HEMATOLOGIA ºAno. 7ª Aula. Hematologia 3ºano 2010/2011 Granulocitopoiese. Prof. Leonor Correia
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1 HEMATOLOGIA ºAno Prof. Leonor Correia 7ª Aula Hematologia 3ºano 2010/2011 Granulocitopoiese Origem, desenvolvimento e morfologia e funções dos diferentes tipos de granulócitos - Neutrófilos - Eosinófilos - Basófilos Cinética das células mielóides Estimulação dos polimorfonucleares pelas endotoxinas Citoquímica e marcadores imunológicos das células da série granulocítica 1
2 Granulocitopoiese MIELOBLASTO m Núcleo volumoso, redondo ou oval com 1 ou vários nucléolos azul pálido, e cromatina fina Citoplasma azulado sem ou com finos grânulos azurófilos 2
3 PROMIELÓCITO 15 a 22 m Cromatina grosseira e estriada Geralmente com nucléolos, por vezes pouco visíveis Citoplasma abundante e basófilo com muitos grânulos primários azurófilos, em menor número na zona do ap. De Golgi MIELÓCITO Com cerca de 15 m Núcleo oval ou redondo com uma estrutura estriada e sem nucléolos Granulações primárias pouco abundantes Citoplasma rosado e rico em grânulos secundárias Última fase em que ocorrem divisões mitóticas 3
4 METAMIELÓCITO Com cerca de 15 m Núcleo bastante condensado e por vezes em forma de rim Citoplasma abundante e rico em grânulos secundários NEUTRÓFILO EM BANDA m Núcleo que em toda a sua superfície apresenta sempre a mesma largura Pode apresentar segmentação inferior a 2/3 do diâmetro nuclear Citoplasma rosado com grânulos finos e pequenos 4
5 NEUTRÓFILO SEGMENTADO m. Núcleo polilobulado e segmentos ligados por filamentos de cromatina densa O nº de segmentos aumenta com a idade da célula Citoplasma incolor ou rosado com muitos grânulos secundários NEUTRÓFILO SEGMENTADO SEGMENTAÇÃO Valores normais (ARNETH) 2 segmentos - (10-30%) 3 segmentos - (40-50%) 4 segmentos - (10-20%) 5 segmentos - ( 0-5%) > neutrófilos em banda =>DESVIO À ESQUERDA > de neutrófilos polisegmentados =>DESVIO À DIREITA 5
6 1. Capacidade de migração FUNÇÕES DOS NEUTRÓFILOS 1. Fagocitose 2. Exocitose FUNÇÕES DOS GRANULÓCITOS 1.CAPACIDADE DE MIGRAÇÃO do SP para os locais de alteração tecidular, infecção ou inflamação. - Moléculas de adesão LAM-1 ou L-Selectina : Mediadoras de interacções de baixa afinidade entre as células mielóides e os endotélios, promovendo a adesão e a deslocação através das paredes dos vasos. Integrinas: Mediadoras de interacções fortes entre os granulócitos e as proteínas da matriz subendotelial, que é essencial para a migração das células para fora dos vasos sanguíneos e nos tecidos. - Factores quimiotácticos (C3b e C5b) 6
7 Captação Os neutrófilos respondem à infecção por migrar através de vasos sanguíneos e ingerir as bactérias. Os pseudópodes dos neutrófilos englobam as bactérias. FUNÇÕES DOS GRANULÓCITOS 2) FAGOCITOSE Ingestão de partículas (bactérias) precedidas ou não de opsonização (revestimento com Acs ou fracções do complemento, que permitem o reconhecimento da partícula pela célula fagocítica) Citotoxicidade mediada pelo Anticorpo Formação de fagosomas ou vacuolos fagocíticos que fusionam com os grânulos citoplasmáticos das células a fim de promover a degradação das partículas pelas enzimas e os agentes oxidantes. Controlada por citocinas (CSFs) e mais importante quando as células se encontram activadas. 7
8 FUNÇÕES DOS GRANULÓCITOS c) EXOCITOSE Libertação do conteúdo dos grânulos: enzimas digestivas e hidrolíticas e mediadores da resposta inflamatória tais como os factores quimiotácticos, os activadores do complemento, da coagulação da fibrinólise e substâncias que afectam a permeabilidade vascular e o fluxo sanguíneo. A desgranulação das células mielóides desencadeia e suporta a resposta inflamatória recrutando mais células mielóides para o local da inflamação. EOSINÓFILO m. Núcleo geralmente bilobado. Cromatina densa Citoplasma rosado e quase incolor Grânulos redondos com tamanho uniforme e cor laranja, que coram pela eosina 8
9 EOSINÓFILOS Contém uma protéina básica major, que cora pela eosina. A sua função principal é a destruição dos parasitas. Mediada pelo Ac (IgG) Também contém peroxidase e outras enzimas idênticas às dos neutrófilos. A sua produção e funções parecem estar mais ligadas com o sistema imunitário. Estão envolvidos nas reacções de hipersensibilidade imediata. Papel nas reacções alérgicas por neutralizarem a histamina Quando excessivamente estimulados podem originar alterações tecidulares e fibrose. BASÓFILO m. Núcleo segmentado e homogéneo Citoplasma reduzido, incolor ou rosado Grânulos basófilos, quase negros, numerosos e dispostos irregularmente 9
10 Grânulos grandes com distribuição irregular e cor azul forte. Papel importante na hipersensibilidade imediata. Produzem leucotrienos (mediadores da hipersensibilidade aguda) As basofilías originam asma, urticária, rinite, anafilaxia, edema, prurido e hipotensão Muito ricos em heparina e histamina, que permite a manutenção do sangue e fluídos extracelulares incoaguláveis, especialmente na medula.. São bons marcadores de doenças mieloproliferativas (LMC). Mastócitos = basófilos tecidulares BASÓFILOS CINÉTICA DA GRANULOPOIESE MO normal produz cerca de 10 9 neutrófilos/kg/dia O tempo total gasto em proliferação, maturação e armazenamento medular oscila entre 6-10 dias Os neutrófilos circulantes ficam em equilíbrio com os marginais (1/1) Os granulócitos deixam a circulação em 6-10h, dos tecidos não voltam ao SP, e o seu tempo de vida é de cerca de 2-3 dias 10
11 CINÉTICA DOS NEUTRÓFILOS ESTIMULAÇÃO DA LEUCOPOIESE PELAS ENDOTOXINAS As endotoxinas activam os monócitos levando-os a produzir monocinas (IL-1 e TNF) As monocinas actuam sobre os linfócitos T levando-os a produzir factores de crescimento mielóides e diferentes citocinas Os factores de crescimento e as citocinas, agindo sobre as stem cells, vão originar as células precursoras das diferentes linhagens 11
12 CINÉTICA DA GRANULOPOIESE Em infecções severas o tempo de maturação pode ser encurtado para 48-72h = > desvio da pool medular para a circulação => aumento do nº de neutrófilos circulantes para compensar a falta dos que se dirigiram para os tecidos Na infecção os GB libertam citocinas que promovem migrações adicionais Etapas da reacção inflamatória 1- os agentes patogénicos e/ou células dos tecidos lesados libertam substâncias químicas, principalmente histaminas. 2- As substâncias químicas libertadas causam vasodilatação e o aumento da permeabilidade dos capilares sanguíneos da zona atingida. Como consequência, aumenta o fluxo sanguíneo no local e uma maior quantidade de fluido intersticial passa para os tecidos envolventes. A zona atingida manifesta rubor, calor, edema e dor.a dor é causada pela acção de substâncias químicas nas terminações nervosas e pela distensão dos tecidos. 3- Os neutrófilos e os monócitos são atraídos por quimiotaxia, deixam os vasos sanguíneos por Diapedese e dirigem-se aos tecidos infectados. Os neutrófilos são os primeiros a chegar e começam a realizar a fagocitose dos agentes patogénicos. Chegam depois os monócitos que se diferenciam em macrófagos. 4- Os macrófagos fagocitam os agentes patogénicos e os seus produtos, os neutrófilos destruídos na processo e as células danificadas. O pús que se acumula no local da infecção é formado por microrganismos e fagócitos mortos e por proteínas e fluídos que saíram dos vasos sanguíneos. O pús é absorvido e, ao fim de alguns dias, verifica-se a cicatrização dos tecidos. 12
13 Choque Séptico Esta condição fisiológica ocorre devido a uma infecção generalizada, especialmente septicemia Os glóbulos brancos (neutrófilos, azul) e macrófagos (verde) chegam ao local da infecção para fagocitar O alargamento dos vasos sanguíneos (vasodilatação) resulta em aumento da permeabilidade capilar e extravasamento de líquidos (gotas), o que pode levar a uma queda drástica da pressão arterial. FUNÇÕES E CONTEÚDO DOS GRÂNULOS DOS GRANULÓCITOS Granulócitos Funções Conteúdo dos grânulos NEUTRÓFILOS EOSINÓFILOS Degradação de substâncias patogénicas Formação de oxidantes Degradação de tecidos ~ às dos neutrófilos Destruição de parasitas Lisozima Esterase Catepsina G Proteinase Peroxidase Colagenase Proteína básica major BASÓFILOS Hipersensibilidade imediata?? Inibição da coagulação Histamina Heparina glicosaminoglicanos 13
14 CITOQUÍMICA DOS LEUCÓCITOS Leucócito NEUTRÓFILO Mieloperoxidase Esterase específica Esterase inespecífic a PAS MONOCITO LINFÓCITO /- +/- O tipo de grânulos constitui um bom marcador da diferenciação celular Grânulos primários muito ricos em peroxidase A fosfatase alcalina leucocitária (PAL) encontra-se presente nos neutrófilos maduros e muito aumentada nas infecções. CÉLULAS MIELÓIDES Marcadores imunológicos CD34 - marcador característico de células mielóides muito imaturas CD16 - Receptor do Fc das Igs, ocorre nas formas mais maduras Os marcadores imunológicos são úteis para distinguir os progenitores muito imaturos mas não identificam os estados intermédios tal como a morfologia. 14
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