ASSUNTO: TESTE DE SEXAGEM FETAL ALTERAÇÕES NO EXAME

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1 ASSUNTO: TESTE DE SEXAGEM FETAL ALTERAÇÕES NO EXAME Prezados clientes, Comunicamos que desde o dia 19/01, houve alteração de condições, instruções, outros laboratórios, questionário, coleta, comentários, redução da marcação e formato de resultado do exame TESTE DE SEXAGEM FETAL [S TSF]. ANTERIOR CONDIÇÕES Plasma EDTA (tubo PPT) Plasma (material obtido da centrifugação do tubo PPT contendo o sangue total coletado. Não manipular a amostra). Enviar a amostra de 2ª a 5ª feira. OUTROS Não enviar nos finais de semana, LABORATÓRIOS feriados e vésperas de feriados. Obrigatório preenchimento do QUESTIONÁRIO documento "Informações a Obrigatório preenchimento do candidata ao teste de sexagem documento "Termo de Ciência" fetal MARCAÇÃO Diariamente até as 10:00 hs, prazo: Diariamente até as 10:00 hs, prazo: 6 11 dias úteis após as 15:00 hs dias úteis após as 15:00 hs INSTRUÇÕES ANTERIOR - Devido a sensibilidade da metodologia, não é recomendada a realização do teste em idade gestacional inferior a 8 semanas. - Para gestações de fetos múltiplos: a ausência do cromossomo y em gestações de fetos múltiplos indica que os fetos são do sexo feminino, porém, a presença do cromossomo y indica que pelo menos um dos fetos é do sexo

2 masculino. - Pacientes em uso de heparina não fracionada ou heparina de baixo peso molecular não devem realizar este exame, pela possibilidade de inibição da reação. - Este exame não se trata do exame Sexo Genético verificar mnemônico SG. INSTRUÇÕES - Pacientes em uso de anti-coagulantes como enoxaparina (Clexane), heparina (Liquemine), varfarina (Marevan) não devem fazer o exame, pela chance de inibição da reação. - A coleta deverá ser feita a partir da 9ª semana de gestação. COLETA ANTERIOR - Coletar 1 tubo de sangue de 6,0 ml do tipo PPT (Plasma Preparation Tube, BD). - Após a coleta, este deve ser centrifugado em até 2 horas. Este prazo deves ser rigorosamente observado, sob o risco de comprometer a qualidade do exame. - A amostra deve ser coletada preferencialmente por funcionários do sexo feminino, para evitar contaminação por cromossomo Y. - A centrifugação deve ser feita por 10 minutos a 1100G (forca G centrifuga), em temperatura ambiente. - A conversão de força centrifuga relativa G para RPM depende do raio da centrifuga (verificar tabela abaixo). - Após a centrifugação, enviar o próprio tubo de coleta. - Não aliquotar ou fracionar a amostra e não abrir o tubo. - Tabela de relação raio da centrifuga X velocidade de centrifugação para se obter a Força Centrífuga de 1100 G: - 07 cm rpm - 08 cm rpm - 09 cm rpm - 10 cm rpm - 11 cm rpm

3 COLETA - 12 cm rpm - 13 cm rpm - 14 cm rpm - 15 cm rpm - 16 cm rpm - 17 cm rpm - 18 cm rpm - 19 cm rpm - 20 cm rpm - 21 cm rpm - 22 cm rpm - 23 cm rpm - 24 cm rpm - 25 cm rpm - Encaminhar imediatamente ao setor técnico sob refrigeração. -Coletar em dois tubos PPT. (Plasma Preparation Tube, BD). As amostras de sangue total devem ser centrifugadas logo após a coleta por 5 minutos a 3000 rpm, mantidas no tubo primário (PPT) e enviadas ao laboratório congeladas. Este prazo deve ser rigorosamente observado, sob o risco de comprometer a qualidade do exame. Não coletar de pacientes que tenham recebido transfusões sanguíneas nos últimos 4 meses, realizaram transplante de medula óssea, foram submetidas a infusão de linfócitos paternos ou imunização com linfócitos paternos. A coleta deverá ser feita a partir da 9ª semana de gestação. A Coleta do exame deverá ser realizada exclusivamente por colaboradoras do sexo feminino. Não aliquotar ou fracionar a amostra e não abrir o tubo. COMENTÁRIOS O DNA fetal livre de células é oriundo de sincíciotrofoblastos apoptóticos, que tem como função abrir caminho na parede do endométrio para a implantação

4 do blastocisto durante a primeira semana de gestação a partir da placenta (Alberry et al., 2007). Anteriormente, a determinação do sexo fetal era realizada por utilização de técnicas invasivas, tais como a amniocentese. Estes processos, no entanto, ainda carregam um risco de aborto em torno de 1% e não podem ser realizados até 11 semanas de gestação. A determinação confiável do sexo fetal por meio de ultrassonografia não pode ser feita no primeiro trimestre, porque o desenvolvimento da genitália externa ainda não está completo (Scheffer et al., 2010). O uso de técnicas moleculares não invasivas, tais como a PCR em tempo real permitiu um grande avanço na identificação do sexo fetal, principalmente em fases precoces da gravidez. A qpcr se baseia na detecção e identificação de marcadores do cromossomo Y no DNA fetal presente no plasma materno (Wright et al., 2009). FORMATO DE RESULTADO MÉTODO: PCR RESULTADO: ANTERIOR NA IDADE GESTACIONAL DETECTADO DNA PROVENIENTE DE CROMOSSOMO Y, SUGERINDO QUE O SEXO DO FETO E VALOR DE REFERÊNCIA: NÃO SE APLICA. TABELA DO ÍNDICE DE ACERTO DO TESTE DE DETERMINACAO DO SEXO FETAL PELA ANÁLISE MOLECULAR DO PLASMA MATERNO, DE ACORDO COM O GENERO APONTADO E A IDADE GESTACIONAL (Atualizado até Junho 2004). RESULTADO DO TESTE FASE DA GRAVIDEZ (Semanas) N FEMININO MASCULINO MENOR QUE ,00% MAIOR QUE 99,00% 8 A ,00% MAIOR QUE 99,00% 11 A ,00% MAIOR QUE 99,00% MAIOR OU IGUAL A ,00% MAIOR QUE 99,00% TOTAL

5 OBS.: O USO DE MEDICAMENTOS, ESTADOS PATOLÓGICOS DA MÃE OU DO FETO, DELEÇÕES NO CROMOSSOMO Y, NÃO SE SABE SE PODEM INTERFERIR NO RESULTADO. NOTA: EXAME REALIZADO EM PARCERIA COM O LABORATÓRIO SÍRIO LIBANÊS. MÉTODO: PCR (REAÇÃO EM CADEIA DE POLIMERASE) EM TEMPO REAL - Método in house RESULTADO: FORMATO DE RESULTADO NOTA: - O teste, realizado pela técnica de PCR Real-time, baseia-se na identificação de parte do cromossomo Y presente na circulação materna. Como apenas indivíduos do sexo masculino possuem esse cromossomo dentro de suas células, sua presença indica que o feto e do sexo masculino e sua ausência indica que o feto e do sexo feminino. - O teste não detecta gravidez, assim, se uma mulher que não estiver grávida fizer o teste, este apontara resultado feminino, pois apenas identificara a ausência de DNA masculino. - Gestação gemelar e desordens genéticas que envolvam cromossomos sexuais e diferenciação sexual podem levar a resultados falso-positivos para o sexo masculino. - Este exame pode permanecer inconclusivo, porém isto não indica que existe algum problema com o feto. MOTIVO: Internalização do exame. O Hermes Pardini tem uma equipe disponível para atendê-lo, de segunda à sexta-feira, no período de 07:00 h às 19:00 h e aos sábados de 07:00 h às 14:00 h (horário de Brasília). Em caso de dúvidas, entre em contato conosco.

6 Atenciosamente, INSTITUTO HERMES PARDINI S/A LABORATÓRIO DE APOIO DIAGNÓSTICO