ESTUDO COMPARATIVO DO PERFIL BACTERIANO DE TELEFONES PÚBLICOS NO TERMINAL RODOVIÁRIO URBANO DA LAPA E NO TERMINAL RODOVIÁRIO DE SALVADOR BA

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1 1 ESTUDO COMPARATIVO DO PERFIL BACTERIANO DE TELEFONES PÚBLICOS NO TERMINAL RODOVIÁRIO URBANO DA LAPA E NO TERMINAL RODOVIÁRIO DE SALVADOR BA Manuel Alves de Sousa Junior 1 Fernanda Silva Lordêlo 2 Verônica Santarém Teles 3 Resumo: Os telefones públicos estão expostos diretamente ás contaminações ambientais e são manipulados diariamente por dezenas/centenas de pessoas que se contaminam com os microorganismos nele presentes, além de deixarem sua contribuição com novos microorganismos. 60 telefones públicos foram examinados, 30 localizados no Terminal Rodoviário Urbano Estação da Lapa, onde circulam diariamente 450 mil pessoas, e 30 localizados no Terminal Rodoviário de Salvador (Intermunicipal e Interestadual), onde circulam uma média de 10 mil pessoas/dia. A estação da Lapa deteve 55,60% das colônias isoladas, 38,75% das colônias isoladas foram de Staphylococcus aureus, 50% de Staphylococcus coagulase negativa e 11,25% foram de Micrococcus sp. Em 30% e 33,33% das amostras da Estação da Lapa e da Rodoviária, respectivamente, não obtiveram crescimento microbiano. Apesar de possuir maiores fluxos de pessoas e porcentagem de UFC em relação à Rodoviária, a Lapa obteve maior porcentagem de Staphylococcus aureus. Esta espécie, entre as encontradas nos telefones analisados, é a mais patogênica. Recomenda-se que os transeuntes realizem uma desinfecção das mãos e do monofone antes de sua utilização e que os agentes de limpeza dos locais procedam higienização constante para evitar possíveis infecções nos usuários. Palavras-chave: Telefones Públicos; Bactérias; Contaminação. Abstract: Public phones are directly exposed to environmental contamination and are daily handled by tens / hundreds of people who are contaminated with the microorganisms presented in them, and leave their "contribution" to new microorganisms. We examined 60 public phones, 30 were located in the Urban Bus Terminal Station of Lapa where 450 thousand people circulate daily and 30 located in the Bus Terminal of Salvador (Interstate and Intermunicipal) which moves an average of 10 thousand people per day. The Lapa station held 55.60% of the isolated colonies, 38.75% of the isolated colonies were Staphylococcus aureus, 50% of negative coagulase Staphylococcus and 11.25% were Micrococcus sp. In 30% and 33.33% of the samples of the Lapa Station and the bus station had respectively no microbial growth. In spite of having bigger flows of people and percentage of CFU regarding the Bus station, the Lapa obtained a bigger percentage of Staphylococcus aureus. This sort, found between the phones tested, is the most pathogenic. It is recommended that the passerby carries out a disinfection of the hands and of 1 Mestrando em Bioenergia Rede de Ensino FTC. Professor do IFBA. mjunior@ead.ftc.br 2 Mestranda em Bioenergia Rede de Ensino FTC. Coordenadora do Curso Superior Tecnológico em Segurança no Trabalho da Faculdade de Tecnologia e Ciências EAD e Docente do Curso de Direito da Faculdade Batista Brasileira. fslordelo@gmail.com 3 Graduada em Ciências Biológicas pela Rede de Ensino FTC. veronicasantarem@hotmail.com

2 2 the telephone handset before using it and that the cleaning agents of the places proceed constant cleaning to avoid possible infections in the users. Key-Words: Public Phones; Bacterial; Contamination. 1 Introdução Entre as células atuais, as bactérias possuem as estruturas mais simples e se constituem em formas de vida que se desenvolvem com o mínimo essencial. Elas são tipicamente esféricas, em forma de bastonetes ou espiraladas, com poucos micrômetros de tamanho (TORTORA et al, 2000; ALBERTS et al, 2002). Uma das mais importantes e amplamente utilizadas técnicas de coloração diferencial para bactérias é a coloração de Gram (BARBOSA, H. & TORRES, B., 1998). É empregada para separar as bactérias nos grupos Gram-positivo e Gram-negativo (MURRAY, P., 1998). Os processos de coloração são usados para evidenciar a estrutura geral ou alguma particularidade da estrutura dos microorganismos, auxiliando sua identificação (BARBOSA, H. & TORRES, B., 1998). As bactérias Gram-positivas retêm a coloração do Gram e assumem uma cor violeta escura, enquanto as bactérias Gram-negativas não retêm o corante e tornam-se vermelhas ou rosa intenso (SCHAECHTER et al, 1999). Em termos gerais as bactérias de interesse clínico pertencem a uma de duas grandes categorias: 1. As bactérias típicas, bastonetes e cocos que não apresentam aspectos morfológicos incomuns. Essas variedades comuns de bactérias podem ser subdivididas, de um modo geral, em bactérias Gram-positivas e bactérias Gram-negativas, e em cada dessas categorias, por sua vez, encontram-se bastonetes e cocos. 2. Bactérias que não estão incluídas nesse grupo como micoplasmas, micobactérias e clamídias (SCHAECHTER et al, 1999). Tanto os Staphylococcus quanto os Streptococcus pertencem a um grupo denominado cocos Gram-positivos. As três principais espécies, de importância médica, dos Staphylococcus são Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis e Staphylococcus saprophyticus (SCHAECHTER et al, 1999). Esses microorganismos são sensíveis à ação da lisostafina, característica esta que permite a sua diferenciação dos Micrococcus, que são cocos Gram-positivos, catalase positivos, que podem eventualmente ser encontrados em espécimes clínicos (TRABULSI et al, 2002). Entre estes, os Staphylococcus sp são, de longe, os causadores mais comuns de doenças humanas. Já os Micrococcus, podem ser encontrados no meio ambiente, como integrantes da flora normal da pele e do trato respiratório, e como patógenos associados a pontas de cateteres e similares (MAZA et al, 2001).

3 3 Os fungos, bem como as bactérias, estão dispersos pelo ambiente e podem ser transmitidos por contao com telefones públicos. Coutinho et al (2007) isolaram 34 gêneros de fungos de telefones públicos da cidade de Recife/PE. O isolamento fúngico não foi o objetivo do presente trabalho. A Estação da Lapa é utilizada para o transporte urbano da Região Metropolitana de Salvador e, segundo o administrador do local, 450 mil pessoas transitam diariamente nesta área. Já o Terminal Rodoviário de Salvador oferece um serviço de transporte inter municipal e inter estadual e, segundo o funcionário da AGERBA (Agência Estadual de Regulação de Serviços Públicos de Energia, Transportes e Comunicações da Bahia), o fluxo de pessoas/dia é de 10 mil. Nestes locais são encontrados telefones públicos, os quais são utilizados pelas pessoas que ali transitam. Os aparelhos telefônicos estão expostos a todo tipo de bactéria. Devido este fato, o presente trabalho buscou analisar o perfil bacteriano encontrado nestes telefones, como também, associá-lo às patologias humanas, a fim de alertar os órgãos de saúde pública da necessidade de fiscalização com relação à higiene destes aparelhos, já que estes podem ser considerados meios de transmissão de doenças. 2 METODOLOGIA Campo: Foi feito o mapeamento de 60 telefones públicos com etiquetas devidamente numeradas, sendo 30 localizados na Estação da Lapa e 30 no Terminal Rodoviário de Salvador. A coleta de todas as amostras foi realizada pela mesma pessoa em um ponto do telefone, o monofone, com o auxílio de swabs com meio de Stuart para evitar resultados errôneos no processamento (Foto 1).

4 4 Foto 1: Coleta com Swab em telefone público. Os swabs foram identificados de forma a diferenciar as amostras coletadas nos telefones de cada local (Foto 2). Para a coleta, o swab foi rolado no monofone, duas vezes, de cima para baixo, de forma a abranger toda sua superfície. Ao término da coleta, os swabs foram depositados em um isopor, contendo gelo reciclável e transportados, em até 2 horas, ao laboratório para serem analisados. Foto 2: Swab identificado

5 5 No laboratório: Foram preparadas 120 placas de Petri, sendo 60 placas com meio de MacConkey e 60 com meio de Ágar Sangue. Estas placas foram incubadas em uma estufa de cultura a 37 ºC por 24 h para garantia da esterilidade das mesmas. Após verificar a ausência de colônias contaminantes, as placas de Petri foram retiradas da estufa e armazenadas em geladeira até sua utilização. As amostras contidas em cada swab foram descarregadas em placas devidamente identificadas com a numeração das amostras, com os meios de Ágar Sangue (Foto 3) e de MacConkey, respectivamente. Após este procedimento, com o auxílio de uma alça bacteriológica, flambada, foi realizada a semeadura por esgotamento (Foto 4). As placas foram incubadas na estufa de cultura a 37 ºC por 24 h. Foto 3: Amostra sendo descarregada em placa com meio de Ágar Sangue. Foto 4: Semeadura por esgotamento.

6 6 Foi realizada uma análise macroscópica, onde pode-se evidenciar a quantidade de colônias e os tipos morfológicos presentes. Posteriormente, foi feito repique de cada tipo morfológico encontrado em placas estéreis com meio de Ágar Sangue. Não foram utilizadas placas de MacConkey para os repiques, pela ausência de bactérias Gram-negativas após semeadura e incubação por 48 h em estufa de cultura a 37 ºC. As placas com os repiques foram incubadas em estufa a 37 ºC por 24 h. As placas de Agar Sangue com ausência de crescimento na semeadura das amostras foram incubadas por mais 24 h. Foram realizadas as provas bioquímicas catalase e coagulase e a coloração de Gram. A catalase foi realizada utilizando duas gotas de água oxigenada sobre uma lâmina, evidenciando ou não o borbulhamento. A coagulase foi feita, utilizando duas gotas de plasma sanguíneo sobre uma lâmina, observando a presença ou ausência de aglutinações. Como auxílio diagnóstico, a coloração de Gram foi realizada em todas as amostras. Após a confecção do esfregaço, este foi coberto com as seguintes substâncias, violeta genciana, lugol, álcool-acetona e fucsina, respectivamente. Sendo que as três primeiros por 1 minuto (cada) e a último por 30 segundos. A cada uso das substâncias, a lâmina era lavada com água corrente e recolocada no suporte de coloração. As lâminas foram analisadas no microscópio óptico na objetiva de imersão. 3 Resultados e Discussão Na tabela 1 observa-se que a Estação da Lapa obteve maior quantidade de UFC em relação ao Terminal Rodoviário de Salvador. Este resultado já era o esperado, pois a Lapa possui um maior fluxo de pessoas (450 mil) transitando em suas dependências, conseqüentemente, a utilização dos telefones seria mais intensa. Tabela 1. Quantidade de Unidades Formadoras de Colônias (UFC) de bactérias encontradas em 60 telefones públicos, sendo 30 da Estação da Lapa e 30 do Terminal Rodoviário de Salvador, em outubro de 2005 (Salvador BA) Local Lapa Rodoviária Total UFC (%) , ,

7 7 De acordo com a tabela 2, verifica-se que a Estação da Lapa obteve uma porcentagem maior de Staphylococcus (coagulase negativa). Porém, o Terminal Rodoviário de Salvador obteve maior porcentagem de Micrococcus e Staphylococcus aureus. Isto quer dizer que, a Rodoviária, mesmo possuindo um menor fluxo de pessoas/dia (10 mil), estas estão mais susceptíveis às patologias, pois a espécie S. aureus, entre as bactérias encontradas, são as que têm maior grau de patogenicidade e por sua vez, maior importância epidemiológica. Tabela 2. Bactérias da espécie Staphylococcus aureus e dos gêneros Staphylococcus (coagulase negativa) e Micrococcus encontradas em 60 telefones públicos, sendo 30 da Estação da Lapa e 30 do Terminal Rodoviário de Salvador, em outubro de 2005 (Salvador BA) Segundo a tabela 3, a ausência de UFC em telefones públicos entre os dois locais foi Bactérias Local Total % UFC Staphylococcus aureus Staphylococcus coagulase Presença negativa Ausência Micrococcus sp Total Local Lapa % Rodoviária % 14 34, ,59 Lapa % Rodoviária % 23 56, , , , , , , , Total % 31 38, , , , , praticamente similar, 30 % na Estação da Lapa e 33,33 % no Terminal Rodoviário de Salvador. Provavelmente, antes da realização da coleta, houve a limpeza destes 19 telefones e também, possa ser que na região do monofone, de onde foi coletada as amostras, não havia bactérias viáveis e/ou de fácil crescimento nos meios utilizados.tabela 3. Avaliação qualitativa de telefones públicos da Estação da Lapa e Terminal Rodoviário de Salvador, segundo a presença de UFC da espécie Staphylococcus aureus e dos gêneros Staphylococcus (coagulase negativa) e Micrococcus, em outubro de 2005 (Salvador BA)

8 8 O Staphylococcus aureus é o agente mais comum de infecções piogênicas. Essas infecções podem se localizar na pele ou regiões mais profundas (TRABULSI et al, 2002). Algumas das formas de transmissão é através do contato direto, de pessoa para pessoa, ou através de roupas contaminadas. Doenças como foliculite (terçol, furúnculo), otite média, impetigo, endocardite bacteriana aguda, pneumonia, intoxicação alimentar estafilocócica e síndromes da pele escaldada e do choque tóxico são causadas por S. aureus. Algumas cepas de Staphylococcus, como as espécies coagulase negativas, estão presentes na flora normal do corpo humano. Porém, se encontrarem condições de se instalar no organismo, podem causar infecções urinárias e de próteses. Espécies de Micrococcus também colonizam seres humanos, principalmente na superfície da pele. Esses microorganismos só crescem em condições aeróbicas. Os Micrococcus podem ser encontrados em pacientes com infecções oportunistas, seu isolamento em amostras clínicas quase sempre representa uma contaminação insignificante pela flora da pele (MURRAY et al, 2000). A infecção por bactérias nem sempre ocorre, devido a alguns fatores: 1. O micróbio pode instalar-se no local errado e não ser capaz de multiplicar-se. 2. Algumas regiões do corpo possuem substâncias antibacterianas que têm efeito antibiótico, inibindo o crescimento dos micróbios. 3. A microbiota endógena também pode inibir o crescimento de microorganismos. 4. Fagócitos presentes no sangue e em outros tecidos podem envolver e destruir os micróbios. 4 Conclusão O perfil bacteriano encontrado em telefones públicos na Estação da Lapa e Terminal Rodoviário Salvador foi caracterizado pela presença de bactérias Gram-positivas, como Staphylococcus aureus, Staphylococcus (coagulase negativa) e Micrococcus. A Lapa, apesar de possuir maiores fluxo de pessoas e porcentagem de UFC em relação à Rodoviária, obteve maior porcentagem de Staphylococcus aureus. Esta espécie, entre as encontradas nos telefones analisados, é a mais patogênica. Esperava-se encontrar entereobactérias, porém em nenhuma das amostras analisadas, houve a presença destas bactérias Gram-negativas. Referências ALBERTS, B. et al. Fundamentos da Biologia Celular: uma introdução à biologia molecular da célula. Porto Alegre: Ed. Artmed, p.

9 9 BARBOSA, H. R. & TORRES, B. B. Microbiologia Básica. 4. ed. São Paulo: Ed. Atheneu, p. COUTINHO, Flavia Paiva; CAVALCANTI, Marilene da Silva; CORDEIRO NETO, Francisco. Isolamento de fungos filamentosos em telefones públicos da região Metropolitana da cidade do Recife, PE, Brasil. Braz. J. Microbiol. [online]. 2007, vol.38, n.2, pp MURRAY, Patrick R. Microbiologia Clínica. 2. ed. Rio de Janeiro: Ed. Medsi, p. SCHAECHTER, M. et al. Microbiologia: mecanismos das doenças infecciosas. 3 ed. Rio de Janeiro: Ed. Guanabara Koogan S. A., p. TRABULSI. Microbiologia. 3 ed. São Paulo: Ed. Atheneu, p. MAZA, L. M., PEZZLO, M. T. & BARON, E. J. Atlas de Diagnóstico em Microbiologia. Porto Alegre: Ed. Artmed, p.