PROGRAMA DE CONTROLE DE QUALIDADE DA ABH
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- Ivan Garrido Igrejas
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1 PROGRAMA DE CONTROLE DE QUALIDADE DA ABH SUMÁRIO 1. INSTRUÇÕES GERAIS INSTRUÇÕES MODALIDADE TIPIFICAÇÃO HLA Envio de Resultados Tipificação HLA Qualidade da Amostra Critérios de Avaliação e Desempenho da Modalidade Tipificação HLA... 5 a) Baixa e Média Resolução:... 5 b) Alta Resolução: INSTRUÇÕES MODALIDADES PROVA CRUZADA E PRA Envio de resultados modalidade Prova Cruzada Envio de resultados modalidade PRA Viabilidade celular Definição do Consenso para Modalidades Prova Cruzada e PRA Critérios de Avaliação Modalidades Prova Cruzada e PRA... 7 a) Para Screening e Prova Cruzada:... 7 b) Para Determinação de Especificidades: Analise de Desempenho Modalidades Prova Cruzada e PRA... 8
2 1. INSTRUÇÕES GERAIS AMOSTRAS DA 1 RODADA DO CQ ABH-2012 TIPIFICAÇÃO HLA PROVA CRUZADA PRA 5 amostras de sangue em anticoagulante EDTA (amostras 53, 54, 55, 56 e 57) 3 amostras de soro (soros 46, 47 e 48) e duas amostras de sangue em anticoagulante ACD (números 1 e 2 ou 3 e 4) 3 amostras de soro (soros 46, 47 e 48) a) Resultados: Todos os resultados do CQABH devem ser preenchidos on-line no site A Identificação (ID) do usuário ( ) e senha é obrigatória. Se você esqueceu sua senha, entre em contato com a Comissão de Controle de Qualidade no e- mail qualidade@abh.net.br, no prazo máximo de 72h antes do término do envio de resultados. Siga as instruções da tela do site na guia Envio de Resultados. O prazo máximo de envio dos resultados é dia 21 de maio de 2012, às 23h59min. A inclusão tardia dos resultados não será aceita. b) Comentários: Os comentários não serão considerados como parte dos resultados, e não serão utilizados na análise de desempenho. c) Correção de erros: Se for detectado erro depois dos resultados serem enviados, entre novamente com seu ID e senha e faça as modificações necessárias. Ressaltamos que ao finalizar o prazo de envio de resultados as correções não serão mais possíveis. d) Desempenho: Para avaliação de desempenho, serão consideradas todas as amostras enviadas no ano.
3 2. INSTRUÇÕES MODALIDADE TIPIFICAÇÃO HLA O Controle de Qualidade da ABH foi concebido para avaliar o desempenho dos Laboratórios na Tipificação HLA por qualquer método. O Programa consiste em dois (2) embarques anuais, cada um composto de cinco amostras de sangue total em anticoagulante ACD. Os Laboratórios participantes devem utilizar o(s) método(s) que usam em sua rotina. Os resultados devem ser relatados conforme os métodos utilizados para a realização do teste, isto é, métodos moleculares de baixa, média e alta resolução Envio de Resultados Tipificação HLA Para inserir os resultados, primeiro selecione a amostra e depois entre com os resultados. Na mesma página serão inseridos os resultados para todos os níveis de resolução. A entrada padrão para todos os campos é NT (não testado). Os resultados devem ser inseridos em ordem crescente de dígitos, conforme a lista que aparece no campo do resultado. Selecione a primeira coluna para optar por resultados de baixa resolução. Se aplicável, os equivalentes sorológicos de tipificação molecular devem ser selecionados nesta coluna. Selecione a segunda coluna para inserir resultados de média resolução. O código NMDP deve ser digitado. Nos resultados de baixa e alta resolução em que forem identificados uma única especificidade ou alelo, a segunda especificidade ou alelo deverá ser registrada como blank (-). Se na média resolução for identificada a mesma especificidade com dois códigos NMDP diferentes, ambos os resultados devem ser registrados. Por exemplo: Se detectado B*44:HREN e B*44:HREP, os dois resultados devem ser registrados. Se detectado B*44:HREN e B*44:HREN, apenas o primeiro grupo alélico deve ser registrado, o segundo deverá ser registrado como blank (-). Para a digitação de alta resolução, nos campos de alta resolução é usada a nova nomenclatura da OMS. Para maiores informações consulte o site:
4 Se for identificado um provável novo alelo, selecione "Novo" no campo de alta resolução e descreva os seus comentários no campo especifico. Quando o laboratório não puder excluir um alelo ambíguo (ou alternativo) ou quando dois alelos diferirem fora dos exons 2 e 3 para classe I e fora do exon 2 para classe II deve-se usar os sufixos G e P, conforme definido pela Nomenclatura da OMS. Se o método de tipificação não distingue dois alelos que não são do grupo G ou P e que ambos estão especificados na lista dos Alelos Comuns e Bem Documentados, então esta não é uma tipificação de alta resolução. Recomenda-se que em tais casos se insira o resultado como NT, no campo alta resolução e digite os alelos ambíguos nos comentários. (Common and welldocumented HLA alleles: report of the Ad-Hoc committee of the American Society for Histocompatiblity and Immunogenetics. Hum Immunol. 68(5): ,2007). As ambiguidades que envolvem alelos cujas diferenças estão localizadas fora dos exons 2 e 3 para genes de classe I e fora do exon 2 para genes de classe II, mas que afetam sua expressão [alelos nulos (N) ou de baixa expressão (L)] devem ser resolvidas nas situações citadas na tabela abaixo. Deve-se excluir o alelo N quando no fenótipo forem detectados os alelos ou grupos alélicos mencionados nesta tabela. Por exemplo, na amostra com tipificação HLA-B*44:03, o resultado HLA-C*04:01:01G não deve ser liberado, são obrigatórias estratégias que excluam o alelo HLA-C*04:09N. Métodos como PCR-SSP alelo especifico ou sequenciamento complementar permitem a diferenciação. Alelo Expresso Alelos/Grupos Alélicos presentes e que Alelo Nulo Comumente Relacionado requerem a resolução da tipificação A*24:09N A*24:02 B*40 ou B*27 B*51:11N B*51:01 A*02, C*15 e DRB1*04 A*02:01, C*15 e DRB1*04:02 C*04:09N C*04:01 B*44 ou principalmente B*44: Qualidade da Amostra Para cada amostra indique a qualidade do espécime, no espaço dos comentários: "Boa" para amostras que obtiveram resultados satisfatórios sem o processamento da amostra ou problemas no teste.
5 "Aceitável" para amostras que apresentaram dificuldades no processamento ou nos testes, mas a partir das quais resultados confiáveis foram obtidos. "Inaceitável" é reservada para os espécimes cujos resultados não foram confiáveis por problemas da amostra. Neste caso o resultado dever ser NT (não testado) Critérios de Avaliação e Desempenho da Modalidade Tipificação HLA a) Baixa e Média Resolução: A análise da tipificação HLA de baixa e média resolução só poderá ser realizada quando os seguintes critérios forem preenchidos: Consenso de 80% entre os laboratórios e; Equivalência entre o resultado do consenso e o resultado da alta resolução do Laboratório de Referência. Se esses critérios não forem cumpridos a análise do desempenho não será enviada aos laboratórios. Havendo consenso a análise do desempenho será enviada conforme percentual de concordância. -Desempenho Excelente: concordância de 100% com o consenso dos laboratórios e o Laboratório de Referência. -Desempenho Satisfatório: requer concordância de 90 a 99% com o consenso dos laboratórios e o Laboratório de Referência. -Desempenho Insatisfatório: concordância menor do que 90% com o consenso dos laboratórios e o Laboratório de Referência. b) Alta Resolução: O desempenho será avaliado em comparação com o resultado do Laboratório de Referência Internacional, C.W. Bill Young Marrow Donor Center, Georgetown University Medical Center - Washington, DC, USA. -Desempenho Excelente: concordância de 100% o resultado do Laboratório de Referência. -Desempenho Bom: requer concordância de 80 a 99% com o resultado do Laboratório de Referência.
6 - Desempenho Insatisfatório: concordância menor do que 80% com o resultado do Laboratório de Referência. 3. INSTRUÇÕES MODALIDADES PROVA CRUZADA E PRA O Controle de Qualidade da ABH foi concebido para avaliar o desempenho dos Laboratórios na pesquisa de anticorpos HLA e nas Provas Cruzadas. O Programa consiste em dois (2) embarques anuais, cada um composto de três amostras de soro e duas amostras sangue total em anticoagulante ACD. O desempenho só será dado com o mínimo de 10 participantes, por categoria. Os Laboratórios participantes devem utilizar o(s) método(s) que usam em sua rotina. A tipificação HLA das amostras de sangue enviadas estará disponível na página da web ( aproximadamente 10 dias após a data de embarque. Os resultados devem ser relatados conforme os métodos utilizados para a realização do teste Envio de resultados modalidade Prova Cruzada Para inserir os resultados, escolha a combinação soro/célula correspondente. Atenção: cada laboratório receberá um conjunto de células diferentes, uma parte dos laboratórios receberá as células n 1 e 2, e outra parte receberá as células n 3 e 4. Insira os resultados conforme a técnica utilizada, onde NT (não testado), N - Negativo ou P - Positivo Envio de resultados modalidade PRA Para inserir os resultados, primeiro selecione a amostra, relate o fabricante, selecione o método, insira o MFI dos controles e o valor de corte ( Cut Off ) quando necessário. Para o resultado do Screening classe I e II selecione positivo ou negativo. Nos resultados de Painel de Fenótipos classe I e II, insira o percentual e para cada especificidade selecione NT (não testado), N - Negativo ou P - Positivo. Para o resultado de Painel de antígenos isolados classe I e II, inserir o percentual calculado utilizando o banco de dados da sua região. Para cada especificidade selecione NT (não testado), N - Negativo ou P - Positivo.
7 3.3. Viabilidade celular Para cada célula indique a viabilidade, no espaço dos comentários: "Boa" para amostras que obtiveram resultados satisfatórios sem o processamento da amostra ou problemas no teste. "Aceitável" para amostras que apresentaram dificuldades no processamento ou nos testes, mas a partir das quais resultados confiáveis foram obtidos. "Inaceitável" é reservada para os espécimes cujos resultados não foram confiáveis por problemas da amostra. Neste caso o resultado dever ser NT (não testado) Definição do Consenso para Modalidades Prova Cruzada e PRA A análise dos resultados de PRA e Prova Cruzada só poderá ser realizada quando os seguintes critérios forem atingidos: - mínimo de 10 participantes; - concordância do resultado de 80 % entre os laboratórios participantes. - as especificidades que forem reportadas por mais que 80% dos laboratórios serão consideradas como consenso. - as especificidades reportadas por apenas um laboratório serão consideradas discrepantes Critérios de Avaliação Modalidades Prova Cruzada e PRA a) Para Screening e Prova Cruzada: Critério de avaliação para cada amostra de soro requer concordância com o consenso dos laboratórios, sendo avaliado em CONCORDANTE, DISCREPANTE ou NÃO GRADUADO (SEM CONSENSO). b) Para determinação de Especificidades: As especificidades relatadas pelo laboratório devem ser coincidentes com o consenso mínimo em 80%, para serem consideradas CONCORDANTES. Por exemplo: o consenso definiu 10 especificidades, o laboratório que definir no mínimo 8 dessas 10 especificidades (80%), será
8 considerado CONCORDANTE. Caso o laboratório não atinja a concordância de 80% ou reporte mais de três especificidades apenas detectadas por ele, este resultado será considerado DISCREPANTE Analise De Desempenho Modalidades Prova Cruzada e PRA - Desempenho Excelente: acerto de 100%. - Desempenho Satisfatório: acerto de 80 a 99%. - Desempenho Insatisfatório: acerto menor que 80%. Comissão de Controle de Qualidade ABH
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