Efeito do ectoplasma utilizando Allium cepa como sistema teste ROSANA SILISTINO RICCHARD HALLAN HERNANDE LEITE

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Francisca Canejo Bonilha
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1 Efeito do ectoplasma utilizando Allium cepa como sistema teste ROSANA SILISTINO RICCHARD HALLAN HERNANDE LEITE 1

2 OBJETIVO Investigar os efeitos do ectoplasma sobre células de Allium cepa como modelo teste. 2

3 Ectoplasmia: objeto do estudo O pesquisador Charles R. Richet ( ), em 1906, propôs o nome ectoplasma. Ectoplasmia: aparecimento temporário de substâncias protoplasmáticas mais ou menos organizadas, de essência plástica, física e extrafísica, de fácil decomposição, em graus diversos de solidificação, com formas instáveis, ora como tênues vapores, bastões [...] (VIEIRA, 1999, RICHET, 2008, apud ROSSA, 2011). 3

Ectoplasmia: aparecimento temporário de substâncias protoplasmáticas mais ou menos organizadas, de

4 O uso do Allium cepa como organismo teste O Allium cepa (cebola) teve seu uso como sistema-teste em 1938 (LEVAN, 1945). Vegetais são um importante modelo para teste das alterações genéticas e reconhecidos como indicadores de efeitos citotóxicos, genotóxicos e mutagênicos de ambientes com presença de substâncias químicas (YI & MENG, 2003). 4

Vegetais são um importante modelo para teste das alterações genéticas e reconhecidos

5 Vantagens do uso de testes em plantas 1. Detectar a genotoxicidade mais rápida e eficientemente do que ensaios animais, são mais simples e econômicos, e usados, com sucesso, em monitoramento ambiental (YI & MENG, 2003); 2. Indicadores de efeitos tóxicos: respondem com alta sensibilidade (GRANT, 1994); pelo crescimento rápido de suas raízes, grande número de células em divisão, alta tolerância a diferentes condições de cultivo, disponibilidade durante o ano todo, fácil manuseio e por possuir cromossomos em número reduzido (2n = 16) e de grande tamanho (QUINZANI-JORDÃO, 1987); 3. Validados em estudos de colaboração internacional: United Nations Environmental Program (UNEP), World Health Organization (WHO) e US Environmental Protection Agency (USEPA), (FERNANDES et al., 2007). 5

Indicadores de efeitos tóxicos: respondem com alta sensibilidade (GRANT, 1994); pelo crescimento rápido de suas raízes, grande número de células em divisão, alta tolerância a diferentes condições

6 MATERIAL E MÉTODOS a) Material: ectoplasma de indivíduos ectoplastas (N= 12), do sexo feminino (G1) e masculino (G2); b) Faixa etária: 30 a 80 anos; c) Ectoplasta: entrevista e autorização do uso dos resultados, por meio do termo de consentimento livre e esclarecido; d) Local: sala de experimentos Ectolab Foz do Iguaçu; e) Tempo do experimento: 15 minutos. 6

e autorização do uso dos resultados, por meio do termo de consentimento livre e

7 A. Cepa como modelo teste Sementes de A. cepa (2n = 16 cromossomos), de um mesmo lote (variedade Baia Periforme). 7

8 MATERIAL E MÉTODOS GRUPO EXPERIMENTAL raíz Placas 1s/2r Placas 3s/4r Placas 5s/6r Placas 7s/8r ECTOPLASTA alcance da mão A. cepa ECTOPLASTA a 3 m A. cepa ECTOPLASTA alcance da mão A. cepa + HERBICIDA ECTOPLASTA a 3 m A. cepa + HERBICIDA 8

9 CONTROLE raíz 9s/10r A. Cepa (CONTROLE NEGATIVO) 11s/12r A. Cepa + HERBICIDA (CONTROLE POSITIVO) Em outra sala, os dois grupos controle serão colocados para germinar no mesmo horário e nas mesmas condições de temperatura e de umidade da sala experimental. 9

grupos controle serão colocados para germinar no mesmo horário e

10 PROCESSAMENTO DAS AMOSTRAS Germinação: quando as raízes de A. cepa atingirem 2 cm de comprimento serão fixadas por 24 horas e armazenadas para o processamento de acordo com as análises. 10

11 A. CEPA Análises Avaliar possíveis alterações no potencial mutagênico, citotóxico e genotóxico nas células expostas ao ectoplasma e tratadas com o herbicida por meio das análises de: aberrações cromossômicas; freqüência de quebras, micronúcleos nucléolos: número de nucléolo por célula; o tamanho de um único nucléolo e a porcentagem de células com um par de nucléolos heteromórficos; ultraestrutura por meio da MET ; Metabolômica; ECTOPLASTAS - sangue Estudo estrutural utilizando o ML; Análise ultraestrutural por meio do MET 11

de nucléolo por célula; o tamanho de um único nucléolo e a porcentagem de células com um par de nucléolos heteromórficos;

12 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ABNEY, K. R.; KOPSELL, D. A.; SAMS, C. E.; ZIVANOCIC S.; KOPSELL, D. E. UV-B radiation impacts shoot tissue pigment composition in Allium fistulosum L. cultigens. The Scientific World Journal, 2013, CABARAVDIC, M. Induction of chromosome aberrations in the Allium cepa test system caused by the exposure of cells to venzo(a) pyrene. Med Arh., v. 64, p , FERETTI, D.; CERETTI, E.; ZERBINI, I.; LIMINA, R. M.; DOMINICI, L.; MORETTI, M.; MONARCA, S.; DONATO, F. Assessmente of the genotoxic effects of gaseous emissions and percolates from three municipal landfills using plant bioassays. Ann Ig., v. 21, p , FERNANDES, T. C. C.; MAZZEO, D. E. C.; MORALES, M. A. M. Mechanism of micronuclei formation in polyploidizated cells of Allium cepa exposed to trifluralin herbicide. Pesticide Biochemistry and Physiology, v. 8, p ,

Induction of chromosome aberrations in the Allium cepa test system caused by the exposure of cells to venzo(a) pyrene. Med Arh., v. 64, p. 215-8, 2010. FERETTI, D.; CERETTI, E.; ZERBINI, I.

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