GUIA DOS MÉTODOS DE REFERÊNCIA

GUIA DOS MÉTODOS DE REFERÊNCIA MICROBIOLOGIA PARA COSMÉTICOS

BIOKAR Diagnóstico coloca o seu conhecimento à sua disposição para fornecer soluções simples e rápidas para atender suas necessidades. Os laboratórios de microbiologia devem obedecer os critérios regulamentares que estão em constante evolução, e é por isso que nós oferecemos este guia de métodos de referência para ajudálo diariamente na aplicação das normas aos seus produtos cosméticos. SUMÁRIO: Microrganismos totais: Leveduras e fungos Contagem NF EN ISO 16212 T75608 Página 45 Bactérias aeróbicas Contagem e detecção NF EN ISO 21149 T75602 Página 67 Identificação dos Microrganismos: Candida albicans Detecção NF EN ISO 16212 T75608 Página 45 Escherichia coli Detecção NF EN ISO 16212 T75608 Página 45 Pseudomonas aeruginosa Detecção NF EN ISO 16212 T75608 Página 45 Staphylococcus aureus Detecção NF EN ISO 16212 T75608 Página 45 ANEXOS: Anexo A: Protocolo de preparação dos meios de referência. Anexo B: Outras normas de microbiologia dos produtos cosméticos. NF EN ISO 18415: 201108. Detecção de microrganismos específicos e não específicos. NF EN ISO 11930: 201206. Avaliação da proteção antimicrobiana de um produto cosmético. Anexo C: Lista de produtos. Para maiores informações, entre em contato com a gente.

NF EN ISO 16212 T75608 Contagem de leveduras e fungos (Agosto 2011) Princípios: Semeadura da amostra na superfície ou profundidade, ou filtração por membrana e transferência para o meio de cultura (ágar). Incubação à 25,0 ± 2,5ºC por 3 à 5 dias. (1) Contagem do número de Unidades Formadoras de Colônias (UFC) e do número de leveduras e fungos por ml ou por g de produto. Meio de Cultura BIOKAR Diagnóstico Conformidade Diluente neutralizante Meio com peptona de caseína, lecitina de soja e polissorbato 20 (caldo SCDLP20) Caldo Eugon LT100 Caldo Eugon LT 100 BK068HA frasco 500g BM00608 50 tubos 9 ml BM17508 50 tubos 9 ml + contas de vidro BM04308 10 flaconetes 100 ml Diluente lecitina polissorbato (LP) Líquido A Água Peptonada BM16408 3 embalagens de 3L Diluentes Solução peptona tamponada (ph 7) Caldo peptona tamponado NaCl ph 7 BK128HA frasco 500g Parcial (2) Meio de Cultura Ágar Sabouraud Dextrose Cloranfenicol (SDCA) (3) Ágar Batata Dextrose com antibiótico Ágar Sabouraud Glicose com Cloranfenicol BK025HA frasco 500g BM17608 20 unidades Ø 90 mm BM17708 120 unidades Ø 90 mm BM17208 10 flaconetes 200 ml Ágar Glicose Extrato de Batata BK095HA frasco 500g Suplemento Seletivo Cloranfenicol 50 mg BS02108 10 flaconetes Ágar Glicosepeptona (GP) com antibiótico Diluente para a suspensão de levedura Ágar para cultura de cepa de referência Solução triptona cloreto de sódio Ágar Sabouraud Dextrose (SDA) Caldo Triptona Soja BK046HA frasco 500g BM00808 50 tubos 9 ml BM11408 10 flaconetes 90 ml BM13508 3 embalagens de 3L Ágar Sabouraud Glicose BK025HA frasco 500g BM17308 20 unidades Ø 90 mm BM17408 120 unidades Ø 90 mm BM05308 10 flaconetes 200 ml (1) Em caso de utilização de ágar sem antibiótico, incubar à 22,5 ± 2,5ºC por 5 à 7 dias. (2) Fórmula da Farmacopéia. Contém 1g de triptona ao invés de peptona de carne e ph 7,0 ± 0,2 ao invés de 7,1 ± 0,2. (3) Para produtos conhecidos e não contaminados o meio será utilizado sem cloranfenicol.

Protocolo 1g ou 1mL de amostra diluída 1/10 (a) (b) Caldo Eugon LT 100 (c) 0,1 ml em superfície 1 ml em profundidade Por filtração em membrana Ágar SABOURAUD Cloranfenicol (e) Incubar de 3 à 5 dias à 25,0 ± 2,5ºC Contagem de leveduras e fungos (f) (a) Quantidade mínima de amostra para análise. (b) Outras diluições podem ser feitas a partir da suspensãomãe (utilizando o mesmo solvente), dependendo do nível de contaminação da amostra. (c) Outros solventes podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.4. (d) Transferir para a membrana uma quantidade adequada de amostra (correspondente à 1g ou 1mL de produto) e colocála sobre o ágar. (e) Outros meios de cultura podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.4. (f) A contagem é geralmente realizada utilizando ao menos 2 unidades por diluição.

NF EN ISO 21149 T75602 Contagem e detecção de bactérias aeróbicas mesófilas (Setembro 2009) Princípios: Para a contagem Semeadura da amostra na superfície ou profundidade, ou filtração por membrana e transferência para o meio de cultura (ágar). Incubação por 72 ± 6h. Contagem do número de Unidades Formadoras de Colônias (UFC) e do número de bactérias aeróbicas mesófilas por ml ou por g de produto. Para a detecção Enriquecimento em meio líquido não seletivo por 20 horas. Semeadura em ágar não seletivo. Incubação por 48 a 72h. Meio de Cultura BIOKAR Diagnóstico Conformidade Diluente neutralizante Meio com peptona de caseína, lecitina de soja e polissorbato 20 (caldo SCDLP20) Caldo Eugon LT100 Diluente lecitina polissorbato (LP) Caldo Letheen modificado Caldo Eugon LT 100 BK068HA frasco 500g BM00608 50 tubos 9 ml BM17508 50 tubos 9 ml + contas de vidro BM04308 10 flaconetes 100 ml Diluentes Líquido A Água Peptonada BM16408 3 embalagens de 3L Solução peptona tamponada (ph 7) Caldo peptona tamponado NaCl ph 7 BK128HA frasco 500g Parcial (1) Meio de Cultura para Contagem Ágar de peptona e caseína de soja (SCDA) ou ágar triptocaseína de soja (TSA) Ágar Eugon LT 100 Ágar LT 100 Meio de peptona e caseína de soja adicionado de ágar Ágar Triptocaseína de Soja BK026HA frasco 500g BM05008 20 unidades Ø 90 mm BM17808 120 unidades Ø 90 mm BM01708 10 flaconetes 100 ml BM04908 10 flaconetes 200 ml Ágar Eugon LT 100 BK096HA frasco 500g BM17008 20 unidades Ø 90 mm BM04508 10 flaconetes 200 ml Caldos de enriquecimento Caldo Eugon LT100 Caldo Eugon LT 100 BK068HA frasco 500g BM00608 50 tubos 9 ml BM17508 50 tubos 9 ml + contas de vidro

Caldo Letheen modificado Meio líquido de peptona de caseína de sojalecitinapolissorbato 80 (Caldo SCDLP 80) Caldo neutralizante D/E (caldo neutralizante Dey/Engley) BM04308 10 flaconetes 100 ml Meios para a detecção por enriquecimento Diluente para a suspensão bacteriana Ágar para cultura de cepa de referência Ágar Eugon LT 100 Meio líquido de peptona de caseína de sojalecitinapolissorbato 80 (Caldo SCDLP 80) Solução triptona cloreto de sódio Ágar de peptona e caseína de soja (SCDA) ou ágar triptocaseína de soja (TSA) Ágar Eugon LT 100 BK096HA frasco 500g BM17008 20 unidades Ø 90 mm BM04508 10 flaconetes 200 ml Caldo Triptona Soja BK046HA frasco 500g BM00808 50 tubos 9 ml BM11408 10 flaconetes 90 ml BM13508 3 embalagens de 3L Ágar Triptocaseína de Soja BK026HA frasco 500g BM05008 20 unidades Ø 90 mm BM17808 120 unidades Ø 90 mm BM01708 10 flaconetes 100 ml BM04908 10 flaconetes 200 ml (1) Fórmula da Farmacopéia. Contém 1g de triptona ao invés de peptona de carne e ph 7,0 ± 0,2 ao invés de 7,1 ± 0,2. Protocolo 1g ou 1mL de amostra diluída 1/10 (a) (b) Caldo Eugon LT 100 (c) 0,1 ml em superfície 1 ml em profundidade Por filtração em membrana Ágar Triptocaseína de soja (c) Caldo Eugon LT100 (c) Incubar de 72 ± 6h Incubar de 48 à 72h Contagem (e) Presença/Ausência (e)

(a) Quantidade mínima de amostra para análise. (b) Outras diluições podem ser feitas a partir da suspensãomãe (utilizando o mesmo solvente), dependendo do nível de contaminação da amostra. (c) Outros solventes podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.4. (d) Transferir para a membrana uma quantidade adequada de amostra (correspondente à 1g ou 1mL de produto) e colocála sobre o ágar. (e) A contagem é geralmente realizada utilizando ao menos 2 unidades por diluição.

NF EN ISO 18416 T75607 Detecção de Candida albicans (Setembro 2009) Princípios: Enriquecimento em meio líquido de 20 à 72 horas. Isolamento em ágar por 24 a 48h. Identificação por ensaios apropriados. Meio de Cultura BIOKAR Diagnóstico Conformidade Caldo Eugon LT100 Caldo Eugon LT 100 BK068HA frasco 500g BM00608 50 tubos 9 ml BM17508 50 tubos 9 ml + contas de vidro BM04308 10 flaconetes 100 ml Meios líquidos de enriquecimento Meio líquido digerido de caseínasoja Caldo Letheen modificado Caldo Triptona Soja (TSB) BK046HA frasco 500g BM03008 50 tubos 10 ml BM00908 10 flaconetes 100 ml BM17908 10 flaconetes 90 ml Meio lecitina polissorbato 80 adicionado de dextrose e de peptona (Caldo GPLP80) Ágar seletivo para o isolamento C. albicans Ágar Sabouraud Dextrose Cloranfenicol Ágar Sabouraud Glicose com Cloranfenicol BK025HA frasco 500g BM17608 20 unidades Ø 90 mm BM17708 120 unidades Ø 90 mm BM17208 10 flaconetes 200 ml Ágar Batata Dextrose com antibiótico Ágar Glicose Extrato de Batata BK095HA frasco 500g Suplemento Seletivo Cloranfenicol 50 mg BS02108 10 flaconetes Diluente para a suspensão de levedura Solução triptona cloreto de sódio Caldo Triptona Soja BK046HA frasco 500g BM00808 50 tubos 9 ml BM11408 10 flaconetes 90 ml BM13508 3 embalagens de 3L Ágar para validação Ágar Sabouraud Dextrose (SDA) Ágar Sabouraud Glicose BK025HA frasco 500g BM17308 20 unidades Ø 90 mm BM17408 120 unidades Ø 90 mm BM05308 10 flaconetes 200 ml Ágar Batata Dextrose Ágar Glicose Extrato de Batata BK095HA frasco 500g Ágar de peptona e caseína de soja (SCDA) ou ágar triptocaseína de soja (TSA) Ágar Triptocaseína de Soja BK026HA frasco 500g BM05008 20 unidades Ø 90 mm BM17808 120 unidades Ø 90 mm BM01708 10 flaconetes 100 ml BM04908 10 flaconetes 200 ml

Protocolo 1g ou 1mL de amostra diluída 1/10 (a) (b) Caldo Eugon LT 100 (c) 0,1 ml em superfície Incubar de 20 à 72 h Ágar SABOURAUD Cloranfenicol (d) Incubar de 24 à 48 h Coloração de Gram Teste de produção de filamentos e clamidosporos Cultura em ágar de farinha de mandioca com 1% de polissorbato 80 (a) Quantidade mínima de amostra para análise. (b) Outras diluições podem ser feitas a partir da suspensãomãe (utilizando o mesmo solvente), dependendo do nível de contaminação da amostra. (c) Outros solventes podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.3.3. (d) Outros meios de cultura podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.3.4.

NF EN ISO 21150 T75604 Detecção de Escherichia coli (Setembro 2009) Princípios: Enriquecimento em meio não seletivo de 20 à 72 horas. Isolamento em ágar por 24 a 48h. Identificação por meio de ensaios apropriados. Meio de Cultura BIOKAR Diagnóstico Conformidade Meios líquidos de enriquecimento Caldo Eugon LT100 Meio líquido de lactose, contendo neutralizantes e agentes dispersantes Meio líquido lactose Meio líquido de triptonasojalecitinapolissorbato 80 (Caldo SCDLP 80) Caldo Eugon LT 100 BK068HA frasco 500g BM00608 50 tubos 9 ml BM17508 50 tubos 9 ml + contas de vidro BM04308 10 flaconetes 100 ml Caldo Nutritivo Lactose BK082HA frasco 500g Caldo neutralizante D/E (caldo neutralizante Dey/Engley) Caldo Letheen modificado Ágar seletivo para o isolamento E.coli Ágar MacConkey Ágar MacCONKEY BK050HA frasco 500g BM18008 10 flaconetes 100 ml Ágar seletivo para confirmação Ágar de Levine eosina e azul de metileno (EMB) Ágar EMB (Levine) BK046HA frasco de 500g Diluente para a suspensão Bacteriana Solução triptona cloreto de sódio Caldo Triptona Soja BK046HA frasco 500g BM00808 50 tubos 9 ml BM11408 10 flaconetes 90 ml BM13508 3 embalagens de 3L Ágar para validação Ágar de peptona e caseína de soja (SCDA) ou ágar triptocaseína de soja (TSA) Ágar Triptocaseína de Soja BK026HA frasco 500g BM05008 20 unidades Ø 90 mm BM17808 120 unidades Ø 90 mm BM01708 10 flaconetes 100 ml BM04908 10 flaconetes 200 ml

Protocolo 1g ou 1mL de amostra diluída 1/10 (a) (b) Caldo Eugon LT 100 (c) 0,1 ml em superfície Incubar de 20 à 72 h Ágar MacCONKEY Incubar de 24 à 48 h Coloração de Gram Cultura em Ágar de Levine eosina e azul de metileno (EMB) (a) Quantidade mínima de amostra para análise. (b) Outras diluições podem ser feitas a partir da suspensãomãe (utilizando o mesmo solvente), dependendo do nível de contaminação da amostra. (c) Outros solventes podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.3.3.

NF EN ISO 22717 T75603 Detecção de Pseudomonas aeruginosa (Setembro 2009) Princípios: Meios líquidos de enriquecimento Enriquecimento em meio não seletivo de 20 à 72 horas. Isolamento em ágar por 24 a 48h. Identificação por meio de ensaios apropriados. Meio de Cultura BIOKAR Diagnóstico Conformidad e Caldo Eugon LT100 Meio líquido de triptonasojalecitinapolissorbato 80 (Caldo SCDLP 80) Caldo neutralizante D/E (caldo neutralizante Dey/Engley) Caldo Eugon LT 100 BK068HA frasco 500g BM00608 50 tubos 9 ml BM17508 50 tubos 9 ml + contas de vidro BM04308 10 flaconetes 100 ml Caldo Letheen modificado Ágar seletivo para o isolamento Ágar Cetrimida Ágar Cetrimida BK049HA frasco 500g Ágar seletivo para confirmação Ágar de Pseudomonas para a pesquisa de piocianina (Ágar Pseudomonas P) Diluente para a suspensão Bacteriana Solução triptona cloreto de sódio Caldo Triptona Soja BK046HA frasco 500g BM00808 50 tubos 9 ml BM11408 10 flaconetes 90 ml BM13508 3 embalagens de 3L Ágar para validação Ágar de peptona e caseína de soja (SCDA) ou ágar triptocaseína de soja (TSA) Ágar Triptocaseína de Soja BK026HA frasco 500g BM05008 20 unidades Ø 90 mm BM17808 120 unidades Ø 90 mm BM01708 10 flaconetes 100 ml BM04908 10 flaconetes 200 ml

Protocolo 1g ou 1mL de amostra diluída 1/10 (a) (b) Caldo Eugon LT 100 (c) 0,1 ml em superfície Incubar de 20 à 72 h Ágar Cetrimida Incubar de 24 à 48 h Coloração de Gram Pesquisa de oxidase Cultura em Ágar de Pseudomonas para pesquisa de piocianina (a) Quantidade mínima de amostra para análise. (b) Outras diluições podem ser feitas a partir da suspensãomãe (utilizando o mesmo solvente), dependendo do nível de contaminação da amostra. (c) Outros solventes podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.3.3.

NF EN ISO 22718 T75605 Detecção de Staphylococcus aureus (Setembro 2009) Princípios: Enriquecimento em meio não seletivo de 20 à 72 horas. Isolamento em ágar por 24 a 48h. Identificação por meio de ensaios apropriados. Meio de Cultura BIOKAR Diagnóstico Conformidade Meios líquidos de enriquecimento Caldo Eugon LT100 Meio líquido hidrolisado de caseínasoja Caldo neutralizante D/E (caldo neutralizante Dey/Engley) Caldo Eugon LT 100 BK068HA frasco 500g BM00608 50 tubos 9 ml BM17508 50 tubos 9 ml + contas de vidro BM04308 10 flaconetes 100 ml Caldo Letheen modificado Ágar seletivo para o isolamento Ágar Baird Parker Solução de telurito de potássio Emulsão de gema de ovo Ágar Manitol (Ágar Chapman) Ágar Baird Parker BK055HA frasco 500g BM01808 20 unidades Ø 90 mm BM09108 120 unidades Ø 90 mm Ágar de CHAPMAN Manitol BK030HA frasco 500g Ágar VogelJohnson Diluente para a suspensão bacteriana Solução triptona cloreto de sódio Caldo Triptona Soja BK046HA frasco 500g BM00808 50 tubos 9 ml BM11408 10 flaconetes 90 ml BM13508 3 embalagens de 3L Ágar para validação Ágar de peptona e caseína de soja (SCDA) ou ágar triptocaseína de soja (TSA) Ágar Triptocaseína de Soja BK026HA frasco 500g BM05008 20 unidades Ø 90 mm BM17808 120 unidades Ø 90 mm BM01708 10 flaconetes 100 ml BM04908 10 flaconetes 200 ml

Protocolo 1g ou 1mL de amostra diluída 1/10 (a) (b) Caldo Eugon LT 100 (c) Incubar de 20 à 72 h Ágar BAIRDPARKER (d) Incubar de 24 à 48 h Coloração de Gram Pesquisa de catalase Pesquisa de oxidase (a) Quantidade mínima de amostra para análise. (b) Outras diluições podem ser feitas a partir da suspensãomãe (utilizando o mesmo solvente), dependendo do nível de contaminação da amostra. (c) Outros solventes podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.3.3. (d) Outros meios de cultura podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.3.4.

Anexo A: Protocolo de preparação para cepa de referência. Suspensão bacteriana Suspensão bacteriana Suspensão bacteriana TSA (Repique da cultura em tubos inclinados ou placas) SDA (Repique da cultura em tubos inclinados ou placas) PDA (Repique da cultura em placas) Incubar de 18 à 24h Segunda subcultura (3º possível) 7 à 11 dias à 32,5 ± 2,5ºC Triptona Cloreto de Sódio Suspensão titulada 10 7 à 10 8 ufc/ml (a) Triptona Cloreto de Sódio Suspensão titulada 10 7 à 10 8 ufc/ml (a) Triptona Cloreto de Sódio Suspensão titulada 10 7 à 10 8 ufc/ml (a) Controle de titulação da suspensão TSA SDA PDA (Repique da cultura em placas) Incubar de 18 à 24h 7 à 11 dias à 32,5 ± 2,5ºC Contagem de bactérias totais (b) Contagem de Candida albicans (b) Contagem de Aspergillus brasiliensis (b) (a) Utilizar a suspensão até duas horas após seu preparo. (b) Para cada suspensão, dobrar a contagem por ml repicado.

Anexo B: outras normas para a Microbiologia de Produtos Cosméticos. Diretrizes para a avaliação de riscos e identificação microbiológica de baixo risco NF EN ISO 29621 T75609 Avaliação da proteção antimicrobiana de um produto cosmético NF EN ISO 11930 T75600 Instruções gerais para as análises microbiológicas NF EN ISO 21148 T75601 Detecção dos microorganismos específicos e não específicos NF EN ISO 18415 T75 606

NF EN ISO 18415 T75606 Detecção de microrganismos específicos e não específicos (Agosto 2011) Princípios: 1ª etapa: enriquecimento em meio líquido não específico. 2ª etapa: isolamento e identificação em função das necessidades e seguindo as instruções das normas correspondentes. Meio de Cultura BIOKAR Diagnóstico Conformidade Diluente Meio líquido de enriquecimento Solução triptona cloreto de sódio Caldo Eugon LT100 Meio líquido de caseínasojalecitinapolissorbato 20 (FCDLP 20) Caldo Triptona Soja BK046HA frasco 500g BM00808 50 tubos 9 ml BM11408 10 flaconetes 90 ml BM13508 3 embalagens de 3L Caldo Eugon LT 100 BK068HA frasco 500g BM00608 50 tubos 9 ml BM17508 50 tubos 9 ml + contas de vidro BM04308 10 flaconetes 100 ml Meio líquido de caseínasojalecitinapolissorbato 80 (FCDLP 80) Caldo neutralizante D/E (caldo neutralizante Dey/Engley) Caldo Letheen modificado Ágar não específico Ágar de peptona e caseína de soja (SCDA) ou ágar triptocaseína de soja (TSA) Ágar Triptona Soja (TSA) BK026HA frasco 500g BM05008 20 unidades Ø 90 mm BM17808 120 unidades Ø 90 mm BM01708 10 flaconetes 100 ml BM04908 10 flaconetes 200 ml Meio de peptona e caseína de soja adicionado de ágar (Caldo SCD adicionado de ágar) Caldo Triptona Soja (TSB) BK046HA frasco 500g BM03008 50 tubos 10 ml BM00908 10 flaconetes 100 ml BM17908 10 flaconetes 90 ml Ágar Bacteriológico tipo A A1010HA Flaconete 500g A1010GC Balde 5kg Ágar Bacteriológico tipo E A1012HA Flaconete 500g A1010GC Balde 5kg

Protocolo 1g ou 1mL de amostra diluída 1/10 (a) (b) Caldo Eugon LT 100 (c) Incubar de 20 à 72 h Ágar TSA (d) Incubar de 24 à 48 h Identificação dos microorganismos (e): Escherichia coli Pseudomonas aeruginosa Staphylococcus aureus Candida albicans Microrganismos não específicos (a) Quantidade mínima de amostra para análise. (b) Outras diluições podem ser feitas a partir da suspensãomãe (utilizando o mesmo solvente), dependendo do nível de contaminação da amostra. (c) Outros solventes podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.3.2. (d) Outros meios de cultura podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.3.3. (e) Estabelecer os testes de identificação necessários para cada microrganismo.

NF EN ISO 11930 T75600 Avaliação da proteção antimicrobiana de um produto cosmético (Junho 2012) Princípios: Inoculação da formulação com inócuo calibrado. Determinação do número de microorganismos sobreviventes aos intervalos de tempo pré definidos durante 28 dias. Meio de Cultura BIOKAR Diagnóstico Conformidade Diluente Solução triptona cloreto de sódio Caldo Triptona Soja BK046HA frasco 500g BM00808 50 tubos 9 ml BM11408 10 flaconetes 90 ml BM13508 3 embalagens de 3L Neutralizante Caldo Eugon LT100 Caldo Eugon LT 100 BK068HA frasco 500g BM00608 50 tubos 9 ml BM17508 50 tubos 9 ml + contas de vidro BM04308 10 flaconetes 100 ml Meios de cultura Ágar Sabouraud Dextrose (SDA) Ágar Batata Dextrose Ágar Sabouraud Glicose BK025HA frasco 500g BM17308 20 unidades Ø 90 mm BM17408 120 unidades Ø 90 mm BM05308 10 flaconetes 200 ml Ágar Glicose Extrato de Batata BK095HA flaconete 500g Equivalente (1) Ágar de peptona e caseína de soja (SCDA) ou ágar triptocaseína de soja (TSA) Ágar Triptocaseína de soja BK026HA frasco 500g BM05008 20 unidades Ø 90 mm BM17808 120 unidades Ø 90 mm BM01708 10 flaconetes 100 ml BM04908 10 flaconetes 200 ml (1) o meio contém 4g de extrato de batata ao invés de 200g de infusão de batata preconizada.

Protocolo 1) Demonstração da eficácia do neutralizante: 1g ou 1 ml da formulação em 9 ml de Caldo Eugon LT 100 30 ± 15 min à temperatura ambiente Adicionar 1 ml de solução calibrada de microorganismos (b) (c) TSA SDA PDA Contagem de bactérias totais (a) Incubar de 48 à 72h Contagem de Candida albicans (a) 3 à 5 dias à 32,5 ± 2,5ºC Contagem de Aspergillus brasiliensis (a) 2) Demonstração da eficácia da proteção antimicrobiana da formulação: 20g ou 20 ml da formulação + 0,2 ml de inócuo calibrado (b) Em um intervalo de tempo regular, retirar 1 ml ou 1g da formulação inoculada 7 dias: T7 14 dias: T14 28 dias: T28 Para cada amostragem, fazer a contagem dos microrganimos (seguindo o protocolo descritivo da etapa Demonstração da eficácia da etapa de neutralização ). (a) Contar em dobro, 1 ml de cada mistura inoculada. (b) O inócuo calibrado contém entre 10 5 e 10 6 UFC/mL para Candida albicans e Aspergillus brasiliensis. (c) Fazer um tubo controle, com 1 ml de inócuo em 10 ml de diluente.

Anexo C: Lista dos principais produtos da Microbiologia Cosmética Ágar BAIRDPARKER Ágar Cetrimida Ágar Sal Manitol PRODUTO Caldo peptona tamponado com NaCl ph 7,0 Ágar EMB (LEVINE) Caldo Eugon LT 100 Ágar Eugon LT 100 Ágar Batata Dextrose (com antibiótico) Ágar MacCONKEY Caldo Lactose Ágar SABOURAUD Glicose Ágar SABOURAUD Glicose com Cloranfenicol Caldo Triptona Soja (TSB) Ágar Triptona Soja (TSA) Ágar Glicose Oxitetraciclina (OGA) APRESENTAÇÃO BK055HA frasco 500g BM01808 20 placas de Ø 90 mm BM09108 120 placas de Ø 90 mm BK049HA frasco 500g BK030HA frasco 500g BK128HA frasco 500g BM16408 3 embalagens de 3L BK046HA frasco 500g BK068HA frasco 500g BM00608 50 tubos 9 ml BM17508 50 tubos 9 ml + contas de vidro BM04308 10 frascos 100 ml BK096HA frasco 500g BM17008 20 placas de Ø 90 mm BM04508 10 frascos 200 ml BK095HA frasco 500g Suplemento Seletivo Cloranfenicol 50 mg BS02108 10 frascos BK050HA frasco 500g BM18008 10 frascos 100 ml BK082HA frasco 500g BK025HA frasco 500g BM17308 20 unidades Ø 90 mm BM17408 120 unidades Ø 90 mm BM05308 10 flaconetes 200 ml BK025HA frasco 500g BM17608 20 unidades Ø 90 mm BM17708 120 unidades Ø 90 mm BM17208 10 flaconetes 200 ml BK046HA frasco 500g BM03008 50 tubos 10 ml BM00908 10 embalagens 100 ml BM17908 10 embalagens 90 ml BK046HA frasco 500g BM05008 20 placas de Ø 90 mm BM17808 120 placas de Ø 90 mm BM01708 10 embalagens 100 ml BM04908 10 embalagens 200 ml BM02208 10 flaconetes 110 ml BK053HA frasco 500g BK053GC embalagem 5 Kg Suplemento Seletivo Oxitetraciclina 50 mg

Ágar Schaedler Caldo Tetrationato Ágar Verde Brilhante Caldo MüllerKauffmann Ágar Contagem de Placas (PCA) Caldo Lecitina Polissorbato Triton X Ágar Lecitina Polissorbato Triton X BS00808 embalagem com 10 frascos Suplemento Seletivo Gentamicina 25 mg BS00908 embalagem com 10 frascos Suplemento Seletivo Cloranfenicol 50 mg BS02108 embalagem com 10 frascos BK063HA frasco 500g BK083HA frasco 500g BK091HA frasco 500g BM10608 50 flaconetes 10 ml BK135HA frasco 500g Suplemeto Seletivo Novobiocina 10 mg BS03308 embalagem com 10 frascos Suplemeto Seletivo Novobiocina 40 mg BS05608 embalagem com 8 frascos BM01508 10 flaconetes 100 ml BM03308 10 flaconetes 200 ml BK144HA frasco 500g BK144GC embalagem 5 Kg BM00608 50 tubos 9 ml BM04308 10 frascos 100 ml BK137HA frasco 500g BM04508 10 flaconetes 200 ml BK138HA frasco 500g

Apresentações A) Ágar: PRONTO: Placas de Petri (ainda não disponíveis no Brasil): Pacote com 120 unidades de Ø 90 mm; Pacote com 20 unidades de Ø 90 mm. PRONTO PARA SOLUBILIZAR: Flaconetes (ainda não disponíveis no Brasil): 10 flaconetes de 100 ml; 10 flaconetes de 200 ml. DESIDRATADO: Frascos: Embalagem de 500g; Embalagem de 5 Kg.

Apresentações B) Caldos: PRONTO PARA USO: Frascos (ainda não disponíveis no Brasil): 10 frascos de 90 ml; 10 frascos de 100 ml; 10 frascos de 200 ml. Tubos (ainda não disponíveis no Brasil): 50 tubos de 9 ml; 50 tubos de 10 ml. Embalagens flexíveis (ainda não disponíveis no Brasil): 3 embalagens de 3L; 2 embalagens de 5L. DESIDRATADO: Frascos: Embalagem de 500g; Embalagem de 5 Kg.

BIOKAR Diagnostics Qualidade O Controle de Qualidade da Biokar Diagnostics certifica o desempenho de seus produtos em conformidade com os padrões ISO: Testes de desempenho; Condições de transporte; Testes de esterilidade; Testes de neutralização; Análises das características físicoquímicas (ph, aspecto...). BIOKAR Diagnostics é certificada de acordo com as normas padrão de gerenciamento ISO 9001:2008. A Biokar Diagnostics propõe um acesso direto à documentação técnica de seus produtos nos sites: Ficha Técnica; Ficha de Segurança; Laudo de Análise. Acesse nossos sites: www.biokardiagnostics.com OU www.solabia.com.br