RELAÇÃO ENTRE O TESTE DE DETERIORAÇÃO CONTROLADA E O DESEMPENHO DE SEMENTES DE MILHO EM DIFERENTES CONDIÇÕES DE ESTRESSE 1

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1 198 RELAÇÃO ENTRE O TESTE DE DETERIORAÇÃO CONTROLADA E O DESEMPENHO DE SEMENTES DE MILHO EM DIFERENTES CONDIÇÕES DE ESTRESSE 1 LILIAN PADILHA 2 ; MARIA DAS GRAÇAS GUIMARÃES CARVALHO VIEIRA 3 ; ÉDILA VILELA DE RESENDE VON PINHO 4 E MARIA LAENE MOREIRA DE CARVALHO 4 RESUMO - O desenvolvimento de metodologias que estimem o vigor de sementes em resposta a diferentes condições de estresse é fundamental para a escolha de lotes para a semeadura em condições específicas. Dois lotes do híbrido AG-122 foram submetidos ao processo de deterioração controlada a 40 o C por diferentes períodos de envelhecimento (24 e 48 horas) e diferentes teores iniciais de água (15, 20 e 25%) para testar o desempenho de sementes de milho submetidas a temperatura adversa e ao estresse hídrico. Após a deterioração controlada de ambos os lotes, as sementes foram submetidas aos teste de germinação e tiveram determinados os padrões eletroforéticos isoenzimáticos para a esterase e sorbitol desidrogenase. Os resultados para esses testes foram comparados aos do testes de frio, de emergência das plântulas em condições de estresse hídrico nos potenciais de -0,3; -0,6 e -0,9MPa. As sementes submetidas à deterioração controlada com 15 e 20% de água por 24 horas, permitiram a estimativa da emergência das plântulas em areia, em condições ideais. O mesmo procedimento para sementes com 25% de água foi eficiente em predizer a emergência das plântulas, em substrato umedecido a 40% da capacidade de campo, e a germinação de sementes com restrição hídrica de -0,3 e -0,6MPa. Os resultados de germinação das sementes com 20% de água submetidas à deterioração controlada por 48 horas correlacionaram-se com o teste de frio. Os vários resultados encontrados para os diferentes testes de deterioração controlada indicam a necessidade de utilização de uma metodologia específica para testar o vigor de lotes de sementes de milho, em função das condições de solo e do clima da região a que se destina a semeadura dessas sementes. Termos para indexação: sementes, Zea mays, deterioração controlada, condições de estresse. RELATIONSHIP BETWEEN CONTROLLED DETERIORATION TEST AND MAIZE SEED PERFORMANCE UNDER DIFFERENT STRESS CONDITIONS ABSTRACT - The development of methodologies that estimate seed vigor in response to different stress conditions is fundamental to screen lots for sowing under specific conditions. Two lots of AG-122 hybrid were submitted to the controlled deterioration test at 40ºC for different aging periods (24 and 48 hours) and initial seed moisture content (15, 20 and 25%) to assess the performance of maize seeds sown under adverse temperatures and water stress. The lots were assessed after deterioration by the germination test and by electrophoresis patterns of the esterase isoenzymes and sorbitol dehydrogenase. The results of these assessments were compared to those of the cold test, which evaluates seedling emergence in substrate moistened to 40% field capacity and germination under water stress conditions at the water potentials of -0.3, -0.6 and -0.9MPa. Seeds submitted to controlled deterioration with 15 and 20% moisture for 24 hours allowed the estimation of seedling emergence under field conditions. The same procedure for seeds with 35% moisture was efficient to predict the emergence of seedlings in substrate moistened to 40% of field capacity and seed germination under -0.3 and -0.6MPa water restriction. The germination results 1 Aceito para publicação em Eng a Agr a, Doutoranda do Curso de Pós Graduação em Fitotecnia, UFLA, Caixa Postal 37, , Lavras-MG; lpadilha@uai.com.br 3 Prof a. Titular, Depto. de Agricultura, UFLA; mariagcv@ufla.br 4 Prof. Adjunto, Depto. de Agricultura, UFL; edila@ufla.br, mlaenemc@ufla.br

2 DETERIORAÇÃO CONTROLADA E DESEMPENHO DE SEMENTES DE MILHO EM CONDIÇÕES DE ESTRESSE 199 of controlled deterioration of seeds with 20% moisture content for 48 hours correlated with those of the cold test. The results of different controlled deterioration tests indicated necessity of specific methodologies for determining the vigor of maize seeds lots as a function of the soil and climate conditions of the sowing region. Index terms: seeds, Zea mays, controlled deterioration, stressful conditions. INTRODUÇÃO Os testes de vigor são utilizados para a caracterização mais precisa de um lote de sementes e devem ser escolhidos de maneira a atender objetivos específicos, complementando as informações obtidas no teste padrão de germinação. Esse último, muitas vezes, mostra-se pouco eficiente em predizer o comportamento das sementes pois, é realizado sob condições ótimas, o que nem sempre ocorrerá no momento da semeadura e desenvolvimento das plantas no campo. O teste de deterioração controlada foi desenvolvido, inicialmente, para avaliação do vigor de sementes pequenas (Powell & Matthews, 1981) e tem o mesmo princípio do teste de envelhecimento acelerado, que segundo Delouche & Baskin (1973), baseia-se no aumento da taxa de deterioração das sementes por meio de sua exposição a condições de elevada temperatura e umidade relativa. Porém, no processo de deterioração controlada, os fatores temperatura e teor de água das sementes são regulados de forma mais precisa. Peterson et al. (1995) utilizaram o processo de deterioração controlada com o objetivo de determinar o potencial de armazenamento de lotes de sementes de milho localizadas em diferentes posições na espiga e submetidas ao dano mecânico por impacto e abrasão. Para Rossetto & Marcos-Filho (1995), a deterioração controlada pode também ser utilizada na diferenciação de lotes de sementes de soja quanto a qualidade fisiológica. Esses autores ressaltam a importância dos cuidados durante o ajuste de umidade das sementes, de forma a evitar a ocorrência de danos que poderiam mascarar os resultados do teste. A queda no vigor das sementes pode ser expressa pelo atraso na emergência da radícula, menor crescimento da plântula, maior número de plântulas anormais e redução da tolerância às condições de estresse (Basu, 1994). Piana (1994) observou que a deficiência hídrica retarda o desenvolvimento das plântulas durante a germinação das sementes de milho, sendo que sementes mais vigorosas, apresentam desempenho superior nessa condição. Segundo Tonin (1997), o vigor das sementes de milho também influencia o comportamento do híbrido em relação a resistência ao estresse hídrico. Este trabalho teve o objetivo de correlacionar o teste de deterioração controlada com o desempenho de sementes de milho em diferentes condições de semeadura. MATERIAL E MÉTODOS O trabalho foi conduzido no Laboratório de Análise de Sementes da Universidade Federal de Lavras, MG. Dois lotes de sementes de milho do híbrido duplo AG-122, colhidos na safra 98/99 foram utilizados neste estudo. O teor de água das sementes foi determinado pelo método da estufa a 105±3 o C por 24 horas (Brasil, 1992) e a qualidade inicial das sementes foi caracterizada pelos seguintes testes: germinação - instalado com quatro repetições de 50 sementes, semeadas em rolos de papel mantidos em germinador a 30 o C. Na avaliação foram computadas o número de plântulas aos sete dias e, diariamente, foi anotado o número das plântulas com coleoptilo acima de 1,0cm de comprimento e, pelo menos, com as raízes seminais desenvolvidas. Esses dados foram utilizados para a determinação do índice de velocidade de germinação (Maguire, 1962); tetrazólio - o pré-condicionamento das sementes foi realizado em água a 25 o C, durante 16 horas. As sementes foram seccionadas longitudinalmente, imersas em solução de tetrazólio 0,1%, durante quatro horas, a 25 o C. Posteriormente, foram adotados os procedimentos descritos por Dias & Barros (1995) para classificação em: sementes vigorosas (classes 1 a 3), sementes viáveis (classes 1 a 5) e não viáveis (classes 6 a 8); emergência das plântulas - instalado em bandejas contendo a mistura do substrato terra e areia, na proporção 1:2 respectivamente, onde foram semeadas quatro repetições de 50 sementes. As bandejas eram irrigadas quando necessário e foram realizadas contagens diárias das plântulas emergidas. Foram avaliados o índice de velocidade de emergência das plântulas (Maguire, 1962) e a percentagem de plântulas normais, aos sete dias da instalação do teste; análise eletroforética de isoenzimas - feita pelo sistema PAGE, onde 50 sementes foram congeladas em nitrogênio líquido e moídas (partículas 0,25mm) em moinho refrigerado (TE-631 Tecnal). A extração das isoenzimas foi realizada ressuspendendo 100mg do pó das sementes em 200µl do tampão Tris- Revista Brasileira de Sementes, vol. 23, nº 1, p , 2001

3 200 HCl 0,2M, ph 8,0 + 0,1% de β ME + 0,4% PVP + 0,4% PEG + 1mM EDTA, mantidos a 4 o C, por 16 horas. Os géis foram revelados para os sistemas enzimáticos esterase (EST) e sorbitol desidrogenase, segundo Brune et al. (1998). A avaliação do desempenho dos lotes das sementes em condições adversas, foi feita pelos testes de: emergência das plântulas sem irrigação - realizado de forma similar ao descrito para a emergência das plântulas, porém, o substrato (terra e areia na proporção 1:2) foi secado ao sol por um período de cinco dias e, posteriormente, teve sua capacidade de campo ajustada para 40%. Procedeu-se a semeadura e as bandejas (50x30x15cm) não foram irrigadas durante todo o período do teste. As avaliações foram realizadas diariamente para o cálculo do índice de velocidade de emergência e, ao final, avaliou-se a percentagem de emergência das plântulas normais; frio - foram utilizadas quatro repetições de 50 sementes e a capacidade de campo do substrato (areia e solo de área cultivada na proporção de 1:2) foi ajustada para 70%. Após a semeadura e adição de água, as bandejas (50x30x15cm) foram vedadas e mantidas por um período de sete dias a 10 o C, em câmara regulada para 30 o C, durante sete dias. Na avaliação, consideraram-se as plântulas normais emergidas (Dias & Barros, 1995); restrição hídrica - realizado em rolo de papel, com quatro repetições de 25 sementes, e conduzido de maneira semelhante ao de germinação porém, o papel toalha foi embebido em solução aquosa de polietileno glicol 6000, com potenciais hídricos de -0,3; -0,6 e -0,9MPa, calculados por meio da tabela apresentada por Villela et al. (1991). As avaliações foram realizadas no décimo dia após a semeadura, quando foram anotadas as plântulas normais; deterioração controlada das sementes - foi realizada elevando-se o teor de água das sementes para três níveis: 15, 20 e 25% de água. Em embalagens revestidas de alumínio, foram acondicionadas 50 sementes de milho. Para serem atingidos os níveis de água previamente estabelecidos, adicionou-se às sementes a quantidade de água requerida, calculada pela fórmula: A W 2 = x W B 1 onde: A - teor de água inicial das sementes (base no peso úmido); B - teor de água requerido; W 1 - peso inicial das sementes (g); W 2 -peso final das sementes (g); W 2 -W 1 - água a ser adicionada (Wang & Hampton, 1991, citados por Hampton et al., 1992). A embalagem foi selada a quente e mantida por 24 horas, a 10 o C, para a uniformização da umidade das sementes. As sementes foram envelhecidas a 40 o C, por 24 e 48 horas, em câmara de germinação (BOD-Marconi). Após o envelhecimento foram realizados a determinação do teor de água das sementes, o teste de germinação e a eletroforese de isoenzimas em gel de poliacrilamida, como descritos anteriormente. Utilizou-se o delineamento inteiramente casualizado e as repetições dos testes realizados foram utilizadas na análise estatística. Nesta análise, os dados foram transformados em arco seno x/100. Realizou-se a comparação das médias pelo teste de Tukey, a 5% de probabilidade e, posteriormente, foram calculados os coeficientes de correlação (r) para os testes de deterioração controlada, emergência das plântulas e aqueles testes que envolveram condições de estresse. RESULTADOS E DISCUSSÃO Os resultados da caracterização inicial dos lotes de sementes (Tabela 1) mostraram diferenças estatísticas significativas na qualidade das sementes, detectadas pelos testes de germinação, índice de velocidade de germinação, tetrazólio (classe 1-3) e frio. Por outro lado, a viabilidade medida pelo teste de tetrazólio (classes 1 a 5) e vigor pela emergência das plântulas e pelo índice de velocidade de emergência das plântulas, não permitiram a diferenciação desses lotes. Embora esses últimos testes não tenham detectado diferença na qualidade das sementes dos lotes 1 e 2, pode ser verificada a TABELA 1. Caracterização da qualidade inicial de sementes híbridas de dois lotes de milho AG 122. Lavras, MG, U Germinação IVG TZ (1-3) TZ (1-5) Emergência das plântulas Lote 1 10,1 97a 15,77a 78a 96a 92a 12,77a 63a Lote 2 10,1 89 b 14,38 b 69 b 93a 89a 12,17a 45 b Médias seguidas pela mesma letra, na coluna, não diferem entre si pelo teste de Tukey, a 5%. U - teor de água; IVG - índice de velocidade de germinação; TZ (1-3) - teste de tetrazólio (classes 1 a 3); TZ (1-5) - teste de tetrazólio (classes 1 a 5); IVE - índice de velocidade de emergência; F - teste de frio. IVE F

4 DETERIORAÇÃO CONTROLADA E DESEMPENHO DE SEMENTES DE MILHO EM CONDIÇÕES DE ESTRESSE 201 maior sensibilidade deste último, quando submetido ao processo de deterioração controlada (Tabela 2). Ao submeter sementes com teores de água mais elevados à temperatura de 40 o C, o lote 2 sempre apresentou comportamento inferior ao lote 1. Sabe-se que, sementes com nível mais elevado de vigor, apresentam desempenho superior em uma faixa mais ampla de condições ambientais. Após o período de envelhecimento por 24 e 48 horas, não existem variações significativas com relação ao teor de água inicial das sementes (Tabela 2). No teste de deterioração controlada (Tabela 2), tanto o teor de água quanto o período de envelhecimento influenciou o processo de deterioração das sementes. Assim, a medida que se aumentou o teor de água das sementes e o período de exposição à temperatura de 40 o C, essas tiveram sua viabilidade reduzida. Para o período de 48 horas, sementes com teores de água de 20 e 25% tiveram a sua viabilidade reduzida em 36 e 60%, respectivamente, para o lote 1 e em 52 e 79% para o lote 2. A temperatura e o grau de umidade das sementes são fatores diretamente ligados à taxa de deterioração das sementes. Basavarajappa et al. (1991) verificaram que o envelhecimento acelerado em sementes de milho, leva a perda de integridade das membranas. Os radicais livres produzidos, como um resultado da peroxidação de lipídeos no envelhecimento, reagem com os lipídeos das membranas celulares destruindo a estrutura dessas e também as reservas das sementes, resultando na redução da qualidade das sementes. Também, os perfis enzimáticos avaliados, mostraram alterações para as sementes submetidas a condições mais drásticas de deterioração. Para os dois lotes, no zimograma da esterase pôde ser observado a diminuição da intensidade das bandas I e II (Figuras 1A e 1B) para os tratamentos mais drásticos, onde as sementes possuíam teores de água de 20 e 25% e também houve o aparecimento de nova banda (banda ) nessas condições. O perfil eletroforético da sorbitol desidrogenase (Figuras 2A e 2B), mostrou ligeira alteração na intensidade da banda I, principalmente para as sementes do lote 2 (Figura 2B) que se encontravam com teor de água de 25%. A esterase é uma enzima envolvida na hidrólise de ésteres, estando diretamente ligada ao metabolismo dos lipídeos. Sendo a peroxidação de lipídeos TABELA 2. Grau de umidade e porcentagem de plântulas normais de dois lotes de milho híbrido AG-122 de sementes submetidas a diferentes combinações para o teor de água e períodos de envelhecimento no teste de deterioração controlada. Lavras, MG Germinação Umidade após envelhecimento Plântulas normais após envelhecimento inicial 24 horas 48 horas 24 horas 48 horas 15% U 20% U 25% U 15% U 20% U 25% U 15% U 20% U 25% U 15% U 20% U 25% U Lote 1 97Aa 14,8 19,7 24,8 14,8 19,3 24,6 96Aa 91Aa 87Aa 92Aa 62B a 39C a Lote 2 89A b 14,8 19,6 24,5 14,9 19,0 24,5 87A b 83AB b 75B b 82AB b 42C b 19D b Médias seguidas pela mesma letra, maiúscula na linha e minúscula na coluna, não diferem entre si pelo teste de Tukey, a 5%. Germinação inicial - antes das sementes serem submetidas ao processo de deterioração; U - teor de água. (A) Lote 1 (B) Lote 2 24h 48h 24h 48h I I FIG. 1. Padrão isoenzimático da esterase para sementes de milho (híbrido AG-122) no tempo zero e após o teste de deterioração controlada, realizado por 24 e 48 horas, a 40ºC, em sementes com teor de água de 15, 20 ou 25%. (A) Lote 1, (B) Lote 2. Revista Brasileira de Sementes, vol. 23, nº 1, p , 2001

5 202 (A) 24h Lote 1 (B) Lote 2 48h 24h 48h FIG. 2. Padrão isoenzimático da sorbitol desidrogenase para sementes de milho (híbrido AG-122) no tempo zero e após o teste de deterioração controlada realizado por 24 e 48 horas, a 40ºC, em sementes com teor de água de 15, 20 ou 25%. (A) Lote 1, (B) Lote 2. um evento associado a danos de membrana das sementes (Basavarajappa et al., 1991), alterações nos padrões dessa enzima podem estar denotando a ocorrência de eventos deteriorativos, que podem estar contribuindo para a redução na germinação das sementes a medida que são aumentados os fatores temperatura e teor de água das sementes no processo de deterioração controlada (Tabela 2). A sorbitol desidrogenase é uma enzima que está relacionada ao processo de degradação do monossacarídeo sorbitol para o fornecimento de energia para a célula. A redução observada na atividade dessa enzima é expressa pela alteração na intensidade da banda I (Figura 2B) e também foi verificada por Brandão- Júnior (1996) e Basavarajappa et al. (1991), em sementes de milho envelhecidas. Os resultados dos testes realizados em condições ideais de emergência das plântulas e daqueles em que as sementes foram submetidas a algum tipo de estresse, estão na Tabela 3. O teste de frio, embora tenha sido um bom parâmetro para diferenciar os dois lotes, mostrou efeito muito drástico na emergência das plântulas. Foi observado que a germinação das sementes no potencial hídrico de -0,9MPa ocorreu em níveis tão baixos, que ficou evidenciada a incapacidade das sementes em germinar nesse potencial hídrico. O teste de emergência das plântulas em substrato umedecido a 40% da capacidade de campo resultou na redução da percentagem final de plântulas emergidas sem, no entanto, permitir a diferenciação dos dois lotes, de maneira semelhante ao ocorrido no teste de emergência das plântulas. Todavia, os potenciais hídricos de -0,3 e -0,6MPa acentuaram a diferença entre os dois lotes, confirmando maior nível de vigor nas sementes do lote 1 quando comparado ao lote 2. Existiram correlações (r) significativas e positivas entre as diferentes metodologias do teste de deterioração controlada e os testes realizados em condições de estresse (Tabela 4). O teste de frio apresentou correlação com o teste de deterioração controlada, realizado durante 24 horas, estando as sementes com teor de água de 25%. Também, foi encontrada correlação para a deterioração controlada, realizada por 48 horas, independente do teor de água das sementes. Para a emergência das plântulas em substrato a 40% da capacidade de campo, todas as metodologias do teste de deterioração controlada apresentaram correlações significativas e, para o teste de estresse de germinação a -0,6MPa, apenas o resultado do envelhecimento das sementes com 15% de água, por 24 horas, e a 40 o C, não apresentou valor de r significativo. Quando foi aplicado o potencial hídrico de -0,3MPa, existiu corre- TABELA 3. Porcentagem de plântulas normais de dois lotes de milho híbrido AG-122 submetidas aos testes de emergência, de frio e de restrição hídrica, em substrato de solo + areia ou rolo de papel. Lavras, MG, Emergência das plântulas Teste de frio Emergência 40% capacidade Germinação de campo -0,3MPa -0,6MPa -0,9MPa Lote 1 92Aa 63Ba 82Aab 87Aa 88Aa 19Ca Lote 2 89Aa 45B b 78Aa 73Aab 43B b 5Ca Médias seguidas pela mesma letra, maiúscula na linha e minúscula na coluna, não diferem entre si pelo teste de Tukey, a 5%.

6 DETERIORAÇÃO CONTROLADA E DESEMPENHO DE SEMENTES DE MILHO EM CONDIÇÕES DE ESTRESSE 203 TABELA 4. Coeficientes de correlação simples [r] entre as variáveis analisadas nos testes de avaliação da qualidade de sementes do milho híbrido AG-122. Lavras, MG, Período de envelhecimento no teste de deterioração controlada (horas) Germ. U U EP EP 0,08 0,44 0,31 0,53 0,50 0,28 0,71 * Teste de frio 0,82 ** 0,46 0,48 0,85 ** 0,66 * 0,82 ** 0,72 * 0,42 EP a 40% capacidade de campo 0,75 * 0,73 * 0,66 * 0,73 * 0,81 ** 0,66 * 0,78 * 0,37 Germinação -0,3MPa 0,39 0,73 * 0,37 0,48 0,48 0,16 0,74 * 0,45 Germinação -0,6MPa 0,86 ** 0,57 0,61 * 0,96 ** 0,82 ** 0,68 * 0,76 * 0,47 Germinação -0,9MPa 0,37 0,39 0,37 0,58 0,42 0,08 0,65 * 0,45 ** significativo a 1%; * significativo a 5% probabilidade. U - teor de gua; Germ. - Germinação; EP - Emergência de plântulas. lação significativa com a deterioração controlada realizada por 24 e 48 horas nas sementes com 15 e 25% de água, respectivamente. A baixa germinação das sementes em condições de estresse hídrico a -0,9MPa foi correlacionada significativamente (r=0,65) com o tratamento de deterioração controlada mais drástico (25% de água das sementes por 48 horas a 40 o C). Em condições ideais para a germinação das sementes (emergência das plântulas), o teste de deterioração controlada das sementes com teores de água de 15 e 20%, por 24 horas, a 40 o C e com teor de água de 15%, por 48 horas e a 40 o C (Tabela 2) apresentou-se eficiente para predizer, em termos de valores absolutos, a emergência, tanto para o lote de alta como de média qualidade. Houve correlação positiva entre a emergência das plântulas e a germinação das sementes com 25% de água, submetidas ao período de 48 horas de deterioração controlada (Tabela 4). Em trevo vermelho, o teste de deterioração controlada, realizado com sementes que apresentavam 18% de água submetidas a 45 o C, por 24 horas, apresentou a melhor correlação com a emergência das plântulas em diferentes épocas de semeadura (Wang et al., 1994). A estimativa dos índices de correlação (Tabela 4) e também os valores absolutos encontrados para percentagem de plântulas normais no teste de frio (Tabela 3) e no de deterioração controlada em sementes com 20% de água submetidas a 40 o C, por 48 horas (Tabela 2) sugerem que essa metodologia foi eficiente para estimar a emergência das plântulas, em condições de baixa temperatura e alta umidade do substrato, simuladas pelo teste de frio. Apesar dos altos valores estimados para a correlação (r=0,96) entre os testes de deterioração controlada das sementes com 25% de água, por 24 horas e a 40 o C e de restrição hídrica a -0,6MPa, em termos de valores absolutos, apenas a germinação das sementes de alta qualidade foi eficientemente estimada por esse teste nas condições citadas. Embora não tenha havido correlação significativa para a deterioração das sementes com 25% de água, por 24 horas e a 40 o C, com o teste de restrição hídrica a -0,3MPa, essa metodologia do teste de deterioração controlada aproximou-se muito dos resultados encontrados para a restrição hídrica de -0,3MPa, sendo eficiente em predizer a germinação das sementes nessas condições. Boersma et al. (1996) trabalharam com soja e encontraram correlação significativa no teste de deterioração controlada (sementes com 20% de água, envelhecidas a 45 o C, por 24 horas) com a emergência das plântulas em solos umedecidos até a capacidade de campo (-0,01MPa) ou em solos saturados, não encontrando correlação com a emergência em solos considerados secos (-0,3MPa). Para as condições de emergência das plântulas em substrato com 40% da capacidade de campo, o teste de deterioração controlada para as sementes com teor de água de 15%, por 48 horas e a 40 o C, propiciou maior correlação significativa (r=0,81) que o tratamento correspondente às sementes com teor de água de 25%, por 24 horas e a 40 o C (r=0,73). CONCLUSÃO As metodologias do teste de deterioração controlada avaliadas neste estudo podem ser utilizadas na estimativa do vigor de sementes de milho em resposta a diferentes condições de estresse na semeadura. A utilização deste teste deve ser baseada nas condições locais da utilização das sementes. Revista Brasileira de Sementes, vol. 23, nº 1, p , 2001

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