Syva. Teste de um passo de opiáceos. Teste imunocromatográfico de um passo para a detecção qualitativa de opiáceos na urina humana
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- Manoel Mendonça Campelo
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1 Syva RapidTest d.a.u. OPI Teste de um passo de opiáceos Para utilização em diagnóstico in vitro Informações actualizadas: Consultar as secções 18 e 20. Syva 6A332UL.7SL P-5804-F saturará os anticorpos, inibindo deste modo a ligação dos conjugados droga-corante aos anticorpos da membrana. Deste modo, uma amostra positiva para a droga não produzirá uma linha na posição OPI da janela de resultados, ao passo que uma amostra negativa para a droga produzirá uma linha na posição OPI. Para além da linha que poderá surgir na posição OPI da janela de resultados, deve surgir uma Linha de controlo na posição de validação do Controlo (C) da janela de resultados, para confirmar a viabilidade do teste. Esta Linha de controlo deve ser sempre observada, no caso do teste ser conduzido correctamente. A Linha de controlo contém anticorpos policlonais anti-rato imobilizados; deste modo, irá capturar os conjugados anticorpo-corante que passarem na região, causando a formação de uma linha colorida na posição C. Esta funciona como um controlo do procedimento, confirmando que foi utilizado um volume de amostra adequado e que o sistema de reagentes funcionou. Se for utilizado um volume insuficiente de amostra, poderá não existir qualquer linha de Controlo, indicando que o teste é inválido. 4 Materiais fornecidos Nº de Cat. 6A049UL, Kit para 25 testes Teste imunocromatográfico de um passo para a detecção qualitativa de opiáceos na urina humana Cada Ensaio Syva RapidTest d.a.u. OPI contém todos os reagentes necessários para executar 1 teste. 1 dispositivo Syva RapidTest d.a.u. OPI. Cada dispositivo de teste contém (1) uma tira de membrana contendo uma fita de teste revestida com anticorpos monoclonais de rato para a morfina e uma fita de controlo revestida com anticorpos de ovelha para a IgG de rato, bem como (2) uma almofada de corante contendo ouro coloidal revestido com IgG de rato e conjugados de morfina numa matriz proteica. 1 doseador de amostra descartável. Instruções de utilização. 5 Precauções Para utilização em diagnóstico in vitro. Evitar a contaminação cruzada de amostras de urina utilizando um novo recipiente para amostras de urina e um novo doseador para cada amostra de urina. Este dispositivo não contém qualquer material de origem humana. As amostras de urina são potencialmente infecciosas. Deverão ser respeitados métodos de manuseamento e eliminação de acordo com as boas práticas laboratoriais. O dispositivo Syva RapidTest d.a.u. OPI deve permanecer na sua bolsa original selada até estar pronto a ser utilizado. Não utilizar o teste se a bolsa estiver danificada ou selada incorrectamente. 1 Fim a que se destina O Ensaio Syva RapidTest d.a.u. OPI é um teste imunocromatográfico de um passo para a detecção qualitativa de opiáceos na urina humana. O teste detecta a morfina na seguinte concentração de "cutoff": OPI Morfina 300 ng/ml O Ensaio Syva RapidTest d.a.u. OPI fornece apenas um resultado analítico preliminar. Deve ser utilizado um método químico alternativo com maior especificidade, de forma a obter um resultado analítico confirmado. O método de confirmação preferido é a cromatografia gasosa/espectrometria de massa (CG/EM). Existem disponíveis outros métodos de confirmação química. A consideração clínica e a avaliação profissional deverão ser utilizadas em qualquer resultado do teste de droga de abuso, particularmente quando são utilizados resultados positivos preliminares. 1 2 Resumo e explicação do teste A morfina, a codeína e os derivados semi-sintéticos da morfina, pertencem à classe de drogas denominadas opiáceos. Um opiáceo exerce o seu efeito sobre o sistema nervoso central e pode produzir euforia, depressão respiratória e coma em caso de abuso. A morfina é o composto protótipo dos opiáceos. A morfina é excretada na urina sob a forma de morfina-3-glucorónido, morfina inalterada e outros metabolitos menores. A heroína é metabolizada para morfina e codeína e excretada na urina com uma pequena quantidade de forma inalterada. A codeína é também excretada como morfina e na forma de conjugados. Embora alguns opiáceos surjam nas fezes, a excreção urinária constitui a principal via de eliminação. 1,2,3 3 Princípio O Ensaio Syva RapidTest d.a.u. OPI emprega uma tecnologia de imunoensaio de fase sólida de um passo para a detecção qualitativa de opiáceos na urina humana. O teste baseia-se no princípio de reacções imunoquímicas altamente específicas entre antigénios e anticorpos, que são utilizadas para a análise de substâncias específicas em líquidos biológicos. O teste assenta na competição para a ligação aos anticorpos entre os conjugados da droga e as drogas que podem estar presentes na amostra de urina. No procedimento do teste, uma amostra de urina é colocada no poço da Amostra (S) do dispositivo e permite-se que a amostra migre no sentido ascendente. Se estiver presente na amostra de urina, a droga compete com o conjugado droga-corante por anticorpos limitados imobilizados na membrana. Quando está presente uma quantidade suficiente de droga, esta Não utilizar o kit de teste após o fim do prazo de validade. 6 Armazenamento e estabilidade O dispositivo Syva RapidTest d.a.u. OPI deve ser armazenado a uma temperatura de 2 30 C (35 86 F) na sua bolsa original selada. O prazo de validade foi estabelecido de acordo com estas condições de armazenamento. 7 Colheita e preparação das amostras São necessários aproximadamente 110 µl de amostra de urina para cada teste. As amostras de urina colhidas recentemente não necessitam de nenhum manuseamento ou pré-tratamento especial. As amostras devem ser colhidas num recipiente limpo de vidro ou plástico. Se o teste não for efectuado imediatamente, as amostras devem ser refrigeradas (2 8 C) ou congeladas. As amostras devem estar à temperatura ambiente antes da execução do teste. As amostras que contêm uma quantidade elevada de partículas podem produzir resultados de teste inconsistentes. Tais amostras devem ser clarificadas por centrifugação ou por deposição antes de serem testadas. 8 Procedimento do teste O procedimento do teste consiste na adição da amostra de urina no poço da Amostra (S) do dispositivo Syva RapidTest d.a.u. OPI e na observação do aparecimento de linhas coloridas na janela de resultados. 9 Protocolo do teste 1. Para cada teste, abrir a bolsa e etiquetar o dispositivo com a identificação do doente (ID). 2. Segurando no doseador na vertical, dispensar 3 gotas (110 µl) da amostra de urina no poço da Amostra (S). 3. Efectuar a leitura do resultado após 5 minutos, mas antes de decorridos 10 minutos após a aplicação da amostra.
2 LINHA DE CONTROLO (C) (VALIDAÇÃO). A linha de controlo/validação indica: 1. Se foi utilizada a quantidade correcta da amostra; 2. Se a amostra ficou misturada; 3. Se o procedimento foi correctamente seguido. Se não aparecer nenhuma linha de controlo, o teste NÃO É VÁLIDO. Repetir o teste utilizando um novo dispositivo e seguir cuidadosamente o procedimento. Negativo = Linha de controlo e linha específica da droga Positivo = Apenas linha de controlo; não existe linha específica da droga Syva RapidTest d.a.u. OPI 1. Syva RapidTest d.a.u. OPI Adicionar 3 gotas (110 µl) Efectuar a leitura após 5 10 minutos OR OR INVÁLIDO LINHA DE TESTE (OPI). Uma linha de teste na posição OPI da janela de resultados indica que a amostra não contém a droga específica acima do nível de "cutoff". 10 Interpretação dos resultados Negativo: O aparecimento duma linha de Controlo (C) avermelhada-púrpura e duma linha na posição OPI da janela de resultados indica um resultado de teste negativo para a droga; isto é, não foi detectada qualquer concentração de droga acima do nível de "cutoff". As intensidades de cor da linha de Controlo (C) e da linha da posição OPI podem não ser iguais. Contudo, qualquer linha ténue na posição OPI da janela de resultados, visível no espaço de 10 minutos, deve ser interpretada como um resultado negativo. Um resultado de teste negativo não indica a ausência da droga na amostra; indica apenas, em termos qualitativos, que a amostra não contém droga numa concentração acima do nível de "cutoff". Positivo: O aparecimento apenas duma linha de Controlo (C) avermelhada-púrpura e de nenhuma linha na posição OPI indica um resultado de teste positivo; isto é, a amostra contém opiáceos numa concentração produtora duma resposta acima do nível de "cutoff". Um resultado de teste positivo não indica o nível de intoxicação ou a concentração específica da droga na amostra; indica apenas, em termos qualitativos, que a amostra contém droga numa concentração acima do nível de "cutoff". Inválido: Deve surgir sempre uma linha de Controlo (C). O teste é inválido se não se formar qualquer linha na posição C, devendo ser repetido utilizando um novo dispositivo. No diagrama em baixo, apresentam-se exemplos dos resultados possíveis. 1. OPI ( ): Uma (1) Linha de controlo avermelhada-púrpura na posição C e 1 linha na posição OPI. 2. OPI (+): Uma (1) Linha de controlo avermelhada-púrpura na posição C; nenhuma linha na posição OPI. 3. Inválido: Nenhuma Linha de controlo na posição C. 11 Limitações O ensaio foi concebido para ser utilizado apenas com urina humana sem adulteração. Outras substâncias e/ou outros factores não referidos (por ex., erros técnicos ou de procedimento) podem interferir com o teste e produzir resultados falsos. Adulterantes, tais como lixívia e/ou alúmen, em amostras de urina podem produzir resultados erróneos independentemente do método de análise. No caso de suspeita de adulteração, o teste deverá ser repetido com uma nova amostra. A leitura do resultado do teste após 10 minutos pode não ser consistente com a leitura original obtida durante o período de leitura de 5 a 10 minutos. A leitura do teste deve ser efectuada no espaço de 5 10 minutos após a aplicação da amostra. Certas medicações que contêm opiáceos ou derivados dos opiáceos podem produzir um resultado positivo em qualquer ensaio químico ou imunológico. As sementes de papoila do ópio podem conter opiáceos e a ingestão de produtos contendo sementes de papoila do ópio pode causar um resultado positivo. Certos plásticos podem adsorver algumas drogas. 12 Controlo da Qualidade Controlos internos: Cada Ensaio Syva RapidTest d.a.u. OPI possui controlos incorporados. A linha de Controlo (C) é um controlo de procedimento interno do positivo. Deve surgir sempre uma linha de controlo distinta de cor avermelhada-púrpura na posição C da janela de resultados, no caso de o procedimento do teste ter sido executado correctamente, de ter sido utilizado um volume de amostra adequado, de a amostra e o reagente se terem misturado na membrana, e de os reagentes do teste na Linha de controlo e do indicador conjugado-corante serem reactivos. Além disso, se o teste tiver sido efectuado correctamente e o dispositivo estiver a funcionar correctamente, o fundo da janela de resultados tornar-se-á límpido e apresentará um resultado distinto. Este poderá ser considerado como um controlo de procedimento interno do negativo. Os controlos de procedimento do positivo e do negativo contidos em cada dispositivo de teste Syva RapidTest d.a.u. OPI satisfazem os requisitos de teste dum controlo positivo e dum controlo negativo numa base diária. Se a Linha de controlo não surgir na posição C da janela de resultados, o teste é inválido e deve ser executado um novo teste. Se o problema continuar, contactar a assistência técnica da Syva Company. Controlos externos: Podem também ser utilizados controlos externos para garantir que os reagentes estão a actuar apropriadamente e que e o procedimento de ensaio foi seguido correctamente. Os controlos devem ser testados a intervalos regulares (por exemplo, uma vez por lote ou uma vez por envio), como parte duma boa prática de teste laboratorial. Para obter informações sobre a forma de obter controlos, contactar a Syva Company para assistência técnica. 13 Valores esperados O Ensaio Syva RapidTest d.a.u. OPI é um teste qualitativo. A quantidade de opiáceos presentes na urina humana não pode ser inferida a partir do teste. Os resultados do teste distinguem amostras positivas para a droga de amostras negativas para a droga. Os resultados positivos indicam que as amostras contêm opiáceos numa concentração produtora de resposta acima do nível de "cutoff". 14 Características de desempenho O dispositivo Syva RapidTest d.a.u. OPI detecta morfina a um nível de "cutoff" de 300 ng/ml em urina humana. 15 Exactidão Foram testadas novecentas e sessenta e seis (966) amostras num nível de "cutoff" de 300 ng/ml de morfina. As amostras foram analisadas utilizando o Ensaio Syva RapidTest d.a.u. OPI e um imunoensaio disponível comercialmente (Emit II), tendo os resultados sido comparados. Foi observada uma concordância completa em 99% das amostras. Os resultados são apresentados na Tabela 1. Tabela 1 Exactidão: Ensaio Syva RapidTest d.a.u. OPI versus Ensaio Emit II Opiáceos Ensaio Emit II Positivo Negativo TOTAL Syva RapidTest Positivo d.a.u. Negativo TOTAL Sensibilidade relativa Especificidade relativa Opiáceos 99.6% (249/250) >99% (716/716) 2 6A332UL.7SL
3 Num estudo separado, amostras confirmadas como positivas por CG/EM foram testadas utilizando o Ensaio Syva RapidTest d.a.u. OPI. Foi observada uma correlação excelente (99% de concordância). Os resultados são apresentados na Tabela 2. Tabela 2 Exactidão: Ensaio Syva RapidTest d.a.u. OPI versus CG/EM Syva RapidTest d.a.u. CG/EM Positivo Negativo 1 0 Num estudo adicional, foram preparadas 20 amostras cegas por contaminação com várias concentrações de morfina em amostras de urina negativas para a droga. Dois (2) operadores testaram independentemente as amostras utilizando o Ensaio Syva RapidTest d.a.u. OPI. Os resultados obtidos pelos operadores foram comparados e apresentaram uma concordância completa. 16 Precisão O desempenho do Ensaio Syva RapidTest d.a.u. OPI foi determinado por análise de soluções padrão da droga diluídas em série. Noventa e cinco porcento (95%) das amostras que continham concentrações de morfina 25% superiores ao nível de "cutoff" apresentaram resultados positivos de forma consistente. A precisão do nível de "cutoff" foi desafiada através do teste de mais de 40 amostras a ± 25% do nível de "cutoff". Os resultados obtidos com o Ensaio Syva RapidTest d.a.u. OPI apresentaram uma concordância consistente com os resultados de teste previsíveis. 17 Reprodutibilidade O desempenho do Ensaio Syva RapidTest d.a.u. OPI foi examinado em 3 locais diferentes. A reprodutibilidade foi determinada através do teste de 15 controlos cegos, consistindo em 5 amostras negativas, 5 amostras positivas com uma concentração de 1.5 vezes o nível de "cutoff" e 5 amostras positivas com uma concentração de 3 vezes o nível de "cutoff". Os resultados obtidos nestes 3 locais foram comparados e apresentaram uma concordância de 100%. 18 Especificidade A especificidade foi determinada utilizando o Ensaio Syva RapidTest d.a.u. OPI para analisar amostras de urina negativas para a droga contaminadas com várias drogas e metabolitos de drogas. A Tabela 3 apresenta uma lista dos compostos detectados pelo teste e as concentrações nas quais produziram um resultado positivo. Tabela 3 Especificidade Composto Concentração (ng/ml) Codeína 300 Hidrocodona 500 Hidromorfona 600 Levofloxacina Levorfanol 5000 Meperidina Morfina 300 Morfina-3-β-D-glicuronido 500 Nalorfina 1000 Naloxona Norcodeína Ofloxacina Oxicodona Oximorfona Procaína HCl Ranitidina Tebaína 5000 Tramadol A Tabela 4 apresenta uma lista dos compostos, testados numa concentração de 100 µg/ml, que não apresentaram qualquer reactividade cruzada com o Ensaio Syva RapidTest d.a.u. OPI. Tabela 4 Compostos sem reactividade cruzada 4-Acetamidofenol Hidroclorotiazida Acetofenetidina (Fenacetina) Hidrocortisona N-Acetilprocainamida Ácido o-hidroxi-hipoúrico Ácido acetilsalicílico 3-Hidroxitiramina Aminopirina Ibuprofeno Amitriptilina Imipramina Amobarbital Iproniazida Amoxapina ( ) Isoproterenol Amoxicilina Isoxsuprina D,L-Anfetamina Quetamina L-Anfetamina Cetoprofeno Apomorfina Labetalol Aspartame Lidocaína Atropina Loperamida Ácido benzílico Succinato de loxapina Ácido benzóico Maprotilina Benzoilecgonina Meprobamato Benzfetamina Metadona Butabarbital p-hidroximetanfetamina Cannabidiol Metaqualona Cannabinol Metoxifenamina Hidrato de cloral (±) 3,4-Metilenodioxianfetamina Cloranfenicol (±) 3,4-Metilenedioximetanfetamina Clorodiazepóxido Metilfenidato Cloroquina Metoprilona Clorotiazida Morfina-6-β-glucurónido Clorpromazina Ácido Naladíxico Colesterol Naltrexona Clomipramina Naproxeno Clonidina Niacinamida Cocaína Nifedipina Cortisona Noretindrona ( ) Cotinina Noroximorfona Creatinina ( ) Norpseudoefedrina Dextrometorfano Noscapina Diazepam Nilidrina Diclofenac D,L-Octopamina Dietilpropiona Ácido oxálico Diflunisal Oxazepam Digoxina Ácido oxolínico Difenidramina Oximetazolina Domperidona Papaverina Doxilamina Penicilina-G Ecgonina Pentazocina Éster metílico de ecgonina Pentobarbital (+) Efedrina Perfenazina (±) Efedrina Fenciclidina ( ) Efedrina Fendimetrazina ( ) Efedrina Y Fenelzina Eritromicina Fenobarbital β-estradiol Fentermina Estrona-3-sulfato L-Fenilefrina Etil-p-aminobenzoato β-feniletilamina Fenoprofeno Fenilpropanolamina Furosemida Fenitoína Ácido gentísico Prednisolona Glutetimida Prednisona Guaifenesin Promazina Ácido hipoúrico Prometazina Hidralazina Propiomazina 3 6A332UL.7SL
4 Tabela 4 Compostos sem reactividade cruzada (cont.) D-Propoxifeno Tetrahidrozolina Propranolol Tiamina D-Pseudoefedrina Tioridazina Quinidina D,L-Tiroxina Quinina Tolbutamida Ácido Salicílico Triantereno Secobarbital Trifluoperazina Serotonina Trimetoprim Sulfametazina Trimipramina Sulindac Triptamina Temazepam D,L-Triptofano Tetraciclina Tiramina 8 -THC D,L-Tirosina 9 -THC Ácido úrico 11-nor- 9 -THC-9-COOH Verapamil Tetrahidrocortisona Zomepirac Notas 19 Bibliografia 1. Hawks RL, Chiang CN, eds. Urine Testing for Drugs of Abuse. Rockville, MD: Substance Abuse and Mental Health Services Administration (SAMHSA), NIDA Research Monograph 73; Baselt RC. Disposition of Toxic Drugs and Chemicals in Man. 2nd ed. Davis, CA: Biomedical Publ.; Tietz NW. Textbook of Clinical Chemistry. WB Saunders Company; 1986: Chave dos símbolos Fabricado por EC REP Representante Autorizado IVD Dispositivo Médico para Diagnóstico In Vitro LOT Código do Lote EXP YYYY-MM-DD REF A data em "Utilizar antes de" encontra-se no formato ano-mês-dia (AAAA-MM-DD) Limitação da Temperatura Marca CE Número de Catálogo Consulte as Instruções de Utilização SAC - Serviço de Atendimento ao Cliente sac/brazil@dadebehring.com Importado e distribuído por DADE BEHRING LTDA. Rua Geraldo Flausino Gomes, 61-1º Andar Brooklin - São Paulo - SP - CEP Fone (11) Fax (11) CNPJ: / Resp. Téc.: Nanci A. Trindade CRF - SP: ID Identificação PT-2 Para obter assistência técnica, contactar a Syva Company: nos EUA no Canadá Fora dos EUA e Canadá, contactar o representante local da Syva Company. Aviso: A adulteração, utilização de instrumentos inadequados ou outra falha no cumprimento das instruções definidas neste rótulo podem afectar as características do desempenho e as indicações do rótulo explícitas ou implícitas., Syva, d.a.u. e Emit são marcas comerciais registadas da Syva Company nos EUA e noutros países. 1998, Syva Company Syva EC REP Dade Behring Limited Regus House, Atterbury Milton Keynes MK10 9RG United Kingdom Produced for Syva Company Dade Behring Inc. Cupertino, CA Printed in USA Revisto Agosto 2003 P-5804-F 6A332UL.7SL
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