EFEITO DA INOCULAÇÃO COM ISOLADOS DE FUNGOS ECTOMICORRÍZICOS SOBRE O DESENVOLVIMENTO DE MUDAS DE

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1 Ciênci Florestl, Snt Mri, v. 22, n. 2, p , br.-jun., 2012 ISSN EFEITO DA INOCULAÇÃO COM ISOLADOS DE FUNGOS ECTOMICORRÍZICOS SOBRE O DESENVOLVIMENTO DE MUDAS DE Euclyptus grndis Hill ex Miden 251 EFFECT OF ECTOMYCORRHIZAL FUNGI ISOLATES INOCULATION IN Euclyptus grndis Hill ex Miden SEEDLINGS DEVELOPMENT Edurdo Lorensi de Souz 1 Zid Inês Antoniolli 2 Rfel Goulrt Mchdo 3 Dniel Pzzini Eckhrdt 4 Sbrin de Fátim Brbos Dhmer 5 Guilherme Krsten Schirmer 6 RESUMO No Estdo do Rio Grnde do Sul, os reflorestmentos de euclipto têm se concentrdo em solos com bix fertilidde nturl, e o desempenho desss muds poderá depender d formção d ssocição ectomicorrízic. Nesse trblho, vliou-se o efeito d inoculção dos isoldos de fungos ectomicorrízicos UFSC-Pt116, UFSC-Pt188 e UFSC-SA9, individulmente e em mistur, sobre muds de Euclyptus grndis. As vlições form relizds os 30, 45, 60, 75 e 90 dis pós semedur. A inoculção individul do isoldo fúngico ectomicorrízico UFSC-Pt116 promoveu mior ltur e mss sec d prte ére. As muds inoculds com mistur dos isoldos fúngícos UFSC-Pt116 + UFSC-Pt188 + UFSC-SA9 cumulrm mior quntidde de fósforo os 90 dis. Pr os teores de nitrogênio e potássio, e mss sec de rízes não mostrou diferenç significtiv entre os trtmentos. Plvrs-chve: euclipto; ectomicorrizs; nutrição minerl. ABSTRACT In the Rio Grnde do Sul stte, where euclyptus reforesttion is common in low fertility soils, the seedling performnce my depend on the ectomycorrhizl ssocition. In this pper, the inocultion effects of UFSC-Pt116, UFSC-Pt188 nd UFSC-SA9 ectomycorrhizl fungi isoltes, individully nd in mixture, on Euclyptus grndis seedlings were evluted. Evlutions were performed t 30, 45, 60, 75, nd 90 dys fter sowing. The individul inocultion of UFSC-Pt116 isolte promoted highest height nd eril dry mss. The seedlings inoculted with the mixture UFSC-Pt116 + UFSC-Pt188 + UFSC-SA9 ccumulted highest mounts of phosphorus t 90 dys. The nitrogen nd potssium concentrtions, nd root dry mss did not show significnt differences mong the tretments. Keywords: euclyptus; ectomycorrhize; minerl nutrition. 1. Engenheiro Agrônomo, MSc., Doutorndo do Progrm de Pós-grdução em Ciênci do Solo, Centro de Ciêncis Ruris, Universidde Federl de Snt Mri, Av. Rorim, 1000, CEP , Snt Mri (RS). Bolsist d CAPES. elorensi@yhoo.com.br 2. Biólog, Dr., Professor Associd do Deprtmento de Solos, Centro de Ciêncis Ruris, Universidde Federl de Snt Mri, Av. Rorim, 1000, CEP , Snt Mri (RS). Bolsist de Produtividde do CNPq. zntoniolli@gmil.com 3. Engenheiro Agrônomo, Mestrndo do Progrm de Pós-grdução em Ciênci do Solo, Universidde Federl do Rio Grnde do Sul, Av. Bento Gonçlves, 7712, CEP , Porto Alegre (RS). Bolsist d CAPES. rgoulrtmchdo@gmil.com 4. Engenheiro Agrônomo, Doutorndo do Progrm de Pós-grdução em Ciênci do Solo, Centro de Ciêncis Ruris, Universidde Federl de Snt Mri, Av. Rorim, 1000, CEP , Snt Mri (RS). Bolsist d CNPq. dniel.pzzini@hotmil.com 5. Engenheir Agrônom, Mestrnd do Progrm de Pós-grdução em Ciênci do Solo, Centro de Ciêncis Ruris, Universidde Federl de Snt Mri, Av. Rorim, 1000, CEP , Snt Mri (RS). Bolsist Cpes. sbrin_dhmer@hotmil.com 6. Engenheiro Agrônomo, Doutorndo do Progrm de Pós-grdução em Ciênci do Solo, Universidde Federl do Rio Grnde do Sul, Av. Bento Gonçlves, 7712, CEP , Porto Alegre (RS). Bolsist d CAPES. skguilherme@gmil.com Recebido pr publicção em 28/10/2009 e ceito em 27/04/2011 Ci. Fl., v. 22, n. 2, br.-jun., 2012

2 252 INTRODUÇÃO Souz, E. L. et l. MATERIAL E MÉTODOS O euclipto tem crcterístic de ssocir-se fungos ectomicorrízicos (fecm) e rbusculres (fma), que fvorecem sobrevivênci e o crescimento ds plnts (MARX, 1969). A importânci ds micorrizs foi evidencid ns primeirs tenttivs de introdução de espécies vegetis for de seus hbitts nturis, e n dificuldde encontrd nos reflorestmentos de regiões de solos degrddos, onde não existim fungos comptíveis com s espécies introduzids (MARX e CORDELL, 1989). As ectomicorrizs promovem um incremento significtivo d áre de bsorção rdiculr ds plnts colonizds, mximizndo o proveitmento de águ e nutrientes, como o fósforo (P), o nitrogênio (N) e o potássio (K), e lguns micronutrientes não fungistáticos (MOLINA e TRAPPE, 1984; SMITH e READ, 1997; GLOWA et l., 2003). Estes fungos contribuem pr o estbelecimento e desenvolvimento ds plnts (SMITH e READ, 1997), mesmo em solos com bixos teores de nutrientes ou degrddos (MOREIRA et l., 2002; SANTOS et l., 2008). A presenç destes fungos ns muds de euclipto fvorece o estbelecimento e sobrevivênci ds plnts no cmpo, pelo umento n cpcidde de bsorção de nutrientes, umento d longevidde de rízes, proteção contr ptógenos, umento no rendimento de mss sec e n bsorção de fósforo (BARROS et l., 1978). Considerndo bix fertilidde dos solos que são usdos pr os reflorestmentos, é necessário que se dotem lgums lterntivs viáveis econômic e mbientlmente correts, pr produção de muds sdis destinds áres degrdds, como s que ocorrem n metde sul do Rio Grnde do Sul. Um desss lterntivs é o uso de fungos ectomicorrízicos (fecm) n produção de muds de euclipto, pr umentr bsorção de nutrientes e promover resistênci o tque de ptógenos, proporcionndo mior sobrevivênci desss muds em solos de bix fertilidde. No entnto, pouco se conhece sobre o comportmento dests qundo inoculds com misturs de isoldos de fecm, e sobre os benefícios, ou prejuízos, que est inoculção pode cusr às plnts de euclipto. Este trblho teve por objetivo vlir os efeitos d inoculção de lguns isoldos de fungos ectomicorrízicos, individulmente e em mistur, no desenvolvimento de plnts de Euclyptus grndis. Fungos micorrízicos Os isoldos de fungos ectomicorrízicos testdos neste experimento form cedidos pelo Lbortório de Ectomicorrizs do Deprtmento de Microbiologi e Prsitologi d Universidde Federl de Snt Ctrin (UFSC). As espécies de fungos ectomicorrízicos utilizds no presente trblho form: Pisolithus microcrpus (COOKE e MASSEE) Cunn. (UFSC-Pt 116 e UFSC-Pt 118), obtidos junto espécies de Euclyptus sp., e Scleroderm flvidum E. Et. E. (UFSC-SA9), simbionte de Euclyptus dunii Miden. Os isoldos utilizdos form escolhidos com bse nos resultdos obtidos por Souz (2003), Souz et l. (2008), Mello (2006) e Bonnssis (2007). Estes utores verificrm que esses isoldos ectomicorrízicos presentrm eficiênci n cumulção de nutrientes e n promoção de crescimento ds muds de euclipto. As culturs purs desses fungos form originlmente obtids de crpóforos coletdos em plntções de Euclyptus spp. e, posteriormente, mntids em lbortório, trvés de repicgens periódics em meio de cultur Melin-Norkrns Modificdo sólido (MNM) (MARX, 1969), em plcs de Petri, n UFSC. Os isoldos form repicdos e começrm fzer prte do bnco de fungos micorrízicos do Lbortório de Biologi e Microbiologi do Solo Professor Mrcos Rubens Fries, d Universidde Federl de Snt Mri. Produção de inóculo de fungos ectomicorrízicos Os inóculos dos fecm form obtidos, inicilmente, prtir d multiplicção e do crescimento ds culturs, pós 30 dis. Em seguid, form feits suspensões micelins em 25 ml de meio de cultur MNM (MARX, 1969) líquido, em frscos de Erlenmeyer de 250 ml, prtir de discos obtidos ds culturs purs, seguindo-se de incubção 25ºC, por mis 30 dis. Após esse período, o inóculo foi frgmentdo e suspenso em 200 ml de meio de cultur MNM líquido, em liquidificdor, durnte 5 segundos, e utilizdo pr inoculr 500 ml de um mistur com um prte de vermiculit e qutro de turf (v/v), mis 200 ml de meio MNM líquido, em frscos de 900 ml. A mistur turf-vermiculit foi previmente esterilizd em utoclve 121ºC, durnte 60 Ci. Fl., v. 22, n. 2, br.-jun., 2012

3 Efeito d inoculção com isoldos de fungos ectomicorrízicos sobre o desenvolvimento minutos, por três dis consecutivos, ntes d dição do meio MNM (MARX, 1969). Posteriormente, foi relizd esterilizção pelo período de 20 minutos, sob s mesms condições de tempertur e pressão. Após, form inoculdos os isoldos UFSC-Pt116, UFSC-Pt118 e UFSC UFSC-SA9. Os frscos form mntidos em estuf 25ºC pr o crescimento micelino, durnte 90 dis. Substrto pr s muds de euclipto O substrto utlilizdo no presente trblho foi composto por turf comercil, produzid pel empres Florest S.A. A composição do. substrto foi de turf, perlit, clcário ditivdo com fertiliznte nturl, presentndo s seguintes crcterístics químics: ph = 5,8; P = 14,4 mg.dm³; K = 194 mg.dm³; Al = 0, C = 25 cmol c.dm³, Mg = 4,7 cmol c.dm³, CTC= 30 cmol c.dm³, M.O.= 17% e sturção por bses = 90%. O substrto foi previmente esterilizdo em utoclve 121ºC, durnte 60 minutos, três vezes consecutivs, com um intervlo de 24 hors entre cd esterilizção, pr eliminr possíveis contminções por outros fungos. Após esterilizção, foi diciond, neste substrto, um solução nutritiv contendo os seguintes elementos: Mn, 0,15; Zn, 0,0375; Cu, 0,125; Mo, 0,05; B, 0,05 e Fe, 0,375 (mg kg -1 ), bsedos em Alves et l. (2001). O nitrogênio (N) foi diciondo n form de (NH 4 ) 2 SO 4, no momento d semdur, conforme recomendção do Mnul de Adubção e de Clgem pr os Estdos do Rio Grnde do Sul e Snt Ctrin (COMISSÃO DE QUÍMICA E FERTILIDADE DO SOLO, 2004). Sementes As sementes de euclipto form obtids no Viveiro Florestl d Universidde Federl de Snt Mri. Ests sementes form pré-germinds, durnte cinco dis, em plc de Petri, num incubdor microbiológic com fotoperíodo. Pr isso, form inicilmente desinfestds em álcool 70% por 30 segundos, lvds em águ destild, e trnsferids pr lgums plcs de Petri contendo ppel tolh e águ destild. Inoculção dos fungos Após três meses de crescimento do inóculo, foi feit inoculção dos isoldos Pisolithus microcrpus (UFSC-Pt116); Scleroderm flvidum (UFSC-SA9); e Pisolithus microcrpus (UFSC- Pt188), em vsos de PVC com cpcidde pr 1L, previmente desinfestdos com solução de hipoclorito de sódio 1%. A inoculção foi feit no mesmo momento d semedur, colocndo-se pr isso, 10% (v/v) do inoculnte fúngico em cd vso, isoldmente ou em mistur. No cso ds misturs, combinouse o inóculo dos isoldos de modo se obter combinções de dois ou três isoldos, em cd vso de plntio. Além desses trtmentos, foi preprdo um trtmento controle não inoculdo, que recebeu os mesmos 10% (v/v) do substrto de inoculção. A homogeneizção do inóculo foi feit mnulmente, com uso de luvs descrtáveis, sob condições sséptics. Cd vso recebeu qutro sementes prégerminds de euclipto, e em seguid completou-se umidde do substrto nos vsos, té cpcidde de cmpo. Dest form, o experimento constou de oito trtmentos: Controle (não inoculdo), UFSC- Pt116, UFSC-SA9, UFSC-Pt188, UFSC-Pt116 + UFSC-SA9, UFSC-Pt116 + UFSC-Pt188, UFSC- SA9 + UFSC-Pt188 e UFSC-Pt116 + UFSC-Pt188 + UFSC-SA9, em dez repetições, totlizndo 80 uniddes experimentis. Após inoculção e semedur, o experimento foi mntido em cs de vegetção por 90 dis e cpcidde de cmpo foi mntid, dirimente, com águ destild. Após 10 dis d emergênci ds plântuls, foi feito um desbste, deixndo-se dus plântuls por vso, e pós os 20 dis d emergênci ds plântuls, foi relizdo um novo desbste, deixndo-se pens um mud de euclipto por vso. Avlições Durnte o período de crescimento, form relizds vlições cd 15 dis qunto à ltur e o diâmetro do cule. Aos 60 dis, pós semedur, form coletds cinco plnts de cd trtmento e nlisds qunto os seguintes spectos: ltur, diâmetro do cule, mss sec ds rízes, volume de rízes, ssocição micorrízic, mss sec d prte ére e teores de nitrogênio (N), fósforo (P) e potássio (K) n prte ére ds plnts. Com s outrs cinco plnts form relizds s mesms vlições os 90 dis. Após 60 e 90 dis de crescimento, s muds form retirds dos vsos e seprds em rízes e prte ére. A prte ére foi colocd em estuf 70 ± 1 o C, pr determinção d mss sec. A determinção d percentgem de colonizção rdiculr foi feit pel técnic ds interseções de Ci. Fl., v. 22, n. 2, br.-jun., 2012

4 254 Souz, E. L. et l. Giovnetti e Mosse (1980), modificdo por Brundrett et l. (1996). Pr determinção do teor de P e K nos tecidos ds plnts, empregou-se técnic descrit por Tedesco et l. (1995). O volume rdiculr foi determindo pelo método de deslocmento de águ, dptndo-se metodologi utilizd pr solos (EMBRAPA, 1997). Os ddos obtidos de ltur, diâmetro do cule, mss sec ds rízes, volume de rízes, colonizção micorrízic, mss sec d prte ére, teores de nitrogênio, fósforo e potássio, form testdos qunto su normlidde e submetidos à nálise de vriânci e teste de médis (Tukey, 5%), utilizndo-se dos procedimentos disponíveis no progrm esttístico SISVAR (FERREIRA, 2000). RESULTADOS E DISCUSSÃO Aos 30, 45, 60, 75 e 90 dis pós emergênci ds plnts de euclipto, ests presentrm diferençs significtivs qunto à ltur (Figur 1). Aos 30 dis pós semedur, o isoldo UFSC-SA9 presentou vlores significtivos com relção o controle, enqunto que os 45 dis, com exceção d mistur UFSC-Pt116 + UFSC-SA9, todos os demis trtmentos inoculdos proporcionrm mior ltur de muds que o controle. Aos 75 dis, os isoldos UFSC-Pt116, UFSC-SA9, UFSC-Pt188 e mistur UFSC-SA9 + UFSC-Pt188, tmbém presentrm um incremento no desenvolvimento ds muds. Aos 90 dis, provvelmente, s muds já encontrvm restrições qunto o crescimento, devido limitções de espço nos vsos pr crescimento do sistem rdiculr, e dest form, o controle presentou ltur semelhnte os demis trtmentos, exceto o UFSC-Pt 116, que foi superior (Figur 1). Os resultdos demonstrm que, pr s condições em que s muds form vlids, inoculção com ectomicorrizs proporcionou mior ltur às muds de euclipto com relção às não inoculds. As inoculções com os isoldos em misturs não proporcionrm desenvolvimento significtivo qunto à ltur, com relção às inoculções com os isoldos individulizdos, não sendo o uso de misturs justificdo pelo prâmetro ltur de plnts (Figur 1). 50 CONTROLE UFSC-Pt116 y=0,0007x 2,3516 R 2 =0,9919 y=0,0005x 2,5030 R 2 =0, UFSC-SA9 UFSC-Pt188 UFSC-Pt116 + UFSC-SA9 y=0,0012x 2,2872 R 2 =0,9886 y=0,0004x 2,5490 R 2 =0,9931 y=0,00001x 2,8133 R 2 =0,9827 UFSC-Pt116 + UFSC-Pt188y=0,0001x 2,7725 R 2 =0,9959 Altur, cm UFSC-SA9 + UFSC-Pt188 y=0,0002x 2,7447 R 2 =0,9975 UFSC-Pt116 + UFSC-Pt188 + UFSC-SA9y=0,0019x 2,1202 R 2 =0, FIGURA 1: Altur ds plnts de Euclyptus grndis produzids no substrto turf, inoculds ou não, com diferentes isoldos de fungos ectomicorrízicos, individulmente ou em mistur, os 60 e 90 dis pós o plntio em cs de vegetção. FIGURE 1: Height of Euclyptus grndis produced in pet, or not inoculted with different isoltes of mycorrhizl fungi lone or in combintion, 60 nd 90 dys fter plnting in the greenhouse. Averges followed by sme letters in columns do not differ significntly by Tukey test t 5%. Ci. Fl., v. 22, n. 2, br.-jun., Idde, dis

5 Efeito d inoculção com isoldos de fungos ectomicorrízicos sobre o desenvolvimento Nos resultdos obtidos de diâmetro de cule ds plnts, observrm-se diferençs esttístics entre os trtmentos de inoculção individul e ns misturs de isoldos ectomicorrízicos, pens os 90 dis de crescimento ds muds em cs de vegetção. As plnts inoculds presentrm mior diâmetro de cule, com exceção dos trtmentos com os isoldos UFSC-Pt188 e UFSC-Pt116 + UFSC-Pt188 + UFSC-SA9, que presentrm diâmetro de cule menor que o trtmento controle. O mior diâmetro foi encontrdo em muds inoculds, individulmente, com o isoldo UFSC-Pt116, sendo, proximdmente, 31% superiores o controle. Os ddos obtidos neste estudo são semelhntes os de Souz (2003). Este utor considerou que s medids de diâmetro de cule têm pouc utilidde pr vlir o efeito d inoculção nest fse do desenvolvimento ds plnts, pois, respost inicil d colonizção micorrízic está ssocid o umento de cptção e proveitmento de águ e nutrientes, tendo mior reflexo n produção de rmos e folhs. Assim, vlores de mss sec são considerdos s vriáveis mis úteis pr medir o efeito de trtmentos de inoculção micorrízic sobre o crescimento ds muds (MARX, 1980; MARX, 1991; SMITH e READ, 1997). A mss sec médi d prte ére ds plnts de euclipto obtid os 60 dis mostrou que os trtmentos com miores vlores form os inoculdos com os isoldos UFSC-Pt116 e UFSC- SA9, sendo que o primeiro presentou 50%, e o segundo 66% mis mss sec em relção o controle (Tbel 1). Aos 90 dis pós semedur, o trtmento que se destcou em relção os demis foi o inoculdo individulmente com o isoldo UFSC-Pt116, que presentou 56% de mss sec d prte ére mis que o controle. Este umento foi constnte nos dois períodos vlidos, indicndo um crescimento regulr com desenvolvimento ds muds (Tbel 1). Estes resultdos demonstrm importânci d inoculção de fungos micorrízicos no momento d formção ds muds, um vez que esses podem melhorr bsorção de águ e nutrientes e propicir às plnts um mior cúmulo de mss sec. O crescimento d prte ére ds plnts foi mior dos 60 té os 90 dis de crescimento ds plnts, ests obtiverm cerc de dez vezes mss de qundo tinhm 60 dis de idde. Os resultdos obtidos são semelhntes os de Souz (2008), que observou que inoculção com fungos micorrízicos promoveu mior cúmulo de mss sec n prte ére de euclipto. TABELA 1: Mss sec d prte ére e de rízes (mg plnt -1 ) ds muds de Euclyptus grndis, não inoculds e inoculds com diferentes isoldos de fungos ectomicorrízicos, individulmente ou em mistur, os 30, 45, 60, 75 e 90 dis pós semedur, em cs de vegetção. TABLE 1: Euclyptus grndis seedlings shoots nd roots dry mss (mg plnt -1 ) non-inoculted nd inoculted with severl mycorrhizl fungi isolted or combine, t 30, 45, 60, 75 nd 90 dys fter sowing in the greenhouse. Mss sec (mg) Trtmentos Prte ére Rízes Dis Controle 264 c 3522 b 66 b 833 UFSC-Pt b UFSC-SA b 71 b 1403 UFSC-Pt bc 3562 b 65 b 1254 UFSC-Pt116 + UFSC-SA9 177 d 3765 b 45 b 1060 UFSC-Pt116 + UFSC-Pt c 3472 b 41 b 1145 UFSC-SA9 + UFSC-Pt bc 3592 b 60 b 1000 UFSC-Pt116 + UFSC-Pt188 + UFSC-SA9 267 c 3302 b 44 b 923 Médi CV (%) 12,5 19,4 24,5 25,8 Em que: Os vlores são médis de 5 repetições. Médis seguids ds mesms letrs ns coluns não diferem, esttisticmente entre si, pelo teste de Tukey 5%. Ci. Fl., v. 22, n. 2, br.-jun., 2012

6 256 Souz, E. L. et l. Qunto o volume de rízes, observou-se que s plnts inoculds com o isoldo UFSC- Pt116 form s que presentrm mior volume de rízes os 60 dis, seguids pels plnts dos trtmentos UFSC-SA9, UFSC-Pt188, UFSC- Pt116 + UFSC-SA9, UFSC-SA9 + UFSC-Pt188, UFSC-Pt116 + UFSC-Pt188 + UFSC-SA9, controle e UFSC-Pt116 + UFSC-Pt188. Slient-se que os trtmentos com mior volume de rízes estão entre queles que envolvem inoculção dos isoldos, individulmente (Figur 2). Aos 90 dis pós emergênci, qundo s muds já tinhm expressdo bo prte do seu potencil de crescimento, os resultdos observdos em relção o volume de rízes form distintos. As plnts do trtmento com o isoldo UFSC-SA9 form s que se destcrm, tendo, proximdmente, o volume de rízes 17% mior do que o controle. Not-se ind que s plnts inoculds somente com o isoldo UFSC-Pt188 presentrm volume de rízes menor que os demis trtmentos o fim do período experimentl, inclusive menor que o controle (Figur 2). Segundo Ditengou e Lpeyrie (2000), fecm do gênero Pisolithus podem secretr hipforin, qul induz mudnçs morfológics em rízes de euclipto. A incubção n presenç de hipforin cusou um decréscimo n tx de elongção do ápice rdiculr às rízes de euclipto (DITENGOU e LAPEYRIE, 2000). Em dição isto, os utores firmm que o ácido indol-cético tem efeito resturdor no ápice rdiculr, indicndo um efeito ntgonist d hipforin ns mudnçs morfológics do sistem rdiculr. Os isoldos de fungos ectomicorrízicos colonizrm s rízes do euclipto com diferentes grus de intensidde, vrindo com o tipo de mistur que foi inoculd ns plnts. N primeir vlição, os 60 dis pós emêrgenci ds plântuls, foi verificdo que s muds que obtiverm os miores txs de colonizção rdiculr form s dos trtmentos UFSC-SA9 e UFSC-Pt116, com, proximdmente, 16 e 13% respectivmente (Figur 3). A colonizção micorrízic foi mior ns rízes inoculds individulmente pelos isoldos UFSC-SA9 e UFSC-Pt116, com 19 e 17% de ssocição rdiculr, respectivmente (Figur 2). Os trtmentos inoculdos com pens um isoldo presentrm um tendênci pr os miores níveis de colonizção, com exceção ds plnts inoculds com o isoldo UFSC-Pt188, que ficrm com médis bixo dos trtmentos contendo misturs de isoldos (Figur 3). FIGURA 2: Volume de rízes ds plnts de Euclyptus grndis produzids no substrto turf, inoculds ou não com diferentes isoldos de fungos ectomicorrízicos, individulmente ou em mistur, os 60 e 90 dis pós o plntio em cs de vegetção. Médis seguids ds mesms letrs ns coluns não diferem esttisticmente entre si pelo teste de Tukey 5%. FIGURE 2: Roots volume of Euclyptus grndis produced in pet, or not inoculted with different isoltes of mycorrhizl fungi lone or in combintion, 60 nd 90 dys fter plnting in the greenhouse. Averges followed by sme letters in columns do not differ significntly by Tukey test t 5%. Ci. Fl., v. 22, n. 2, br.-jun., 2012

7 Efeito d inoculção com isoldos de fungos ectomicorrízicos sobre o desenvolvimento FIGURA 3: Colonizção micorrízic ns plnts de Euclyptus grndis produzids no substrto turf, inoculds ou não com diferentes isoldos de fungos ectomicorrízicos, individulmente ou em mistur, os 60 e 90 dis pós o plntio em cs de vegetção. Médis seguids ds mesms letrs ns coluns não diferem, esttisticmente entre si, pelo teste de Tukey 5%. FIGURE 3: Mycorrhizl coloniztion in plnts of Euclyptus grndis produced in pet, inoculted or noninoculted with different isoltes of mycorrhizl fungi lone or in combintion, 60 nd 90 dys fter plnting in the greenhouse. Averges followed by sme letters in columns do not differ significntly by Tukey test t 5%. Os percentuis de colonizção são bixos qundo comprdos os de Mello (2006), obtidos com muds de Euclyptus grndis em cs de vegetção, e trblhndo com o isoldo UFSC-Pt116. É possível que n hor de fzer o procedimento de lvgem ds rízes, logo pós su colet, tenh-se perdido prte ds rízes mis fins ds plnts, que são s que estão mis propícis à colonizção ectomicorrízic. Isto poderi explicr o bixo percentul de colonizção micorrízic, qundo comprdos os ddos de Mello (2006). Tmbém form nlisdos os teores de nitrogênio, de fósforo e de potássio n prte ére ds plnts de euclipto os 60 e 90 dis de idde. Pr o teor de N nos tecidos d prte ére, consttou-se que o trtmento com mistur de isoldos UFSC-SA9 + UFSC-Pt188 proporcionou gnhos significtivos no cúmulo de N em relção o controle. Ests plnts cumulrm em torno de 45 g kg -1 de N em seus tecidos, enqunto que s plnts do trtmento controle cumulrm 35 g kg -1 de N nos primeiros 60 dis de experimento (Figur 4). Em seguid, com vlores próximos, ms que diferem esttisticmente, vêm s plnts com os isoldos UFSC-Pt116, UFSC-Pt116 + UFSC-SA9, UFSC-Pt116 + UFSC-Pt188, UFSC-Pt116 + UFSC- Pt188 + UFSC-SA9, UFSC-SA9, UFSC-Pt188 e o controle. Observ-se que, pr o cúmulo de N n prte ére, s plnts que mis se destcrm form quels com misturs de isoldos, contrrindo o que vinh ocorrendo ns vriáveis nteriores. Aos 90 dis de experimento, verificou-se que os teores de N nos tecidos d prte ére ds plnts não vrirm significtivmente, ms mnteve-se cert superioridde dos trtmentos com misturs de isoldos (Figur 4). Todvi, houve um redução dos 60 pr os 90 dis, que pode ter ocorrido em virtude do rápido crescimento ds plnts, que os 90 dis erm cerc de 3 vezes miores que os 60 dis. Isto pode ter provocdo um efeito de diluição do N nos tecidos ds plnts, ocsionndo um menor concentrção deste nutriente n prte ére ds plnts. A redução no teor de nitrogênio pode ser devido o esgotmento deste minerl no substrto utilizdo, já que dubção nitrogend foi feit pens n semedur, pr simulr o que ocorre nos viveiros florestis. Ci. Fl., v. 22, n. 2, br.-jun., 2012

8 258 Souz, E. L. et l. 50 Concentrção folir de N (g kg -1 ) c b bc 60 dis 90 dis b c b bc 0 CONTROLE UFSC-Pt116 UFSC-SA9 UFSC-Pt188 UFSC-Pt116 + UFSC-SA9 UFSC-Pt116 + UFSC-Pt188 UFSC-SA9 + UFSC-Pt188 UFSC-Pt116 + UFSC-Pt188 + UFSC-SA9 FIGURA 4: Teores de nitrogênio (N) n prte ére ds muds de Euclyptus grndis produzids no substrto turf, inoculds e não inoculds, com diferentes isoldos de fungos ectomicorrízicos, individulmente ou em mistur, os 60 e 90 dis pós o plntio em cs de vegetção. Médis seguids ds mesms letrs ns brrs não diferem, esttisticmente entre si, pelo teste de Tukey 5%. FIGURE 4: Nitrogen (N) levels in Euclyptus grndis seedlings shoots produced in the pet, inoculted nd non-inoculted with different isoltes of mycorrhizl fungi isolted or combined, 60 nd 90 dys fter plnting in the greenhouse. Averges followed by sme letters in columns do not differ significntly by Tukey test t 5%. Qunto o teor de fósforo (P) n prte ére, os 90 dis verificou-se superioridde significtiv ds misturs UFSC-Pt116 + UFSC-SA9 e UFSC- Pt116 + UFSC-Pt188 + UFSC-SA9, 50% e 75% de cúmulo de P nos tecidos com relção o controle, respectivmente. Verificou-se ind que dos 60 pr os 90 dis ocorreu um qued nos teores de P nos tecidos, o que pode ter contecido pelo esgotmento do P no substrto, já que esse não foi diciondo o substrto n hor d semedur, ou tmbém por efeito de diluição deste nutriente nos tecidos d plnt, pois, os 90 dis s plnts erm cerc de 3 vezes miores que os 60 dis. Estes resultdos corrborm com os obtidos por Souz (2008) que, trblhndo com euclipto, verificou que s plnts inoculds tiverm os miores teores de fósforo cumuldos nos tecidos (Figur 5). Embor s txs de colonizção tenhm sido bixs, os efeitos positivos no umento do crescimento, mss sec e bsorção de P são evidentes, demonstrndo eficiênci de lguns isoldos vlidos (Figur 5). É possível que presenç dos isoldos no mbiente rizosférico tenh infuencido positivmente o crescimento ds plnts. Muitos fungos têm mostrdo cpcidde de solubilizr fosftos e de produzir substâncis Ci. Fl., v. 22, n. 2, br.-jun., 2012

9 Efeito d inoculção com isoldos de fungos ectomicorrízicos sobre o desenvolvimento promotors de crescimento (NARLOCH, 2002), fvorecendo o crescimento e cúmulo de P pels plnts. Anlisndo-se os vlores de K nos tecidos, não se verificou superioridde significtiv ds muds inoculds com relção o controle (Figur 6). Os resultdos obtidos sugerem possibilidde de inoculr s muds de Euclyptus grndis no viveiro, pr que o fungo poss ser levdo o cmpo com grnde probbilidde de contribuir pr o bom estbelecimento e desenvolvimento ds muds. Dinte d grnde vribilidde ecotípic encontrd entre isoldos de um mesm espécie de fungo ectomicorrízico (TRAPPE e FOGEL, 1977), poderá hver um comportmento diferencido entre os micossimbiontes, qundo colocdos em diferentes substrtos e solos. Concentrção folir de P (g kg -1 ) b c b bc b c 60 dis 90 dis b b b bc bc b bc b 0.0 CONTROLE UFSC-Pt116 UFSC-SA9 UFSC-Pt188 UFSC-Pt116 + UFSC-SA9 UFSC-Pt116 + UFSC-Pt188 UFSC-SA9 + UFSC-Pt188 UFSC-Pt116 + UFSC-Pt188 + UFSC-SA9 FIGURA 5: Teores de fósforo (P) n prte ére ds muds de Euclyptus grndis produzids no substrto turf, inoculds e não inoculds com diferentes isoldos de fungos ectomicorrízicos, individulmente ou em mistur, os 60 e 90 dis pós o plntio em cs de vegetção. Médis seguids ds mesms letrs ns brrs não diferem, esttisticmente entre si, pelo teste de Tukey 5%. FIGURE 5: Phosphorus (P) levels in Euclyptus grndis seedlings shoots produced in the pet, inoculted nd non-inoculted with different isoltes of mycorrhizl fungi isolted or combined, 60 nd 90 dys fter plnting in the greenhouse. Averges followed by sme letters in columns do not differ significntly by Tukey test t 5%. Ci. Fl., v. 22, n. 2, br.-jun., 2012

10 260 Souz, E. L. et l. 30 Concentrção folir de K (g kg -1 ) b b 60 dis 90 dis b b b b 0 CONTROLE UFSC-Pt116 UFSC-SA9 UFSC-Pt188 UFSC-Pt116 + UFSC-SA9 UFSC-Pt116 + UFSC-Pt188 UFSC-SA9 + UFSC-Pt188 UFSC-Pt116 + UFSC-Pt188 + UFSC-SA9 FIGURA 6: Teores de potássio (K) n prte ére ds muds de Euclyptus grndis produzids no substrto turf, inoculds e não inoculds com diferentes isoldos de fungos ectomicorrízicos, individulmente ou em mistur, os 60 e 90 dis pós o plntio em cs de vegetção. Médis seguids ds mesms letrs ns brrs não diferem, esttisticmente entre si, pelo teste de Tukey 5%. FIGURE 6: Potssium (K) levels in Euclyptus grndis seedlings shoots produced in the pet, inoculted nd non-inoculted with different isoltes of mycorrhizl fungi isolted or combined, 60 nd 90 dys fter plnting in the greenhouse. Averges followed by sme letters in columns do not differ significntly by Tukey test t 5%. CONCLUSÃO A inoculção com o isoldo fúngico ectomicorrízico UFSC-Pt116 promoveu mior ltur e mss sec d prte ére de muds de Euclyptus grndis. As muds de euclipto inoculds com misturs dos isoldos de fungos ectomicorrízicos UFSC-Pt116 + UFSC-Pt188 + UFSC-SA9 presentrm mior concentrção de fósforo os 90 dis. AGRADECIMENTO Os utores grdecem o Progrm de Pós-grdução em Ciênci do Solo (PPGCS) d Universidde Federl de Snt Mri, o Conselho Ncionl de Pesquis e Tecnologi (CNPq), Coordenção de Aperfeiçomento de Pessol de Nível Superior (CAPES) e FAPERGS pelo poio finnceiro este trblho. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ALVES, J. R. et l. Efeito de inoculnte ectomicorrízico produzido por fermentção semisólid sobre o crescimento de Euclyptus dunnii Miden. Pesquis Agropecuári Brsileir, Brsíli, v. 36, n. 2, p , fev BARROS, N. F.; BRANDI, R. M.; REIS, M. S. Ci. Fl., v. 22, n. 2, br.-jun., 2012

11 Efeito d inoculção com isoldos de fungos ectomicorrízicos sobre o desenvolvimento Micorriz em euclipto. Um revisão sobre morfologi, fisiologi e os efeitos mútuos d ssocição fungo-plnt. Revist Árvore, Viços, v. 2, n. 2, p , mio/go BONNASSIS, P. A. P. Crcterizção de isoldos fúngicos ectomicorrízicos n promoção do crescimento e n colonizção rdiculr de Euclyptus dunnii Miden. 2007, 68 f. Dissertção (Mestrdo em Biotecnologi)-Universidde Federl de Snt Ctrin, Florinópolis, BRUNDRETT, M. et l. Working with mycorrhizs in forestry nd griculture. Cnberr: ACIAR, 1996, 374 p. (Monogrph, 32). DITENGOU F. A.; LAPEYRIE F. Hypphorine from the ectomycorrhizl fungus Pisolithus tinctorius countercts ctivities of indole-3-cetic cid nd ethylene but not synthetic uxins in euclypt seedlings. Moleculr Plnt-Microbe Interctions v. 13, p , EMBRAPA. Centro Ncionl de Pesquis de Solos. Mnul de métodos de nálise de solo. 2. ed. Rio de Jneiro, 1997, 212 p. FERREIRA, D. F. Sistems de nálises esttístic pr ddos blncedos. Lvrs: UFLA/DEX/ SISVAR, p. GIOVANNETTI, M.; MOSSE, B. An evlution of techniques for mesuring vesiculr rbusculr mycorrhizl infection in roots. New Phytology. Lncster, v. 84, p , Mr GLOWA, K. R.; AROCENA, J. M.; MASSICOTTE, H. B. Extrction of potssium nd/or mgnesium from selected soil minerls by Piloderm. Geomicrobiology Journl, New York, v. 20, n. 2, p , Mr MARX, D. H. Ectomycorrhizl fungus inocultions: tool for improving foresttion prctices. In: P. MIKOLA (Ed.) Tropicl Mycorrhiz Reserch. Oxford: Pub. Clrendon Press, p , MARX, D. H. The influence of ectotrophic mycorrhizl fungi on the resistnce of pine roots to pthogenic infections. I. Antgonism of mycorrhizl fungi to root pthogenic fungi nd soil bcteri. Phytopthology. Sint Pul, v. 59, n. 2, p , Feb MARX, D. H. The prcticl significnce of ectomycorrhize in Forest estblishment. In: THE MARCUS WALLENBERG FOUNDATION SYMPOSIUM, 7., 1991, Stockolm. Proceedings... Wllenberg Foundtion, 1991, p MARX, D. H.; CORDELL, C. E. The use of specific ectomycorrhizl to improve rtificil foresttion prctices. In: WHIPPS, J. M.; LUMSDEN, R. D. (eds). Biotechnology of fungi for improving plnt growth. New York: Acdemic Press, p MELLO, A. H. Ocorrênci, crcterizção e eficiênci de fungos micorrízicos em Euclyptus grndis e Acáci mernsii. 2006, 236 f. Tese (Doutordo em ciênci do Solo)-Universidde Federl de Snt Mri, Snt Mri, MOLINA, R.; TRAPPE, J. M. Mycorrhiz mngement in breroot nurseries. In: DURYEA, M. L.; LANDIS, T. D. (eds). Forestry nursery mnul: production of brerrot seedlings. Lncster, 1984, p MOREIRA, F. M. S.; SIQUEIRA, J. O. Microbiologi e bioquímic do solo. Lvrs: UFLA, p. NARLOCH, C. Interção microrgnismos solubilizdores de fosftos - fungos ectomicorrízicos e o crescimento de Pinus ted L. 2002, 171 f. Dissertção (Mestrdo em Biotecnologi)-Universidde Federl de Snt Ctrin, Florinópolis, SANTOS, J. D. E. et l. Eficiênci de fungos micorrízicos rbusculres isoldos de solos de áres de minerção de buxit no crescimento inicil de espécies ntivs. Revist Brsileir de Ciênci do Solo, Viços, v. 32, n. 1, p , jn./fev SMITH, S. E.; READ, D. J. Mycorrhizl symbiosis. London: Acdemic Press, 1997, 605 p. SOCIEDADE BRASILEIRA DE CIÊNCIA DO SOLO. COMISSÃO DE QUÍMICA E FERTILIDADE DO SOLO RS/SC. Mnul de dubção e clgem pr os Estdos do Rio Grnde do Sul e de Snt Ctrin. 10. ed. Porto Alegre: SBCS, Comissão de Químic e Fertilidde do Solo, p. SOUZA, L. A. B. et l. New isoltes of ectomycorrhizl fungi nd the growth of euclyptus. Pesquis Agropecuári Brsileir, Brsíli, v. 43, n. 2, p , fev SOUZA, L. A. B. Seleção de fungos ectomicorrízicos eficientes pr promoção do crescimento de Euclyptus dunnii Miden. 2003, 117 f. Dissertção (Mestrdo em Biotecnologi)- Universidde Federl de Snt Ctrin, Florinópolis, TEDESCO, M. J. et l. Análise de solo, plnts e outros mteriis. 2 ed. Porto Alegre: UFRGS, p. TRAPPE, J. M.; FOGEL, R. D. Ecosystemtic functions of mycorrhize. In: The bellow ground ecosystem: A synthesis of plnt-ssocited process. Rng Science, v. 26, n. 3, p , Ci. Fl., v. 22, n. 2, br.-jun., 2012