df=jlkfqlo PUTSUT Advertência

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1 df=jlkfqlo PUTSUT Advertência Finalidade do teste Resumo e explicação do teste Princípios do teste A concentração de antigénio CA 19-9 determinada numa dada amostra mediante ensaios fornecidos por diversos fabricantes pode variar por causa das diferenças dos métodos de ensaio e da especificidade dos reagentes. Os resultados referidos pelo laboratório ao médico devem incluir a denominação do ensaio de antigénio CA 19-9 utilizado. Os valores obtidos com métodos de ensaio diferentes não podem ser alternados. Se, no decorrer da monitorização dum doente, o método de ensaio usado para a determinação de valores de antigénio CA 19-9 for modificado, será necessário realizar testes sequenciais adicionais para confirmar os valores iniciais. Os pacientes devem possuir a capacidade de expressar o antigénio do grupo sanguíneo Lewis, caso contrário não serão capazes de produzir o antigénio CA 19-9 mesmo na presença de doença maligna provada. Um paciente com um genótipo positivo para o antigénio Lewis pode produzir níveis variáveis de antigénio CA A determinação do fenótipo para a presença do antigénio do grupo sanguíneo Lewis pode ser insuficiente para detectar indivíduos realmente negativos ao antigénio Lewis. O teste Access GI Monitor é um imunoensaio quimioluminescente com partículas paramagnéticas para a determinação quantitativa dos níveis de antigénio CA 19-9 no soro e no plasma humanos utilizando os Sistemas de Imunoensaio Access. O antigénio CA 19-9, uma mucina relacionada ao grupo sanguíneo Lewis, é um antigénio associado a tumores sintetizado pelas células pancreáticas e dos ductos biliares de indivíduos sadios, assim como pelos epitélios gástrico, colónico, endometrial e salivar. 1,2 Em geral, apenas uma pequena quantidade do antigénio CA 19-9 está presente no sangue de indivíduos saudáveis ou indivíduos com distúrbios benignos. Inicialmente encontrado em doentes com cancro colorrectal, o antigénio CA 19-9 também foi identificado em pacientes com cancro do pâncreas, do ducto biliar, hepatocelular, do estômago e do esófago. As doenças não cancerosas que podem elevar os níveis do antigénio CA 19-9 compreendem cirrose, colangite, hepatite, pancreatite e patologias gastrointestinais não malignas. 2,3,4,5,6 Os níveis do antigénio CA 19-9 podem ser usados como um auxílio na monitorização da resposta à terapia de doentes com cancro do pâncreas. Nestes doentes, níveis elevados do antigénio CA 19-9 tendem a ser associados com um estágio avançado da doença. A presença de níveis continuamente em aumento do antigénio CA 19-9 pode estar relacionada com a progressão da doença. Níveis do antigénio CA 19-9 constantemente elevados pode indicar uma baixa resposta à terapia, enquanto que níveis em diminuição podem indicar uma resposta terapêutica positiva. 7,8 O ensaio Access GI Monitor não é recomendado como um instrumento de rastreio. Um valor abaixo do limite de cut-off não indica a ausência da doença. Outros testes e procedimentos clinicamente aceitáveis também devem ser consideradas na monitorização da doença e no tratamento correcto do doente. O teste Access GI Monitor é um ensaio imunoenzimático de local duplo ( sandwich ). Uma amostra é adicionada a um recipiente de reacção juntamente com partículas paramagnéticas revestidas com anticorpo policlonal de cabra antibiotina, conjugado anticorpo monoclonal de Página 1

2 rato biotina e uma solução proteica tamponada. Após a incubação num recipiente de reacção, os materiais ligados à fase sólida são retidos num campo magnético enquanto os materiais não ligados são removidos por lavagem. De seguida, o substrato quimioluminescente, Lumi-Phos* 530, é adicionado ao recipiente e a luz gerada pela reacção é medida com um luminómetro. A produção de luz é directamente proporcional à concentração de antigénio CA 19-9 na amostra. A quantidade de analito presente na amostra é determinada a partir duma curva de calibração multiponto armazenada no sistema. Informações sobre o produto Kit de reagentes Access GI Monitor Nº Cat : 100 determinações, 2 embalagens, 50 testes/embalagem Fornecido pronto para utilizar. Congelar no momento da recepção a -20 C ou temperatura inferior. Manter refrigerado a 2 10 C por no mínimo duas horas antes de usar no aparelho. Estável até ao vencimento do prazo de validade marcado na etiqueta quando armazenado a 2 10 C. Estável a 2 10 C por 56 dias após utilização inicial. Uma possível degradação pode ser indicada pela ruptura da camada de elastómero da embalagem ou por valores de controlo fora do intervalo de variação. Abrir a embalagem de reagente caso tenha sofrido prejuízos (p.ex. ruptura da camada elastomérica). Todos os anti-soros são policlonais, excepto quando indicado em contrário. R1a: Partículas paramagnéticas, revestidas com anticorpo policlonal de cabra antibiotina, albumina sérica bovina, < 0,1% de azida sódica e 0,1% de ProClin** 300. R1b: Conjugado anticorpo monoclonal de rato anti-antigénio CA 19-9 fosfatase alcalina (bovina), albumina sérica bovina, < 0,1% de azida sódica e 0,1% de ProClin 300. R1c: Conjugado anticorpo monoclonal de rato anti-antigénio CA 19-9 biotina, albumina sérica bovina, < 0,1% de azida sódica e 0,1% de ProClin 300. R1d: Solução proteica tamponada (proteínas bovina, cabrina, murina), < 0,1% de azida sódica e 0,1% de ProClin 300. Avisos e precauções Para utilização em diagnóstico in vitro. As amostras dos doentes e os produtos hemoderivados podem ser analisados rotineiramente com riscos mínimos utilizando o procedimento descrito. Contudo, deve manusear estes produtos como potencialmente infecciosos de acordo com as precauções gerais e os métodos adequados de laboratórios clínicos, independentemente da origem, tratamento ou certificação anterior. Usar um desinfectante apropriado para a descontaminação. Armazenar e eliminar estes materiais e os respectivos contentores segundo o regulamento e as normas locais. O material de origem humana utilizado na preparação do reagente foi testado e considerado não reactivo ao antigénio de superfície da Hepatite B (HBs Ag), aos anticorpos do vírus da Hepatite C (HCV) e aos anticorpos do vírus da Imunodeficiência humana (HIV-1 e HIV-2). Dado que nenhum método de ensaio conhecido pode oferecer a segurança completa da ausência de agentes infecciosos, manusear os reagentes e as amostras dos doentes como potencialmente infecciosos. 9 A azida sódica pode reagir com as canalizações de chumbo ou cobre formando azidas metálicas altamente explosivas. Portanto, deixar fluir água em abundância nos tubos durante a eliminação de líquidos para prevenir a acumulação de azidas. 10 Access GI Monitor D 2005 Beckman Coulter, Inc. Página 2

3 A Folha dos Dados de Segurança do Material (MSDS) está disponível a pedido. Colheita e preparação da amostra 1. Soro e plasma (heparina) são as amostras aconselhadas. 2. Seguir as recomendações abaixo para manusear, analisar e armazenar amostras de sangue: 11 Colher todas as amostras de sangue tomando as precauções habituais para a colheita venosa. Deixar as amostras de soro coagularem completamente antes da centrifugação. Manter as provetas sempre fechadas. Dentro de duas horas após a centrifugação, transferir no mínimo 500 µl de amostra isenta de células para uma proveta de armazenamento. Tapar imediatamente a proveta com a rolha, apertando bem. Armazenar as amostras hermeticamente fechadas à temperatura ambiente (a C) durante o máximo de oito horas. Se o ensaio não estiver pronto dentro de oito horas, refrigerar as amostra a 2 8 C. Se o ensaio não estiver pronto dentro de 48 horas, ou no caso de amostras a serem expedidas, congelar a -20 C ou a temperatura mais baixa. As amostras podem ser descongeladas somente uma vez. 3. Seguir as instruções abaixo para preparar as amostras: Certificar-se de que a fibrina e a matéria celular residuais tenham sido removidas antes da análise. Para a centrifugação, seguir as instruções do fabricante das provetas de colheita de sangue. 4. Cada laboratório deve determinar a aceitabilidade das próprias provetas de colheita de sangue e dos produtos de separação do soro. Estes produtos podem variar entre fabricantes diferentes e, às vezes, de um lote para o outro. 5. Não analisar amostras lipémicas e/ou hemolisadas. Materiais fornecidos R1 Kits de reagentes Access GI Monitor Materiais necessários mas não fornecidos Comentários sobre o procedimento 1. Calibradores: Access GI Monitor Calibrators Fornecido em zero e aproximadamente 30, 90, 300, 900 e 2000 U/mL. Nº Cat Materiais do Controle de Qualidade (QC): material de controlo disponível no mercado. 3. Diluente de amostras A: Access Sample Diluent A Nº Cat Substrato: Access Substrate Nº Cat Tampão de lavagem: Access Wash Buffer Nº Cat (Access, Access 2, SYNCHRON LX i) Nº Cat (UniCel DxI) 1. Consultar os respectivos manuais de sistema e/ou o sistema de Ajuda para uma descrição específica da instalação, inicialização, princípios de funcionamento, características de desempenho do sistema, instruções de funcionamento, procedimentos de calibração, limitações operacionais e precauções, riscos, manutenção e solução de problemas. 2. Misturar o conteúdo das embalagens novas (vedadas) de reagentes invertendo delicadamente a embalagem várias vezes antes de carregá-la no aparelho. Não inverter embalagens abertas (perfuradas). 3. Usar dez (10) µl de amostra para cada determinação além dos volumes mortos do recipiente da amostra e do sistema. Consultar os respectivos manuais de sistema e/ou o sistema de Ajuda para o volume mínimo de amostra necessário. Página 3

4 4. A unidade de medida padrão do sistema para indicar os resultados das amostras é U/mL. Procedimento Detalhes de calibração Controlo de qualidade Resultados Limitações do procedimento Consultar os respectivos manuais de sistema e/ou o sistema de Ajuda para obter informações sobre a gestão das amostras, a configuração dos testes, a solicitação de testes e a visualização dos resultados dos testes. Para todos os testes, é necessário ter uma curva de calibração activa. Para o ensaio Access GI Monitor, a calibração é necessária a cada 56 dias. Consultar os respectivos manuais de sistema e/ou o sistema de Ajuda para obter informações sobre os métodos de calibração, a configuração de calibradores, a introdução de solicitações de testes dos calibradores e a visualização de dados de calibração. Os materiais de controlo de qualidade simulam as características das amostras dos doentes e são fundamentais para a monitorização do desempenho do sistema de análises imunoquímicas. Dado que as amostras podem ser analisadas a qualquer momento utilizando um formato de acesso aleatório em vez dum formato por lote, é aconselhável utilizar os materiais de controlo de qualidade a cada 24 horas. 12 Utilizar materiais de controlo de qualidade disponíveis no mercado que cubram pelo menos dois níveis de analito. Seguir as instruções do fabricante para a reconstituição e o armazenamento. Cada laboratório deve estabelecer os seus próprios valores médios e limites aceitáveis para garantir um desempenho adequado dos testes. Os resultados do controlo de qualidade que não estiverem dentro dos limites aceitáveis, podem indicar resultados de testes não válidos. Examinar todos os resultados dos testes obtidos desde o último ponto de teste de controlo de qualidade aceitável para este analito. Consultar os respectivos manuais de sistema e/ou o sistema de Ajuda para informações sobre como visualizar os resultados do controlo de qualidade. Os resultados dos testes dos doentes são determinados automaticamente pelo software do sistema utilizando um modelo matemático smoothing spline. A quantidade de analito na amostra é determinada a partir da produção de luz medida através dos dados de calibração armazenados no sistema. Os resultados dos testes dos doentes podem ser visualizados através do ecrã apropriado. Consultar os respectivos manuais de sistema e/ou o sistema de Ajuda para as instruções completas sobre como visualizar os resultados das amostras. 1. Os resultados do Access GI Monitor devem ser interpretados baseando-se no quadro clínico geral do doente, incluindo: os sintomas, a anamnese clínica, os dados de outros testes e outras informações apropriadas. 2. As concentrações de antigénio CA 19-9 no soro ou no plasma não devem ser interpretadas como uma evidência absoluta da presença ou ausência de cancro. Concentrações elevadas podem ser observadas no soro ou no plasma de doentes com doenças benignas ou outras afecções não cancerosas, assim como, no cancro do pâncreas e em outras doenças malignas. O ensaio Access GI Monitor não deve ser utilizado como um teste de rastreio do cancro. 3. Os pacientes devem possuir a capacidade de expressar o antigénio do grupo sanguíneo Lewis, caso contrário não serão capazes de produzir o antigénio CA 19-9 mesmo na presença de doença maligna provada. Um paciente com um genótipo positivo para o antigénio Lewis pode produzir níveis variáveis de antigénio CA A determinação do fenótipo para a presença do antigénio do grupo sanguíneo Lewis pode ser insuficiente para detectar indivíduos realmente negativos ao antigénio Lewis. 4. As amostras podem ser medidas com exactidão dentro do intervalo de análise compreendido entre o limite mínimo de detecção e o valor mais alto do calibrador (aproximadamente 0, U/mL). Se uma amostra contém uma quantidade menor que o limite mínimo de detecção para o ensaio, registar os resultados como menores que aquele valor (por ex., < 0,8 U/mL). Se uma amostra contém uma quantidade maior que o valor estabelecido do calibrador Access GI Monitor D 2005 Beckman Coulter, Inc. Página 4

5 mais alto Access GI Monitor Calibrator (S5), registar os resultados como maiores que aquele valor (por ex., > 2000 U/mL). Alternativamente, diluir um volume de amostra com 9 volumes de diluente de amostras A Access Sample Diluent A. Consultar os respectivos manuais de sistema e/ou o sistema de Ajuda para as instruções sobre a introdução duma diluição de amostra numa solicitação de teste. O sistema mostra os resultados adaptados à diluição. 5. Nos ensaios que utilizam anticorpos, existe a possibilidade de interferência dos anticorpos heterófilos contidos na amostra do doente. Os doentes que estão regularmente em contacto com animais ou que tenham sido submetidos a imunoterapia ou a técnicas de diagnóstico que utilizam imunoglobulinas ou fragmentos de imunoglobulinas podem produzir anticorpos, por ex. HAMA, que interferem com os imunoensaios. Para além disso, outros anticorpos heterófilos, tais como os anticorpos humanos anti-cabra, podem estar presentes nas amostras dos doentes. 13,14 Tais anticorpos interferentes podem produzir resultados errados. Os resultados de doentes suspeitos de ter estes anticorpos devem ser avaliados com cuidado. 6. O ensaio Access GI Monitor não apresenta algum efeito gancho (hook) até a U/mL. Valores esperados 1. Cada laboratório deve estabelecer os seus próprios intervalos de referência para garantir uma representação adequada de populações específicas. 2. A distribuição dos resultados do teste Access GI Monitor, apresentada abaixo, foi determinada a partir dum total de amostras séricas provenientes de homens e mulheres aparentemente saudáveis e de homens e mulheres com patologias não malignas e malignas. Categoria de indivíduos * incluídos os indivíduos sob tratamento Número de indivíduos 0 35 U/mL 35,1 70 U/mL 70,1 100 U/mL > 100 U/mL Aparentemente saudáveis Mulheres Homens Doenças malignas * Pâncreas Biliares/Vesícula biliar Mama Gastrointestinais Genitourinárias Fígado Pulmão Doenças não malignas * Pâncreas Cardiopatia crónica /Hipertensão Gastrointestinais Genitourinárias Desempenho clínico Limite de Referência Superior (URL) O limite de referência superior (URL) para o ensaio Access GI Monitor foi determinado usando um total de 291 amostras séricas provenientes de mulheres (150) e homens (141) aparentemente saudáveis. O 95º percentil, 35 U/mL de antigénio CA 19-9, foi definido como o URL dos resultados do ensaio Access GI Monitor para a população combinada de homens e mulheres. A distribuição dos resultados do teste Access GI Monitor para esta população aparentemente saudável é fornecida na tabela dos Valores Esperados apresentada acima. Página 5

6 Monitorização de doentes com diagnóstico de cancro do pâncreas Neste estudo, um total de 255 amostras séricas foram colhidas de 63 indivíduos (com idade de 28 a 83 anos) para os quais foi diagnostico cancro do pâncreas (estágios de I a IV). Estes indivíduos foram monitorados durante o decurso da doença, por um período de 21 dias a 66 meses. A seguir, são mostrados três exemplos de perfis de monitorização em série dos valores do antigénio CA 19-9 do teste Access GI Monitor e o respectivo estado clínico. Access GI Monitor D 2005 Beckman Coulter, Inc. Página 6

7 Baseando-se em modelos de regressão, seleccionou-se uma percentagem de variação menos significativa de 20% (% de variação MS) para cobrir a imprecisão de todo o intervalo de variação das concentrações do teste Access GI Monitor. A % de variação MS representa a variação de grandeza mínima entre duas medições em série do do antigénio CA 19-9 que não pode ser atribuída à variação da análise ou a ruído. A % de variação MS corresponde, no ensaio Access GI Monitor, a 2,5 vezes a %CV (coeficiente de variação) para a imprecisão. A eficácia das medições do antigénio CA 19-9 como um auxílio na monitorização do estado da doença em indivíduos para os quais foi diagnosticado cancro do pâncreas foi determinada avaliando as variações dos níveis do antigénio CA 19-9 em conjuntos em série (pares) com variação do estado da doença. Dos 63 indivíduos monitorizados em série, dez (10) deles foram excluídos destas avaliações por serem considerados não expressores do antigénio CA 19-9 com concentrações do antigénio CA U/mL em todas as colheitas de sangue realizadas em série. Os restantes 53 indivíduos com cancro do pâncreas do estudo de monitorização em série foram analisados com um conjunto em série (duas consultas sequenciais por conjunto) por indivíduo. Nesta avaliação, o estado da doença foi classificado como Evolução ou Não Evolução, com a Não Evolução consistindo em estável, respondente ou não evidência de doença (NED) entre duas colheitas em série consecutivas. Os resultados destas análises, por paciente, são mostrados abaixo. Página 7

8 Associação de concentrações de antigénio CA 19-9 pelo Estado clínico (por base paciente) Access GI Monitor Variação do Estado Clínico Mudança do marcador Evolução Não Evolução Aumento de 20% Nenhum aumento Total Access GI Monitor Intervalo de confiança de 95% A eficácia das medições do antigénio CA 19-9 como um auxílio na monitorização do estado da doença em indivíduos para os quais foi diagnosticado cancro do pâncreas também foi determinada avaliando as variações dos níveis do antigénio CA 19-9 em conjuntos em série (consultas sequenciais aos pares) com variações do estado da doença. As amostras provenientes dos 53 doentes do estudo de monitorização em série, por um total de 168 conjuntos em série, foram de novo analisadas para determinar a percentagem de variação nas concentrações do antigénio CA 19-9 em todos os conjuntos em série e estados da doença. Nesta avaliação, o estado da doença, entre duas colheitas em série consecutivas, foi classificado como Evolução ou Não Evolução. A distribuição dos resultados do teste Access GI Monitor nas três classificações da doença relativas à % de variação MS, por amostra, está apresentada abaixo. % de Variação nas Concentrações de antigénio CA 19-9 por Estado da Doença Baseada na % de Variação Menos Significativa de 20% (por amostra) Total Concordância positiva 78,1% 61,2% 89,0% Concordância negativa 47,6% 28,3% 67,6% Concordância total 66,0% 52,6% 77,3% Access GI Monitor Mudança do estado da doença Total Mudança do antigénio CA 19-9 Evolução Não Evolução Mudança significativa > 20% Nenhuma mudança 20% Total Access GI Monitor Intervalo de confiança de 95% Concordância positiva 59,4% 47,7% 70,2% Concordância negativa 62,6% 52,8% 71,5% Concordância total 61,3% 58,8% 68,3% Características específicas de desempenho Comparação de métodos Uma comparação de 405 valores obtidos com o ensaio Access GI Monitor do sistema de imunoensaio Access e com um kit de radioimunoensaio disponível no mercado forneceu os seguintes dados estatísticos aplicando os cálculos Deming: n Intervalo de observações Intercepção Inclinação Coeficiente de correlação (r) ,0 2,5726 0,9569 0,9007 Comparação de tipos de amostras Uma comparação de 80 amostras emparelhadas de soro e plasma com lítio heparina utilizando o ensaio Access GI Monitor do sistema de Imunoensaio Access forneceu os seguintes dados estatísticos aplicando os cálculos Deming: Access GI Monitor D 2005 Beckman Coulter, Inc. Página 8

9 n Intervalo de observações Intercepção Inclinação Coeficiente de correlação (r) ,9-0,5002 0,9842 0,9995 Recuperação da diluição (linearidade) Diluições múltiplas de três amostras contendo vários níveis de antigénio CA 19-9 com o calibrador Access Sample Diluent A forneceram os seguintes dados: Amostra 1 Concentração esperada Concentração determinada Recuperação (%) Pura 1202, :2 601,3 536,3 89,2 1:4 300,7 282,7 94,0 1:8 150,3 142,2 94,6 1:16 75,2 68,4 91,0 1:32 37,6 35,6 94,7 1:64 18,8 17,3 92,0 Recuperação média em% 92,6 Amostra 2 Concentração esperada Concentração determinada Recuperação (%) Pura 1382, :2 691,1 748,2 108,3 1:4 345,5 356,6 103,2 1:8 172,8 169,8 98,3 1:16 86,4 83,7 96,9 1:32 43,2 40,7 94,2 1:64 21,6 20,7 95,8 Recuperação média em% 99,5 Amostra 3 Concentração esperada Concentração determinada Recuperação (%) Pura 1239, :2 619,6 601,5 97,1 1:4 309,8 288,3 93,1 1:8 154,9 137,2 88,6 1:16 77,4 70,5 91,1 1:32 38,7 37,8 97,7 1:64 19,4 19,6 101,0 Recuperação média em% 94,8 Imprecisão Este ensaio apresenta uma imprecisão total de menos de 10% em todo o intervalo de análise. Um estudo realizado utilizando material de controlo com base em soro humano disponível no mercado incluindo um total de 20 testes, 2 replicados por teste, no decorrer de 20 dias, forneceu os seguintes dados, examinados através da análise de variância (ANOVA): 15,16 Página 9

10 Amostra Média geral (n=40) Intra-execução (%CV) Inter-execução (%CV) Imprecisão total (%CV) Nível 1 17,6 6,4 5,7 8,9 Nível 2 110,5 2,2 2,7 3,5 Nível 3 584,6 1,7 2,5 3,1 Nível ,5 1,8 2,4 3,0 Especificidade analítica / Interferências Amostras contendo até a 50 mg/dl de hemoglobina, 60 mg/dl de bilirrubina, 1000 mg/dl de triglicéridos (trioleína) ou 9 g/dl de proteina (albumina sérica humana) não afectam a concentração do antigénio CA 19-9 testado. A tabela abaixo descreve a reactividade cruzada do ensaio com agentes quimioterapêuticos comuns e outras substâncias possivelmente interferentes. Substância Concentração Adicionada Esperada Observada % de Recuperação Média 5Fluoruracil (Adrucil) 1 mg/ml 8,4 8,3 99 Paracetamol (Tylenol) 0,2 mg/ml 8,9 8,8 99 Ácido acetil-salicílico (aspirina) 0,5 mg/ml 9,4 8,8 94 Adriamicina (Doxorrubicina HCL) 0,1 mg/ml 8,7 8,5 98 Hidrato de ametopterina (Metotrexato) 4,5 mg/ml 9,3 9,1 98 Aminoglutetimida 0,4 mg/ml 8,6 8,6 100 Cafeína 0,1 mg/ml 8,5 8,7 102 Cisplatina Bicloreto 1 mg/ml 8,9 8,2 92 Ciclofosfamida (Cytoxan) 0,25 mg/ml 9,4 9,4 100 Ciclosporina A 2,97 X 10-6 mg/ml 9,8 9,2 94 Digoxina 5,0 X 10-6 mg/ml 9,7 9,4 97 Ácido folínico (Leucovorina) 1,1 mg/ml 9,1 9,4 103 Gentamicina Sal sulfato 0,12 mg/ml 9,0 9,6 107 Heparina 50 U/mL 8,3 9,0 108 Cloridrato de lidocaína 0,06 mg/ml 8,5 8,8 104 Carbonato de lítio (Eskalith) 0,035 mg/ml 9,0 8,3 92 Mitomicina C 0,006 mg/ml 9,2 10,1 110 Novatrona (Mitoxantrona) 0,5 mg/ml 8,3 8,1 98 Paclitaxel 3,5 X 10-6 mg/ml 9,4 9,2 98 Propanolol - HCL (Inderal) 5,0 X 10-6 mg/ml 9,0 8,7 97 Gluconato de quinidina (Duraguin, Quinaglute) 0,05 mg/ml 9,0 8,9 99 Salicilato (Ácido salicílico Sal sódico) 0,5 mg/ml 8,9 8,7 98 Tamoxifeno Sal citrato 0,13 mg/ml 9,3 8,6 92 Teofilina (Aminofilina) 0,25 mg/ml 8,9 8,8 99 Tobramicina Sal sulfato 0,015 mg/ml 9,1 9,4 103 Sensibilidade analítica O nível mínimo detectável de antigénio CA 19-9 distinguível de zero (calibrador Access GI Monitor Calibrator S0) com 95% de confiança é 0,8 U/mL. Este valor é determinado através do processamento duma curva de calibração completa de seis pontos, controlos e 10 replicados do calibrador zero em testes múltiplos. O valor de sensibilidade analítica é calculado a partir da curva no ponto que representa dois desvios padrão do sinal do calibrador zero. Access GI Monitor D 2005 Beckman Coulter, Inc. Página 10

11 df=jlkfqlo=`^if_o^qlop PUTSUU Advertência Finalidade do produto Resumo e explicação do produto Padronização Informações sobre o produto A concentração de antigénio CA 19-9 determinada numa dada amostra mediante ensaios fornecidos por diversos fabricantes pode variar por causa das diferenças dos métodos de ensaio e da especificidade dos reagentes. Os resultados referidos pelo laboratório ao médico devem incluir a denominação do ensaio de antigénio CA 19-9 utilizado. Os valores obtidos com métodos de ensaio diferentes não podem ser alternados. Se, no decorrer da monitorização dum doente, o método de ensaio usado para a determinação de valores de antigénio CA 19-9 for modificado, será necessário realizar testes sequenciais adicionais para confirmar os valores iniciais. Os calibradores Access GI Monitor Calibrators são utilizados para calibrar o ensaio Access GI Monitor para a determinação quantitativa dos níveis de antigénio CA 19-9 no soro e no plasma humanos utilizando os Sistemas de Imunoensaio Access. A calibração dum ensaio quantitativo é o processo pelo qual as amostras com concentrações conhecidas de analito (por ex., calibradores de ensaio) são testadas como amostras de doentes a fim de medir a sua resposta. A relação matemática entre as respostas medidas e as concentrações conhecidas de analito define a curva de calibração. Esta relação matemática, ou curva de calibração, é utilizada para converter as medições URL (Unidade Relativa de Luz) de amostras de doentes em concentrações quantitativas específicas de analito. A substância a ser medida (analito) nos calibradores Access GI Monitor Calibrators tem como referência os calibradores internos do fabricante. O processo de padronização baseia-se na norma EN ISO Os valores atribuídos foram estabelecidos usando amostras representativas deste lote de calibrador e são específicos para as metodologias de ensaio dos reagentes Access. Os valores atribuídos por outras metodologias podem ser diferentes. Tais diferenças, se presentes, podem ser causadas por desvios entre os métodos. Access GI Monitor Calibrators Nº Cat : S0 S5, 2,5 ml/recipiente Fornecidos prontos para utilizar. Congelar no momento da recepção a -20 C ou temeratura inferior. Misturar o conteúdo invertendo delicadamente antes da utilização. Evitar a formação de bolhas. Estável até ao vencimento do prazo de validade marcado na etiqueta quando armazenado a -20 C ou temperatura inferior. Após a abertura, os recipientes descongelados permanecem estáveis a 2-10ºC por 90 dias, a menos que o prazo de validade não vença antes do limite de 90 dias. Marcar na etiqueta do recipiente a data de descongelamento ou o prazo de validade. Após o uso, refrigerar os calibradores a 2 10 C. Não recongelar os recipientes abertos. Uma possível degradação pode ser indicada por valores de controlo fora do intervalo de variação. Consultar o cartão de calibração para as concentrações exactas. Página 11

12 . S0: Albumina sérica bovina (BSA) tamponada, < 0,1% de azida sódica e 0,5% de ProClin** 300. S1, S2,S3, S4, S5: Cartão de calibração: Antigénio CA 19-9 a níveis de aproximadamente 30, 90, 300, 900 e 2000 U/mL, em BSA tamponada, < 0,1% de azida sódica e 0,5% de ProClin Avisos e precauções Para utilização em diagnóstico in vitro. As amostras dos doentes e os produtos hemoderivados podem ser analisados rotineiramente com riscos mínimos utilizando o procedimento descrito. Contudo, deve manusear estes produtos como potencialmente infecciosos de acordo com as precauções gerais e os métodos adequados de laboratórios clínicos, independentemente da origem, tratamento ou certificação anterior. Usar um desinfectante apropriado para a descontaminação. Armazenar e eliminar estes materiais e os respectivos contentores segundo o regulamento e as normas locais. O material de origem humana utilizado na preparação do reagente foi testado e considerado não reactivo ao antigénio de superfície da Hepatite B (HBs Ag), aos anticorpos do vírus da Hepatite C (HCV) e aos anticorpos do vírus da Imunodeficiência humana (HIV-1 e HIV-2). Dado que nenhum método de ensaio conhecido pode oferecer a segurança completa da ausência de agentes infecciosos, manusear os reagentes e as amostras dos doentes como potencialmente infecciosos. 9 A azida sódica pode reagir com as canalizações de chumbo ou cobre formando azidas metálicas altamente explosivas. Portanto, deixar fluir água em abundância nos tubos durante a eliminação de líquidos para prevenir a acumulação de azidas. 10 Xi. Irritante: ProClin 300 0,5%. R 43: Pode causar sensibilização em contacto com a pele. S 28-37: Após contacto com a pele, lavar imediata e abundantemente com água e sabão. Usar luvas adequadas. A Folha dos Dados de Segurança do Material (MSDS) está disponível a pedido. Procedimento Detalhes da calibração Limitações do procedimento Consultar os respectivos manuais de sistema e/ou o sistema de Ajuda para obter informações sobre os métodos de calibração, a configuração de calibradores, a introdução de solicitações de testes dos calibradores e a visualização de dados de calibração. Os calibradores Access GI Monitor Calibrators são fornecidos em seis níveis - zero e aproximadamente 30, 90, 300, 900 e 2000 U/mL. Os dados de calibração do ensaio são válidos por 56 dias. Os calibradores são analisados em duplicado. Se forem notados sinais de contaminação microbiana ou excesso de turvação num reagente, rejeitar o recipiente. Access GI Monitor D 2005 Beckman Coulter, Inc. Página 12

13 . p^jmib=afirbkq=^ UNVMU Finalidade do produto Resumo e explicação do produto Informações sobre o produto O diluente de amostras A Access Sample Diluent A é utilizado juntamente com os ensaios Access para diluir as amostras dos doentes contendo concentrações de analito maiores que o calibrador S5 específico para aquele analito. O nível de analito nas amostras dos doentes podem exceder os níveis do calibrador S5 específico. Se for necessário um valor quantitativo, será preciso diluir a amostras a fim de determinar a concentração de analito. Access Sample Diluent A Nº Cat : 4 ml/recipiente Fornecido pronto para utilizar. Deixar o conteúdo repousar à temperatura ambiente por 10 minutos. Misturar invertendo delicadamente antes da utilização. Evitar a formação de bolhas. Estável até ao vencimento do prazo de validade marcado na etiqueta do recipiente quando armazenado a 2 10 C. Diluente: Matriz BSA tamponada com surfactante, < 0,1% de azida sódica, 0,5% de ProClin** 300. Avisos e precauções Para utilização em diagnóstico in vitro. As amostras dos doentes e os produtos hemoderivados podem ser analisados rotineiramente com riscos mínimos utilizando o procedimento descrito. Contudo, deve manusear estes produtos como potencialmente infecciosos de acordo com as precauções gerais e os métodos adequados de laboratórios clínicos, independentemente da origem, tratamento ou certificação anterior. Usar um desinfectante apropriado para a descontaminação. Armazenar e eliminar estes materiais e os respectivos contentores segundo o regulamento e as normas locais. A azida sódica pode reagir com as canalizações de chumbo ou cobre formando azidas metálicas altamente explosivas. Portanto, deixar fluir água em abundância nos tubos durante a eliminação de líquidos para prevenir a acumulação de azidas. 10 Xi. Irritante: ProClin 300 0,5%. R 43: Pode causar sensibilização em contacto com a pele. S 28-37: Após contacto com a pele, lavar imediata e abundantemente com água e sabão. Usar luvas adequadas. A Folha dos Dados de Segurança do Material (MSDS) está disponível a pedido. Procedimento As amostras podem ser medidas com exactidão dentro do intervalo analítico compreendido entre o limite mínimo de detecção e o valor do calibrador mais alto do ensaio específico. Se uma amostra contém uma quantidade de analito maior que o valor estabelecido do calibrador S5, diluir a amostra seguindo as instruções de diluição do ensaio específico contidas no folheto do kit sob Limitações do Procedimento na secção reagentes. Consultar os respectivos manuais Página 13

14 de sistema e/ou o sistema de Ajuda para as instruções sobre a introdução duma diluição de amostra numa solicitação de teste. Limitações do procedimento Se forem notados sinais de contaminação microbiana ou excesso de turvação no reagente, rejeitar o recipiente. Access GI Monitor D 2005 Beckman Coulter, Inc. Página 14

15 Referências 1 Lillemoe KD, Yeo CY, and Cameron JL. Pancreatic Cancer: State-of-the-Art Care. CA Cancer J. Clin. 2000; 50: Steinberg W. The clinical utility of the CA 19-9 tumor-associated antigen. Am J Gastroenterol. 1990; 85 (4): Del Villano BC, Brennan S, Brock P, Bucher C, Liu V, McClure M, et al. Radioimmunometric Assay for a Monoclonal Antibody-Defined Tumor Marker, CA Clin Chem. 1983; 29: Steinberg WK, Gelfand R, Anderson KK, Glen J, Kurtzman SH, Sindelar WF, et. al. Comparison of the Sensitivity and Specificity of the CA 19-9 and Carcinoembryonic Antigen Assays in Detecting Cancer of the Pancreas. Gastroenterology. 1985; 90: Ritts RE Jr, Del Villano BC, Go VLW, Herberman RB, Klug TL, Zurawski VR Jr. Initial Clinical Evaluation of an Immunoradiometric Assay for CA 19-9 Using the NCI Serum Bank. Int J. Cancer. 1984; 33: Jalanko H, Kuusela P, Roberts P, Sipponen P, Haglund C, Makela O. Comparison of a New Tumor Marker, CA 19-9, with Alpha-Fetoprotein and Carcinoembryonic Antigen in Patients with Upper Gastrointestinal Diseases. J Clin Pathol. 1984; 37: Glenn J, Steinberg WM, Kurtzman SH, Steinberg SM, Sindelar WF. Evaluation of the Utility of a Radioimmunoassay for Serum CA 19-9 Levels in Patients Before and After Treatment of Carcinoma of the Pancreas. J Clin Oncol. 1988; 6 (3): Willet CG, Dayl WJ, Warshaw AL. CA 19-9 is an index of response to neoadjunctive chemoradiation therapy in pancreatic cancer. Am J Surg. 1996; 172: HHS Publication, 4th ed., May Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. Available 10 DHHS (N10SH) Publication No , August Current Intelligence Bulletin 13 Explosive Azide Hazard. Available 11 Approved Guideline Procedures for the handling and processing of blood specimens, H18-A National Committee for Clinical Laboratory Standards. 12 Cembrowski GS, Carey RN. Laboratory quality management: QC & QA. ASCP Press, Chicago, IL, Kricka, L. Interferences in immunoassays still a threat. Clin Chem 2000; 46: Bjerner J, et al. Immunometric assay interference: incidence and prevention. Clin Chem 2002; 48: Krouwer JS, Rabinowitz R. How to improve estimates of imprecision. Clin Chem, 1984; 30: Tentative Guideline User evaluation of precision performance of clinical chemistry devices, EP5-T National Committee for Clinical Laboratory Standards, 4: No. 8. Access, SYNCHRON LX, UniCel, DxI e o logotipo Beckman Coulter são marcas registadas da Beckman Coulter, Inc. *Lumi-Phos é uma marca registrada da Lumigen, Inc. **ProClin é uma marca registrada da Companhia Rohm e Haas ou de suas subsidiárias e filiais. Fabricado por: Beckman Coulter, Inc N. Harbor Blvd. Fullerton, CA U.S.A. Beckman Coulter Ireland Inc. Mervue Business Park, Mervue, Galway, Ireland Impresso nos Estados Unidos da América. Fabricado nos Estados Unidos da América Revisado em Fevereiro 2005 Página 15