Universidade de São Paulo Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Patologia
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- Lúcia de Barros Osório
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1 Universidade de São Paulo Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Patologia Laboratório de Farmacologia e Toxicologia Laboratório de Neuroimunologia Estudos pré-clínicos: desafios para a implementação de laboratórios especializados no Brasil Prof. Dr. Luiz Carlos de Sá-Rocha lcsaroch@usp.br São Paulo, 13 de novembro de 2008
2 Estratégia de apresentação: - Conceitos básicos e rápidos sobre estudos pré-clínicos. - Desafios brasileiros na área. - Estudo de caso: CIALLYX - Laboratórios & Consultorias Micro empresa CIETEC / SP
3 Abordagem inicial aos estudos de segurança (toxicidade). - Aspectos científicos. - Aspectos tecnológicos. - O estado da arte no mundo atual. - Limites e avanços. - A revolução biotecnológica. - A revolução nanotecnológica.
4 Principais critérios e elementos que devem nortear o desenvolvimento de fármacos e medicamentos. - Qualidade (*) - Eficácia (*) - Segurança (*) (*) Estes critérios valem tanto para um fármaco ou medicamento humano como veterinário.
5 Principais critérios e elementos que devem nortear o desenvolvimento de fármacos e medicamentos. -Efícácia. -Farmacodinâmica. -Farmacocinética. -Estudos laboratoriais in vitro e in vivo. -Segurança. -Consumidor (estudos toxicológicos abrangentes). -Ocupacional (estudos abrangentes e segurança de operadores). -Ambiental (toxicologia ambiental / análise de risco). -Terapêutica ou espécie alvo (paciente).
6 Etapas no desenvolvimento de um novo fármaco de Interesse médico humano ou veterinário. -Empresas envolvidas na descoberta de novos medicamentos. -Número de empresas com projetos para descoberta de novos fármacos e medicamentos. -EUA / Canadá > Outros países > Número de empresas que dão algum tipo de suporte. -EUA / Canadá > Outros países > 3600.
7 Etapas no desenvolvimento de um novo fármaco de Interesse médico humano ou veterinário. -Empresas envolvidas na descoberta de novos medicamentos. -Número de empresas com projetos CIALLYX para descoberta de novos fármacos e medicamentos. Prestadora de serviços: -EUA / Canadá > Outros países > Agilidade Atendimento ao cliente -Número de empresas que dão algum Foco no tipo cliente de suporte e suas estrutural. necessidades -EUA / Canadá > Outros países > 3600.
8 Etapas no desenvolvimento de um novo fármaco de Interesse médico humano ou veterinário. -Depois de descobertos, quais as causas para interrupção do desenvolvimento de novos medicamentos. - Toxicidade. - Baixa eficácia - Baixa tolerância. - Baixa biodisponibilidade nos tecidos alvo. Obs: Em seres humanos, é na Fase II, ou seja em pacientes, que ocorre o maior número de interrupções em projetos de novos medicamentos pois estes não apresentam-se tão eficientes quanto se avaliava.
9 Boas Práticas de Laboratório BPL ( GLP ) para estudos laboratoriais pré-clínicos. -Tabela de conteúdos (FDA 21 CFR Part 58 / OECD) - Escopo. - Definições. - Aplicabilidade dos estudos. - Inspeção das instalações e facilidades para a realização dos estudos. - Manejo e gestão das instalações e facilidades para a realização dos estudos. - Pessoal. - Diretor de estudo. - Unidade de Garantia de Qualidade (UGQ). - Instalações e facilidades para os cuidados com animais - Compatibilidade das diferentes áreas de laboratório. - Documentação: Laboratórios, biotérios e instalações para espécies alvo. - Gestão da documentação gerada. - Equipamentos. - Manutenção (preventiva e corretiva) e calibração dos equipamentos. ( )
10 Boas Práticas de Laboratório BPL ( GLP ) para estudos laboratoriais pré-clínicos. -Tabela de conteúdos - Procedimentos Operacionais Padrão POPs. - Reagentes e soluções. - Comissão de ética no uso de animais em experimentação. - Controle de amostras (cadeia de custódia). - Registro de manuseio e pesagem das amostras. - Protocolos. - Plano de estudos para a condução de estudos pré-clínicos. - Relatórios dos estudos pré-clínicos. - Guarda e recuperação dos registros e dados obtidos nos estudos.
11 Boas Práticas de Laboratório BPL ( GLP ) para estudos laboratoriais pré-clínicos. -Porque Boas Práticas de Laboratório BPL. - Histórico de falsificação de dados pelas empresas de pesquisa contratadas (CRO`s). - Reposição de animais que haviam morrido durante o teste. - Elaboração dos resultados dos estudos (fábrica de laudos). - Exclusão de resultados não interessantes para a viabilização dos produtos. - Em laboratórios norte americanos: - 25% de todos os resultados eram fajutados. - 13% dos dados de hematologia eram ruins. - 18% dos dados imunotoxicológicos estavam errados ou não tinham pé nem cabeça.
12 Boas Práticas de Laboratório BPL ( GLP ) para estudos laboratoriais pré-clínicos. -Histórico do BPL / Nova Zelândia / Ato de registro para testes em laboratórios / Estados Unidos / FDA / Regulamentação das Boas Práticas de Laboratório / Em vários países surgem diretrizes sobre BPL / Europa / OECD / Princípios das Boas Práticas de Laboratório / OECD / As diretrizes da OECD são adotadas pela Comunidade Européia / OECD / Revisão das Diretrizes e Princípios da BPL.
13 Boas Práticas de Laboratório BPL ( GLP ) para estudos laboratoriais pré-clínicos. -Os estudos pré-clínicos realizados hoje no Brasil exigem: - Observação aos Princípios de Boas Práticas de Laboratório BPL para a condução de estudos pré-clínicos. - Certificação, dentro do possível, de instituições nacionais e/ou internacionais que verificam os aspectos éticos e de qualidade ligados ao uso de animais em experimentação (AAALAC, COBEA, etc.). - Gestão de Qualidade (GQ), com Unidades de Garantia de Qualidade (UGQ) próprias que enfrentem auditorias internas (necessárias), de clientes e patrocinadores (comuns) e externas (agências governamentais nacionais e internacionais, como exemplo: ANVISA, In METRO, MAPA, FDA, etc.).
14 Boas Práticas de Laboratório BPL ( GLP ) para estudos laboratoriais pré-clínicos. -Papel da Unidade de Garantia de Qualidade (UGQ): - Revisão do Plano de Estudos e Relatórios visando que estes estejam de acordo com as necessidades regulatórias exigidas. - Revisão dos Relatórios visando que os resultados apresentados estejam de acordo com os resultados brutos obtidos. - Proceder no local dos testes inspeções das fases críticas do BPL. - Proceder no local dos testes inspeções nos diferentes departamentos participantes do estudo para assegurar o cumprimento dos Princípios de BLP. - Reportar suas observações para: Diretor de Estudos, Investigador Principal e Cientistas Responsáveis para que medidas corretivas sejam tomadas. - Prevenir eventuais problemas através do treinamento, esclarecimento e da persuasão gentil.
15 Boas Práticas de Laboratório BPL ( GLP ) para estudos laboratoriais pré-clínicos. -Papel da Unidade de Garantia de Qualidade (UGQ): - Estudos realizados em diferentes locais (multi centros - multi-site). Os Princípios de BLP devem ser seguidos em todos os locais e não apenas onde encontra-se o Diretor de Estudo. - Diretor de Estudo. - É o individuo responsável pela condução de todos os estudos pré-clínicos. - Investigador Principal. - É o indivíduo que, num teste realizado em lugares distintos, atua em nome do Diretor de Estudos e define responsabilidades para as diferentes fases do estudo.
16 Boas Práticas de Laboratório BPL ( GLP ) para estudos laboratoriais pré-clínicos. -Papel da Unidade de Garantia de Qualidade (UGQ): - Estudos realizados em diferentes locais (multi centros - multi-site). CIALLYX Os Princípios de BLP devem ser Formação seguidos em de todos RH na os área: locais e não apenas onde encontra-se o Diretor de Estudo. - Diretor de Estudo. - É o individuo responsável pela condução de todos os estudos pré-clínicos de saúde ou de segurança ambiental. especializados. - Investigador Principal. Atividade constante. Micro empresas tecnológicas são formadoras de RH Atividades muito especializadas (ex:patologia toxicológica experiência ACVP - É o indivíduo que, num teste realizado / EUA) em lugares distintos, atua em nome do Diretor de Estudos e define responsabilidades para as diferentes fases do estudo.
17 Boas Práticas de Laboratório BPL ( GLP ) para estudos laboratoriais pré-clínicos. -Objetivos: -Credibilidade. -Integridade. -Qualidade do trabalho. -Vantagens: -Aceitação de resultados obtidos. -Ferramentas para comprovação da excelência dos laboratórios e pessoal envolvidos.
18 Boas Práticas de Laboratório BPL ( GLP ) para estudos laboratoriais pré-clínicos. -Objetivos: -Credibilidade. -Integridade. -Qualidade do trabalho. CIALLYX Desafio de qualidade e relacionamento: -Vantagens: Produto = CONFIANÇA Conquistar a confiança do -Aceitação de resultados obtidos. cliente -Ferramentas para comprovação Manter da a excelência confiança dos do cliente laboratórios e pessoal envolvidos.
19 Testes toxicológicos que fazem parte da garantia de segurança para um produto farmacêutico. Programas básicos de estudos toxicológicos: - In vitro (triagem) - Aguda (mínimo necessário) - Dose repetida - Sub-crônica - Genotoxicidade - Crônica (podem ser requisitados) - Testes especial
20 Testes toxicológicos que fazem parte da garantia de segurança para um produto farmacêutico. Programas básicos de estudos toxicológicos: - In vitro (triagem) CIALLYX Desafio em C&T: - Aguda (mínimo necessário) - Sub-crônica Implementação de novos - Genotoxicidade protocolos. Validação de protocolos Experiência crescente - Crônica (podem ser requisitados) - Testes especial
21 Testes toxicológicos que fazem parte da garantia de segurança para um produto farmacêutico. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals Section 4: Health Effects - EXEMPLOS 401-Acute oral toxicity 402-Acute dermal toxicity 403-Acute inhalation toxicity 404-Acute dermal irritation/corrosion 405-Acute Eye irritation/corrosion 406-Skin sensitisation 407-Repeated dose 28-days oral toxicity study in rodents 408-Repeated dose 90-days oral toxicity study in rodents 410-Repeated dose dermal toxicity: 21/28 day study 411-Subchronic dermal toxicity: 90 day study 412-Repeated dose inhalation toxicity 414-Prenatal development toxicity study 421-Reproduction/Development toxicity screening test 424-Neurotoxicity study in rodents 451-Carcinogenicity studies 452-Chronic toxicity studies 474-Mammalian erythrocyte micronucleus test
22 Testes toxicológicos que fazem parte da garantia de segurança para um produto farmacêutico. Testes primários básicos: -Diferentes protocolos para toxicidade aguda -Safety Pharmacology -Estudos de genotoxicidade Bateria de testes (Ames; micronúcleo; outros) -Estudo de 28 dias, via oral, para roedores (roedor / ratos) -Estudo de 28 dias, via oral, para não roedores (não roedor / Mini Pigs) Testes especiais: -Imunotoxicidade - IMUNOTOX -Efeitos hormônais. -Estudo de 90 dias, via oral, para roedores (ratos). -Estudo de 90 dias, via oral, para não roedores (Mini Pigs). -Teratogenicidade. -Neurotoxicidade. -Carcinogenicidade. -Reprodução REPROTOX -OUTROS Importância do teste 28 dias em roedores e não roedores.
23 Toxicologia Ciência e segurança. Conceitos chave para a compreensão de resultados toxicológicos: -Crônicidade. -Absorção. -Distribuição. -Reversibilidade. -Dose-resposta. -Tempo-resposta -Suscetibilidade. -Evidências estatísticas x biológicas. -Metabolismo e biotransformação.
24 Toxicologia Ciência e segurança. Manifestações toxicológicas. -Letalidade. -Corrosão e intolerância de tecidos locais. -Efeitos imunes. -Efeitos sobre a reprodução. -Efeitos sobre o desenvolvimento. -Neurotoxicidade. -Efeitos sobre os órgãos alvo. -Carcinogenicidade. -Lesões anatonopatológicas. -Lesões histopatológicas. -Descrição e avaliação da lesões encontradas
25 Toxicologia Ciência e segurança. Manifestações toxicológicas. -Citotoxicidade. -Perda da capacidade de regulação da célula. -Ruptura da capacidade de reparo celular. -Efeitos sobre a membrana celular. -Efeitos sobre receptores. -Efeitos sobre organelas celulares. -Efeitos bioquímicos / metabólicos.
26 Princípios básicos dos testes de toxicidade. Espécies animais (não alvo) mais utilizadas. Roedores: -Ratos -Camundongos. -Camundongos geneticamente modificados. -outros. Não roedores: -Cães. -Minipigs. -Primatas não humanos: -Cynomolgus. -Sagüis. -Rhesus. Vantagens do minipig: -Similaridade com o ser humano. -É animal de criação não de companhia. -Sistemas digestório, cardiovascular, outros são semelhante ao do ser humano -Em estudos de imunotoxicidade são melhores que ratos. -A pele é excelente para estudos de irritação e sensibilização.
27 Princípios básicos dos testes de toxicidade. Espécies animais (não alvo) mais utilizadas. Roedores: CIALLYX -Ratos -Camundongos. Desafio em C&T: -Camundongos geneticamente modificados. -outros. Não roedores: -Cães. -Minipigs. -Primatas não humanos: -Cynomolgus. -Sagüis. -Rhesus. Qualificação do mini pig, no Brasil, como animal de experimentação. Qualificação de outros sistemas testes (ex: camundongos transgênicos).
28 Princípios básicos dos testes de toxicidade. Fatores animais a serem padronizados -Espécie. -Raça / Linhagem. -Idade. -Peso corpóreo / Superfície corpórea. -Gestação. -Sexo. -Influências genéticas. -Condições de saúde. -Condições imunológicas. -Condições endócrinas. -Condições neuro-comportamentais (estresse).
29 Princípios básicos dos testes de toxicidade. Fatores ambientais padronizáveis -Alimentação (ração, verde, outras). -Condição nutricional (restrições, dietas ou ad libitum). -Administrar a substância teste sempre após a alimentação. -Temperatura, umidade e pressão do ar nas salas e locais de alojamento. -Intensidade da luz. -Ciclo de luz. -Tamanho da caixa ou baia. -Possibilidade de exercícios. -Solitário ou em grupo. -Ciclo do dia. -Estação do ano. -Barulhos e ruídos. -Período de aclimatação.
30 Princípios básicos dos testes de toxicidade. Fatores ambientais padronizáveis -Alimentação (ração, verde, outras). CIALLYX -Condição nutricional (restrições, dietas ou ad libitum). -Administrar a substância teste Desafio sempre após funcional: a alimentação. -Temperatura, umidade e pressão do ar nas salas e locais de alojamento. -Intensidade da luz. Implementar um Lab. -Ciclo de luz. Experimentação Animal -Tamanho da caixa ou baia. (Biotério). -Possibilidade de exercícios. Equacionar Estrutura física / -Solitário ou em grupo. Procedimentos / Saúde animal -Ciclo do dia. Garantir integridade dos -Estação do ano. sistemas teste -Barulhos e ruídos. -Período de aclimatação.
31 Princípios básicos dos testes de toxicidade. Considerações éticas sobre o uso de animais em experimentação. -Estudos em animais dificilmente serão substituídos em breve espaço de tempo para a área de medicamentos (já na área de cosméticos...). - Incorporação de novas espécies - Incorporação de sistema in vitro (fator humano!) - Incorporação de sistema in silico (triagem) -É necessária a redução no número de animais utilizados (dados BPL são importantes). - AVANÇO DOS PROTOCOLOS INTERNACIONAIS NESTA ÁREA!!!
32 Ciallyx Laboratórios & Consultoria
33 Ciallyx Oportunidade: O desenvolvimento de novos fármacos e medicamentos faz parte da política de desenvolvimento científico, tecnológicos e industrial do Brasil. Existem projetos inovadores, no Brasil, para o desenvolvimento de novo fármacos e medicamentos. Cresce, no mundo, a busca por laboratórios especializados em avaliação de eficácia / segurança de novos produtos farmacêuticos.
34 Ciallyx A CIALLYX tem: Equipe multidisciplinar. Formação técnico-científica qualificada Parcerias fortes nas diferentes etapas de desenvolvimento. Experiência acumulada na realização, análise de resultados e elaboração de laudos técnicos visando atender as Agências Reguladoras.
35 Ciallyx Equipe: Articulada, competente e motivada! Os sócios são profissionais com mestrado e doutorado em áreas afins como :Patologia, Clínica e Cirurgia Veterinária, Farmacologia e Toxicologia. Possuem experiência profissional no desenvolvimento de protocolos internacionais. A CIALLYX conta também com consultores científicos e tecnológicos ligados a diferentes Universidades Brasileiras.
36 Ciallyx Nossa Equipe é: Articulada, competente e motivada! CIALLYX Os sócios são profissionais com mestrado e doutorado em áreas Desafio afins no mercado: como :Patologia, Clínica e Cirurgia Veterinária, Farmacologia e Toxicologia. Testes pré-clínico x provas de conceito. Possuem experiência Adaptação rápida. profissional no desenvolvimento de Desenvolvimento de protocolos internacionais. Plataformas Tecnológicas. Antiinflamatórios A CIALLYX conta também com consultores científicos e tecnológicos ligados a diferentes Universidades Brasileiras. Antimicrobianos Antineoplásicos Outras
37 Projetos inovadores - Medicamentos Desenvolvimento de medicamentos Veterinário nanoestruturados. Projetos inovadores Serviços: Biologia celular e molecular voltada para a avaliação de segurança e eficácia de produtos. Uso de células tronco humanas e murinas, diferenciadas em hepatócitos e neurônios,para uso em estudos de segurança e eficiência in vitro. Outros
38 Ciallyx Laboratórios & Consultoria Onde estamos? Uma empresa incubada no CIETEC. CIETEC - Centro Incubador de Empresas de Base Tecnológica, com sede na cidade de São Paulo.
39 Ciallyx O CIETEC tem como parceiros principais: Laboratórios & Consultoria Serviço Brasileiro de Apoio às Pequenas e Médias Empresas-SEBRAE. Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares-IPEN. Instituto de Pesquisas Tecnológicas do Estado de São Paulo-IPT / SP. Universidade de São Paulo-USP. Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de São Paulo-FAPESP. Conselho Nacional de Pesquisa-CNPq. Secretaria de Ciência,Tecnologia e Turismo do Estado de São Paulo.
40 CIALLYX, por dentro da vida, para sua segurança Contatos: Fabiano Moron / Diretor Administrativo Roberto Foz / Pesquisador Principal Thiago Salles Gomes / Diretor de Unidade Cristina Massoco / UGQ
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