F O L H E T O I N F O R M A T I V O D O P R O D U T O

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1 Immucor Transplant Diagnostics, Inc. 550 West Avenue, Stamford, Connecticut 0690; E.U.A.(USA) Tel: +1 (0) or (888) (em E.U.A. e no Canadá), Fax: +1(0) Documentação e traduções do produto disponíveis em: F O L H E T O I N F O R M A T I V O D O P R O D U T O LIFECODES LifeScreen Deluxe (LMX) é um teste por filtração Luminex para detecção de anticorpos IgG a moléculas de origem humana HLA Classe I e HLA Classe II. Para utilização de diagnóstico in vitro. Definição dos Símbolos Utilização Prevista.. Resumo e Explicação..... Princípios do Procedimento.... Reagentes.... A. Identificação. B. Advertências e cuidados.... C. Instruções de Armazenamento D. Tratamento para Utilização..... E. Indicações de Instabilidade.. Requisitos do Instrumento... Colheita e Preparação de Amostra... 1 ÍNDICE Procedimento A. Materiais Fornecidos B. Materiais Necessários não Fornecidos... Instruções de Utilização... Controlo de Qualidade. Resultados. Limitações do Procedimento Resolução de Problemas.. Características do funcionamento específico Referências DEFINIÇÃO DOS SÍMBOLOS (Etiquetas do Produto e Documentos Suplementares) Código do lote Diluir antes de utilizar Nome do Paciente DIL NAME Número de Catálogo Sensível à luz (Conservar ao abrigo da luz) Número de Identificação Prazo de validade Suficiente para N testes Gama de temperatura (armazenamento) Consulte as instruções de utilização ID# Data DATE Técnico TECH Grânulo BEAD Grupo étnico ETHN Dador DONOR Mediana da intensidade da fluorescência Grânulo de Controlo Positivo (Imunoglobina G) Data da Colheita de Sangue MFI Resultado (ver secção Resultados) SCORE Interpretação INTRP Factores de Ajuste de Luminosidade Grânulo de Controlo Negativo IgG Classe I CLI Classe II CLII Amostra SAMPLE BDT Número de Grânulos que possuem Antigénio Fabricante Representante autorizado na Comunidade Europeia BAF CON Intervalos observados Observed Ranges Controlos Controls Riscos biológicos Atenção! Ver documentos de acompanhamento N.º de Lote da Mistura de Grânulos Bead Mix Lot # Advertência Página 1 de 6 LC100IVDPT.15 (05/16)

2 UTILIZAÇÃO PREVISTA O LIFECODES LifeScreen Deluxe é um imunoensaio qualitativo baseado em grânulos utilizado para detectar anticorpos IgG a moléculas HLA Classe I e Classe II. RESUMO E EXPLICAÇÃO Os antigénios leucocitários humanos (HLA) são um sistema de glicoproteínas que têm um papel funcional na apresentação de péptidos no sistema imunológico. 1, Contudo, como um sistema altamente polimórfico, as moléculas de HLA podem tornar-se no alvo das respostas por anticorpos em pessoas durante gravidez, transfusão de produtos sanguíneos, ou rejeição de transplante de órgãos. Geralmente, a aloimunização conduz à produção de anticorpos específicos ao HLA em aproximadamente % dos indivíduos expostos. A presença ou ausência destes anticorpos específicos ao HLA tem um papel na determinação da sobrevivência dos alotransplantes. 4 Os grânulos LIFECODES LifeScreen Deluxe são concebidos para detectar anticorpos IgG a antigénios HLA Classe I e Classe II. O LifeScreen é composto por grânulos Luminex únicos, com os quais se conjugam as glicoproteínas HLA Classe I e HLA Classe II purificadas por afinidade. PRINCÍPIOS DO PROCEDIMENTO Deixa-se incubar uma alíquota dos grânulos com um pequeno volume da amostra do soro de teste. Os grânulos sensibilizados são depois lavados para remoção do anticorpo não fixado. É então acrescentado um anticorpo IgG anti-humana conjugada com picoeritrina. Após outra incubação, a amostra de teste é diluída e analisada no instrumento Luminex. A intensidade de sinal de cada grânulo é comparada à intensidade de sinal de um grânulo de controlo negativo incluído na preparação do grânulo para determinar se o grânulo é positivo ou negativo a aloanticorpo ligado. REAGENTES A. Identificação 6815: LMX LIFECODES LifeScreen Deluxe é constituído por cinco (5) componentes. São fornecidos os seguintes produtos em quantidades suficientes para 96 testes. 1. Grânulos LifeScreen Deluxe LMXB (480 µl): Uma combinação de grânulos conjugados com glicoproteínas HLA Classe I ou glicoproteínas HLA Classe II mais quatro (4) grânulos de controlo. O tampão de memória é um tampão de fosfato que contém NaCl, Tween- 0, ProClin00 e albumina sérica de bovinos. SENSÍVEL À LUZ. Assegurar que a exposição à luz seja até um máximo de três horas. Pronto a utilizar. Guardar entre C e 8 C no escuro.. Conjugado Concentrado LMCJS (550 µl): 10x IgG de cabra anti-humana conjugada com picoeritrina num tampão de memória de fosfato contendo NaCl, Tween-0, azida de sódio e albumina sérica de bovino. DIL DEVE SER DILUÍDO na proporção 1:10 na Solução Tampão antes de ser utilizado. SENSÍVEL À LUZ. Assegurar que a exposição à luz seja até um máximo de três horas. Guardar entre C e 8 C no escuro.. Solução Tampão LMWB (150 ml): Um tampão de fosfato contendo NaCl, Tween-0, azida de sódio e albumina sérica de bovinos. Pronto a utilizar. Armazenar a uma temperatura entre ºC e 8 ºC e, antes de utilizar, equilibrar à temperatura ambiente (0 ºC a 4 ºC). São fornecidos os seguintes produtos em quantidade suficiente para seis (6) execuções: 4. Soro Controlo Positivo LMPC (80 µl): Este soro ou mistura de soros obtém-se de indivíduo ou indivíduos que mostram ser aloimunizados aos antigénios HLA. Contém azida de sódio. Pronto a utilizar. Armazenar entre C e 8 C. 5. Soro Controlo Negativo LMNC (80 µl): Este soro ou mistura de soros obtém-se de indivíduo ou indivíduos que se sabe não terem anticorpos para os antigénios HLA. Contém azida de sódio. Pronto a utilizar. Armazenar entre C e 8 C. B. Advertências ou Cuidados 1. Para utilização de diagnóstico in vitro. O material de origem humana usado na produção deste kit foi testado através de métodos aprovados pela FDA e considerado negativo quanto a anticorpos para HIV, HCV e HBsAg. No entanto, nenhum método de teste pode oferecer segurança completa quanto à ausência de agentes infecciosos. Por essa razão, observe as Precauções Universais quando trabalhar com estes materiais.. A substituição de componentes por outros que não fazem parte deste sistema pode originar resultados erróneos. 4. Alguns reagentes contêm 0,1% de azida de sódio como conservante, que pode reagir com canalizações de chumbo e cobre e formar azidas de metal potencialmente explosivas. Utilize grandes quantidades de água quando eliminar materiais através da canalização do lavatório. 5. A contaminação bacteriológica de amostras ou a presença de imunocomplexos ou outros agregados de imunoglobulina podem causar ligação não específica aumentada e resultados erróneos. 6. Este produto detecta anticorpos IgG que podem ser ou não ser linfocitotóxicos. 7. Não se espera que este produto detecte anticorpos de imunoglobulina das classes IgA ou IgM. 8. Estes produtos são concebidos para ser usados com o instrumento Luminex em conformidade com as recomendações do fabricante. 9. Eliminar todos os materiais após utilização de acordo com regulamentação local. 10. Ver fichas de dados de segurança do material para informações adicionais. C. Instruções de Armazenamento 1. Consultar as indicações de armazenamento nas etiquetas do produto.. Os Grânulos e os Conjugados Concentrados LifeScreen Deluxe são SENSÍVEIS À LUZ. Assegurar que a exposição à luz seja até um máximo de três horas. D. Tratamento Necessário para Utilização 1. Conjugado Concentrado LMCJS : DIL DEVE SER DILUÍDO na proporção 1:9 na Solução Tampão antes de ser utilizado. Preparar o Counjugado diluído juntando 5 μl de LMCJS a 45 μl de Solução Tampão, para cada poço de teste. Cobrir com folha de alumínio e/ou armazenar no escuro à temperatura ambiente (0 o C a 4 o C) até ser utilizado. Voltar a armazenar a porção não utilizada de LMCJS à temperatura entre C e 8 C no escuro, para futura utilização.. Solução Tampão LMWB : Equilibrar à temperatura ambiente (0 ºC a 4 ºC) antes de utilizar. Página de 6 LC100IVDPT.15 (05/16)

3 E. Indicações de Instabilidade 1. Não utilizar os componentes ou controlos que estejam turvos ou cujo prazo de validade tenha sido ultrapassado.. Eliminar todos os controlos diluídos positivos ou negativos não utilizados, e conjugar após utilização. REQUISITOS DO INSTRUMENTO Instrumento Luminex (Número de Produto Lifecodes 88800) COLHEITA E PREPARAÇÃO DE AMOSTRA O sangue deve ser colhido sem anticoagulante, usando técnica asséptica e deve ser testado enquanto ainda fresco para minimizar a possibilidade de obter reacções falso-positivas ou falso-negativas devido a armazenamento inadequado ou contaminação da amostra. O soro deve ser armazenado entre C a 8 C não mais do que 48 horas. Se o soro for armazenado durante mais do que 48 horas, deve ser congelado a ou abaixo de -0 C ou -80 C até anos. Os laboratórios individuais devem estabelecer e validar métodos para armazenamento de soros além de anos. O soro deve ser separado dos glóbulos vermelhos quando for armazenado ou transportado. Evitar a congelação e descongelação repetida das amostras de soro. Não utilizar soros com contaminação microbiana, hemolizados, lipémicos ou inactivados pelo calor, uma vez que estas amostras poderão originar resultados inconsistentes. Antes do ensaio, todas as amostras deverão ser agitadas com brevidade num agitador tipo vortex (0 segundos) e centrifugadas (4-5 minutos a x g) por forma a sedimentar qualquer matéria particulada que possa estar presente. PROCEDIMENTO A. Materiais Fornecidos (Para informação mais específica, ver REAGENTES na página ) Grânulos HLA Soro Controlo Negativo Conjugado Concentrado Ficha de Registo Solução Tampão Folhas de Formato das Placas Soro Controlo Positivo B. Materiais, Reagentes e Equipamento Necessários mas não Fornecidos (conforme listagem ou equivalente) Pipetas ajustáveis de 5 µl 50 µl com pontas de pipeta adequadas Pipeta multicanais de 50 µl com pontas a condizer e bebedouro do tampão Rotador ou agitador tipo vórtex com adaptador de prato Placas de filtro multifiltro Millipore (Cat # MSBVN 110, LIfeCodes #8886) Tubos de microcentrifugadora de 1,5,0 ml Vedantes adesivos de placa (LifeCodes #88861) Tubos de teste para amostras de pacientes e de controlos Distribuidor de vácuo multifiltro (Millipore Cat #MAVM 0960R ou Qiagen Cat#19504, Lifecodes Cat# 88815) Temporizador Estojo de Fluido Luminex (1x ou 0x Lifecodes 68005, 6805) Caneta-marcador Grânulos de calibração Luminex (CAL 1, CAL, CON 1, CON ; Lifecodes 68006, 68007, 68008, 68009) Água destilada Microcentrifugadora INSTRUÇÕES DE UTILIZAÇÃO PRECAUÇÕES: TEM DE SE TER cuidado para evitar a contaminação da Solução Tampão e do reagente para o Conjugado Concentrado (IgG antihumana). A contaminação inadvertida destes reagentes com soro humano resultará na neutralização da IgG anti-humana e consequentemente, resultará na falha do teste. O controlo da força do vácuo deve ser feito com precaução. Pressão elevada de vácuo pode provocar a aderência dos grânulos à membrana, induzindo a erro na contagem dos grânulos. Devem ser tomadas precauções durante o processo de pipetagem na placa de filtro, para que a ponta da pipeta não toque na membrana. O contacto da ponta da pipeta com a membrana poderá causar perfuração da membrana e consequentemente a falha do ensaio. Devem ser tomadas precauções para assegurar, durante os passos da incubação, que os grânulos não salpicam e não aderem às partes laterais dos poços. Ao executar o ensaio pela primeira vez, executar alguns controlos positivos e/ou negativos para determinar a velocidade ideal da plataforma rotativa ou do misturador tipo vortex. Uma velocidade de aproximadamente 00 rotações por minuto tem demonstrado ser eficaz com alguns instrumentos. A presença de níveis significativos de anticorpo não fixado na finalização da lavagem, devido ao soro em excesso ou à lavagem deficiente, pode reduzir a capacidade do ensaio detectar IgG ligada a grânulos sensibilizados, e causar resultados erróneos. Amostras de soros de controlo positivos e negativos devem ser incluídas com cada teste, para ajudar a determinar se ocorreram erros técnicos ou falhas do reagente. Não misturar componentes de diferentes lotes. Página de 6 LC100IVDPT.15 (05/16)

4 Procedimento do teste: 1. Deixando os outros componentes à temperatura entre ºC e 8 ºC no escuro até serem necessários, deixar a Solução Tampão atingir a temperatura ambiente (0 ºC a 4 ºC) antes da utilização. Durante este tempo, utilizar a Ficha de Formato da Placa para atribuir uma posição na placa para cada um dos soros e controlos a analisar. Os soros de controlo fornecidos no kit são utilizados para ilustrar um alo-anticorpo positivo largamente reactivo e um soro negativo.. Cobrir os poços da Placa de filtro não atribuídos com cobertura plástica adesiva. Em seguida molhar previamente os poços que vão ser utilizados com µl de água destilada. Após a 5 minutos, retirar a água por meio de aspiração cuidadosa da placa utilizando o distribuidor de vácuo. (Ver as recomendações do fabricante para uma utilização adequada.). Preparar os grânulos HLA centrifugando com brevidade (0 segundos) o frasco a x g, para remover quaisquer grânulos ou líquido que tenham ficado na tampa ou nas paredes do frasco. Agitar bem em vórtice (~1 minuto) de forma a voltar a suspender os grânulos com uma distribuição uniforme. 4. Adicionar 40 µl de Solução Tampão a cada poço de teste da Placa de filtro, seguido de 1,5 µl de soro do paciente ou de soro de controlo e misturar. 5. Adicionar 5 µl de grânulos HLA a cada um dos poços atribuídos. Voltar a agitar em vórtice o frasco dos grânulos HLA de em minutos, de forma a manter os grânulos em suspensão enquanto se procede à distribuição dos mesmos. ATENÇÃO: É importante manter os grânulos em suspensão para assegurar que grânulos suficientes são aplicados nos poços, e para assegurar tempos baixos de contagem. A ausência de agitação intermitente em vortex dos grânulos, provocará a sedimentação destes no fundo do tubo. Isto provocará uma diferença na quantidade de grânulos dispensados nos poços, o que poderá afectar adversamente os tempos de execução e a análise dos resultados. 6. Cobrir a placa com a cobertura plástica adesiva, embrulhando-a depois em folha de alumínio ou colocá-la em caixa para a conservar ao abrigo da luz. Incubar durante 0 minutos à temperatura ambiente (0-4 C) no escuro, numa plataforma rotativa (00 rotações por minuto). Voltar a armazenar as porções não utilizadas de soros de controlo e de grânulos à temperatura entre C e 8 C no escuro, para futura utilização. 7. Diluir o conjugado com solução tampão e armazenar no escuro (5 µl de conjugado para 45 µl de solução tampão por amostra). Para compensar as perdas na pipetagem, é desejável fazer um (1) volume extra de conjugado diluído. Cobrir com folha de alumínio e/ou armazenar no escuro à temperatura ambiente até ser utilizado. Voltar a armazenar a porção não utilizada de Conjugado Concentrado à temperatura entre C e 8 C no escuro, para futura utilização. 8. Após a incubação de 0 minutos, remover a cobertura plástica adesiva e adicionar 100 µl de Solução Tampão a cada poço. Misturar dando pancadas ligeiras na parte lateral da placa, e aspirar cuidadosamente a placa. ATENÇÃO: A utilização de elevada pressão de vácuo irá provocar a aderência dos grânulos à membrana, e poderá resultar em falha da amostra. Para aspiração das amostras, aplicar a pressão mínima de vácuo. 9. Adicionar 50 µl de Solução Tampão a cada poço, aspirar e repetir mais duas vezes, para um total de três lavagens. ATENÇÃO: Caso a lavagem não seja devidamente feita, a capacidade do conjugado detectar IgG ligada a grânulos sensibilizados poderá ficar reduzida, causando resultados falso-negativos. 10. Adicionar 50 µl de conjugado diluído a cada poço. Cobrir a placa com folha de alumínio, ou colocá-la em caixa para a conservar ao abrigo da luz. Colocar numa plataforma rotativa (ajustada em 00 rotações por minuto) ou agitar em vórtice ligeiramente cada 5 a 10 minutos. Incubar durante 0 minutos à temperatura ambiente (0 a 4 C). 11. Utilizando uma ponta de pipeta limpa, adicionar 150 µl de Solução Tampão a cada poço e mexer para voltar a suspender os grânulos. 1. Recolher os dados com o instrumento Luminex seguindo as recomendações do fabricante. Atrasos superiores a horas podem aumentar a possibilidade de obter reacções falso-positivas ou falso-negativas. Voltar a armazenar a porção não utilizada de Solução Tampão à temperatura entre C e 8 C no escuro, para futura utilização. CONTROLO DE QUALIDADE O controlo de qualidade do ensaio LMX está integrado no sistema de teste através da inclusão de quatro grânulos de controlo (um grânulo de controlo positivo e três grânulos de controlo negativo). Os grânulos de Controlo Negativo (CON) medem os valores de fundo do ensaio e são utilizados para normalizar o sinal dos grânulos HLA. Estes grânulos deverão apresentar valores baixos de MFI. Para os intervalos observados para os Grânulos de Controlo Negativo, consultar a ficha de registo específica do lote. Os dados fora do intervalo deverão ser examinados cuidadosamente. O Grânulo de Controlo Positivo (Probe 77) é revestido de IgG humana e terá de apresentar valores > MFI com o Soro de Controlo Positivo ou o Soro de Controlo Negativo. Se forem obtidos valores inferiores a , a lavagem do ensaio poderá ter sido insuficiente ou o conjugado poderá não estar bom. As amostras de pacientes podem apresentar um intervalo de reactividade alargado com o Grânulo de Controlo Positivo (Probe 77), mas devem produzir um sinal > 500 MFI. Na ausência de soros, o Probe 77 dará um sinal forte, enquanto que os restantes grânulos darão em média cerca de 50 MFI ou menos. Se uma amostra de teste produzir um padrão semelhante de valores, então a amostra poderá ter sido omitida inadvertidamente. Estas amostras deverão ser repetidas. Os Soros de Controlo Positivo e Negativo são fornecidos com cada kit para servirem de controlos de ensaio externos, e devem ser incluídos em cada execução. O Soro de Controlo Positivo deve ter um resultado positivo registado para o Probe I-01 e Probe II-01. O Soro de Controlo Negativo deve ter um resultado negativo registado para todos os grânulos. Página 4 de 6 LC100IVDPT.15 (05/16)

5 O ensaio deve ser executado conforme recomendado na folha de dados da embalagem, devendo igualmente ser executado com quaisquer outros procedimentos de controlo de qualidade que estejam em conformidade com os requisitos locais, estaduais, federais e/ou das agências de acreditação. RESULTADOS Para determinar se uma amostra de teste é positiva para anticorpos específicos de HLA Classe I e HLA Classe II, cada grânulo HLA individual é primeiro avaliado para determinar se é positivo ou negativo para anticorpos IgG. Para determinar se um grânulo HLA individual é positivo, dividir primeiro a MFI (Intensidade Fluorescente Média) do grânulo individual pela MFI de cada Grânulo de Controlo Negativo (CON1, CON, CON). A partir destes quocientes, subtrair o Factor de Ajuste de Luminosidade (BAF) para a combinação grânulo/com apropriada. O BAF é um rácio pré-determinado da MFI para cada combinação grânulo/com, para compensar o ruído de fundo devido à variação do grânulo. Para os valores de BAF, consultar a Ficha de Registo específica do lote fornecida com o kit. Exemplo: MFI do Grânulo Individual - (BAF) = Rácio 1 ajustado MFI Grânulo de Controlo Negativo 1 (CON 1) MFI do Grânulo Individual MFI Grânulo de Controlo Negativo (CON ) MFI do Grânulo Individual MFI Grânulo de Controlo Negativo (CON ) - (BAF) = Rácio ajustado - (BAF) = Rácio ajustado Para o PROBE I-01 e o PROBE II-01, um valor positivo para qualquer um dos cálculos indica uma reacção do grânulo positiva. Para todos os outros grânulos, um valor positivo para quaisquer dois dos três cálculos indica uma reacção do grânulo positiva. Um valor negativo para todos os três cálculos indica uma reacção do grânulo negativa. Avaliação de uma Amostra de Teste Uma amostra é considerada positiva para anticorpos específicos de HLA Classe I se pelo menos um dos sete (7) grânulos HLA de classe I for positivo. Uma amostra é considerada positiva para anticorpos específicos de HLA Classe II se pelo menos um dos cinco (5) grânulos HLA de classe II for positivo. Uma amostra é considerada negativa para anticorpos IgG específicos de HLA se todos os grânulos HLA forem determinados como negativos. LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO Os resultados deste teste não podem ser utilizados como a única base para se tomar uma decisão clínica. Podem ocorrer resultados erróneos devido a contaminação bacteriológica dos materiais de teste, períodos de incubação inadequados, lavagem inadequada dos grânulos, exposição do conjugado a luz acidental, ou omissão de reagentes ou de passos do teste. A presença de imunocomplexos ou outros agregados de imunoglobulina na amostra do paciente pode causar uma ligação não específica aumentada e produzir resultados erróneos no ensaio. Este produto detecta anticorpos IgG que podem ser ou não ser linfocitotóxicos. Os anticorpos detectados são os reactivos incluídos na população de antigénios disponíveis, listados na Ficha de Registo. A capacidade de detectar um anticorpo (IgG) baseia-se na afinidade e na titulação do anticorpo, e na frequência relativa do epítopo alvo presente no grânulo. Os anticorpos (IgG) com uma baixa afinidade e/ou baixa titulação que sejam específicos para epítopos de baixa frequência, podem não ser detectados com o Ensaio LIFECODES LifeScreen Deluxe. O LifeScreen Deluxe é composto por grânulos únicos Luminex aos quais são conjugados glicoproteínas HLA Classe I e HLA Classe II purificadas por afinidade. Para o PROBE I-01, as glicoproteínas antigénio HLA Classe I purificadas por afinidade, são obtidas a partir de plaquetas de 100 dadores de sangue Caucasianos, 100 Afro-americanos e 100 Hispânicos. As glicoproteínas HLA Classe I purificadas por afinidade a partir de linfócitos B transformados pelo EBV e ligadas aos PROBES I-0 até ao I-07 estão listadas na ficha de registo específica do lote. Para o PROBE II-01, as glicoproteínas antigénio HLA Classe II purificadas por afinidade utilizadas no fabrico deste produto, derivam de linfócitos B transformados pelo EBV que representam os seguintes antigénios HLA Classe II: DR1, DR4, DR7, DR8, DR9, DR10, DR11, DR1, DR1, DR14, DR15, DR16, DR17, DR18, DR10, DR51, DR5 e DR5. As glicoproteínas HLA Classe II purificadas por afinidade a partir de linfócitos B transformados pelo EBV e ligadas aos PROBES II-0 até ao II-05 estão listadas na ficha de registo específica do lote. A determinação da reactividade de uma amostra baseia-se em ter pelo menos um grânulo positivo. A reactividade de cada grânulo individual baseia-se em atingir um número mínimo de Rácios Ajustados positivos. Algumas amostras poem produzir Rácios Ajustados iguais ou próximos dos valores limiares e é lhes designada uma reactividade positiva com base num Rácio Ajustado positivo. Subsequentemente, a determinação da reactividade do anticorpo para a amostra testada com o ensaio LIFECODES LifeScreen Deluxe deve ter em conta os resultados específicos de todos os grânulos, o número de Rácios Ajustados Positivos necessários para cada grânulo e se os três Rácios Ajustados para cada grânulo têm um valor igual ou próximo do valor limiar. Devido à natureza complexa dos testes a antigénios HLA, a interpretação dos dados deve ser verificada por pessoal qualificado. O conhecimento do histórico do paciente assim como a compreensão dos grupos com reactividade cruzada, podem ser úteis na atribuição da reactividade de anticorpos a um determinado soro. Página 5 de 6 LC100IVDPT.15 (05/16)

6 RESOLUÇÃO DE PROBLEMAS PROBLEMA CAUSA POSSÍVEL SOLUÇÃO Impulsionar o vortex para voltar a Deficiente suspensão da Mistura dos grânulos suspender completamente Falhas do instrumento - descalibrado Ver o Manual do Instrumento Falhas do instrumento - passagem da amostra Ver o Manual do Instrumento Baixa Contagem de Grânulos bloqueada Foto-descoloração dos grânulos Utilizar novo kit Pressão de vácuo demasiado forte/grânulos colados à Diminuir a força do vácuo membrana Lavagem deficiente Repetir e verificar as lavagens Limiar de Controlo Ultrapassado Qualidade deficiente da amostra Voltar a fazer a colheita Foto-descoloração do conjugado Utilizar novo kit Falha do Limiar de Controlo Positivo Lavagem deficiente Repetir e verificar as lavagens CARACTERÍSTICAS DO FUNCIONAMENTO ESPECÍFICO Quando os kits LIFECODES LifeScreen Deluxe são utilizados de acordo com o procedimento descrito, os resultados revelam a presença ou a ausência de anticorpos IgG HLA. Na detecção de anticorpos específicos HLA Classe I, os kits LifeScreen Deluxe apresentaram 100% de co-positividade (97,6-100%), 91% de co-negatividade (87,-94,1%) e 95% de concordância para 417 amostras de soros avaliadas quando comparado com resultados obtidos pelo método LifeScreen (intervalo de confiança de 95%). Na detecção de anticorpos específicos HLA Classe II, os kits LifeScreen Deluxe apresentaram 100% de co-positividade (97,8-100%), 9% de co-negatividade (89,5-95,8%) e 96% de concordância para 44 amostras de soros avaliadas quando comparado com resultados obtidos pelo método LifeScreen (intervalo de confiança de 95%). Os seguintes reagentes foram avaliados em testes de laboratório e não interferiram com o LIFECODES LifeScreen Deluxe: Remicade (Centocor), Rituxin (Genentech), Zenapax (Roche), Campath (Genzyme) e Gammaguard (Baxter). Em contrapartida, mostrou-se que a Timoglobulina (Genzyme) provoca resultados falso-positivos. Amostras que contenham Timoglobulina poderão dar resultados incorrectos. REFERÊNCIAS 1. Klein, J, Sato, A. The HLA System. N. Engl. J. Med. 000; 4:70 and 4:78.. Parham, P. The Immune System. Garland Publishing, N.Y. and London. 000; 55. FABRICANTE E REPRESENTANTE AUTORIZADO. Rodey, GE. HLA Beyond Tears ( nd Edition). DeNovo, Inc. Durango, CO. 000; McKenna, RM; Takemoto, SK; Terasaki, PI. Anti-HLA Antibodies after Solid Organ Transplantation. Transplantation 000; 69:19. Fabricante: Para Immucor Transplant Diagnostics, Inc., 550 West Avenue, Stamford, Connecticut 0690, E.U.A.(USA) Telefone: , em E.U.A. e no Canadá;Fax: Representante Autorizado: Immucor Medizinische Diagnostik GmbH, Adam-Opel-Strasse 6A Rodermark 6, Alemanha Telefone: (+49) , Fax: (+49) Serviço Técnico Europeu: +/ Edição: Rev 15, Página 6 de 6 LC100IVDPT.15 (05/16)