15/10/2009. Staphylococcus. Streptococcus e Enterococcus. Os CGP compõem um grupo de grande importância

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1 Streptococcus e Enterococcus Os CGP compõem um grupo de grande importância clínica, sendo responsáveis por inúmeras e variadas doenças. Os CGP de maior importância clínica pertencem aos gêneros: Staphylococcus Streptococcus Disciplina: Bacteriologia III Curso: Veterinária Prof. Renata F. Rabello Enterococcus Streptococcus CGP, catalase negativos, anaeróbios facultativos, com requerimentos nutricionais complexos e arranjados em cadeias em meio líquido. TAXONOMIA Família Streptococcaceae. Grupo heterogêneo, sofrendo mudanças nos últimos 20 anos. CLASSIFICAÇÃO Padrão hemolítico. Características antigênicas. Características fisiológicas. Padrão hemolítico (meio de ágar sangue): Características antigênicas: grupos de Lancefield: carboidrato C (parede celular), com exceção do grupo D (ác. lipoteicóicos); 20 grupos (A-H, K-V); β-hemolítico γ-hemolítico α-hemolítico estreptococos β-hemolíticos identificação; tipos sorológicos: proteína M (S. pyogenes). 1

2 Padrão hemolítico, grupo de Lancefield e hospedeiro de algumas espécies de estreptococos. Espécie Hemólise Grupo de Lancefield Hospedeiro S. pyogenes β A Humanos S. agalactiae β B Humanos, bovinos S. dysgalactiae subsp. dysgalactiae S. dysgalactiae subsp. equisimilis α, γ C Animais β A, C, G, L Humanos S. equi subsp. equi β C Animais S. equi subsp. zooepidemicus β C Animais, humanos a S. canis β G Cães, humanos a Grupo S. anginosus α, β e γ A, C, G, F, nenhum Humanos Características fisiológicas: sistema de diferenciação (espécies de > importância clínica): estreptococos β-hemolíticos; S. pneumoniae; complexo S. bovis/s. equinus (grupo D); grupo viridans. S. porcinus β E, P, U, V, nenhum Suínos, humanos a a raramente em humanos EPIDEMIOLOGIA Doenças em humanos e animais. Microbiota anfibiôntica: mucosas; pele (ocasionalmente); Principais agentes de doenças em humanos: S. pyogenes, S. agalactiae e S. pneumoniae. Espécies de interesse veterinário: S. agalactiae, S. dysgalactiae subsp. dysgalactiae e S. uberis (mastite em ruminantes). S. equi subsp. equi (garrotilho em equinos). S. equi subsp. zooepidemicus (ex. ITRS, pneumonia e ITG em equinos; mastite; pneumonia em cordeiros; septicemia em suínos, ovinos e caprinos). S. canis (uma variedade de doenças em caninos, mas também em outros hospedeiros). S. suis (várias infecções em leitões, assim como meningite, septicemia e poliartrite). Outros ( S. genitalium, S. dysgalactiae subsp. equisimilis, S. pneumoniae, S. pyogenes, outros beta-hemolíticos). Streptococcus agalactiae Estreptococos β-hemolíticos do grupo B de Lancefield. Importante agente de infecções: em humanos, particularmente em neonatos. em animais mastite em ruminantes. 2

3 Fonte de infecção: Mastite subclínica (sem sintomatologia). glândula mamária infectada mastite contagiosa. Mastite clínica Transmissão: durante a ordenha; Mastite subclínica ascensão pelo canal do teto. Fatores de virulência: cápsula (9 sorotipos: Ia, Ib, II-VIII); C5a peptidase; β-hemolisina; ácido lipoteicóico; proteínas de superfície; hialuronidase. Outros estreptococos agentes de mastite: S. dysgalactiae subs. dysgalactiae (mastite contagiosa/ambiental). S. uberis, S. bovis, S. equinus, S. saccharolyticus (mastite ambiental - estreptococos ambientais ou esculina positivos). Importante diferenciar S. agalactiae dos demais possibilidade de erradicação do S. agalactiae do rebanho. Diagnóstico: clínico (mastite clínica); contagem de células somáticas ou Tratamento: antibioticoterapia (período seco). Medidas de controle: California Mastitis Test (CMT) (mastite subclínica); cultura. Higiene durante a ordenha Uso de soluções anti- Antibioticoterpia Manutenção da ordenhadeira sépticas antes e após a (período seco) ordenha 3

4 Streptococcus equi Streptococcus equi subsp. equi e Streptococcus equi subsp. zooepidemicus. Até 1984, consideradas espécies distintas. Estreptococos β-hemolíticos do grupo C de Lancefield*. * Outras espécies também Streptococcus equi subsp. equi Hospedeiro específico: PATÓGENO DE EQUÍDEOS Agente etiológico do garrotilho ou adenite equina. ITRS e linfonodos associados. contagiosa. Grandes perdas econômicas. Distribuição mundial. 30% das enfermidades do TR em todo o mundo. Mais comum em jovens (< 5 anos). Taxa de mortalidade: 9% (s/ tratamento); 1-2% (tratamento precoce e adequado). Transmissão: contato direto (secreção nasal e oral); contato indireto (aerossóis, fômites e insetos). Aglomerações de equinos (ex. exposições, quartéis). Portadores crônicos (~20%) importante fonte de infecção (meses/anos). PI: 4-8 dias. Fatores de virulência: cápsula de ácido hialurônico (não imunogênica) evasão; peptideoglicana hipertermia (ativação de citocinas pirogênicas); proteína M proteína de superfície anti-fagocítica; hialuronidase difusão tecidual; estreptolisinas hemólise e formação de abscessos; estreptoquinases disseminação e invasão tecidual (destruição de fibrina) e formação de abscessos; superóxido dismutase sobrevivência no interior de fagócitos; exotoxinas pirogênicas imunomodulação (SAgs); proteínas de superfície adesinas, atividade enzimática e transportadores. 4

5 Sintomatologia: febre, anorexia, apatia, tosse, linfonodos (podem fistular), edema mandibular, corrimento nasal mucopurulento. Forma atípica (adenite bastarda): disseminação via linfática ou hematogênica abscessos (ex. cavidade abdominal, torácica e cérebro); sintomatologia variável (local e tamanho). Sequela: púrpura hemorrágica exposições prévias. Patogênese: Cavidade oral ou narinas Tonsilas e linfonodos locais Linfonodos regionais (X) PG ativa SI, atraindo NO para o local Proteína M impede reconhecimento pelo SI Estreptolisina e estreptoquinase abscessos Diagnóstico: clínico; bacterioscopia; cultura (confirmação): swab ou lavado nasal, pus (abscesso); Edema submandibular (obstrução do fluxo linfático) Formação de secreção purulenta Tratamento: antibioticoterapia (droga de escolha: penicilina); tratamento local do abscesso. Controle: isolamento (doentes) e quarentena (novas admissões); desinfecção de fômites; vacinação. Vacinas: n o de casos e gravidade da doença; bacterina ou extrato de proteína M; eficácia limitada; potenciais efeitos colaterais; nova vacina intranasal (viva avirulenta)* * eficácia, segurança, efeitos adversos e riscos de reversão da virulência não descritos. 5

6 Streptococcus equi subsp. zooepidemicus Ancestral do S. equi subsp. equi (98% homologia de DNA). Patógeno oportunista. Ampla variedade de doenças em diferentes hospedeiros. Em equinos: animais saudáveis (mucosas). patógeno oportunista: infecções virais, estresse e injúrias teciduais; ITRS, pneumonias e ITG. transmissão: aerossóis e através de injúrias da pele. Infecções em outros hospedeiros: ruminantes (ex. mastite, septicemia*, pneumonia*); suínos (ex. septicemia); cães (ex. pneumonia, septicemia e SCTS); aves (septicemia); humanos (ex. ITR, endocardite, meningite, glomerulonefrite) contato com equinos, consumo Fatores de virulência: semelhantes aos do S. equi subsp. equi; carece de toxinas pirogênicas; síntese da cápsula variável (saudáveis - não encapsulados). Tratamento: antibioticoterapia (droga de escolha: penicilina). de Ps leiteiros não pasteurizados ou carne de porco. Controle: isolamento, higiene, limpeza de feridas e vacinação (doenças virais) (equinos); boa higiene durante a ordenha, manutenção de equipamento (mastite - animais leiteiros). Streptococcus canis Estreptococos β-hemolíticos do grupo G. Microbiota de mucosas e pele canina, mas também agente de doenças: ITUs, abortos, vaginites, metrites, mastites, infecções de pele, síndrome do choque tóxico estreptocócico, fascite necrosante. 6

7 Agente de doenças em outros hospedeiros (gatos, ratos, coelhos, bovinos, humanos, outros). Em humanos: casos raros; idosos e imunocomprometidos em contato com animais domésticos. Tratamento: antibioticoterapia. Streptococcus suis Estreptococos não β-hemolíticos dos grupos R, S, RS, T de Lancefield ou não grupáveis. Portadores saudáveis (60-100%) e agente de doenças em suínos (2-15%). Cepas mais virulentas responsáveis por doenças graves. Patógeno zoonótico. Em humanos: meningite, endocardite, septicemia e choque séptico; contato com suínos e carne de suínos (ex. produtores, funcionários de abatedouros e veterinários). Em suínos: poliartrite, meningite e septicemia; outros (ex. otite, pneumonia, endocardite, aborto). Casos esporádicos ou em surtos. Leitões < 12 semanas. Fonte de infecção: porca. Corte de cauda e dentes, ventilação pobre, e superpopulação S. Fatores de virulência: Diagnóstico: cápsula: clínico e cultura (tecidos e sangue). ~ 35 sorotipos (variação de virulência); Tratamento: tipos 1 e 2: > surtos epidêmicos; antibioticoterapia de acordo com TSA. hemaglutinina, hemolisina, proteína associada à PC e proteína extracelular de 110 kda. Controle: risco: manejo adequado, higienização das instalações, vacinas, quimioprofilaxia. 7

8 DIAGNÓSTICO LABORATORIAL ESTREPTOCOCOS Identificação: Isolamento: meio de ágar sangue; atmosfera de incubação: estreptococos β-hemolíticos aerobiose: Coloração de Gram Catalase (-) stabs inocular em profundidade; alguns crescem melhor com 5% CO2. Ágar sangue Morfologia colonial e Padrão hemolítico Testes fenotípicos presuntivos: Estreptococos β-hemolíticos Sorologia: estreptococos β-hemolíticos; anti-soros específicos (grupos A, B, C, D, G e F). S. agalactiae S. equi subsp. equi Teste CAMP Fermentação de açúcares (lactose, sorbitol e trealose) API 20 STREP Enterococcus CGP, catalase negativos, ocorrem isoladamente, aos pares ou em cadeias curtas, anaeróbios facultativos, capazes de Métodos moleculares: Sistemas automatizados: crescer em 10 a 45º C, na presença de 6,5% de NaCl e PCR e sondas hidrolisam esculina na presença de sais biliares. 8

9 TAXONONOMIA Inicialmente, pertenciam ao gênero Streptococcus (estreptococos do grupo D). Família Enterococcaceae. Gênero Enterococcus (> 30 espécies). EPIDEMIOLOGIA E TRANSMISSÃO Crescimento e sobrevivência em ambientes adversos. Habitat: ambiente; microbiota de mamíferos e aves: TGI; TGU e cavidade oral. CGP mais abundantes no intestino. Patógenos oportunistas. TGI importante reservatório. SIGNIFICADO CLÍNICO Em humanos: importante agente de infecções hospitalares; fatores de risco (idade, doenças de base, hospitalização, imunossupressão, outros); ITUs, bacteremias, infecções de feridas, outras; E. faecalis (80 a 90%), E. faecium (5 a 10%) e outros. Em animais: FATORES DE VIRULÊNCIA Citolisina/hemolisina: toxicidade em modelos animais; Substância de agregação (proteína de superfície): facilita troca de plasmídeos; * cães - otite externa e ITUs também. aderência e internalização em células do hospedeiro; 9

10 Proteína de superfície extracelular (Esp): evasão de Acs retração; Ácidos lipoteicóicos: modulação da RI (induz produção de citocinas); Resistência antimicrobiana (característica marcante): intrínseca e adquirida IMPORTÂNCIA NO TRATAMENTO!!! DIAGNÓSTICO LABORATORIAL Isolamento. Identificação presuntiva: Gram; morfologia colonial; padrão de hemólise (α ou γ); catalase (-); bile-esculina; Identificação: testes convencionais; testes miniaturizados (ex. API 20S, Rapid 32 Strep); LAP (+); sistemas automatizados (ex. Vitek). PYR (+); API 20 STREP crescimento em NaCl 6,5%; crescimento a 45 o C. 10