Imagem ampliada 1100 vezes de bactérias na ponta de uma agulha.

Transcrição

1 Imagem ampliada 1100 vezes de bactérias na ponta de uma agulha.

2 CURIOSIDADES MAIS ANTIGA VIÁVEL E VIVA 3 a 4 x 10 6 anos MAR DO JAPÃO (1991) ANOS MASTODONTE (CARCAÇA) 1991 USA MAIOR BACTÉRIA Epulopisciumfishelsoni (80 x 600 µm) > 10 6 E. coli Simbiótica (Trato intestinal) Acanthurusnigrofuscus(peixe) Menor bactéria Mycoplasmalaidlawii 10-7 µ m (1936) Esgoto

3 Epulopiscium fishelsoni

4 Maior Altitude 41,13 Km NASA 1967 Mais rápida Bdellovibriobacteriovirus Bastonete (2 µ m) Velocista Nadador Rotação 100 vezes/seg 50 x seu corpo 320 Km/h 6min Canal da Mancha Mais resistente à radiação atômica Radiação 6,5 x10 6 Röntgens (10 4 > homem) Mais resistente à temperatura Vasões de enxofre 306 o C Pacífico

5 Bdellovibrio bacteriovorus

6 BACTÉRIAS 1. INTRODUÇÃO > ABUNDÂNCIA E DIVERSIDADE DECOMPOSIÇÃO TAMANHO 0,5 X1,0 µm e 1,0 X 2,0 µm 1g = 1X10 12 BACTÉRIAS TAMANHO REDUZIDO RAZÃO S/V CRESCIMENTO E METABOLISMO

7 2. FORMAS DAS BACTÉRIAS

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10 Presença de cápsulas

11 3. ESTRUTURAS INTERNAS À PAREDE CELULAR OBRIGATÓRIAS PROTOPLASTOS MEMBRANA CITOPLASMÁTICA CITOPLASMA MESOSSOMA INCLUSÕES CITOPLASMÁTICAS MATERIAL NUCLEAR

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13 ENDOSPOROS

14 ENDOSPOROS ORIGEM OCORRÊNCIA Bacillus Clostridium Myxobacterias COMPOSIÇÃO ÁC. DIPICOLÍNICO Ca +2 5 a 10% PS Ca +2 + ÁC. DIP. + PEPTOGLICANO FORMA RESISTÊNCIA ESFÉRICA E OVAL TAMANHO, LOCALIZAÇÃO

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16 TABELA 1. POPULAÇÃO DE BACTÉRIAS ESPORULANTES EM SOLO SOB DIFERENTES SISTEMAS DE CULTURA, NA CAMADA DE 0-5 cm. MÉDIA DE QUATRO ÉPOCAS (CATTELAN E VIDOR, 1990). Sistema de cultura Bactérias ( x10 4 ) Esporos ( x10 4 ) Esporos ( % ) Guandu + Milho Aveia+vica/milho+caupi Campo nativo Siratro Aveia/milho Pangola Solo Descoberto ,9 11,1 14,3 6,0 17,6 13,6 22,0

17 4. REPRODUÇÃO BACTERIANA a) FISSÃO BINÁRIA > PARTE b) ESPOROS OU FRAGMENTAÇÃO Streptomyces Nocardia C) BROTAMENTO Hyphomicrobium

18 Reprodução do Gênero Shigella

19 5. Condições físicas necessárias ao crescimento bacteriano a) Temperatura oscilações metabolismo e morfologia Psicrófilas 0 o ; 15 a 20 o C; - 7 o Antártida Mesófilas 25 o a 40 o C Termófilas 45 a 60 o C ótimo facultativas Estenotermófilas 60 o C, mesófilas (?)

20 b) EXIGÊNCIAS ATMOSFÉRICAS AERÓBIAS ANAERÓBIAS + O 2 LIVRE - O 2 LIVRE ANAERÓBIAS FACULTATIVAS

21 Aeróbio Microaerófilo Facultativo Anaeróbio bactéria bactéria bactéria MC MC MC MC bactéria

22 6. CRESCIMENTO E REPRODUÇÃO Ingestão Síntese de macromoléculas Massa e tamanho Alongamento, invaginação, migração dos ácidos parede celular transversa, separação Populacional Tempo de geração Crescimento geométrico T.G n

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24 Exercício Considerando-se que o número de bactérias iniciais de um determinado meio de cultivo é da ordem de 10 3 cél/ml e após 5 horas atingiu 10 9 /ml. Dessa forma determine: Número de gerações e consequentemente o TG. Resolução b = a x 2 n logb = loga + nlog2 n = logb - loga/log2 n = /0, TG = t/n 5h/20 0,25 h 15 min

25 Considerando-se o crescimento exponencial das bactérias estime: a) Número de células. A partir de uma única célula bacteriana que possua tempo de geração (TG = 30 min). Depois de 72 horas de crescimento exponencial, quantas células poderão existir? b) Peso total Considere que uma célula em média pesa cerca de g. Dessa forma estime o peso total que poderá ser atingido?

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27 TABELA 1. VALORES DE ph MÍNIMO E MÁXIMO PARA O CRESCIMENTO DE DIVERSAS ESPÉCIES BACTERIANAS. Bactérias Mínimo LiLimites de ph Ótimo Máximo Thiobacillus thiooxidans 0,5 2,0-3,5 6,0 Acetobacter aceti 4,0-4,5 5,4-6,3 7,0-8,0 Staphylococcus aureus 4,2 7,0-7,5 9,3 Azotobacter spp. 5,5 7,0-7,5 8,5 Thermus aquaticus 6,0 7,5-7,8 9,5 Fonte: WILLIAMS e WIKINS (1974)

28 TABELA 2. TEMPO DE GERAÇÃO DE DIVERSAS ESPÉCIES DE BACTÉRIAS. BACTÉRIAS MEIO DE CULTURA TTEMPERATURA ( O C) TEMPO DE GERA- ÇÃO (MIN.) Escherichia coli caldo Bacillus mycoide caldo Rhizobium japonicum Staphilococcus aureus caldo Treponema pallidum coelho Fonte: SPECTOR (1956), adaptado.

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30 8. FASES DO CRESCIMENTO BACTERIANO LAG LOG ESTACIONÁRIA DECLÍNIO OU MORTE

31 9. BACTÉRIAS DE IMPORTÂNCIA AGRÍCOLA SIMBIONTES Rhizobium Bradyrhizobium ASSOCIAÇÃO Azospirillum Acetobacter VIDA LIVRE Beijerinkia, Derxia, Azotomonas Principais gêneros Arthrobacter, Achromobacter, Bacillus, Clostridium, Flavobacterium, Micrococus, Pseudomonas. Espécies:

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33 10. FUNÇÕES DAS BACTÉRIAS NO SOLO DECOMPOSIÇÃO AGREGAÇÃO NUTRIENTES FIXAÇÃO NUTRIENTES BIBLIOGRAFIA: PELCZAR, M.; REID, R.S. SCHAN, E.S.C. Microbiologia. São Paulo, Macawl Hill do Brasil. v Cap. 3,5,6 e 7.

34 MÉTODO DE HANS CHRISTIAN GRAM 1. Limpar previamente as lâminas microscópicas 2. Selecionar colônias isoladas das placas de Petri 3. Adicionar uma ou duas gotas de água destilada esterilizada 4. Transferir com a alça de semeadura uma colônia ou parte 5. Deixar secar e, em seguida, fixar com calor 6. Cobrir a lâmina com o corante cristal violeta, por 1 min 7. Enxaguar a lâmina com água corrente 8. Cobrir toda a superfície da lâmina com lugol, por 1 min. 9. Enxaguar a lâmina com água

35 MÉTODO DE HANS CHRISTIAN GRAM 10. Adicionar algumas gotas de álcool-acetona 1:1 v:v (descolorizador), por 5 segundos. 11. Enxaguar a lâmina com água para remover o excesso de solvente 12. Cobrir a lâmina com o corante fucsina básica por 1 min. 13. Enxaguar a lâmina com água e tocar as bordas com papel absorvente 14. Colocar lamínula e óleo de imersão; 15. Observar no microscópio ótico. 16. Interpretação do resultado

36 Staphylococcus aureus Klebsiella pneumoniae Figura 1. Bactéria Gram + Figura 2. Bactéria Gram -

37 Teste de solubilidade em KOH (RYU, 1940) 1. Limpar previamente as lâminas microscópicas 2. Selecionar colônias isoladas das placas de Petri 3. Pingar na lâmina microscópica três gotas de KOH (3%); 4. Transferir com a alça de semeadura uma colônia ou parte 5. Misturar e homogeneizar e aguardar 30 segundos 6. Colocar a alça de semeadura sobre a mistura previamente obtida e erguer 1-2 cm 7. Verificar se há formação de fios viscosos.

38 Teste de solubilidade em KOH (RYU, 1940)

39 PAREDE CELULAR Características a) Sensibilidade antibióticos Penicilina, sulfonamidas + Alta Gram - Baixa Estreptomicina, cloranfenicol, tetraciclina b) Lisoenzimas c) Detergentes aniônicos d) Toxinas Baixa Alta Alta Exo Alta Baixa Baixa Endo