Métodos in vivo para determinar disponibilidade e digestibilidade. Luciano Hauschild

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1 Métodos in vivo para determinar disponibilidade e digestibilidade Luciano Hauschild

2 Plano Apresentação: Conceitos gerais odisponibilidade (Disp) e biodisponibilidade (Biod) o Relação composição alimentos e exigência nutricional Métodos in vivo para determinar disponibilidade e biodisponibilidade

3 Plano Apresentação: Métodos in vivo para determinar disponibilidade e digestibilidade dos aminoácidos Nilva Sakomura e Horacio Rostagno. Métodos de pesquisa em nutrição de monogástrico

4 Conceitos: Disponibilidade e biodisponibilidade Invited review: Amino acid bioavailability and digestibility in pig feed ingredients: Terminology and application

5 Disponibilidade e Biodisponibilidade Disp. Biodisp. Disponibilidade = inclui os processos de de digestão

6 Disponibilidade e Biodisponibilidade Disp. Digest.

7 Disponibilidade e Biodisponibilidade Biodisponibilidade = é definido como a proporção do nutriente ingerido que é absorvido em uma forma química potencialmente sustentável para o metabolismo e sintese protéica ( Batterham,1992)

8 Disponibilidade AA AA AA AA Biodisponibilidade AA AA AA Exigência líquida

9 Relação composição alimentos e exigência nutricional Biodisp. Exigência Líquida

10 4.2. Métodos para determinar digestibilidade dos aminoácidos em aves

11 Digestibilidade de AA Perdas endógenas: - Animal (basal) - Alimento (especifico) Fermentação AA Reação Maillard AA AA AA AA AA AA

12 Digestibilidade de AA -Forma química como o AA é absorvido - Fermentação entérica - Perdas endógenas (animal e alimento) AA AA AA AA AA AA

13 Formas de expressar digestibilidade ileal: Aparente = AA ingerido AA ileal excretado AA ingerido X 100 Padrão = AA ingerido (AA ileal excretado AA basal end) X 100 (AA ingerido) Verdadeira = AA ingerido (AA ileal excretado AA end total) X 100 AA ingerido Mensuram desaparecimento AA no trato digestivo

14 Protocolo para determinar a digestibilidade dos aminoácidos com galos cecectomizados o Aves: Galos cecectomizados a partir 20 semanas o Duração 96 horas (48 hs jejum e 48 hs coleta) o Delineamento Minimo 5 repetições

15 Intestinos (Cecos)

16 o Coleta de excretas: A cada 12 hs e recomenda-se o uso de bolsa plásticas presas a região pélvica; o Quantificação das perdas endógenas 96 horas de jejum com coleta nas últimas 48 horas o Preparo das amostras Liofilizadas a vácuo (-40ºC por 72 hs) e posteriormente moidas e análisadas (HPLC).

17 Alimentação precisa Coleta excreta Coleta excreta

18 o Cálculos para determinar os coeficientes de digestibilidade dos aminoácidos: CDAAap = AA ingerido (AA excretado) AA ingerido x 100 CDAAv = AA ingerido (AA excretado AA endógeno) AA ingerido x 100

19 Coleta da digesta ileal em aves: - Mais preciso; - Mais trabalhoso; - Maior número de animais;

20 Tabela 15 Coeficientes de digestibilidade de Proteína Bruta, determinados pelo métodos de coleta totla em frangos intactos e cectomizados e pela coleta de digesta Efeito de tipos de soja Intactos Cecectomizados Ileal Farelo de soja 58,3a 56,54b 81,16ab Soja integral tostada 58,3a 56,68b 79,82b Soja integral extrusada 60,25a 60,50a 83,41a Efeito da enzima Sem enzima 57,84b 55,57b 80,03b Com enzima 60,07a 59,58a 82,89a

21 4.2.6 Protocolo para determinar digestibilidade ileal dos aminoácidos com aves (Abate) o Aves 21 dias de idade; 8 a 15 aves por repetição o Período experimental 5 a 7 dias de adaptação antes do abate o Dietas

22 Dieta ingrediente teste Dieta sem AA (livre protéina) Dieta com AA cristalinos (100% digestíveis)

23 Perdas endógenas Pode ser utilizado de trabalhos publicados Abate das aves Estimular consumo duas horas antes do abate Coleta da digesta Imediatamente após o abate, o íleo é exposto por incisão abdminal e um segmento de 15 a 40 cm, terminando a 4 cm da junção íleo-cecal, é removido Processamento das amostras Liofilização à vácuo Análises laboratoriais Indicador Aminoácidos (HPLC)

24 o Cálculos para determinar os coeficientes de digestibilidade dos aminoácidos: CDAAap = AA ingerido (AA excretado) AA ingerido x 100 CDAAv = AA ingerido (AA excretado AA endógeno) AA ingerido x 100

25 4.3. Métodos para avaliar digestibilidade da proteína e de aminoácidos em suínos Cânula no íleo terminal Anastomose íleo-retal Coleta digesta ileal pelo método sacrifício

26 4.3.2 Protocolo para determinar a digestibilidade ileal Período experimental 5 dias de adaptação 2 coleta Delineamento experimental Blocos casualizado, com repetições no tempo No minimo 4 repetições tempo

27 Determinação da proteína e aminoácidos endógenos Dieta isenta de protéina (DIP) ou Caseina hidrolizada enzimaticamente Fornecimento das dietas 2 vezes ao dia Adicionar indicador Coleta e processamento da digesta Várias coletas ao dia em sacos plásticos amarrados na cânula

28 Obrigado pela atenção!