MÉTODOS DE COLORAÇÃO BACTERIANA. Os Métodos de Coloração Facilitam a Visualização dos Microrganismos ao Microscópio de Luz

Transcrição

1 1 Os Métodos de Coloração Facilitam a Visualização dos Microrganismos ao Microscópio de Luz Preparação a fresco Preparação corada

2 2 MÉTODOS DE COLORAÇÃO DIFERENCIAIS: Método de Coloração Diferencial Morfologia Reação Tintorial Identificação Método de Coloração de Gram: Coco Reação Positiva Agrupados Predominantemente em Cachos de Uvas Staphylococcus Bastonete Reação Positiva Esporulado Bacillus Clostridium Método de Coloração de Ziehl-Neelsen: : Bastonete Reação Positiva Micobactérias (Gênero Mycobacterium) M. leprae M. tuberculosis

3 3 MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM: Solução de Cristal Violeta Solução de Iôdo de Gram (Lugol) Solução de Álcool Etílico 95% ou Acetona Solução de Safranina ou Fucsina Diluída 1 minuto 1 minuto o suficiente 30 seg Corante Mordente Descorante Corante Interpretação do Resultado: Reação Positiva = Roxo Reação Negativa = Rosa

4 4 MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM: Hipóteses que Explicam a Diferenciação das Bactérias: Espessura da Camada de Peptidioglicano: ParedeCelular Gram Positiva Membrana Celular Gram Negativa Desorganização da Membrana Externa das Bactérias Gram Negativas pelo Diferenciador (Solvente Orgânico): Presença de Ácidos Teicóicos nas Bactérias Gram Positivas ;

5 5 MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM: Cocos Gram positivo agrupados em cachos de uva Cocos Gram positivo agrupados em cadeias Cocos Gram positivo agrupados em tétrades

6 6 MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM: Cocos Gram positivo agrupados 2 a 2 (diplococos) Bastonetes Gram positivo não esporulados Bastonetes Gram positivo esporulados

7 7 MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM: Bastonetes Gram lábeis não esporulados Cocos Gram negativo agrupados 2 a 2 (diplococos) intra e extracelulares Bastonetes (cocobacilos) Gram negativo

8 8 MÉTODO DE COLORAÇÃO DE ZIEHL-NEELSEN: Solução de Fucsina de Ziehl-Neelsen, fenicada (carbolfucsina), concentrada à quente por 5 min Solução Álcool Ácida Solução de Azul de Metileno Corante Descorante Corante Interpretação do Resultado: Reação Positiva = Vermelha Reação Negativa = Azul BAAR= Bacilo Álcool- Ácido Resistente

9 9 MÉTODO DE COLORAÇÃO DE ZIEHL-NEELSEN: Hipóteses que Explicam a Diferenciação das Bactérias: Composição da Parede Celular das Micobactérias: Polipeptídios (Ex.: tuberculina) Lipídios Livres (Ex.: fator corda, ceras, micosídios ) Camada Micolato Arabinogalactano Camada de Peptidioglicano Ácidos Micólicos D-arabinose e D-galactose Citoplasma Membrana Citoplasmática Ácido D-glutâmico - Ac. m-diaminopimélico e L-alanina

10 10 MÉTODO DE COLORAÇÃO DE ZIEHL-NEELSEN: Tuberculose Hanseníase Globia

11 11 Doença em foco: Tuberculose M. tuberculosis Tuberculose Infecção Tuberculose Doença Renal Disseminação Cura Transmissão por Via Aérea Vacina BCG Tuberculose Doença Tuberculose Doença Óssea Teste do PPD da Tuberculina

12 12 Doença em foco: Hanseníase M. leprae Alteração da Sensibilidade: Térmica Táctil Dolorosa Formas Clínicas Indeterminada Tuberculóide Dimorfa Virchowiana Forma de Transmissão Multibacilar Sadio Secreções do Trato Respiratório Superior Teste da Lepromina ou Mitsuda