Estes também permaneceram em estufa por 24h. Figura 7 Amostras mantidas em estufa

10 Resultados Preliminares Os resultados deste caso foram obtidos ao se retirar as amostras da estufa. Notou-se que houve crescimento microbiano em todos os meios correspondente a 1ª. Coleta (Agar Sangue, Agar McKonkey e Agar Sabouraud), diferente do que ocorreu nas outras duas coletas (2ª. e 3ª. após as duas antissepsias). Figura 8 Amostras das coletas n 01 demonstra crescimento de microorganismos Figura 9 Amostras das coletas n 02 demonstra o não-crescimento de microorganismos Figura 10 Amostras das coletas n 03 demonstra o não-crescimento de microorganismos

11 Com o resultado obtido, encaminhou-se para o laboratório particular, somente as três placas correspondentes a 1ª. Coleta, uma vez que a identificação dos microorganismos é importante para confirmar a presença do microorganismo patogênico mais comum nas complicações dos procedimentos cirúrgicos (Staphylococcus spp). OS microorganismos identificados nas placas estão descritos na figura 11. Figura 11 Resultado obtido das amostras da coleta n 1 do caso Os estafilococos coagulase-negativa estão associados à presença de corpos estranhos como válvulas cardíacas, próteses ortopédicas, cateteres intravasculares, urinários e de diálises. São os organismos mais freqüentemente isolados de culturas sangüíneas, estando associados a graves morbidades e identificados com fatores de virulência. O resultado desta amostra preliminar nos dá um indício de que, ao se confirmar estes dados com uma amostra maior, não haveria necessidade de se fazer as duas antissepsias, pois a microbiota natural já seria combatida apenas com a primeira etapa da antissepsia. A pesquisa deverá seguir com os demais 14 casos para haver validação deste primeiro achado científico. Fontes Consultadas BIRCHARD, S.J., SHERDING, R.G. Manual Saunders Clínica de Pequenos Animais. 1ª edição. Roca, São Paulo, SP, 1998.

12 SLATTER, DOUGLAS H. Manual de Cirurgia de Pequenos Animais. 3ª edição. Manole, São Paulo, SP, BORJAB, M. JOSEPH. Técnicas Atuais em Cirurgias de Pequenos Animais. 1ª edição. Roca. São Paulo, SP, QUINN, P.J., MARKEY, B.K., CARTER, M.E., DONNELY, W.J., LEONARD, F.C. Microbiologia Veterinária e Doenças Infecciosas. 1ª edição. Artmed, ZEE, YUAN CHUNG, HIRSH, DWIGHT C. Microbiologia Veterinária. 1ª edição. Guanabara Koogan, Rio de Janeiro, RJ, PANDEY, R. Microbiologia Veterinária: Perspectivas Clínicas e Moleculares. 1ª edição. Roca, São Paulo, SP, BRAGA, DANIEL PONTES. Incidência e fatores de risco associados à infecção do sítio cirúrgico na clínica de cães e gatos do Hospital veterinário da Universidade Federal de Viçosa. Dissertação de pós-graduação. Universidade Federal de Viçosa. Viçosa, MG, 2008 SILVA, DÉCIO ADAIR REBELLATTO DA; COSTA, MATEUS MATIUZZI DA; VARGAS, AGUEDA CASTAGNA DE; ALIEVI, MARCELO MELLER; SCHOSSLER, JOÃO EDUARDO WALLAU; SILVA; TATIANA RESENDE DA. O Glucanato de Clorexidina ou o Álcool-iodo-álcool na antissepsia de campos operatórios em cães. Artigo científico. Ciência Rural, Santa Maria, v. 30, n. 3, p , 2000 ISSN FERREIRA, GISELI DOS SANTOS. Ovariectomia por videocirurgia em cadelas e gatas. Dissertação de mestrado. Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro. Campo de Goytacazes, RJ, PINTO, CARLOS EDUARDO CRUZ. Análise de casuística de afecções cirúrgicas observadas, segundo aparelho corpóreo analisado, no período de 1988 a 2007 na Clinica Cirúrgica de pequenos animais da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo. Dissertação de Pós-graduação. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade São Paulo, São Paulo, SP, NETO, JOÃO MOREIRA C.N; FILHO, EMANOEL FERREIRA MARTINS; JÚNIOR, DEUSDETE CONCEIÇÃO GOMES; TEIXEIRA, DIANA MELLO; MORAES, VINÍCIUS DE JESUS. Princípios da Assepsia Cirúrgica Veterinária. Notas de aula da disciplina: Técnica Cirúrgica Veterinária. Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade Federal da Bahia. Salvador, BA, 2006 BRASIL, Ministério da Saúde, Portaria 930, de 27 de agosto de 1992; Anexo V: Normas para limpeza, desinfecção, esterilização e antissepsia em estabelecimentos de saúde. Diário Oficial da União, Brasília. 4 set ALHER JR, CARLOS ALBERTO; CARNEIRO, LUIZ FELIPE; MELLO, DANIELA PEREIRA; DIAS, LUIZ GUSTAVO. Normas Internacionais de Assepsia (bloco Cirúrgico). Artigo Científico. Revista Científica Eletrônica de Medicina Veterinária da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia de Garça ISSN: Ano VII Número 12 Janeiro de 2009.