2. Aplicabilidade: Bioquímicos/biomédicos do setor de imunologia
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- Zaira Canário Pinho
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1 1. Sinonímia: HIV triagem, HIV teste rápido. 2. Aplicabilidade: Bioquímicos/biomédicos do setor de imunologia 3. Aplicação clínica Utilizado para investigar a infecção pelo vírus da imunodeficiência humana. No Brasil, o diagnóstico da infecção pelo HIV é regulamentado por meio da Portaria 29, de 17 de dezembro de 2013, que aprova o Manual Técnico para o Diagnóstico da Infecção pelo HIV em Adultos e Crianças. Uma vez diagnosticado como portador da infecção pelo HIV, o indivíduo deve ser encaminhado prontamente para atendimento em uma Unidade Básica de Saúde do Sistema Único de Saúde ou para um SAE. Após suspeita de risco de infecção pelo HIV, deve-se considerar o tempo necessário para que o exame detecte a presença do HIV no sangue ou fluido corporal utilizado para o diagnóstico da infecção. A duração desse período depende do tipo do teste, da sensibilidade e do método utilizado para detectar o marcador, seja ele RNA viral, DNA pró-viral, antígeno p24 ou anticorpo. Por isso, é preciso estar atento a esse período em casos de risco de infecção recente e resultado negativo de sorologia anti-hiv. 4. Princípio do teste Trata-se de um teste qualitativo que utiliza um conjugado composto por antígenos recombinantes associados com ouro coloidal. Esse conjugado está impregnado na membrana presente no dispositivo de teste e funciona como revelador do teste. Baseia-se na tecnologia de imunocromatografia 1
2 de fluxo lateral, permite a detecção de anticorpos das classes IgG, IgM e IgA, específicos para HIV-1, incluindo grupo O, e HIV-2. O produto HIV TEST BIOEASY contém uma tira membrana pré-revestida com antígenos de captura HIV-1 recombinantes (gp41, p24) na linha de teste 1 do teste e antígenos de captura HIV-2 recombinantes (gp36) na linha de teste 2, respectivamente. O antígeno recombinante HIV 1/2 (gp41, p24 e gp36) - conjugado ouro coloidal e a amostra se movem cromatograficamente ao longo da membrana para as regiões de teste (T) e formam uma linha visível a medida com que o complexo antígenoanticorpo-partículas de ouro coloidal se conjuga com um elevado grau de sensibilidade e especificidade. O dispositivo contém os caracteres 1 (Linha teste HIV-1), 2 (Linha Teste HIV-2) e C (Linha Controle) na superfície da estrutura. Nenhuma das linhas (Controle ou Testes) é visível na janela de resultados antes da aplicação da amostra. A Linha Controle (C) é utilizada para procedimentos de controle. A Linha Controle (C) deve sempre aparecer, indicando que os procedimentos de teste foram realizados adequadamente e que os reagentes estão funcionando corretamente. 5. Equipamentos 6. Calibração 2
3 7. Amostra Soro, plasma (EDTA, citrato e heparina) e sangue total 8. Reagentes e materiais Materiais do kit HIV triagem Bioeasy; Pipeta; Ponteira. 9. Procedimento: Remover o dispositivo da embalagem de alumínio e colocá-lo sobre uma superfície limpa, seca e plana. Sangue total: Reservar o Tubo Capilar e a lanceta. Limpar a área do dedo a ser lancetada utilizando gaze embebida em álcool. Apertar a extremidade final do dedo a ser lancetado. Faça a ordenha do dedo para a sangria. Produzir uma gota de sangue espessa. Aspirar o sangue total emergente com o auxílio do Tubo Capilar, preenchendo todo o seu volume cuidadosamente a fim de evitar a formação de bolhas. Encostar levemente o Tubo Capilar na cavidade da amostra até que o volume aspirado (20μl) seja transferido naturalmente para o cassete. Sobrará um volume morto que não se deslocará do Tubo Capilar. Imediatamente após a colocação da amostra, adicionar 4 gotas (aproximadamente 120μl) do diluente de ensaio na mesma cavidade onde foi colocada a amostra. 3
4 No início da reação, observar-se-á uma cor roxa em toda janela de resultado (no centro do dispositivo de teste). Interpretar o resultado entre 10 e 20 minutos. Não interpretar antes de 10 ou depois de 20 minutos. Atenção: Se a cor de fundo não possibilitar distinguir o resultado do teste (após adicionado o diluente) e este não for legível após 10 minutos, volte a consultar o resultado no período de 20 minutos. Após os 20 minutos, não interprete o resultado. Repita o teste. Soro ou plasma: Adicionar 10μl de soro ou plasma na cavidade da amostra. Imediatamente após a colocação da amostra, adicionar 4 gotas (aproximadamente 120μl) do diluente de ensaio na mesma cavidade onde foi colocada a amostra No início da reação, você observará uma cor roxa em toda janela de resultado (no centro do dispositivo de teste). Interpretar o resultado entre 10 e 20 minutos. Não interpretar antes de 10 ou depois de 20 minutos. Atenção: Se a cor de fundo não possibilitar distinguir o resultado do teste (após adicionado o diluente) e este não for legível após 10 minutos, volte a consultar o resultado no período de 20 minutos. Após os 20 minutos, não interprete o resultado. Repita o teste. 10. Controle de qualidade Interno 4
5 10.2. Externo 11. Resultados Amostra não reagente para HIV Amostra reagente para HIV Unidades Cálculos 12. Bibliografia Manual do kit - HIV TEST BIOEASY STANDARD DIAGNOSTIC Departamento de DST-AIDS e Hepatites virais do Ministério da Saúde 13. Anexos Revisado por Data da revisão Alterações Próxima revisão Dezembro/2017 5
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