Avaliação de dois anticorpos monoclonais em estudos histopatológicos e imunohistoquímicosde

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Sônia Gabeira Campos
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Avaliação de dois anticorpos monoclonais em estudos histopatológicos e imunohistoquímicosde meningite Cristina TakamiKanamura 1 ; RoosecelisBrasil 1, Elizabeth De

1 Avaliação de dois anticorpos monoclonais em estudos histopatológicos e imunohistoquímicosde meningite Cristina TakamiKanamura 1 ; RoosecelisBrasil 1, Elizabeth De Gaspari 2. 1Centro de Patologia, Núcleode AnatomiaPatológica; 2 Centro de Imunologia, InstitutoAdolfo Lutz, São Paulo, SP, , Brasil. egaspari@ial.sp.gov.br

2 Introdução e objetivos Meningite é a inflamação das meninges, causada principalmente por microrganismos patogênicos, com altas taxas de morbidade e mortalidade. As meningites infecciosas estão no grupo de notificação compulsória, por sua capacidade de produzir surtos, e exigem uma vigilância epidemiológica ativa para propor ações preventivas e corretivas. A meningite pode ser causada por diferentes agentes etiológicos, como bactérias, vírus e fungos, sendo as crianças menores de 5 anos as mais susceptíveis à infecção. No Brasil, a Neisseriameningitidisé a principal bactéria causadora de meningite, seguida por Streptococcuspneumoniae. O Haemophilusinfluenzaedo tipo b (Hib) ocupava o segundo lugar, mas após a introdução da vacina conjugada contra a Hibem 1999, houve uma queda de 90% desta meningite, o que evidencia o valor das ações de prevenção como a imunização. O bom prognóstico da doença está baseado em diagnóstico e tratamento precoces e portanto, o conhecimento da doença, da etiologia e de técnicas desenvolvidas de análise são decisivos. Medidas como uso de vacinas e quimioprofilaxiasão importantes ferramentas no controle desta doença e suas sequelas O laboratório de imuno-histoquímicatestou, em ensaio piloto, dois anticorpos monoclonais, sendo desenvolvidos para meningococosno laboratório de anticorpos monoclonais antígenos e adjuvantes. Os dois reagentes foram aplicados a amostras de cérebro de casos de meningite meningocócica, meningite de etiologia viral e em tecido cerebral sem alterações patológicas. Os dois anticorpos monoclonais demonstraram reatividade somente nas amostras de casos cujo diagnóstico de meningite meningocócica foi confirmado por PCR. O resultado obtido nestes primeiros testes mostrou-se muito promissor, mas necessita ampliação da casuística para estudo, incluindo amostras de meningites meningocócicas dos diferentes sorogrupos e de outras patologias. Pretende-se, com a padronização destas reações, estabelecer um protocolo para pesquisa imuno-histoquímicade antígenos de N.meningitidise incrementar o diagnóstico histopatológico da meningite meningocócica, sobretudo em situações em que não houve confirmação, por técnicas biomoleculares como o PCR, da presença do agente causador desta doença.

3 Metodologia Dois anticorpos monoclonais foram obtidos para Neisseriautilizando linfonodos poplíteos segundo protocolos descritos em Belo et al., Belo EF, Ferraz AS, Coutinho LM, Oliveira AP, Carmo AM, Tunes CF, Ferreira T, Ito AY, Machado MS, De L Franco D, De GaspariEN. Production of monoclonal antibodies against Neisseria meningitidis using popliteal lymphnodes and in vivo/in vitro immunization:.hybridoma(larchmt) Oct;26(5): As amostras teciduais foram processadas, submetidas à microtomia para e foram empregadas nos ensaios imuno-histoquímicossegundo Alves (2001), utilizando os monoclonais obtidos como anticorpos primários. ALVES, V.A.F. Garantia de qualidade em imuno-histoquímica. In: ALVES, V.A.F.; BACHI, C.E.; VASSALO, J. Manual de imuno-histoquímica, São Paulo, SP: Sociedade Brasileira de Patologia; P.1-9.

4 Resultados Imunoreatividade de dois anticorpos monoclonais em tecido cerebral Anticorpo moclonal 1 Anticorpo moclonal 2

5 Comentários, Discussão e Conclusões Foram avaliados dois hibridomasmurinossecretores de anticorpos monoclonais produzidos em nosso laboratório contra antígenos de Neisseriaem estudo imuno-histoquimico no Centro de Patologia, Laboratório de Imuno-histoquímica do Instituto Adolfo Lutz. n.ihq Identificação Reg. IAL (SIGH) PCR NM NL Obs. 1 E M.S.R H Men C + + IHQ Men poly + 2 E R.R.S.A H Men B + + IHQ Men poly + 3 E W.T.V F & G Men C + + IHQ Men poly + 4 E L.S.M D Men C + + IHQ Men poly + 5 E J.R.S D Men C; Rickettsia neg neg IHQ Men poly neg; IHQ Rickettsia sp poly + 6 E RN de M.A.B G Strepto neg neg IHQ Men poly neg 7 E J.V.L C Strepto neg neg IHQ Men poly neg 8 E L.L.M I Strepto neg neg IHQ Men poly neg 9 E G.C.S C Strepto neg neg IHQ Men poly neg 10 E D.M.A A Rubéola neg Neg IHQ Rubéola positivo Atualmente a metodologia está em fase de validação e processo de patente para diagnóstico diferencial das meningites virais e bacterianas no Centro de Patologia do IAL.

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