Probióticos: do isolamento à formulação de novos produtos

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Leila di Azevedo Beltrão
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1 Probióticos: do isolamento à formulação de novos produtos Profa. Elisabeth Neumann Laboratório de Ecologia e Fisiologia de Microrganismos Departamento de Microbiologia/ICB/UFMG

2 Probióticos Micro-organismos vivos que, quando administrados em quantidades adequadas, conferem benefício à saúde do hospedeiro FAO/WHO (2001)

3 Segurança Critérios de Seleção de linhagens Não patogênica microbianas probióticas Ter sua identificação taxonômica estabelecida Geneticamente estável Não apresentar resistência a antimicrobianos associados a elementos móveis Ser oriunda da espécie ao qual se deseja aplicar o probiótico (recomendação)

Critérios de Seleção de linhagens Funcionalidade microbianas probióticas Tolerar as condições adversas do TGI: enzimas gástricas e pancreáticas,

4 Critérios de Seleção de linhagens Funcionalidade microbianas probióticas Tolerar as condições adversas do TGI: enzimas gástricas e pancreáticas, sais Biliares e variação de ph Resistir a imunidade local Capacidade de antagonizar patógenos Proteção da barreira epitelial Modulação da resposta imune

5 Critérios de Seleção de linhagens Aspectos tecnológicos Fácil/Rápido crescimento Fácil manipulação microbianas probióticas Permanecer estável e viável durante o processo produtivo e no produto final

Sequência de eventos Linhagens microbianas isoladas de diferentes fontes Linhagens com potencial probiótico Linhagens probióticas resistentes ao processamento Linhagens probióticas Alimentos

6 Sequência de eventos Linhagens microbianas isoladas de diferentes fontes Linhagens com potencial probiótico Linhagens probióticas resistentes ao processamento Linhagens probióticas Alimentos (queijos, leites fermentados, vegetais) diferentes ambientes do corpo humano e de outros animais Testes in vitro e in vivo (eficácia e segurança) Verificação da manutenção das características probióticas Ensaios clínicos PRODUTO FINAL Micro-organismos vivos, quantidade adequada, benefício à saúde

7 Algumas experiências do nosso grupo de pesquisa... LEFM

kefiranofaciens 8U -L. diolivorans 1Z -L.

8 Lactobacillus spp. isolados de grãos de kefir 52 linhagens de lactobacilos (8 espécies) Identificação e testes in vitro de segurança e eficácia -L. kefiranofaciens 8U -L. diolivorans 1Z -L. casei 17U -L. casei 25P -L. satsumensis 18P -L. satsumensis 23P3 -L. perolens 17P2 -L. perolens 11P3 -L. kefiri 24P3I -L. mali 21U2

9 Lactobacillus spp. isolados de grãos de kefir 10 linhagens Potencialmente probióticas Liofilização - Trealose - Sacarose - Skim milk - Alginato de sódio -L. diolivorans 1Z -L. satsumensis 18P -L. kefiranofaciens 8U -L. casei 25P -L. perolens 17P2 -L. satsumensis 23P3 -L. perolens 11P3 -L. kefiri 24P3I -L. mali 21U2 -L. casei 17U

10 Lactobacillus spp. isolados de grãos de kefir Ensaio in vivo sobrevida após infecção por Salmonella Typhimurium L. diolivorans L. casei L. satsumensis L. kefiranofaciens

11 Grãos de kefir de água -L. diolivorans 1Z -L. satsumensis 18P Grãos de kefir de leite -L. kefiranofaciens 8U -L. casei 25P Ensaio in vivo com kefir (bebida total) sobrevida após infecção por Salmonella Typhimurium

12 Seleção de bactérias láticas probióticas - equinos 33 linhagens (6 espécies) Identificação e testes in vitro de segurança e eficácia - Pediococcus pentosaceus 40 - Weissella confusa 1

13 % sobrevivência Ensaio in vivo com P. pentosaceus 40 (Pp40) sobrevida após infecção por Salmonella Typhimurium desafio p40 + desafio Dias No dia da infecção animais tratados com Pp40 apresentavam níveis elevados de TNF-α e IFN-γ no tecido intestinal

14 Seleção de bactérias láticas probióticas - cães 31 linhagens (7 espécies) Identificação e testes in vitro de segurança e eficácia - Lactobacillus reuteri 1/2Z - L. paraplantarum 2/3

15 Seleção de bactérias láticas probióticas - bovinos 70 linhagens: Trato respiratório superior 28 Mucosa vaginal 2 Fezes - 40 (12 espécies) Identificação e testes in vitro de segurança e eficácia - L. fermentum V3B-08 (TRS) - W. hellenica V1V-30 (MV) - L. farciminis B4F-06 (F)

16 Seleção de bactérias láticas probióticas - bovinos -Lactobacillus acidophilus B1F-36 (L36) -Lactobacillus salivarius B2F-38 (L38) L38 levou ao aumento de IL-10 e TGF-β (Treg) Não protegeram animais em modelo de infecção por S. Typhimurium

Seleção de bactérias láticas probióticas - bovinos 192 linhagens leite cru e swab intramamário (30 espécies) Identificação e testes in vitro de segurança e eficácia - Weissella confusa GIR48L1 -

17 Seleção de bactérias láticas probióticas - bovinos 192 linhagens leite cru e swab intramamário (30 espécies) Identificação e testes in vitro de segurança e eficácia - Weissella confusa GIR48L1 - Lactococcus lactis GIR04S8 TESE DE DOUTORADO: Caracterização da microbiota da glândula mamária bovina saudável e com mastite subclínica e sleção de bactérias potencialmente probióticas isoladas deste ecossistema A microbiota da glândula mamária bovina saudável possui uma abundância de bactérias dos gêneros Pseudomonas e Acinetobacter, além de bactérias do ácido lático

18 Seleção de bactérias láticas probióticas - suínos 24 linhagens (8 espécies) Identificação e testes in vitro de segurança e eficácia Teste in vivo: Infecção por S. Typhimurium Weissella paramesenteroides WpK4

19 Atualmente em nosso laboratório... Lactobacillus diolivorans 1Z (Kefir): Estudo de capacidade imunomodulatória em modelo murino de infecção por S. Typhimurium. Weissella paramesenteroides WpK4 (suíno): Estudo de proteção contra infecção por Giardia lamblia (Modelo experimental em Gerbil); estudo de capacidade imunomodulatória em modelo murino de colite ulcerativa; estudo de capacidade psicobiótica em modelo animal de ansiedade e depressão.

20 Linhagem probiótica Tempo? Custo? Produto final Alimento Medicamento Suplemento alimentar

21 Manutenção da viabilidade das linhagens probióticas no produto final

22 Muito obrigada!! Contato:

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