IMPORTANCIA DEL FRIJOL LIMA PARA GUATEMALA, PERSPECTIVAS Y PRIMER REPORTE DE Macrophomina phaseolina EN BRASIL.

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1 IMPORTANCIA DEL FRIJOL LIMA PARA GUATEMALA, PERSPECTIVAS Y PRIMER REPORTE DE Macrophomina phaseolina EN BRASIL. Lima vean (pod and flower). Photo: K. K. Garvey M.Sc Marvin García

2 Cultivo de Frijol Lima Classificação Orden Fabales, família Fabaceae (Leguminosae), género Phaseolus (CRONQUIST, 1988); Género: Phaseolus (P. vulgaris, P. lunatus, P. coccineus, P. accutifolius e P. plianthus) Origem Teoria de Mackie (1943); Estudios de Martínez-Castillo et al., 2015;

3 Importancia

4 Foto: Mota, 2015 Cultivo en Brasil x Cultivo en EUA Foto: Irrigating lima beans. Photo: Courtesy of the California Dry Bean Advisory Board.

5 Foto: Google Produción Nacional Brasil t t Ceará t Piauí t 162 t (IBGE, 2014) 102 t

6 Principales enfermedades causadas por hongos del frijol lima (Carvalho et al., 2015) Foto: Sousa, 2015 Foto: Mota, 2015 Foto: Evans et al., 2007 Foto: Sousa, 2016

7 Fotos: García y Sousa, 2016 Macrophomina phaseolina Especie polífaga; En Brasil, altas temperaturas e compactación del suelo facilitan o desarrollo del hongo (ALMEIDA et al., 2014).

8 Importancia de la prueba de patogenicidad Concepto de patogenicidad Postulados de Koch Importantes en la identificación de agentes etiológicos de nuevas enfermedades Permiten trazar estrategias de manejo de enfermedades

9 Objetivos Evaluar patogenicidad de M. phaseolina en plantas de frijol lima; Caracterizar morfológicamente e identificación molecular de los aislados.

10 Primer relato de Macrophomina phaseolina em frijo lima en Brasil

11 Material e métodos Caracterização morfológica Fotos: Sousa, 2015 Foto: Omegom.com Aislados: MPM143 (Assaré-CE) e EM02 (Esperantina-PI). Evaluación: coloración y aspecto de micelio, conidios, micro esclerocios en medio de cultivo PDA. Evaluación de las tasa de crecimiento micelial

12 Caracterización molecular Los aislados fueron identificados en el Instituto Biológico de São Paulo, Brasil, por medio de PCR e secuenciamiento. En la amplificación del gen TEF (Elongation factor 1-α) furon utilizados los primers: EF1-728F Forward (5 - CATCGAGAAGTTCGAGAAGG-3 ) (CARBONE; KOHN, 1999) Ef-2 Reverse (5 -GGAAGTACCAGTGATCATGTT-3 ) (O DONNELL et al., 1998) El árbol filogenético fue construído com el programa MEGA v.6.0 por el método de máxima parcimonia.

13 Fotos: Sousa; García, 2015 Prueba de patogenicidad Dos métodos de inoculación en plantas de frijol lima de la variedade boca-de-moça (Acesso UFPI-907);

14 Fotos: Sousa; Pires; Garcia, 2016

15 Resultados Fotos: Sousa; García, 2016

16 Fotos: Sousa; Garcia, 2016 Aspecto da cultura em BDA Microesclerócios em BDA Picnídios Microesclerócios em caule inoculado Conídios em picnídios

17 Resultados Árbol filogenético basado en la secuencia nucleotídica del gen TEF-1α de Macrophomina phaseolina. El árbol fue construída por el método da máxima parcimônia. El largo de las ramas es indicado por la escala en la base del árbol, y los valores de bootstrap (1000 repetições) son indicados encima de los internudos.

18 Conclusiones M. phaseolina es el agente causal de la pudrición em frijol lima en Brasil.

19 Considerações finais A identificação de patógenos e doenças associadas ao feijão-fava é de fundamental importância para o desenvolvimento e expansão da cultura; Os resultados deste estudo integram um conjunto de pesquisas que buscam uma melhor compreensão das doenças que atingem o feijão-fava; São subsídio para estudos de epidemiologia e desenvolvimento de medidas de controle.

20 Agradecimentos

21 Primeira ocorrência de podridão de raiz causada por Fusarium falciforme (FSSC 3 + 4) em feijão-fava no Brasil

22 Resultados (E) Aspecto da cultura em meio BDA; (F) Macroconídios em meio SNA+folha de cravo com septos evidentes; (G) Conidióforos em falsas cabeças; (H) Monofiálide longa, característica de F. solani.

23 Resultados Plantas sintomáticas: 42 das plantas de feijão-fava inoculadas pelo método de ferimento de raízes ; 2 plantas inoculadas pelo método de discos de micélio. Não foram observados sintomas em plantas de soja.

24 Resultados Árvore filogenética baseada na sequência nucleotídica dos genes TEF e RPB2 de isolados de Fusarium falciforme de feijão-fava (Phaseolus lunatus L.). A árvore foi construída usando o método da máxima parcimônia. O comprimento dos ramos é indicado por escala na base da árvore, e os valores de bootstrap (1000 repetições) são indicados acima dos internódios.

25 Conclusões Os dois isolados de F. falciforme foram patogênicos ao feijão-fava, induzindo sintomas de podridão de raiz. O método de inoculação utilizando ferimento de raízes foi eficiente na inoculação artificial de isolados de F. falciforme em feijão-fava.

26 Complexo Colletotrichum gloeosporioides: Novo agente etiológico da antracnose do feijão-fava no Brasil

27 Material e métodos As plantas foram inoculadas aos 10 DAE; Após a inoculação foram mantidas em câmara úmida por 48 horas; Mantidas em ambiente com temperatura controlada a 25 ± 2 C, até a morte da primeira planta inoculada.

28 Resultados Árvore filogenética baseada na sequência nucleotídica da região ITS de representantes do Complexo Colletotrichum gloeosporioides. A árvore foi construída usando o método da máxima verossimilhança. O comprimento dos ramos é indicado por escala na base da árvore, e os valores de bootstrap (1000 repetições) são indicados acima dos internódios.

29 Resultados ESS09 EMJS08

30 Conclusões Espécies do Complexo Colletotrichum gloeosporioides são capazes de causar antracnose em feijão-fava no Brasil. A região ITS não é suficiente para a identificação de espécies dentro do Complexo Colletotrichum gloeosporioides que afetam feijão-fava, sendo indicada uma análise multilocus para a identificação destas espécies.