Syva. Teste de um passo de barbitúricos Para utilização em diagnóstico in vitro
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- Luiz Henrique Damásio Mendonça
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1 Syva RapidTest d.a.u. Teste de um passo de barbitúricos Para utilização em diagnóstico in vitro Informações actualizadas: Consultar a secção 20. Nº de Cat. 6A079UL, Kit para 25 testes Syva Teste imunocromatográfico de um passo para a detecção qualitativa de barbitúricos na urina humana. 6A362UL.7SL P-5807-F 3 Princípio O Ensaio Syva RapidTest d.a.u. emprega uma tecnologia de imunoensaio de fase sólida de um passo para a detecção discreta da presença de qualquer barbitúrico na urina humana. O teste baseia-se no princípio de reacções imunoquímicas altamente específicas entre antigénios e anticorpos, que são utilizadas para a análise de substâncias específicas em líquidos biológicos. O teste assenta na competição para a ligação aos anticorpos entre os conjugados da droga e as drogas que podem estar presentes na amostra de urina. No procedimento do teste, uma amostra de urina é colocada no poço da Amostra (S) do dispositivo e permite-se que a amostra migre no sentido ascendente. Se estiver presente na amostra de urina, a droga compete com o conjugado droga-corante por anticorpos limitados imobilizados na membrana. Quando está presente uma quantidade suficiente de droga, esta saturará os anticorpos, inibindo deste modo a ligação dos conjugados droga-corante aos anticorpos da membrana. Deste modo, uma amostra positiva para a droga não produzirá uma linha na posição da janela de resultados, ao passo que uma amostra negativa para a droga produzirá uma linha na posição. Para além da linha que poderá surgir na posição da janela de resultados, deve surgir uma Linha de controlo na posição de validação do Controlo (C) da janela de resultados, para confirmar a viabilidade do teste. Esta Linha de controlo deve ser sempre observada, no caso do teste ser conduzido correctamente. Esta funciona como um controlo do procedimento, confirmando que foi utilizado um volume de amostra adequado e que o sistema de reagentes funcionou. Se for utilizado um volume insuficiente de amostra, poderá não existir qualquer linha de Controlo, indicando que o teste é inválido. 4 Materiais fornecidos Cada Ensaio Syva RapidTest d.a.u. contém todos os reagentes necessários para executar 1 teste. 1 dispositivo Syva RapidTest d.a.u.. Cada dispositivo de teste contém (1) uma tira de membrana contendo uma fita de teste revestida com anticorpos monoclonais de rato para o secobarbital e uma fita de controlo revestida com anticorpos de ovelha para a IgG de rato, bem como (2) uma almofada de corante contendo ouro coloidal revestido com IgG de rato e um conjugado de secobarbital numa matriz proteica. 1 doseador de amostra descartável. Instruções de utilização. 5 Precauções 1 Fim a que se destina O Ensaio Syva RapidTest d.a.u. é um teste imunocromatográfico de um passo para a detecção qualitativa de barbitúricos na urina humana. O teste detecta secobarbital na seguinte concentração: Secobarbital 300 ng/ml O Ensaio Syva RapidTest d.a.u. fornece apenas um resultado analítico preliminar. Deve ser utilizado um método químico alternativo com maior especificidade, de forma a obter um resultado analítico confirmado. O método de confirmação preferido é a cromatografia gasosa/espectrometria de massa (CG/EM). Existem disponíveis outros métodos de confirmação química. A consideração clínica e a avaliação profissional deverão ser utilizadas em qualquer resultado do teste de droga de abuso, particularmente quando são utilizados resultados positivos preliminares. 1 2 Resumo e explicação do teste Os barbitúricos são uma classe de depressivos do sistema nervoso central derivados do ácido barbitúrico. Injectados ou administrados por via oral, os barbitúricos são prescritos para muitas condições médicas, usualmente pelo seu efeito sedativo. O abuso de barbitúricos pode levar a uma diminuição de coordenação motora, perturbações mentais, colapso respiratório, coma e morte. A combinação de barbitúricos e álcool é particularmente perigosa. Os sintomas do abuso de barbitúricos incluem sonolência, discurso incoerente e irritabilidade. As condições agudas incluem colapso respiratório e perda de consciência. As condições crónicas incluem dependência, abstinência, crises de epilepsia e morte. Os efeitos dos barbitúricos de acção curta como o pentobarbitol e secobarbital duram 3 a 6 horas. Os efeitos dos barbitúricos de acção prolongada como o fenobarbitol duram 10 a 20 horas. Os barbitúricos de acção curta normalmente permanecem detectáveis na urina humana durante 4 a 6 dias, enquanto os barbitúricos de acção prolongada pode ser detectados durante um período de até 30 dias. Os barbitúricos de acção de curta duração são, em geral, excretados na urina sob a forma de metabolitos, enquanto os barbitúricos de acção prolongada surgem principalmente sob a forma não modificada. 1,2 Para utilização em diagnóstico in vitro. Evitar a contaminação cruzada de amostras de urina utilizando um novo recipiente para amostras de urina e um novo doseador para cada amostra de urina. Este dispositivo não contém qualquer material de origem humana. As amostras de urina são potencialmente infecciosas. Deverão ser respeitados métodos de manuseamento e eliminação de acordo com as boas práticas laboratoriais. O dispositivo Syva RapidTest d.a.u. deve permanecer na sua bolsa original selada até estar pronto a ser utilizado. Não utilizar o teste se a bolsa estiver danificada ou selada incorrectamente. Não utilizar o kit de teste após o fim do prazo de validade. 6 Armazenamento e estabilidade O kit Syva RapidTest d.a.u. deve ser armazenado a uma temperatura de 2 30 C na sua bolsa original selada. O prazo de validade foi estabelecido de acordo com estas condições de armazenamento. 7 Colheita e preparação das amostras São necessários aproximadamente 110 µl de amostra de urina para cada teste. As amostras de urina colhidas recentemente não necessitam de nenhum manuseamento ou pré-tratamento especial. As amostras devem ser colhidas num recipiente limpo de vidro ou plástico. Se o teste não for efectuado imediatamente, as amostras devem ser refrigeradas (2 8 C) ou congeladas. As amostras devem estar à temperatura ambiente antes da execução do teste. As amostras que contêm uma quantidade elevada de partículas podem produzir resultados de teste inconsistentes. Tais amostras devem ser clarificadas por centrifugação ou por deposição antes de serem testadas. 8 Procedimento do teste O procedimento do teste consiste na adição da amostra de urina no poço da Amostra (S) do dispositivo Syva RapidTest d.a.u. e na observação do aparecimento de linhas coloridas na janela de resultados.
2 LINHA DE CONTROLO (C) (VALIDAÇÃO). A linha de controlo/validação indica: 1. Se foi utilizada a quantidade correcta da amostra, 2. Se a amostra ficou misturada, 3. Se o procedimento foi correctamente seguido. Se não aparecer nenhuma linha de controlo, o teste NÃO É VÁLIDO. Repetir o teste utilizando um novo dispositivo e seguir cuidadosamente o procedimento. Negativo = Linha de controlo e linha específica da droga Positivo = Linha de controlo; não existe linha específica da droga Syva RapidTest d.a.u. 1. Syva RapidTest d.a.u. C C Adicionar 3 gotas (110 µl) Efectuar a leitura após 5 10 minutos OU OU INVÁLIDO INVALID LINHA DE TESTE (). Uma linha de teste na posição da janela de resultados indica que a amostra não contém a droga específica acima do nível de "cutoff". 9 Protocolo do teste 1. Para cada teste, abrir uma bolsa e etiquetar o dispositivo com a identificação do doente (ID). 2. Segurando no doseador na vertical, dispensar 3 gotas (110 µl) da amostra de urina no poço da Amostra (S). 3. Efectuar a leitura do resultado após 5 minutos, mas antes de decorridos 10 minutos após a aplicação da amostra. 10 Interpretação dos resultados Negativo: O aparecimento duma linha de Controlo (C) avermelhada-púrpura e duma linha na posição da janela de resultados indica um resultado de teste negativo para a droga; isto é, não foi detectada qualquer concentração de droga acima do nível de "cutoff". As intensidades de cor da linha de Controlo (C) e da linha da posição na janela de resultados podem não ser iguais. Contudo, qualquer linha ténue na posição da janela de resultados, visível no espaço de 10 minutos, deve ser interpretada como um resultado negativo. Um resultado de teste negativo não indica a ausência da droga na amostra; indica apenas, em termos qualitativos, que a amostra não contém droga numa concentração acima do nível de "cutoff". Positivo: O aparecimento apenas duma linha de Controlo (C) avermelhada-púrpura e de nenhuma linha na posição indica um resultado de teste positivo; isto é, a amostra contém barbitúricos numa concentração produtora duma resposta acima do nível de "cutoff". Um resultado de teste positivo não indica o nível de intoxicação ou a concentração específica da droga na amostra; indica apenas, em termos qualitativos, que a amostra contém droga numa concentração acima do nível de "cutoff". Inválido: Deve surgir sempre uma linha de Controlo (C). O teste é inválido se não se formar qualquer linha na posição C, devendo ser repetido utilizando um novo dispositivo. No diagrama em baixo, apresentam-se exemplos dos resultados possíveis. 1. Barbitúricos ( ): Uma (1) Linha de controlo avermelhada-púrpura na posição C e 1 linha na posição. 2. Barbitúricos (+): Uma (1) Linha de controlo avermelhada-púrpura na posição C; nenhuma linha na posição. 3. Inválido: Nenhuma Linha de controlo na posição C. 11 Limitações O ensaio foi concebido para ser utilizado apenas com urina humana sem adulteração. Outras substâncias e/ou outros factores referidos (por ex., erros técnicos ou de procedimento) podem interferir com o teste e produzir resultados falsos. Adulterantes, tais como lixívia e/ou alúmen, em amostra de urina podem produzir resultados erróneos independentemente do método de análise. No caso de suspeita de adulteração, o teste deverá ser repetido utilizando uma nova amostra. A leitura do resultado do teste após 10 minutos pode não ser consistente com a leitura original obtida durante o período de leitura de 5 a 10 minutos. A leitura do teste deve ser efectuada no espaço de 5 10 minutos após a aplicação da amostra. Certas medicações que contêm barbitúricos podem produzir um resultado positivo em qualquer ensaio químico ou imunológico. Certos plásticos podem adsorver algumas drogas. 12 Controlo da Qualidade Controlos internos: Cada dispositivo de teste Syva RapidTest d.a.u. possui controlos incorporados. A linha de Controlo (C) é um controlo de procedimento interno do positivo. Deve surgir sempre uma Linha de controlo distinta e de cor avermelhada-púrpura na posição C, no caso de o procedimento do teste ter sido executado correctamente, de ter sido utilizado um volume de amostra adequado, de a amostra e o reagente se terem misturado na membrana e de os reagentes do teste na linha de controlo e do indicador conjugado-corante serem reactivos. Além disso, se o teste tiver sido efectuado correctamente e o dispositivo estiver a funcionar correctamente, o fundo da janela de resultados tornar-se-á límpido e apresentará um resultado distinto. Este poderá ser considerado como um controlo de procedimento interno do negativo. Os controlos de procedimento do positivo e do negativo contidos em cada dispositivo de teste Syva RapidTest d.a.u. satisfazem os requisitos de teste de um controlo positivo e de um controlo negativo numa base diária. Se a Linha de controlo não surgir na posição C, o teste é inválido e deve ser executado um novo teste. Se o problema continuar, contactar a assistência técnica da Syva Company. Controlos externos: Podem também ser utilizados controlos externos para garantir que os reagentes e os procedimentos de ensaio apresentam um desempenho correcto. Os controlos devem ser testados a intervalos regulares (por exemplo, uma vez por lote ou uma vez por envio), como parte duma boa prática de teste laboratorial. Para obter informações sobre a forma de obter controlos, contactar a Syva Company para assistência técnica. 13 Valores esperados O Ensaio Syva RapidTest d.a.u. é um teste qualitativo. A quantidade de barbitúricos presente na urina não pode ser inferida a partir do teste. Os resultados do teste distinguem amostras positivas para a droga de amostras negativas para a droga. Os resultados positivos indicam que as amostras contêm secobarbital numa concentração superior ao nível de "cutoff". 14 Características de desempenho O dispositivo Syva RapidTest d.a.u. detecta secobarbital a um nível de "cutoff" de 300 ng/ml em urina humana. O teste detecta também outras barbitais nas concentrações mínimas indicadas na Tabela Exactidão Foram testadas duzentas e quarenta e oito (248) amostras num nível de "cutoff" de 300 ng/ml de secobarbital. As amostras foram analisadas utilizando o Ensaio Syva RapidTest d.a.u. e um imunoensaio disponível comercialmente (Emit II), tendo os resultados sido comparados. A precisão global do teste foi de 98.8%. Os resultados são apresentados na Tabela 1. Tabela 1 Exactidão: Ensaio Syva RapidTest d.a.u. versus Ensaio Emit II Barbitúricos Ensaio Emit ll Positivo Negativo TOTAL Syva Positivo RapidTest d.a.u. Negativo TOTAL A362UL.7SL
3 Tabela 1 Exactidão: Ensaio Syva RapidTest d.a.u. versus Ensaio Emit II Barbitúricos (cont) Sensibilidade relativa Especificidade relativa Syva RapidTest d.a.u. 97.1% (102/105) >99.9% (143/143) Num estudo separado, 23 amostras confirmadas como positivas para a droga por CG/EM foram testadas utilizando o Ensaio Syva RapidTest d.a.u.. Os resultados demonstraram que os valores de droga destas amostras variaram entre ng/ml de secobarbital. Foi observada uma correlação excelente. Num estudo adicional, foram preparadas 20 amostras cegas por contaminação com várias concentrações de secobarbital em amostras de urina negativas para a droga. Dois (2) operadores testaram independentemente as amostras utilizando o Ensaio Syva RapidTest d.a.u. e os resultados foram comparados. Os resultados revelaram uma concordância completa. 16 Precisão O desempenho do Ensaio Syva RapidTest d.a.u. foi determinado por análise de soluções padrão da droga diluídas em série, a partir de 3 lotes de produto em 3 dias diferentes. Aproximadamente 98% das amostras que continham concentrações de secobarbital 25% superiores ao nível de "cutoff" (375 ng/ml) apresentaram consistentemente resultados positivos. 17 Reprodutibilidade O desempenho do Ensaio Syva RapidTest d.a.u. foi examinado em 3 locais diferentes. A reprodutibilidade foi determinada através do teste de 15 controlos cegos, consistindo em 5 amostras negativas, 5 amostras positivas com uma concentração de secobarbital de 600 ng/ml e 5 amostras positivas com uma concentração de secobarbital de 1200 ng/ml. Os resultados obtidos nestes 3 locais foram comparados e apresentaram uma concordância de 100%. 18 Especificidade A especificidade foi determinada utilizando o Ensaio Syva RapidTest d.a.u. para analisar amostras de urina negativas para a droga contaminadas com várias drogas e metabolitos de drogas. A Tabela 2 apresenta uma lista dos compostos detectados pelo teste e as concentrações nas quais produzem um resultado positivo. Tabela 2 Especificidade Concentração Composto (ng/ml) Alobarbital 500 Alfenal 400 Amobarbital 2000 Aprobarbital 200 Barbital 1500 Butalbital 200 Ciclopentobarbital 500 Pentobarbital 1000 Fenobarbital 3000 Fenitoína 5000 Secobarbital 300 Tiopental > A Tabela 3 apresenta uma lista dos compostos, testados numa concentração de 100 µg/ml, que não apresentaram qualquer reactividade cruzada com o Ensaio Syva RapidTest d.a.u.. Tabela 3 Compostos sem reactividade cruzada Acetaldeído 4-Acetamidofenol Acetona Acetofenetidina (Fenacetina) N-Acetilprocainamida Ácido acetilsalicílico Albumina Aminopirina Amitriptilina Amoxapina Amoxicilina D,L-Anfetamina L-Anfetamina Ampicilina Apomorfina Ácido Ascórbico Aspartame Atropina Ácido benzílico Benzocaína Ácido benzóico Benzoilecgonina Benzfetamina Bilirrubina Cafeína Hipocloreto de sódio Tabela 3 Compostos sem reactividade cruzada (cont) Cannabidiol Lidocaína Canabinol Loperamida Hidrato de cloral Succinato de loxapina Cloranfenicol Dietilamida de ácido lisérgico Clorodiazepóxido Maprotilina Cloroquina Melanina Clorotiazida Meperidina Clorfeniramina Meprobamato Clorpromazina Metadona Colesterol D-Metanfetamina Clomipramina p-hidroximetanfetamina Clonidina Metaqualona Cocaína Metoxifenamina Codeína (±) 3,4-Metilenodioxianfetamina Cortisona (±) 3,4-Metilenedioximetanfetamina ( ) Cotinina Metilfenidato Creatinina Metoprilona Desoxicorticosterona Morfina Dextrometorfano Morfina-3-β-D-glicurónido Dextropropoxifeno Ácido Naladíxico Diazepam Nalorfina Diclofenac Naloxona Dietilpropiona Naltrexona Diflunisal Naproxeno Digoxina Niacinamida Difenidramina Nifedipina Domperidona Norcodeína Doxilamina Noretindrona Ecgonina Noroximorfona Éster metílico de ecgonina D-Norpropoxifeno (+) Efedrina ( ) Norpseudoefedrina (±) Efedrina Noscapina ( ) Efedrina Nilidrina ( ) Efedrina Y D,L-Octopamina Epinefrina Ácido oxálico Eritromicina Oxazepam β-estradiol Ácido oxolínico Estriol Oxicodona Estrona-3-sulfato Oximetazolina Etil-p-aminobenzoato Oximorfona Fenoprofeno Papaverina Furosemida Penicilina-G Ácido gentísico Pentazocina Éter glicerílico de guaiacol Perfenazina Glicose Fenciclidina Glutetimida Fendimetrazina Guaifenesin Fenelzina Hemoglobina β-fenetilamina Ácido hipoúrico Fenotiazina Hidralazina Fentermina Hidroclorotiazida Fenilbutazona Hidrocodona L-Fenilefrina Hidrocortisona D-Fenilpropanolamina Hidromorfona Prednisolona Ácido o-hidroxi-hipoúrico Prednisona 3-Hidroxitiramina Procaína Ibuprofeno Promazina Imipramina Prometazina Iproniazida D,L-Propranolol ( ) Isoproterenol Propiomazina Isoxsuprina D-Propoxifeno Quetamina D-Pseudoefedrina Cetonas L-Pseudoefedrina Cetoprofeno Quinidina Labetalol Quinina Levorfanol Ranitidina 3 6A362UL.7SL
4 Tabela 3 Compostos sem reactividade cruzada (cont) Ácido Salicílico Tioridazina Serotonina D,L-Tiroxina Cloreto de sódio Tolbutamida Sulfametazina Triantereno Sulindac Trifluoperazina Temazepam Trimetoprim Tetraciclina Trimipramina Tetrahidrocortisona Triptamina Tetrahidrozolina D,L-Triptofano 8 -THC Tiramina 9 -THC D,L-Tirosina 11-nor- 9 -THC-9-COOH Ácido úrico Tebaína Verapamil Tiamina Zomepirac Notas 19 Bibliografia 1. Hawks RL, Chiang CN, eds. Urine Testing for Drugs of Abuse. Rockville, MD: Substance Abuse and Mental Health Services Administration (SAMHSA); NIDA Research Monograph Baselt RC. Disposition of Toxic Drugs and Chemicals in Man. 2nd ed. Davis, CA: Biomedical Publ.; Chave dos símbolos Fabricado por EC REP Representante Autorizado IVD Dispositivo Médico para Diagnóstico In Vitro LOT Código do Lote EXP YYYY-MM-DD A data em "Utilizar antes de" encontra-se no formato ano-mês-dia (AAAA-MM-DD) Limitação da Temperatura REF Marca CE Número de Catálogo Consulte as Instruções de Utilização ID Identificação PT SAC - Serviço de Atendimento ao Cliente sac/brazil@dadebehring.com Importado e distribuído por DADE BEHRING LTDA. Rua Geraldo Flausino Gomes, 61-1º Andar Brooklin - São Paulo - SP - CEP Fone (11) Fax (11) CNPJ: / Resp. Téc.: Nanci A. Trindade CRF - SP: Para obter assistência técnica, contactar a Syva Company: nos EUA no Canadá Fora dos EUA e Canadá, contactar o representante local da Syva Company. Aviso: A adulteração, utilização de instrumentos inadequados ou outra falha no cumprimento das instruções definidas neste rótulo podem afectar as características do desempenho e as indicações do rótulo explícitas ou implícitas, Emit, d.a.u. e Syva são marcas comerciais registadas da Syva Company nos EUA e noutros países. 1997, Syva Company Syva EC REP Dade Behring Limited Regus House, Atterbury Milton Keynes MK10 9RG United Kingdom Produced for Syva Company Dade Behring Inc. Cupertino, CA Printed in USA Revisto Novembro 2003 P-5807-F 6A362UL.7SL
5 11/10/03 Part No. 6A362UL.7SL_Portuguese Layout: 8-1/2" x 11" Final size: N/A Folded to: N/A Doc # Colors: Black
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