MANUAL DE COLETA O L aboratório de Patologia Animal- SANIMAL foi fundado com o intuito

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1 Laboratório de Patologia Animal - SANIMAL Rua Antônio Augusto, Lj. 3 - Aldeota - Fone: (85) CEP sanimal@labsanimal.com.br Fortaleza - Ceará MANUAL DE COLETA O Laboratório de Patologia Animal- SANIMAL foi fundado com o intuito de atender as mais diversas necessidades dos profissionais na área laboratorial da Medicina Veterinária. Dessa forma, o SANIMAL tem a grata satisfação de elaborar este manual com o objetivo de auxiliar os Médicos Veterinários na coleta, acondicionamento e envio de amostras a serem analisadas. A padronização de tais procedimentos é fundamental para que possamos garantir a confiabilidade e a qualidade dos resultados obtidos nas análises.

2 ÍNDICE 1. HEMATOLOGIA Contagem de plaquetas Contagem de reticulócitos Eritrograma Hematócrito Hemograma Leucograma Pesquisa de hematozoários Pesquisa do corpúsculo de inclusão viral (cinomose) Quantificação de fibrinogênio 2. BIOQUIMICAS Creatinina Uréia ALT/TGP Alanina aminotransferase AST/TGO Aspartato aminotransferase CK (CPK) TOTAL - Creatina cinase Glicose Fosfatase Alcalina (ALP) Bilirrubinas Totais e Frações Albumina Proteínas Totais Proteínas Totais e Frações

3 3 HEMATOLOGIA CONTAGEM DE PLAQUETAS Preparo de Paciente: Jejum não obrigatório Material: Sangue total colhido em tubo de tampa roxa (0,5 a 4 ml). Método: Automatizado e com revisão de lâmina. Causas de Rejeição: Amostra coagulada e/ou amostra insuficiente. Acondicionamento: Manter refrigerada entre 2 e 8ºC até 24 horas Finalidade: Avaliar quantitativamente as plaquetas. Caninos: 200 mil a 500 mil Felinos: 250 mil a 500 mil Eqüinos: 100 mil a 350 mil Bovinos: mil CONTAGEM DE RETICULÓCITOS Preparo de Paciente: Ideal - Jejum de no mínimo 8 horas. Material: Sangue total (0,5 a 4 ml) colhido em tubo de tampa roxa (EDTA). Método: Azul de Cresil Brilhante. Causas de Rejeição: Amostra coagulada e/ou insuficiente. Acondicionamento: Manter refrigerada entre 2º e 8ºC até 24 horas Finalidade: Tem grande importância clínica, como meio diagnóstico, prognóstico e na orientação da terapêutica. O número de reticulócitos avalia o grau de regeneração dos eritrócitos na medula óssea. Quando aumentados indicam hiperatividade da medula óssea (reticulocitose) e valores diminuídos, hipoatividade da medula óssea (reticulocitopenia). É importante para o diagnóstico diferencial de anemias. Caninos e Felinos: 0,5 a 1,0% Não é encontrado em sangue de eqüinos, bovinos, caprinos e ovinos saudáveis.

4 4 ERITROGRAMA Preparo de Paciente: Ideal - Jejum de no mínimo 8 horas. Material: Sangue total (0,5-4 ml) colhido em tubo de tampa roxa (EDTA). Método: Automatizado e com revisão de lâmina. Causas de Rejeição: Amostra coagulada e/ou insuficiente. Acondicionamento: Manter refrigerada à temperatura entre 2º e 8ºC até 24 horas Finalidade: Avaliar quantitativa e qualitativamente as hemácias, hemoglobina, hematócrito e índices hematimétricos. Valores de referência: Espécie Hemácias Hematócrito Hemoglobina VGM CHGM Caninos(Ad) 5,5-8,5 milhões % g/dl μ³ % Felinos(Ad) 5-9,5 milhões % 8-16 g/dl μ³ % Equinos 6,8-12,9 milhões % g/dl μ³ % Bovinos 5-10 milhões % 8-15 g/dl μ³ % *Ad: Adulto HEMATÓCRITO Preparo do paciente: Ideal - Jejum de no mínimo 8 horas. Material: Sangue total (0,5 a 4 ml) colhido em tubo de tampa roxa (EDTA). Método: Automatizado. Causas de rejeição: Amostra coagulada e/ou amostra insuficiente. Acondicionamento: Manter refrigerada entre 2 e 8ºC até 24 horas Finalidade: O hematócrito é um exame indicador do número de eritrócitos na circulação ativa. Valores reduzidos associam-se à anemia e valores elevados à desidratação ou policitemia. Avaliar o valor das proteínas totais simultaneamente é recomendado para se obter um resultado mais esclarecedor.

5 5 Canino até 3 meses: 26 a 36% Canino de 4 a 6 meses: 34 a 40% Canino de 7 a 12meses: 40 a 47% Canino adulto: 37 a 55% Felino até 6 meses: 22 a 38% Felino maior que 6 meses: 28 a 45% Bovinos: 24 a 46% Equinos: 32 a 53% HEMOGRAMA Preparo de Paciente: Ideal - Jejum de no mínimo 8 horas. Material: Sangue total (0,5 a 4 ml) colhido em tubo de tampa roxa (EDTA). Método: Automatizado e com revisão de lâmina. Causas de Rejeição: Amostra coagulada e/ou insuficiente. Acondicionamento: Refrigerar entre 2 e 8ºC até 24 horas Finalidade: O hemograma é um exame que analisa as variações quantitativas e qualitativas dos elementos figurados do sangue (hemácias, leucócitos e plaquetas). Caso o animal seja submetido a um estresse antes e/ou durante a coleta poderá haver alterações nos parâmetros hematológicos. Orienta na diferenciação entre infecções virais e bacterianas, parasitoses, inflamações, intoxicações, neoplasias, etc. LEUCOGRAMA Preparo de Paciente: Jejum não obrigatório. Evitar o estresse do paciente. Material: Sangue total (0,5 4 ml) colhido em tubo de tampa roxa (EDTA). Método: Automatizado e com revisão de lâmina. Causas de Rejeição: Amostra coagulada e/ou amostra insuficiente. Acondicionamento: Manter refrigerada entre 2 e 8ºC até 24 horas Finalidade: Permitir a avaliação quantitativa e qualitativa dos leucócitos, indicando processos infecciosos e inflamatórios. Quando o procedimento de coleta é demorado e/ou submete o paciente ao estresse pode alterar a contagem dos leucócitos totais.

6 6 Canino até 3 meses: 9 a 15 mil/mm³ Canino de 4 a 6 meses: 9 a 15 mil/mm³ Canino de 7 a 12meses: 9 a 15 mil/mm³ Canino adulto: 6 a 17 mil/mm³ Felino até 6 meses: 6 a 17 mil/mm³ Felino maior que 6 meses: 6 a 17 mil/mm³ Eqüino: 5,5 a 14,3 mil/mm³ Bovinos: 4 a 12 mil/mm³ PESQUISA DE HEMATOZOÁRIOS Material: Sangue total periférico coletado em tubo de tampa roxa (EDTA) ou esfregaço de sangue capilar em lâmina para microscopia. Método: Microscopia direta - Coloração panótico. Causas de Rejeição: Amostra coagulada e/ou insuficiente. Acondicionamento: Manter refrigerada entre 2 e 8ºC até 24 horas Esfregaços devem ser deixados secar ao ar para fixação (temperatura ambiente) sem corar até 7dias. Finalidade: Procura-se identificar Ehrlichia sp, Babesia sp, Haemobartonella sp. e outros parasitas de leucócitos e hemácias. O diagnóstico é considerado polêmico, pois os sinais clínicos são inespecíficos e possui baixa sensibilidade. Ehrlichia: Para a confirmação da suspeita clínica de erliquiose, é necessária a detecção de mórulas do agente etiológico no esfregaço sanguíneo. A sorologia também pode ser empregada na detecção de anticorpos específicos (IgM e IgG). Babesia (Piroplasma): Para a confirmação de suspeita clínica de babesiose aguda a detecção de eritrócitos infectados pode ser bastante variável. São vistos no interior dos eritrócitos como gotas únicas ou duplas, unidas pelo vértice (em eqüinos podem aparecer em número de quatro no mesmo eritrócito). Esfregaços obtidos da ponta da orelha e cauda têm maior porcentagem de células infectadas. A sorologia também pode ser empregada na detecção de anticorpos específicos (IgM e IgG). Haemobartonella (Mycoplasma): Agentes etiológicos: M. haemofelis causador de hemobartonelose felina e H. Canis da hemobartonelose canina. Os esfregaços sanguíneos devem ser confeccionados e analisados em dias consecutivos entre dia pelo menos, isso devido a sua parasitemia cíclica.

7 7 Valor de referência: Negativo. PESQUISA DO CORPÚSCULO DE INCLUSÃO VIRAL (CINOMOSE) Preparo do Paciente: Jejum não obrigatório. Material: 0,5 a 4 ml de sangue total colhido em tubo da tampa roxa (EDTA) Método: Microscopia direta Coloração panótico. Causas de Rejeição: Amostra coagulada e/ou insuficiente. Acondicionamento: Manter refrigerada entre 2 e 8ºC até 24 horas Finalidade: Identificar corpúsculo de inclusão de Lentz. Valor de Referência: Negativo QUANTIFICAÇÃO DE FIBRINOGÊNIO Preparo de Paciente: Jejum não obrigatório. Material: (0,5-4 ml) sangue total colhido em tubo de tampa azul (citrato) ou roxa (EDTA). Método: Coagulométrico Causas de Rejeição: Amostra coagulada e/ou insuficiente. Hemólise acentuada. Finalidade: Confirmar o diagnóstico de patologias hemorrágicas (p. ex.: patologias da medula óssea, doença hepática, câncer de estômago, mama ou renal, etc). O fibrinogênio é uma proteína de fase aguda, onde seus níveis se elevam no início das reações inflamatórias e permanecem altos até o fim da inflamação. Na coagulação disseminada, fibrinólise e doença hepática os níveis encontram-se reduzidos. Caninos: 100 a 500 mg/dl Felinos : 50 a 300 mg/dl Eqüinos: 100 a 400 mg/dl Bovinos: 100 a 600 mg/dl

8 8 BIOQUÍMICAS Creatinina Material: (2mL - 4 ml) soro sanguíneo, sangue total colhido em tubo de tampa vermelha (sem anticoagulante) ou em tubo de tampa roxa (EDTA). Método: Colorimétrico Finalidade: Avaliação renal. Caninos: 0,5-1,5 mg/dl Felinos : 0,8-2,0 mg/dl Eqüinos: 0,9-2,0 mg/dl Bovinos: 0,9-1,3 mg/dl Uréia Material: (2mL - 4 ml) soro sanguíneo, sangue total colhido em tubo de tampa vermelha (sem anticoagulante) ou em tubo de tampa roxa (EDTA). Método: Cinético. Finalidade: Avaliação renal e hepática. Caninos: mg/dl Felinos : mg/dl Eqüinos: mg/dl

9 9 Bovinos: mg/dl ALT/TGP Alanina aminotransferase Material: (2mL - 4 ml) soro sanguíneo, sangue total colhido em tubo de tampa vermelha (sem anticoagulante) ou em tubo de tampa roxa (EDTA). Método: Cinético. Finalidade: Avaliação hepática. Caninos: UI/L Felinos : UI/L Eqüinos: 7-20 UI/L Bovinos: UI/L AST/TGO Aspartato aminotransferase Material: (2mL - 4 ml) soro sanguíneo, sangue total colhido em tubo de tampa vermelha (sem anticoagulante) ou em tubo de tampa roxa (EDTA). Método: Cinético. Finalidade: Avaliação hepática e muscular. Caninos: UI/L Felinos : UI/L Eqüinos: UI/L Bovinos: UI/L

10 10 CK (CPK) TOTAL - Creatina cinase Material: (2mL - 4 ml) soro sanguíneo, sangue total colhido em tubo de tampa vermelha (sem anticoagulante) ou em tubo de tampa roxa (EDTA). Método: Cinético UV. Finalidade: Avaliação muscular. Caninos: UI/L Felinos : UI/L Eqüinos: UI/L Glicose Preparo de Paciente: Ideal - jejum de no mínimo 12 horas. Material: (2mL - 4 ml) sangue total colhido em tubo de tampa preta ou de tampa cinza (anticoagulante: fluoreto de sódio). Método: Ponto final. Finalidade: Avaliação pancreática e das glândulas adrenal e tireoidiana. Caninos: mg/dl Felinos : mg/dl Eqüinos: mg/dl Bovinos: mg/dl

11 11 Fosfatase Alcalina (ALP) Material: (2mL - 4 ml) de soro sanguíneo ou sangue total colhido em tubo de tampa vermelha (sem anticoagulante). Método: Cinético. Finalidade: Avaliação hepatobiliar e óssea. Caninos: UI/L Felinos : UI/L Eqüinos: UI/L Bovinos: UI/L Bilirrubinas Totais e Frações Material: (2mL - 4 ml) soro sanguíneo, sangue total colhido em tubo de tampa vermelha (sem anticoagulante) ou em tubo de tampa roxa (EDTA). Método: Colorimétrico. Finalidade: Avaliação hepatobiliar. Em casos de hemólise acentuada ocorre aumento de sua produção, sendo ideal a mensuração da massa eritrocitária (hematócrito). Caninos: Direta 0,06 a 0,12 mg/dl Total 0,1 a 0,5 mg/dl Felinos : Direta 0,05 a 0,50 mg/dl Total 0,1 a 0,50 mg/dl

12 12 Eqüinos: Direta 0,0 a 0,60 mg/dl Total 0,5 a 2,3 mg/dl Bovinos: Direta 0,04 a 0,4 mg/dl Total 0,0 a 0,5 mg/dl Albumina Material: (2mL - 4 ml) soro sanguíneo ou sangue total colhido em tubo de tampa vermelha (sem anticoagulante). Método: Colorimétrico (Verde bromocresol). Finalidade: Tem papel importante na manutenção da pressão osmótica e o transporte de substâncias. Caninos: 2,3-3,8 g/dl Felinos : 2,1-3,9 g/dl Proteínas Totais Material: (2mL - 4 ml) soro sanguíneo ou sangue total colhido em tubo de tampa vermelha (sem anticoagulante). Método: Colorimétrico (Biureto). Finalidade: Avaliação de pacientes que apresentam anemia, edema, ascite, coagulopatias, diarreias, perda de peso e doença renal ou hepática.

13 13 Caninos: 5,4-7,5 g/dl Felinos : 5,4-7,6 g/dl Eqüinos: 5,9-7,9 g/dl Proteínas Totais e Frações Preparo de Paciente: Ideal - jejum de no mínimo 12 horas. Material: (2mL - 4 ml) soro sanguíneo ou sangue total colhido em tubo de tampa vermelha (sem anticoagulante). Método: Colorimétrico (Biureto e Verde bromocresol). Finalidade: Avaliação do estado nutricional e da presença de doenças sistêmicas agudas ou crônicas. Mensura os valores de albumina e globulina. Caninos: Albumina 2,3 a 3,8 g/dl Globulinas 2,3 a 5,2 g/dl Totais 5,4-7,5 g/dl Felinos : Albumina 2,1 a 3,9 g/dl Globulinas 1,5 a 5,7 g/dl Totais 5,4-7,6 g/dl Eqüinos: Albumina 2,6 a 4,0 g/dl Globulinas 2,5 a 3,5 g/dl Totais 5,9-7,9 g/dl