IHQ em material fixado em formol e incluído em parafina ð Método de escolha

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2 Imuno-histoquímica IHQ em material fixado em formol e incluído em parafina ð Método de escolha Vantagens: material coletado, fixado e processado convencionalmente: biópsias incisionais e excisionais, core biopsy, peças cirúrgicas radicais e preparados citopatológicos permite utilização de material arquivado por muitos anos permite a avaliação morfológica lâminas permantentes custo acessível

3 Imuno-histoquímica Métodos de detecção / amplificação ABC - complexo avidina-biotina-enzima (mais comum)

4 Célula de Langerhans ativação/ inflamação migração para linfonodo Célula de Langerhans CD1a + S100 + CD45 (LCA) + CD68 + Fascina neg. Grânulos de Birbeck + Célula indeterminada, velada (veiled) CD1a + S100 + CD45 (LCA) + CD68 + Fascina + (?) Grânulos de Birbeck neg. Célula dendrítica interdigitante CD1a neg. S100 + CD45 (LCA) + CD68 + Fascina + Grânulos de Birbeck neg. OBS: na HCL, a fascina é positiva!

5 Antígeno CD1a Glicoproteína da superfície celular, expressa em associação com a b2 microglobulina. Função na apresentação de antígenos (?) Expressa em Células de Langerhans: Em tecidos normais (pele, amígdala, timo) Na histiocitose de células de Langerhans Na linfadenopatia dermatopática e outras linfadenopatias reacionais Timócitos corticais (linfócitos T imaturos) Leucemia linfóide aguda / linfoma linfoblástico de células T Marcação na membrana celular (e < no citoplasma)

6 Células de Langerhans Anticorpo anti CD1a - células de Langerhans da epiderme

7 Célula indeterminada ( velada ) Anticorpo anti CD1a linfonodo com linfadenopatia dermatopática

8 Histiocitose de células de Langerhans Anticorpo anti CD1a - histiocitose de células de Langerhans

9 Histiocitose de células de Langerhans Anticorpo anti CD1a - histiocitose de células de Langerhans

10 Histiocitose de células de Langerhans Anticorpo anti CD1a - histiocitose de células de Langerhans

11 Proteína S100 Proteína intracelular relacionada com a diferenciação celular, regulação da motilidade, transcrição de sinais, transdução e ciclo celular Expressa em: Células de Langerhans Células dendríticas interdigitantes Células gliais e de Schwann Melanócitos Condrócitos Adipócitos etc Marcação citoplasmática e nuclear

12 Histiocitose de células de Langerhans Proteína S100 - histiocitose de células de Langerhans

13 Antígeno CD68 Glicoproteína transmembranar da família da sialomucina, de função desconhecida Expressa em grânulos citoplasmáticos de: Células de Langerhans Células dendríticas interdigitantes Macrófagos e monócitos Células mielóides progenitoras e granulócitos Marcação citoplasmática

14 Histiocitose de células de Langerhans CD68 - histiocitose de células de Langerhans

15 Histiocitose de células de Langerhans Diagnóstico definitivo: Exame anatomopatológico com reconhecimento morfológico das células de Langerhans em microambiente apropriado (número variável de eosinófilos, histiócitos, neutrófilos e pequenos linfócitos) Exame imuno-histoquímico com positividade com os marcadores CD1a e proteína S100 Confirmação adicional: Grânulos de Birbeck (microscopia eletrônica)

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