Universidade Federal da Bahia Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia Grupo de Pesquisa de Protozoários Coccídeos. Prof. Luís Fernando Pita Gondim
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1 Universidade Federal da Bahia Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia Grupo de Pesquisa de Protozoários Coccídeos Prof. Luís Fernando Pita Gondim pita@ufba.br
2 Sarcocystis neurona (principal agente) Neospora hughesi
3 Descrições de EPM por S. neurona
4 América do Norte e Central D. virginiana América do Sul D. albiventris D. aurita D. marsupialis D. imperfecta D. pernigra Brasil
5 Baseadas em: Testes imunológicos Avaliação morfológica Testes moleculares???
6 RIFI SAG ELISA * Western blot
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9 Ampificação do locus 25/396 (Tanhauser et al., 1999). Sequenciamento do amplicon - diferiu em 2 bases das cepas americanas.
10 SNC de camundongo KO
11 Anticorpos contra SnSAG4 detectados em 69,6% de 961 equinos
12 SAG2 e SAG4: identidade 95% entre S. neurona e S. falcatula SAG3: 95% de identidade na região codificadora do gene entre S. neurona e S. falcatula Possivelmente ocorre reação imunológica cruzada entre os parasitos acima
13 Cepa SN 37R (EUA)
14 Principais objetivos em nossos trabalhos iniciados em 2010 Disponibilizar a sorologia para EPM na UFBA a preços mais acessíveis Isolar S. neurona in vitro Utilizar isolado brasileiro para diagnóstico e estudos epidemiológicos (animais domésticos e silvestres)
15 Dificuldades Cistos de Sarcocystis spp. não causam infecção em cultura celular nem em hospedeiros intermediários Vashisht et al. / Veterinary Parasitology 133 (2005) µm
16 Dificuldades Isolamento in vitro de S. neurona requer uso de gambá infectado (esporocistos) ou tecido nervoso de equino (pós-morte)
17 Dificuldades Em caso de bioensaio, é necessário o uso de camundongo imunodeficiente
18 Leane Queiroz Isolamento in vitro de nove cepas de Sarcocystis spp. de esporocistos de gambás De 9 cepas, 6 puderam ser mantidas in vitro
19 Nenhum dos isolados correspondeu a S. neurona Nenhuma das cepas foi infectante para camundongo KO Y-IFN Todas as nove cepas foram infectantes para periquitos australianos Os isolados também diferiram geneticamente de S. falcatula, S. lindsayi e S. speeri
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23 Merozoítos isolados diretamente de esporocistos PCR + para o locus 25/396 (Tanhauser et al., 1999)
24 Soros de equinos brasileiros reativos contra merozoítos de S. neurona (cepa SN138, EUA) Os soros reagiram contra merozoítos de isolado baiano de Sarcocystis sp. excretado por gambá e distinto de S. neurona Waléria Borges Equino soronegativo para S. neurona Equino soropositivo para S. neurona
25 Cleusa Oliveira Soros de cães reativos contra S. cruzi não reativos com merozoítos de S. neurona na RIFI. Sarcocystis spp. excretados por gambás provavelmente não apresentam reatividade sorológica cruzada significativa com outras espécies de Sarcocystis.
26 Isolados obtidos de D. aurita/d. marsupialis causam neuropatia em equinos? Isolados de Sarcocystis spp. de D. albiventris diferem daqueles de D. aurita? Infectividade para camundongos IFN-KO ou periquitos é um critério para a distinção das espécies de Sarcocystis no Brasil?
27 Descrições do parasito baseadas em testes morfológicos e/ou imunológicos. Antígenos de superfície de Sarcocystis spp. (SAG2, 3 e 4) de gambás são muito semelhantes entre si. Reações cruzadas entre Sarcocystis pp. de gambás devem ocorrer em testes como ELISA, RIFI e imuno-histoquímica. Inexiste cepa de S. neurona isolada no Brasil disponível para confirmação molecular. Pesquisadores brasileiros devem buscar o isolamento de Sarcocystis sp. a partir de equinos com EPM.
28 Gondim, L.F.P. Equipe do GPPC / UFBA Rodrigo Soares (USP) David Lindsay (Virginia Tech, EUA)
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