IMUNO-HISTOQUÍMICA DE NEOPLASIAS
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- Silvana Lopes Vidal
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1 FINALIDADE IMUNO-HISTOQUÍMICA DE NEOPLASIAS O principal objetivo da Imuno-Histoquímica é fornecer o diagnóstico definitivo de um processo neoplásico no qual, a avaliação histopatológica de rotina biópsia (com ou sem auxílio de colorações especiais), não consegue concluir o caso. Além disso, esta análise também fornece o valor prognóstico (desfavorável, reservado e favorável) de determinadas neoplasias e pode inferir/determinar a etiologia do processo. PRÉ-REQUISITO O Diagnóstico Histopatológico da lesão tecidual com levantamento da suspeita e dos diagnósticos diferenciais é essencial para determinação dos anticorpos a serem utilizados no estudo. Além disso, é importante o envio de informações complementares como histórico; local de coleta; sinais clínicos; resultado da ultra-sonografia; radiografia; hemograma; exames bioquímicos; etc. AMOSTRA Fragmentos de tecidos retirados por biópsia incisional, excisional (figura 1) ou peças de necropsia, formolizados ou fragmentos de tecidos incluídos em bloco de parafina, acompanhados da cópia do laudo histopatológico original e de lâminas coradas. Figura 1: Biópsia excisional de neoplasia. Fonte: Retirado do site da anhembi.br MÉTODO DE COLETA No caso de biópsia incisional ou excisional, deve-se seguir o protocolo de sedação e anestesia local ou geral, segundo critérios clínico-veterinários com os devidos cuidados précirúrgicos necessários (avaliação de risco cirúrgico, jejum, anti-sepsia local, etc). A seleção e triagem do paciente devem seguir rigoroso controle. A escolha do anestésico sempre dependerá da melhor opção do anestesista de acordo com o quadro clínico do paciente e/ou principalmente, resultados de exames pré-operatórios. CONSERVAÇÃO O material a ser submetido ao exame de imuno-histoquímica deverá estar formolizado (usar formol 10% tamponado, figura 2) ou ainda, ser enviado na forma de bloco de parafina com o
2 tecido desejado. Preferencialmente o material deve ser enviado sem formol, mas deve ter permanecido sob fixação por no mínimo 24 horas. TRANSPORTE Figura 2: Fixação do material utilizando frasco com formol 10%. Os blocos de parafina devem ser armazenados em sacos plásticos ou caixas de papel, em temperatura ambiente, devidamente protegidos da umidade, luz direta, calor e insetos. Já as amostras fixadas devem ser transportadas em frascos plásticos de boca larga, bem vedada, protegidos de luz direta e de compressões externas. CAUSAS DE REJEIÇÃO Amostras não fixadas em formol a 10%, amostras congeladas, material exíguo, material sem fixador, blocos de parafina com baixa preservação (fragmentados, comprimidos, etc.) e blocos de parafina com fragmento tecidual insuficiente. EXAMES COMPLEMENTARES Imuno-histoquímica de neoplasia (um marcador); Imuno-histoquímica para neoplasia (painel geral); Painel prognóstico de mastocitoma; Detecção de micro-metástases e Tumores mesenquimais indiferenciados. COMENTÁRIOS Dentre as principais aplicações da imuno-histoquímica em oncologia veterinária estão o diagnóstico de tumores indiferenciados, diagnóstico diferencial entre tumores e estados reacionais, identificação de estruturas e produtos secretados pelas células neoplásicas, determinação de fatores prognósticos de neoplasias (figura 3), determinação/sugestão de sítio primário de neoplasia e determinação de tipo/subtipo de linfomas e leucemias. Figura 3. Expressão em padrão peri-membrana para c-kit em mastocitoma (Grau I). Lista de Anticorpos (Marcadores): Actina muscular alfa (sm) Diferenciação muscular lisa (leiomiossarcomas, miofibroblastos e
3 Actina músculo-específica (HHF-35) Alfa-1 antitripsina Amplificação/superexpressão de HER-2 (FISH/Imuno) Antígeno Ki-67 bcl-2 Calretinina CD138 CD1a CD20 CD21 CD23 CD3 CD30 CD31 CD4 CD43 CD45 CD45-RO CD5 CD57 CD68 CD79a CD8 CD163 Citoceratinas (pan; AE1/AE3) c-kit (CD117) COX-2 (ciclooxigenase 2) Cromogranina A Desmina Gastrina GFAP (Proteína acída fibrilar glial) gp100 (HMB-45) Insulina Lisozima MART-1 (Melan A) Mieloperoxidase Proteína placentária alcalina (PLAP) Receptor de estrógeno (ER) Receptor de progesterona (PR) proteína S-100 Somatostatina TdT Tirosinase Triptase VEGF - Fator de crescimento de endotélio vascular Vimentina células mioepiteliais) Diferenciação muscular lisa e esquelética (leiomiossarcomas, rabdomiossarcomas, miofibroblastos, células mioepiteliais) Carcinoma hepatocelular; deficiência de alfa-1 antitripsina Marcador de prognóstico desfavorável e fator preditivo de resposta terapêutica. Marcador de proliferação celular (células em fases não-g0) Distinção entre linfoma folicular e hiperplasia linfóide folicular reativa Mesotelioma; tumores de células de Sertoli-Leydig Plasmócitos e mieloma múltiplo (plasmocitoma) Células de Langerhans; histiocitose de células de Langerhans Linfomas de células B Tumores de células B e células dendríticas foliculares Linfoma linfocítico de pequenas células B/leucemia linfocítica crônica Linfócitos T maduros; linfomas de células T Linfoma de grandes células anaplásicas CD30-positivo e carcinomas embrionários Células endoteliais/tumores; angiossarcoma; População de linfócitos T Linfócitos T, macrófagos e leucemias; co-expressão em linfomas de células B, principalmente, linfomas B de baixo grau Marcador de linfócitos e processos hematolinfóides Linfócitos T, macrófagos e células precursoras granulocíticas Linfócitos T; linfoma linfocítico de pequenas células B e leucemia linfocítica crônica Tumores de bainha nervosa Marcador de macrófagos e sarcoma histiocítico Linfomas de células B População de linfócitos T Macrófago/histiócito Células epiteliais e carcinomas em geral Tumor gastrointestinal estromal (GIST); mastocitoma, seminoma Fator preditivo de resposta terapêutica Diferenciação neuroendócrina; carcinoma neuroendócrino, neuroblastoma Tumores de musculatura lisa e esquelética; leiomiossarcomas e rabdomiossarcomas Grupo de tumores de células de ilhotas pancreáticas e gastrinomas Gliomas Melanomas e angiomiolipomas Grupo de tumores de ilhotas pancreáticas Granulócitos; histiócitos e marcador de leucemias mielóides Melanoma; córtex adrenal e tumores de estroma ovariano Granulócitos; histiócitos e marcador de leucemias Seminoma Fator prognóstico/preditivo para o câncer de mama e outros carcinomas Marcador prognóstico/preditivo em carcinomas de mama; meningiomas Melanoma; Schwannoma; gliomas; células de Schwann, células de suporte neural e células de Langerhans Grupo de tumores de células de ilhotas pancreáticas e outros tumores neuroendócrinos Linfoma linfoblástico Melanoma Marcador de mastócitos e seus tumores (mastocitoma) Marcador prognóstico/preditivo Sarcomas; linfomas e co-expressão com citoceratinas em alguns carcinomas (carcinoma de células renais e carcinomas endometriais)
4 MATERIAL FORMOL FORMOL SANGUE EM EDTA E FLUORETO EXAMES IMUNOHISTOQUÍMICA DE NEOPLASIA - 1 MARCADOR CÓD 649 IMUNOHISTOQUÍMICA PARA NEOPLASIA - PAINEL GERAL CÓD 648 IMUNOHISTOQUÍMICA - VALOR PROGNÓSTICO DE MASTOCITOMA CÓD 656 IMUNOHISTOQUÍMICA - DETECÇÃO DE MICRO - METÁSTASES DE MELANOMA CÓD 659 PRAZO DIAS BIÓPSIA HISTOPATOLÓGICO CÓD 3 4 PERFIL BIÓPSIA DE CADEIA MAMÁRIA CÓD PERFIL PRE-OPERATÓRIO CÓD O que você quer na próxima DICA? Responda a este e nos dê a sua sugestão, opinião ou dúvida. Teremos o maior prazer em ouvi-lo. EQUIPE DE VETERINÁRIOS - TECSA Laboratórios Primeiro Lab. Veterinário certificado ISO9001 da América Latina. Credenciado no MAPA. PABX: (31) ou FAX: (31) tecsa@tecsa.com.br RT - Dr. Luiz Eduardo Ristow CRMV MG 3708 Facebook: Tecsa Laboratorios ''Atendemos todo Brasil, resultados via internet, FAÇA SEU CONVENIO E PARTICIPE DA JORNADA DO CONHECIMENTO TECSA" INDIQUE ESTA DICA TECSA PARA UM AMIGO Você recebeu este Informativo Técnico, pois acreditamos ser de seu interesse. Caso queira cancelar o envio de futuros s das DICAS TECSA ( Boletim de Informações e
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