GUIA DOS MÉTODOS DE REFERÊNCIA

Transcrição

1 GUIA DOS MÉTODOS DE REFERÊNCIA MICROBIOLOGIA PARA ALIMENTOS

2 BIOKAR Diagnóstico coloca o seu conhecimento à sua disposição para fornecer soluções simples e rápidas para atender suas necessidades. Os laboratórios de microbiologia devem obedecer os critérios regulamentares que estão em constante evolução, e é por isso que nós oferecemos este guia de métodos de referência para ajudálo diariamente na aplicação das normas às suas atividades. SUMÁRIO: B: Bacillus cereus presuntivo Contagem Página 4 Bacillus cereus Pesquisa e Contagem Página 56 (suspeito em pequena quantidade) C: Campylobacter spp. Pesquisa e Contagem Parte 1 Página 7 Campylobacter spp. Pesquisa e Contagem Parte 3 Página 8 Clostridium perfringens Contagem Página 9 Coliformes (Contagem de colônias) Contagem Página 10 Coliformes Pesquisa e Contagem Página 11 (suspeito em pequena quantidade) Coliformes presuntivo Contagem Página 11 Coliformes termorresistentes Contagem Página 12 E: Enterobacteriaceae Pesquisa e Contagem Parte 1 Página 13 (com préenriquecimento) Enterobacteriaceae Pesquisa e Contagem Parte 2 Página 14 Enterobacteriaceae presuntivo Contagem Página 14 Escherichia coli βglicuronidase + Contagem Parte 1 Pagina 15

3 Escherichia coli βglicuronidase + Contagem Parte 2 Pagina 15 L: Escherichia coli βglicuronidase + Contagem Parte 3 Pagina 16 Escherichia coli O157 Pesquisa Pagina 17 Escherichia coli presuntivo Contagem Pagina 18 Leveduras e fungos Contagem Página 19 Leveduras e fungos Contagem Página 20 (produtos com atividade de água superior à 0,95) Leveduras e fungos Contagem Página 21 (produtos com atividade de água inferior à 0,95) Listeria monocytogenes Pesquisa Emenda 1 Página 2224 Listeria monocytogenes Contagem Emenda 1 Página 2526 S: Salmonella spp. Pesquisa Emenda 1 Página 2728 Shigella spp. Pesquisa Página 2930 Staphylococcus coagulase + Contagem Parte 1 Emenda 1 Página 31 Staphylococcus coagulase + Contagem Parte 2 Emenda 1 Página 32 (ágar com fibrinogênio plasma de coelho) Staphylococcus coagulase + Contagem Parte 2 Página 3334 (carga bacteriana baixa) V: Vibrio parahaemolyticus e cholerae Pesquisa Parte 1 Página 35 Vibrio spp. Pesquisa Parte 2 Página 36 (outras espécies que não parahaemolyticus e cholerae) Y: Yersinia enterolitica patogênica presuntiva Pesquisa Página 3738

4 NORMAS GERAIS: Contagem das bactérias anaeróbicas sulfitoredutoras Página 39 Contagem das bactérias mesófilas láticas Página 39 Contagem das bactérias sulfitoredutoras Página 40 Contagem dos microrganismos Página 40 Contagem dos microrganismos (método espiral) Página 41 Contagem dos microrganismos psicrotróficos Página 41 Preparação das amostras, da suspensão mãe e das diluições decimais em razão das análises microbiológicas Parte 1: regras gerais para a preparação da diluição mãe e das diluições decimais Preparação das amostras, da suspensão mãe e das diluições decimais em razão das análises microbiológicas Parte 2: regras específicas para a preparação de produtos de carne e derivados. Preparação das amostras, da suspensão mãe e das diluições decimais em razão das análises microbiológicas Parte 3: regras específicas para a preparação de produtos de peixe. Preparação das amostras, da suspensão mãe e das diluições decimais em razão das análises microbiológicas Parte 4: regras específicas para a preparação de produtos que não sejam derivados de leite, carne e peixe. Preparação das amostras, da suspensão mãe e das diluições decimais em razão das análises microbiológicas Parte 5: regras específicas para a preparação de produtos de leite e derivados. Página 42 Página 42 Página 43 Página 43 Página 44 MÉTODOS DE ROTINA: Métodos de rotina para a contagem de Staphylococcus coagulase positiva (+) para a contagem de colônias à 37ºC Parte 1: técnica com confirmação das colônias. Página 45 Enumeração de fungos e leveduras por contagem de colônias à 25ºC Página 46 ANEXOS: Anexo A: outras normas de referência em microbiologia de alimentos Página 47 Anexo B: métodos alternativos rápidos em microbiologia de alimentos Página 4851 Para maiores informações entre em contato com a gente.

5 NF EN ISO 7932 V08023 Método horizontal para a contagem de Bacillus cereus presuntivo Técnica por contagem de colônias à 30ºC (Julho 2005) Princípios: Semeadura em superfície. Incubação em anaerobiose à 30ºC por 18 à 48 horas. Confirmação pelos ensaios específicos. Diluente Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. Meio base Ágar seletivo para B. Cereus (base segundo MOSSEL) BK116HA frasco 500g (1) Meios ágar Solução de polimixina B Suplemento Seletivo Polimixina B BS flaconetes Emulsão de gema de ovo Emulsão estéril de gema de ovo com polimixina B BS flaconetes 50 ml Meio completo (ágarágar MYP) Ágar seletivo para B. Cereus (base segundo MOSSEL) BM placas Ø 90 mm Meios de confirmação Meio base: base sangue nº2 Ágar TriptonaSoja (base para ágar sangue) BK028HA frasco 500g Equivalente Sangue de carneiro desfibrinado (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína.

6 NF EN ISO V (Julho 2006) Métodos horizontais para a contagem de Bacillus cereus presuntivo com baixa carga bacteriana Técnica do número mais provável e método de pesquisa Princípios: Enriquecimento seletivo dos meios simples para dupla concentração à 30ºC por 48 horas para o método de contagem. Enriquecimento seletivo à 30ºC por 48 horas para o método de pesquisa. Isolamento seletivo em meio PEMBA à 37ºC por 18 à 48 horas. Confirmação das colônias suspeitas por teste de hemólise ou por exame microscópico. Diluente Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. Meio enriquecimento seletivo Meio base Caldo de triptona, soja e polimixina (TSPB) Solução de polimixina B Caldo TriptonaCaseína de soja BK046HA frasco 500g BK046GC embalagem 5 Kg Suplemento Seletivo Polimixina B BS flaconetes (1) base PEMBA Meio seletivo sólido Solução de Polimixina B Emulsão de gema de ovo Suplemento Seletivo Polimixina B BS flaconetes Emulsão estéril de gema de ovo BS flaconetes 50 ml Emulsão estéril de gema de ovo com polimixina B BS flaconetes 50 ml Outros meios seletivos sólidos base MYP Ágar seletivo para B. Cereus (base segundo MOSSEL) BK116HA frasco 500g (1) Solução de Polimixina B Suplemento Seletivo Polimixina B BS flaconetes Emulsão de gema de ovo Emulsão estéril de gema de ovo BS flaconetes 50 ml Emulsão estéril de gema de ovo com polimixina B BS flaconetes 50 ml Meio completo (ágar MYP) Ágar seletivo para B. Cereus (base segundo MOSSEL) BM placas Ø 90 mm Reagentes para a identificação em microscópico Solução oxalato verde malaquita Solução preto Sudan B Xileno Solução de Safranina

7 confirmação Meio base: base sangue nº2 Ágar TriptonaSoja (base para ágar sangue) BK028HA frasco 500g Equivalente Sangue de carneiro desfibrinado estéril (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína.

8 NF EN ISO V (Janeiro 2006) Método horizontal para a pesquisa e contagem de Campylobacter spp. Parte 1: Método de pesquisa. Princípios: Enriquecimento seletivo em atmosfera microaerófila à 37ºC por 4 à 6 horas, em seguida 41,5ºC por 44 ± 4 horas. Isolamento seletivo em dois meios em atmosfera microaerófila por 41,5ºC por 44 ± 4 horas. Confirmação por repique em meio não seletivo, em seguida exames microscópicos e ensaios bioquímicos e de crescimento apropriado. enriquecimento Caldo de Bolton Primeiro meio de isolamento Ágar modificado cefoperazona, com carbono e desoxicloreto (mccd) Segundo meio de isolamento A escolha pode ser feita pelo laboratório de análise. Meio base Ágar Columbia com sangue Ágar Columbia (base) BK019HA frasco 500g Parcial (1) Sangue de carneiro desfibrinado estéril Caldo Brucella Meios e reagentes para confirmação e identificação Reagente para a pesquisa de oxidase Solução de peróxido de hidrogênio à 3% Reagentes para a pesquisa da hidrólise de hipurato base Ágar Mueller Hinton com sangue Ágar MULLERHINTON BK048HA frasco 500g Parcial (2) Sangue de carneiro desfibrinado estéril Discos impregnados de ácido nalidixico (30 μg), cefalotina (30 μg) e acetato de indoxila (1) Presença de polipeptona (17g), de peptona pancreática de coração (3g) e de extrato autolítico de levedura (3g) em vez de extrato enzimático de tecidos animais (23g). (2) Presença de infusão de carne (2g) ao invés de extrato enzimático de tecidos animais (6g) e de amido solúvel (1,5g).

9 NF EN ISO V (Junho 2010) Método horizontal para a pesquisa e contagem de Campylobacter spp. Parte 3: Método de semiquantitativo. Princípios: Enriquecimento seletivo em atmosfera microaerófila à 37ºC por 4 à 6 horas, em seguida 41,5ºC por 44 ± 4 horas. Isolamento seletivo em dois meios em atmosfera microaerófila por 41,5ºC por 44 ± 4 horas. Confirmação por repique em meio não seletivo, em seguida exames microscópicos e ensaios bioquímicos e de crescimento apropriado. enriquecimento líquido Caldo de Bolton Primeiro meio de isolamento Ágar modificado cefoperazona, com carbono e desoxicloreto (mccd) Meio base Ágar Columbia com sangue Ágar Columbia (base) BK019HA frasco 500g Parcial (1) Sangue de carneiro desfibrinado estéril Caldo Brucella Meios e reagentes para confirmação e identificação Reagente para a pesquisa de oxidase Solução de peróxido de hidrogênio à 3% Reagentes para a pesquisa da hidrólise de hipurato base Ágar Mueller Hinton com sangue Ágar MULLERHINTON BK048HA frasco 500g Parcial (2) Sangue de carneiro desfibrinado estéril Discos impregnados de ácido nalidixico (30 μg), cefalotina (30 μg) e acetato de indoxila (1) Presença de polipeptona (17g), de peptona pancreática de coração (3g) e de extrato autolítico de levedura (3g) em vez de extrato enzimático de tecidos animais (23g). (2) Presença de infusão de carne (2g) ao invés de extrato enzimático de tecidos animais (6g) e de amido solúvel (1,5g).

10 NF EN ISO 7937 V (Fevereiro 2005) Método horizontal para a contagem de Clostridium perfringens Técnica por contagem de colônias Princípios: Semeadura da massa em uma camada dupla. Incubação por 20 ± 2 horas à 37ºC. Confirmação pela adição de um meio Lactose Sulfito (A); ou pela adição de um meio nitrato motilidade e de um meio lactose à gelatina (B). Diluente Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. base Ágar triptonasulfito com cicloserina (SC) Ágar TSC (base) BK031HA frasco 500g BK031GC embalagem 5 Kg (1) cultura Solução de Dcicloserina Suplemento Seletivo D cicloserina 200mg BS flaconetes qsp 500mg Reagente de confirmação (A) Meio tioglicolato líquido Caldo tioglicolato com resazurina BK017HA frasco 500g BK017GC embalagem 5 Kg BM tubos 10 ml (1) Meio lactose sulfito Caldo LactoseSulfito BK140HA frasco 500g (1) Solução de bissulfito dissódico anidro Solução de citrato de ferro III amoniacal Reagente de confirmação (B) Sangue desfibrinado de cavalo ou de ovelha Meio nitrato motilidade Reagente para a pesquisa de nitrito Solução de ácido 5amino2 naftalenosulfônico (52ANSA) Solução de ácido sulfanílico Zinco pulverizado Meio lactose à gelatina (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína.

11 NF ISO 4834/FIL 73B T (Julho 2006) Método horizontal para a contagem de coliformes Método por contagem de colônias Princípios: Incubação à 30 ou 37ºC por 24 horas. Confirmação se necessário do número de colônias por fermentação da lactose à 30 ou 37ºC por 24 horas. Diluente Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. Meio seletivo sólido Ágar lactose bile com cristal violeta e vermelho neutro (VRBL) Ágar Bile Vermelho Violeta (VRBL) BK152HA frasco 500g BK152GC embalagem 5 Kg BM flaconetes 100 ml BM flaconetes 200 ml confirmação Caldo lactose bile verde brilhante Caldo lactose bile verde brilhante (BLBVB) BK002HA frasco 500g BM tubos 10 ml com cloro (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína.

12 NF ISO 4831/FIL 73B V Método horizontal para a pesquisa e a contagem de coliformes Técnica do número mais provável (Outubro 2006) Princípios: Enriquecimento seletivo à 30 ou 37ºC por 24 à 48 horas. Semeadura de um meio de confirmação a partir da cultura com desordem e/ou uma produção de gás seguida de incubação à 30 ou 37ºC por 24 à 48 horas. Diluente Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. enriquecimento Caldo com triptose e lauril sulfato Caldo LaurilsulfatoTriptose BK010HA frasco 500g com cloro BM tubos 10 ml com cloro (concentração simples) BM tubos 10 ml com cloro (concentração dupla) (1) confirmação Caldo lactose bile verde brilhante Caldo lactose bile verde brilhante (BLBVB) BK002HA frasco 500g BM tubos 10 ml com cloro (2) (1) Presença de uma Triptona ao invés de digestão enzimática de leite e proteínas animais. (2) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. NF V V Contagem de coliformes presuntivos por contagem de colônias obtidas à 30ºC (Abril 2009) Princípios: Semeadura em profundidade. Incubação à 30ºC por 24 ± 2 horas. Diluente Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. cultura Ágar lactose bile com cristal violeta e vermelho neutro (VRBL) Ágar Bile Vermelho Violeta (VRBL) BK152HA frasco 500g BK152GC embalagem 5 Kg BM flaconetes 100 ml BM flaconetes 200 ml

13 NF V V (Abril 2009) Enumeração dos coliformes termorresistentes por contagem de colônias obtidas à 44ºC Princípios: Semeadura em profundidade. Incubação à 30ºC por 24 ± 2 horas. Diluente Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. cultura Ágar lactose bile com cristal violeta e vermelho neutro (VRBL) Ágar Bile Vermelho Violeta (VRBL) BK152HA frasco 500g BK152GC embalagem 5 Kg BM flaconetes 100 ml BM flaconetes 200 ml

14 NF ISO V (Dezembro 2004) Método horizontal para a pesquisa e contagem de Enterobacteriaceae Parte 1: pesquisa e contagem através da técnica NPP com préenriquecimento. Princípios: Préenriquecimento em meio não seletivo líquido à 37 ou 30ºC (1) por 18 ± 2 horas. Enriquecimento seletivo líquido à 37 ou 30ºC (1) por 18 ± 2 horas. Isolamento seletivo à 37 ou 30ºC (1) por 18 ± 2 horas. Confirmação por repique em meio não seletivo, testando a fermentação de glicose e pesquisa de oxidase. Diluente Meio líquido de enriquecimento seletivo Meio seletivo sólido Meios e reagentes de confirmação confirmação Solução de água peptonada tamponada EPT (20g/L) (2) BK131HA frasco 500g BK131GC embalagem 5 Kg EPT (25g/L) (3) BK018HA frasco 500g BK018GC embalagem 5 Kg BM flaconetes 225 ml BM tubos 9 ml BM flaconetes 90 ml BM embalagens 3 L BM embalagens 2 L Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. Caldo tamponado bile, verde brilhante com glicose (meio EE) Ágar bile, cristal violeta e glicose Ágar Nutriente Dicloridrato de N, N, N',Ntetrametilpfenileno diamina Ágar glicose Caldo de enriquecimento para Enterobactérias (EE segundo MOSSEL) BK127HA frasco 500g Ágar VRBG BK011HA frasco 500g BK011GC embalagem 5 Kg BM flaconetes 200 ml Ágar Nutriente à 2% BK185HA frasco 500g BM tubos 18 ml Ágar Glicose BM tubos 10 ml Parcial (4) Equivalente (5) (1) A temperatura de 30ºC pode ser escolhida quando a contagem das enterobactérias é realizada num contexto de um procedimento tecnológico e compreende as enterobactérias psicotróficas. (2) Fórmula inclui 9,0 g/l de fosfato dissódico dodecaidratado (massa molar 358,14). (3) Fórmula inclui 3,56 g/l de fosfato dissódico anidro (massa molar 141,96). (4) Fórmula contém 10 g/l de peptona pancreática de carne ao invés de digestão enzimática de tecidos animais descritos e 15 mg/l de Verde Brilhante ao invés de 0,0135 g/l descrito. (5) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína.

15 NF ISO V (Dezembro 2004) Método horizontal para a pesquisa e contagem de Enterobacteriaceae Parte 2: método para contagem de colônias. Princípios: Isolamento seletivo à 37 ou 30ºC (1) por 18 ± 2 horas. Confirmação por repique em meio não seletivo, testando a fermentação de glicose e pesquisa de oxidase. Diluente Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. Meio seletivo sólido Meios e reagentes de confirmação confirmação Ágar bile, cristal violeta e glicose Ágar Nutriente Dicloridrato de N, N, N',Ntetrametilpfenileno diamina Ágar Glicose Ágar VRBG BK011HA frasco 500g BK011GC embalagem 5 Kg BM flaconetes 200 ml Ágar Nutriente à 2% BK185HA frasco 500g BM tubos 18 ml Ágar Glicose BM tubos 10 ml Equivalente (5) (1) A temperatura de 30ºC pode ser escolhida quando a contagem das enterobactérias é realizada num contexto de um procedimento tecnológico e compreende as enterobactérias psicotróficas. (2) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. NF V V (Abril 2009) Pesquisa e Contagem dos esporos de microrganismos anaeróbicos sulfito redutase (Clostridia) Parte 1: Método através de filtração por membrana Princípios: Semeadura em profundidade. Incubação à 30 ou 37ºC por 24 ± 2 horas. Diluente Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. cultura Ágar bile com cristal violeta e glicose (VRBG) Ágar VRBG BK011HA frasco 500g BK011GC embalagem 5 K BM flaconetes 200 ml

16 NF ISO V Método horizontal para a contagem de Escherichia coli βglicuronidase + Parte 1: técnica da contagem de colônias à 44ºC através de membranas e de 5 bromo4cloro3indolil βdglicuronato (Agosto 2001) Princípios: Semeadura em membrana de celulose posto sobre o meio MMGA e incubação por 4 horas à 37ºC. Isolamento por transferência da membrana sobre meio TBX, e incubação por 18 à 24 horas à 44ºC. Diluente Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. cultura Meio com glutamato modificado Meio seletivo Meio triptonabileglicuronato (TBX) Ágar TBX BK146HA frasco 500g BK146HM frasco 100g BM flaconetes 100 ml BM flaconetes 200 ml (1) (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. NF ISO V Método horizontal para a contagem de Escherichia coli βglicuronidase + Parte 2: técnica da contagem de colônias à 44ºC através de 5 bromo4cloro 3indolil βdglicuronato (Julho 2001) Princípios: Semeadura em profundidade. Incubação à 44ºC por 18 à 24 horas. Diluente Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. Meio seletivo Meio triptonabileglicuronato (TBX) Ágar TBX BK146HA frasco 500g BK146HM frasco 100g BM flaconetes 100 ml BM flaconetes 200 ml (1) (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína.

17 NF ISO V Método horizontal para a contagem de Escherichia coli βglicuronidase + Parte 3: técnica do número mais provável utilizando 5 bromo4cloro3 indolil βdglicuronato (Dezembro 2005) Princípios: Enriquecimento seletivo à 37 por 24 ± 2 horas. Para cada tubo que apresentar uma produção ácida, colocar em subcultura à 44ºC por 20 à 24 horas. Diluente Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. cultura Meio com glutamato modificado Caldo de glutamato BK186HA frasco 500g Meio seletivo Meio triptonabileglicuronato (TBX) Ágar TBX BK146HA frasco 500g BK146HM frasco 100g BM flaconetes 100 ml BM flaconetes 200 ml (1) (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína.

18 NF EN ISO V (Julho 2001) Método horizontal para a pesquisa de Escherichia coli O157 Princípios: Enriquecimento à 41,5 ± 1ºC por 6 horas seguido por repetição de 12 à 18 horas. Separação e concentração dos microrganismos através de anticorpos bile imunomagnéticos revestidos por antie. Coli O157. Isolamento por cultura secundária de bile imunomagnéticos com captura de bactérias em ágar MacConkey com sorbitolcefixime telurito (CTSMAC) e, a escolha do laboratório, um segundo ágar de isolamento seletivo. Confirmação das colônias sorbitol negativas isoladas por CTSMAC e das colônias características de E. coli O157 isoladas no segundo meio de isolamento, para a pesquisa de produção de indol e de aglutinação em soro antie. coli O157. enriquecimento Separação imunomagnética (IMS) Primeiro meio de isolamento seletivo Caldo Triptona de soja modificado (mtsb) Solução de Novobiocina Bile imunomagnético antie. coli O157 Tampão fosfato modificado 0,01 ml/l ph 7,2 base Solução de bissulfito dissódico anidrotelurito de potássio Solução de cefixima Caldo Triptona de Soja modificado (mtsb base) BK150HA frasco 500g BK031GC embalagem 5 Kg Suplemento Seletivo Novobiocina (10 mg) BS flaconetes Suplemento Seletivo Novobiocina (40 mg) BS flaconetes Ágar MacConkey Sorbitol (CT SMAC base) BK147HA frasco 500g (1) Suplemento cefiximatelurito para ágar CTSMAC BS flaconetes qsp 500 ml (1) (1) Segundo meio subcultura À escolha do laboratório Ágar nutriente Ágar Nutriente à 2% BK18508 frasco 500g BM tubos 18 ml Confirmação Meio triptona/triptofano Caldo com Triptofano BK163HA frasco 500g BM tubos 3 ml Confirmação Reagente de Kovacs para pesquisa de indol Identificação sorológica Solução salina Soro antie. coli O157 (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (1)

19 NF ISO 7251 V Método horizontal para a pesquisa e contagem de Escherichia coli presuntiva Técnica do número mais provável (Julho 2005) Princípios: Enriquecimento seletivo à 37 por 48 horas para o método de pesquisa. Enriquecimento seletivo dos meios simples e dupla concentração para o método de contagem. Para cada tubo que apresentar um aspecto turvo, opaco ou degeneração gasosa, fazer uma subcultura em meio seletivo líquido à 44ºC por 48 horas. Se uma degeneração de gás for observada, realizar uma subcultura com água peptonada livre de indol à 44ºC por 48 horas. Exame da produção de indol resultante da degradação do triptofano dos constituintes das peptonas. Diluente Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. enriquecimento seletivo Caldo lauril sulfato Caldo LaurilsulfatoTriptose BK010HA frasco 500g BM tubos 10 ml com cloro (concentração simples) BM tubos 10 ml com cloro (concentração dupla) (1) Meio seletivo Caldo EC Caldo EC BK162HA frasco 500g (1) Exame para a produção de indol Exame para a produção de indol Água peptonada sem indol Reagente de Kovacs para pesquisa de indol Água Peptonada sem indol BK084HA frasco 500g (1) (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína.

20 NF V08036 V Método horizontal para a contagem de leveduras e fungos que se desenvolvem em produtos com baixa atividade de água (Maio 2003) Princípios: Semeadura em profundidade. Incubação à 25ºC por 5 dias. Diluente Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. (1) cultura Meio dicloran à 18% com glicerina (DG) Meio DicloranGlicerina (DG 18) (base) BK170HA frasco 500g BM flaconetes 100 ml (2) (3) (1) A adição de Tween 80 ao meio líquido de diluição escolhido, a uma concentração de 0,033 g/l, pode facilitar a enumeração dos fungos. (2) A forma desidratada necessita da adição de 220 g de glicerina por litro de ágar base. (3) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína.

21 NF ISO V (Novembro 2008) Método horizontal para a contagem de leveduras e fungos Parte 1: Técnica para contagem de colônias em produtos com atividade de água superior à 0,95 Princípios: Semeadura em superfície. Incubação à 25 ± 1ºC por 5 dias em anaerobiose. Diluente cultura Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. (1) (2) Água peptonada 0,1% Meio dicloranrosa bengalacloranfenicol Água Peptonada BM embalagens 5 L Ágar DicloranRosa Bengala Cloranfenicol BK198HA frasco 500g BM flaconetes 200 ml (7) (3) Adição facultativa de cloridrato de clortetraciclina (4) Adição facultativa de elementos traço (5) Adição facultativa de Tergitol (6) (1) A adição de Tween 80 ao meio líquido de diluição escolhido, a uma concentração de 0,033 g/l, pode facilitar a enumeração dos fungos. (2) Exceto em casos de uma preparação específica de amostra para o ensaio, é recomendado a utilização de água peptonada à 0,1% (concentração em massa) como diluente. (3) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (4) Quando a proliferação bacteriana pode representar um problema, é recomendada a utilização de cloranfenicol (50 mg/l) e clortetraciclina (50 mg/l). (5) Para que os fungos apresentem toda a sua morfologia, 1 ml de uma solução de elementos traço (ZnSO 4.7H 2Og; CuSO 4.5H 2Og; qsp 100 ml H 2O) pode ser adicionada à 1L de meio. (6) Afim de evitar a proliferação de certos microrganismos (Mucoraceae) é recomendada a adição de Tergitol (1 ml/l) ao meio de cultura. (7) A fórmula completa inclui 50 mg/l de cloranfenicol, 50 mg/l de cloridrato de clortetraciclina, 1 mg/l de ZnSO 4.7H 2Og; CuSO 4.5H 2Og e 1mL/L de tergitol.

22 NF ISO V (Novembro 2008) Método horizontal para a contagem de leveduras e fungos Parte 2: Técnica para contagem de colônias em produtos com atividade de água inferior à 0,95 Princípios: Semeadura em superfície. Incubação à 25 ± 1ºC por 5 à 7 dias em anaerobiose. Diluente cultura Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. (1) (2) (3) Água peptonada 0,1% Meio dicloran à 18% com glicerina (DG) Água Peptonada BM embalagens 5 L Meio DicloranGlicerina (DG 18) (base) BK170HA frasco 500g BM flaconetes 100 ml (4) (4) (5) Adição facultativa de cloridrato de clortetraciclina (6) Adição facultativa de elementos traço (7) (1) A adição de Tween 80 ao meio líquido de diluição escolhido, a uma concentração de 0,033 g/l, pode facilitar a enumeração dos fungos. (2) A utilização de um diluente que comporte uma quantidade suficiente de soluto (20 à 30% de glicerina ou de Dglicose) é recomendada para reduzir o choque osmótico dos fungos xerófilos e das leveduras osmófilas quando as diluições em série são realisadas. (3) Exceto em casos de uma preparação específica de amostra para o ensaio, é recomendado a utilização de água peptonada à 0,1% (concentração em massa) como diluente. (4) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (5) A apresentação comercial desidratada necessita da adição de 220 g de glicerina por litro de ágar abse. (6) Quando a proliferação bacteriana pode representar um problema, é recomendada a utilização de cloranfenicol (50 mg/l) e clortetraciclina (50 mg/l). (7) Para que os fungos apresentem toda a sua morfologia, 1 ml de uma solução de elementos traço (ZnSO 4.7H 2Og; CuSO 4.5H 2Og; qsp 100 ml H 2O) pode ser adicionada à 1L de meio.

23 NF EN ISO V (Fevereiro 1997) Método horizontal para a pesquisa e contagem de Listeria monocytogenes Parte 1: Método de pesquisa. Princípios: Enriquecimento primário em meio seletivo com concentração reduzida de agentes seletivos à 30ºC por 24 horas. Enriquecimento secundário em meio seletivo líquido com concentração completa de agentes seletivos à 35 ou 37ºC por 48 horas. Isolamento seletivo à 30, 35 ou 37ºC e exame após 24 horas e, se necessário, após 48 horas. Confirmação por meio de ensaios bioquímicos, fisiológicos e morfológicos apropriados. v Caldo DemiFraser (meio de base) Solução de cloreto de lítio Solução de sal de sódio de ácido nalidíxico Solução de cloridrato de acriflavina Caldo DemiFraser (base sem citrato de ferro III amoniacal) BK173HA frasco 500g BK173GC embalagem 5 Kg Caldo DemiFraser (base sem citrato de ferro III amoniacal, nem ácido nalidíxico, nem acriflavina) BK133HA frasco 500g BK133GC embalagem 5 Kg (1) enriquecimento seletivo primário Solução de citrato de ferro III amoniacal Suplemento Seletivo para Caldo DemiFraser BS flaconetes qp 500 ml BS flaconetes qsp 2,25L Solução estéril de Citrato férrico amoniacal à 5% BS flaconetes 90 ml BS tubos 10 ml Meio completo Caldo DemiFraser (pronto para uso) BM flaconetes 225 ml BM embalagens 3 L BM embalagens 5 L (1) enriquecimento seletivo secundário Caldo Fraser (meio de base) Solução de cloreto de lítio Solução de sal de sódio de ácido nalidíxico Solução de cloridrato de acriflavina Caldo Fraser (base sem citrato de ferro III amoniacal) BK115HA frasco 500g Caldo Fraser (base sem citrato de ferro III amoniacal, nem ácido nalidíxico, nem acriflavina) BK133HA frasco 500g BK133GC embalagem 5 Kg Suplemento Seletivo para Caldo Fraser BS flaconetes qp 500 ml (1)

24 Solução de citrato de ferro III amoniacal Solução estéril de Citrato férrico amoniacal à 5% BS flaconetes 90 ml BS tubos 10 ml Meio completo Caldo Fraser (pronto para uso) BM tubos 10 ml (1) Primeiro meio: Ágar Oxford Ágar OXFORD (base) BK110HA frasco 500g (2) isolamento seletivo Suplemento para Ágar Oxford Segundo meio: Ágar PALCAM Solução de sulfato de polimixina B Solução de cloridrato de acriflavina Solução de ceftazidima de sódio pentaidratada Suplemento Seletivo para Ágar OXFORD (CCCFA) BS flaconetes qsp 500 ml Ágar PALCAM (base) BK145HA frasco 500g Suplemento Seletivo para Ágar PALCAM BS flaconetes qsp 500 ml BS flaconetes qsp 2,25 L (2) Confirmação Ágar sangue de ovelha Caldo para a utilização de carboidratos Meio e cultura de CAMP Meio completo Ágar triptona de soja extrato de levedura (TSYEA) Caldo triptona de soja extrato de levedura (TSYEB) base Sangue desfibrinado de ovelha base Solução de carboidratos Ágar PALMAN (pronto para uso) BM placas Ø 90 mm Triptona Soja (base para ágar sangue) BK028HA frasco 500g (2) Equivalente Ágar motilidade base Meio com sangue de ovelha Triptona Soja (base para ágar sangue) BK028HA frasco 500g Equivalente Solução de peróxido de hidrogênio Tampão PBS

25 NF EN ISO /A1 V /A1 NF EN ISO Parte 1 EMENDA 1: Modificação dos meios de isolamento, para a pesquisa de hemólise e introdução de dados sobre a precisão (Fevereiro 2004) isolamento seletivo Primeiro meio: Ágar Listeria segundo Ottaviani e Agosti. COMPASS Listeria Ágar BM placas Ø 90 mm BM placas Ø 90 mm BT flaconetes 200 ml + suplementos (3) Segundo meio: segundo o laboratório. (1) A fórmula inclui 9,60 g/l de fosfato dissódico anidro ao invés de 12 g/l de L d'hidrogenofosfato dissódico diidratado descrito. (2) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (3) ALOA é um exemplo de meio apropriado disponível no mercado. Esta informação é dada com a intenção de utilização da ISO e não significa que os meios não recomendados pela ISO que não foram citados acima não devem ser utilizados.

26 NF EN ISO V (Agosto 1998) Método horizontal para a pesquisa e contagem de Listeria monocytogenes Parte 2: Método de contagem. Princípios: Revivificação por 1 hora à 20ºC. Semeadura em meio sólido e incubação à 35 ou 37 ºC e avaliação em 24 e 48 horas. Confirmação das colônias presuntivas de L. monocytogenes. Diluente Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. Solução de água peptonada tamponada EPT (20g/L) (1) BK131HA frasco 500g BK131GC embalagem 5 Kg EPT (25g/L) (2) BK018HA frasco 500g BK018GC embalagem 5 Kg BM flaconetes 225 ml BM tubos 9 ml BM flaconetes 90 ml BM embalagens 3 L BM embalagens 2 L (1) enriquecimento seletivo Caldo DemiFraser (meio de base) Caldo DemiFraser (base sem citrato de ferro III amoniacal) BK173HA frasco 500g BK173GC embalagem 5 Kg Caldo DemiFraser (base sem citrato de ferro III amoniacal, nem ácido nalidíxico, nem acriflavina) BK133HA frasco 500g BK133GC embalagem 5 Kg (2) Solução de citrato de ferro III amoniacal Solução estéril de Citrato férrico amoniacal à 5% BS flaconetes 90 ml BS tubos 10 ml isolamento seletivo Segundo meio: Ágar PALCAM Solução de sulfato de polimixina B Solução de cloridrato de acriflavina Solução de ceftazidima de sódio pentaidratada Meio completo Ágar PALCAM (base) BK145HA frasco 500g Suplemento Seletivo para Ágar PALCAM BS flaconetes qsp 500 ml BS flaconetes qsp 2,25 L Ágar PALMAN (pronto para uso) BM placas Ø 90 mm (1) (1) Confirmação Ágar triptona de soja extrato de levedura (TSYEA) Caldo triptona de soja extrato de levedura (TSYEB) Ágar sangue de ovelha base Triptona Soja (base para ágar sangue) BK028HA frasco 500g Equivalente

27 Caldo para a utilização de carboidratos Meio e cultura de CAMP Sangue desfibrinado de ovelha base Solução de carboidratos Ágar motilidade base Meio com sangue de ovelha Triptona Soja (base para ágar sangue) BK028HA frasco 500g Equivalente Solução de peróxido de hidrogênio Tampão PBS NF EN ISO /A1 V /A1 NF EN ISO Parte 2 EMENDA 1: Modificação do meio de isolamento (Fevereiro 2004) isolamento seletivo Primeiro meio: Ágar Listeria segundo Ottaviani e Agosti. COMPASS Listeria Ágar BM placas Ø 90 mm BM placas Ø 90 mm BT flaconetes 200 ml + suplementos (3) (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (2) A fórmula inclui 9,60 g/l de fosfato dissódico anidro ao invés de 12 g/l de L d'hidrogenofosfato dissódico diidratado descrito. (3) ALOA é um exemplo de meio apropriado disponível no mercado. Esta informação é dada com a intenção de utilização da ISO e não significa que os meios não recomendados pela ISO que não foram citados acima não devem ser utilizados.

28 NF EN ISO 6579 V Método horizontal para a pesquisa de Salmonella spp. (Dezembro 2002) Princípios: Préenriquecimento em meio não seletivo líquido à 37 ± 1ºC por 18 ± 2 horas. Enriquecimento em meio seletivo líquido à 41,5 ± 1ºC e 37 ± 1ºC por 24 ± 3 horas. Semeadura em dois meios sólidos, XLD e um outro meio sólido apropriado, em complemento do XLD. Incubação do primeiro meio à 37 ± 1ºC por 24 ± 3 horas e do segundo meio seletivo segundo as recomendações do fabricante. Confirmação por meio de ensaios bioquímicos e sorológicos apropriados. préenriquecimen to não seletivo Solução de água peptonada tamponada EPT (20g/L) (1) BK131HA frasco 500g BK131GC embalagem 5 Kg EPT (25g/L) (2) BK018HA frasco 500g BK018GC embalagem 5 Kg BM flaconetes 225 ml BM tubos 9 ml BM flaconetes 90 ml BM embalagens 3 L BM embalagens 2 L Primeiro meio de enriquecimen to seletivo Primeiro meio de enriquecimen to seletivo Caldo RappaportVassiliadis Soja (Caldo RVS) Caldo MullerKauffmann com tetrationato novobiocina (MKTTn) (base) Solução de iodoiodeto Solução de Novobiocina Meio completo Caldo RappaportVassiliadis Soja (Caldo RVS) BK148HA frasco 500g BM tubos 10 ml Caldo MullerKauffmann com tetrationato novobiocina (base MKTTn sem iodo, sem novobiocina) BK169HA frasco 500g Caldo MullerKauffmann com tetrationato novobiocina (base MKTTn sem iodo) BK028HA frasco 500g Suplemento Seletivo Novobiocina (10 mg) BS flaconetes qsp 250 ml Suplemento Seletivo Novobiocina (40 mg) BS flaconetes qsp 1L Caldo MullerKauffmann com tetrationato novobiocina (pronto para uso) BM tubos 10 ml (3) (4)

29 isolamento subcultura Reagente de confirmação Ágar Xilose Lisina Desoxicolato (XLD) Ágar Nutriente Ágar citrato de ferro com 3 açúcares (Ágar TSI) Ágar Uréia (Christensen) (base) Ágar XLD (ISO 6579) BK168HA frasco 500g BM placas Ø 90 mm O segundo meio é a escolha do laboratório. Ágar Nutriente à 2% BK185HA frasco 500g Bm tubos 18 ml Ágar TSI BK059HA frasco 500g (4) (4) (6) Solução de uréia Meio para descarboxilação de β galactosidase Solução tampão Solução d'onpg VogesProskauer (VP) Solução de creatina Solução de 1naftol em etanol Solução de hidróxido de potássio Meio triptonatriptofano Caldo Triptofano BK163HA frasco 500g BM tubos 3 ml (4) Reagente de Kovacs Ágar nutriente semisólido Solução salina fisiológica (1) Fórmula inclui 9,0 g/l de fosfato dissódico dodecaidratado (massa molar 358,14). (2) Fórmula inclui 3,56 g/l de fosfato dissódico anidro (massa molar 141,96). (3) Fórmula inclui cloreto de magnésio anidro ao invés da forma hexaidratada descrita. (4) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (5) Sua qualidade intrínseca deve ser complementada por aquelas do ágar XLD e permitir a detecção de Salmonella lactose + (incluindo typhi e paratyphi). (6) Triptose 14 g/l ao invés de 20 g/l de peptona descrito. NF EN ISO 6579/A1 V /A1 NF EN ISO 6579 EMENDA 1 Anexo D: Pesquisa de Salmonella spp. em fezes de animais e em amostras ambientais em estado de produção primária (Outubro 2007) isolamento seletivo Meio semisólido de Rappaport Vassiliadis modificado (MRSV) Ágar MRSV (ISO 6579) BK191HA frasco 500g BM flaconetes 200 ml

30 NF EN ISO V 08 *Disponíveis 411 no Brasil Método os meios horizontal desidratados. para a pesquisa de Shigella spp. (Março 2005) Princípios: Enriquecimento seletivo em anaerobiose à 41,5 ± 1ºC por 16 à 20 horas. Isolamento em 3 meios de cultura diferentes à 37 ± 1ºC por 20 à 24 horas. Confirmação por ensaios bioquímicos e sorológicos apropriados. enriquecimento Caldo Shigella Solução de Novobiocina Suplemento Seletivo Novobiocina (10 mg) BS flaconetes qsp 250 ml Suplemento Seletivo Novobiocina (40 mg) BS flaconetes qsp 1L isolamento Ágar MacConkey Ágar Xilose Desoxicolato (XLD) Ágar MacConkey BK050HA frasco 500g Ágar XLD (ISO 6579) BK168HA frasco 500g (1) Ágar Entérico Hektoen (HE) Ágar Hektoen BK067HA frasco 500g Parcial Ágar Nutriente Ágar Nutriente à 2% BK185HA frasco 500g (1) Ágar Triplo AçúcarFerro (TSI) Ágar TSI BK059HA frasco 500g Parcial (1)(3) Ágar Nutriente semisólido Ágar Uréia (base) Reagentes de confirmação (ensaios bioquímicos) Solução de Uréia descarboxilação de L lisina descarboxilação de L ornitina Reagente para ensaio de indol Meio triptona/dltriptofano Reagente indol de Kovacs Reagente β galactosidase Solução tampão Solução salina Caldo roxo de bromocresol

31 Ágar acetato de sódio Ágar Citrato Christensen Caldo Mucato Caldo de ensaio Caldo controle Antisoro de Shigella spp. (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (2) Taxa de fucsina ácida à 40 mg/l, ao invés de 0,1g/L descrito. (3) Taxa de triptona à 14 g/l ao invés de 20 g/l da peptona descrita.

32 NF EN ISO V Método horizontal para a contagem de estafilococos coagulase + (Staphylococcus aureus e outras espécies) Parte 1: técnica utilizando ágar BairdParker (Fevereiro 1999) Princípios: Semeadura em superfície. Incubação à 35 ou 37ºC (1) e leitura dos resultados em 24 e 48 horas. Confirmação por pesquisa de coagulase. Diluente Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. Ágar BairdParker meio base Ágar BAIRDPARKER (base) BK055HA frasco 500g BK055GC embalagem 5 Kg (2) Ágar Solução de telurito de potássio Emulsão de gema de ovo Solução de sulfametazina (sulfametazina, sulfadimidina) (3) Emulsão de gema de ovo com telurito de potássio BS flaconetes 50 ml Suplemento Seletivo Sulfametazina 25 mg BS flaconetes qsp 500 ml Meio completo Meio completo BAIRDPARKER gema de ovo telurito BM placas Ø 90 mm BM placas Ø 90 mm Reagente de confirmação Caldo cérebrocoração Caldo CérebroCoração BK015HA frasco 500g Parcial (4) Plasma de coelho Plasma de coelho liofilizado BR frascos / 20 reações (1) A temperatura está sujeita a um acordo entre as partes interessadas e é indicada no relatório de ensaio. (2) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (3) Aditivo facultativo, justificado pela suspeita de presença de Proteus. (4) Presença de peptona pancreática de gelatina ao invés de tecido animal digerido enzimaticamente.

33 NF EN ISO V Método horizontal para a contagem de estafilococos coagulase + (Staphylococcus aureus e outras espécies) Parte 1: técnica utilizando ágar com plasma de coelho e fibrinogênio E (Outubro 1999) Princípios: Semeadura em profundidade. Incubação à 35 ou 37ºC (1) e leitura por 18 à 24 horas e, se necessário, prolongamento por mais 24 horas. Diluente Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. base Ágar com plasma de coelho e fibrinogênio Ágar BAIRDPARKER (base) BK055HA frasco 500g BK055GC embalagem 5 Kg (2) Ágar Solução de telurito de potássio Solução de fibrinogênio bovino Solução de plasma de coelho e inibidor de tripsina Suplemento Plasma de Coelho Fibrinogênio BS flaconetes qsp 100 ml BS flaconetes qsp 500 ml Meio completo Meio completo BAIRDPARKER BT00508 kit 6 frascos 90 ml + 6 suplementos qsp 100 ml BT01008 kit 6 frascos 190 ml + 6 suplementos qsp 200 ml BM placas Ø 90 mm BM placas Ø 55 mm (2) (1) A temperatura está sujeita a um acordo entre as partes interessadas e é indicada no relatório de ensaio. (2) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína.

34 NF EN ISO V Método horizontal para a contagem de estafilococos coagulase + (Staphylococcus aureus e outras espécies) Parte 3: pesquisa pelo método NPP para carga bacteriana baixa (Junho 2003) Princípios: Enriquecimento seletivo em anaerobiose à 37ºC por 24 à 48 horas. Semeadura para meio seletivo depois de 24 horas a partir dos tubos que apresentaram redução de telurito e depois de 48 horas para os outros. Incubação à 37ºC por 24 à 48 horas. Confirmação por uma reação de coagulase. Diluente enriquecimento Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. Caldo de Giolitti e Cantoni modificado base concentração simples Caldo de Giolitti e Cantoni modificado base concentração dupla Caldo GIOLITTI e CANTONI com Tween 80 BK159HA frasco 500g Caldo GIOLITTI e CANTONI com Tween 80 BK159HA frasco 500g (1) (1) Solução de telurito de potássio Ágar Solução Ágar Solução (20 g/l) Ágar bacteriológico tipo A A1010HA frasco 500g A1010GC embalagem 5 Kg Ágar bacteriológico tipo E A1012HA frasco 500g A1012GC embalagem 5 Kg Ágar BairdParker meio base Ágar BAIRDPARKER (base) BK055HA frasco 500g BK055GC embalagem 5 Kg (1) Ágar Solução de telurito de potássio Emulsão de gema de ovo Solução de sulfametazina (sulfametazina, sulfadimidina) (3) Emulsão de gema de ovo com telurito de potássio BS flaconetes 50 ml Suplemento Seletivo Sulfametazina 25 mg BS flaconetes qsp 500 ml Meio completo Meio completo BAIRDPARKER gema de ovo telurito BM placas Ø 90 mm BM placas Ø 90 mm (1) Reagente de confirmação base Ágar com plasma de coelho e fibrinogênio Solução de telurito de potássio Solução de fibrinogênio bovino Solução de plasma de coelho e inibidor de tripsina Ágar BAIRDPARKER (base) BK055HA frasco 500g BK055GC embalagem 5 Kg Suplemento Plasma de Coelho Fibrinogênio BS flaconetes qsp 100 ml BS flaconetes qsp 500 ml (1)

35 Meio completo Meio completo BAIRDPARKER BT00508 kit 6 frascos 90 ml + 6 suplementos qsp 100 ml BT01008 kit 6 frascos 190 ml + 6 suplementos qsp 200 ml BM placas Ø 90 mm BM placas Ø 55 mm (1) Reagente de confirmação Caldo cérebrocoração Caldo CérebroCoração BK015HA frasco 500g (3) Reagente de confirmação Plasma de coelho Plasma de coelho liofilizado BR frascos / 20 reações (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (2) Aditivo facultativo, justificado pela suspeita de presença de Proteus. (3) Presença de peptona pancreática de gelatina ao invés de tecido animal digerido enzimaticamente.

36 NF ISO/TS V (Junho 2007) Método horizontal para a pesquisa de Vibrio spp potencialmente enteropatogênicos Parte 3: pesquisa de Vibrio parahaemolyticus e Vibrio cholerae Princípios: Enriquecimento seletivo à 37ºC por 6 ± 1 horas para produtos congelados ou 41,5ºC para produtos frescos. Enriquecimento seletivo secundário à 41,5ºC por 18 ± 1 horas (1). Semeadura em dois meios sólidos, TCBS e um outro meio sólido apropriado, em complemento do TCBS. Incubação do primeiro meio à 37ºC por 24 ± 3 horas e do segundo meio seletivo segundo as recomendações do fabricante. Confirmação por meio de ensaios bioquímicos apropriados. enriquecimento Primeiro meio de isolamento Água salina peptonada alcalina (EPAS) Ágar com tiossulfato, citrato, bile e sacarose (TCBS) Ágar TCBS BK040HA frasco 500g (2) subcultura Reagente para identificação presuntiva Reagente de confirmação Ágar salino nutritivo (GNS) Reagente para a pesquisa de oxidase Ágar salino com ferro e três açúcares Meio salino para a detecção de ornitina descarboxilase (ODC) Meio salino para a detecção de L lisina descarboxilase (LDC) Meio salino para a detecção de arginina diidrolase (ADH) Solução de ONPG Ágar TSI BK059HA frasco 500g Solução tampão Meio salino com triptofano Reagente de Kovacs Água peptona salina Solução de cloreto de sódio (1) A segunda etapa de enriquecimento é necessária para os produtos congelados, secos ou salinos. (2) Os 8 g/l de bile de carne são decompostos da seguinte maneira: 5g/L de bile de carne bacteriológica e 3 g/l de cloreto de sódio.

37 NF ISO/TS V (Junho 2007) Método horizontal para a pesquisa de Vibrio spp potencialmente enteropatogênicos Parte 2: pesquisa de outras espécies que não Vibrio parahaemolyticus e Vibrio cholerae Princípios: Enriquecimento seletivo à 37ºC por 6 ± 1 horas para produtos congelados ou 41,5ºC para produtos frescos. Enriquecimento seletivo secundário à 41,5ºC por 18 ± 1 horas (1). Semeadura em dois meios sólidos, TCBS e um outro meio sólido apropriado, em complemento do TCBS. Incubação do primeiro meio à 37ºC por 24 ± 3 horas e do segundo meio seletivo segundo as recomendações do fabricante. Confirmação por meio de ensaios bioquímicos apropriados. enriquecimento Primeiro meio de isolamento Água salina peptonada alcalina (EPAS) Ágar com tiossulfato, citrato, bile e sacarose (TCBS) Ágar TCBS BK040HA frasco 500g (2) subcultura Reagente para identificação presuntiva Reagente de confirmação Ágar salino nutritivo (GNS) Reagente para a pesquisa de oxidase Ágar salino com ferro e três açúcares Meio salino para a detecção de ornitina descarboxilase (ODC) Meio salino para a detecção de L lisina descarboxilase (LDC) Meio salino para a detecção de arginina diidrolase (ADH) Solução de ONPG Ágar TSI BK059HA frasco 500g Solução tampão Meio salino com triptofano Reagente de Kovacs Água peptona salina Solução de cloreto de sódio (1) A segunda etapa de enriquecimento é necessária para os produtos congelados, secos ou salinos. (2) Os 8 g/l de bile de carne são decompostos da seguinte maneira: 5g/L de bile de carne bacteriológica e 3 g/l de cloreto de sódio.

38 NF EN ISO V (Dezembro 2003) Método horizontal para a pesquisa de Yersinia enterocolitica presumivelmente patogênica Princípios: Enriquecimento seletivo em dois meios: caldo PBS à 25ºC por 3 à 5 dias e caldo ITC à 25ºC por 48 horas. Incubação dos dois meios à 30ºC, e análise depois de 24 e 48 horas. Confirmação por meio de ensaios bioquímicos, biotipagem, visando a pesquisa de critérios de patogenicidade e de eventuais ensaios sorológicos apropriados. Caldo peptona, sorbitol e sais biliares enriquecimento Caldo l'irgasan TM, ticarcilina e cloreto de potássio (ITC) meio base Solução de ticarcilina (1 mg/ml) Solução etanólica de l'irgasan TM Solução de cloreto de potássio (100 mg/ml) Ágar cefsulodina, l'irgasan TM, novobiocina (CIN) meio base Solução etanólica de l'irgasan TM isolamento Solução de cefsulodina (15 mg/ml) Solução de novobiocina (2,5 mg/ml) Ágar Salmonella/Shigella com desoxicolato de sódio e cloreto de cálcio (SSDC) Ágar Nutriente Ágar Nutriente 2% BK185HA frasco 500g (1) Meio e reagentes de identificação Meio uréiaindol Reagente de Kovacs Ágar Kligler Ágar de KLIGLER BK034HA frasco 500g Parcial (1)(2) Reagente para a pesquisa de oxidase descarboxilação de oxidase Meio para descarboxilação de lisina Meio para descarboxilação de ornitina

39 fermentação dos açúcares (ramnose, sacarose, trealose ou xilose) à 100 mg/ml Meio Citrato de Simmons Meio utilizado para os ensaios Tweenestearase Ágar triptonacaseínasoja Ágar triptonacaseínasoja para a pesquisa de pirazinamidase Solução de sulfato de ferro III amoniacal para a revelação da pirazinamidase Ágar triptonacaseínasoja com magnésio e oxalato meio base Solução de cloreto de magnésio Solução de oxalato de sódio Ágar triptocaseína de soja (TSA) BK047HA frasco 500g Ágar triptocaseína de soja (TSA) BK047HA frasco 500g (1) (1) Outros reagentes Outros reagentes Outros reagentes Outros reagentes Solução de glicose Solução de cloreto de sódio Solução de hidróxido de potássio e solução de cloreto de sódio Caldo infusão de pele de bezerro Glicerina estéril (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (2) Presença de citrato férrico amoniacal (0,5 g/l) ao invés de sulfato de ferro (III) (0,2 g/l) preconizado; taxa de tiossulfato de sódio à 0,5 g/l ao invés de 0,3 g/l preconizado.

40 NF EN ISO V (Setembro 2003) Método horizontal para a contagem de bactérias sultitoredutoras que se desenvolvem em condições anaeróbicas Princípios: Semeadura das massas em placa ou tubos. Incubação em anaerobiose à 37 ± 1ºC por 24 e 48 horas (leitura final 48h). Diluente Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. Solução peptonasalina Caldo TriptonaSal BK014HA frasco 500g Ágar Ágar Sulfito de Ferro Ágar TSC (base) BK031HA frasco 500g (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (2) Se forem utilizados tubos, a incubação em jarra de anaerobiose não é necessária. (1) (1) NF EN ISO V (Setembro 1998) Método horizontal para a contagem de bactérias mesófilas láticas Técnica por contagem de colônias à 30ºC Princípios: Semeadura em profundidade (eventualmente em superfície). Incubação em anaerobiose à 30ºC por 72 horas. Diluente Meio e cultura Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. Meio MRS (de Man, Rogosa e Sharpe) ph 5,7 Ágar MRS BK089HA frasco 500g Parcial (1) (2) (1) De Man, J.C., Rogosa, M., and Sharpe, M.E A medium for the cultivation of lactobacilli. J. App. Bacteriol., 23, (1): (2) Presença de polipetona (10 g/l) ao invés de caseína digerida enzimaticamente (10 g/l) preconizada e taxa de extrato (autolítico) de levedura à 5 g/l ao invés de 4 g/l preconizada.

41 NF V V (Dezembro 2009) Contagem de bactérias anaeróbicas sulfito redutoras Técnica por contagem de colônias à 46ºC Princípios: Semeadura em profundidade (placa ou tubos). Incubação em anaerobiose à 46ºC por 20 ± 2 horas. Diluente Meio e cultura Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. base Ágar triptonasulfito sem gema de ovo Solução de Dcicloserina Ágar TSC (base) BK031HA frasco 500g Suplemento Seletivo D cicloserina 200 mg BS flaconetes qsp 500 ml (1) (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. NF EN ISO 4833 V (Maio 2003) Método horizontal para a contagem de microrganismos Técnica por contagem de colônias à 30ºC Princípios: Semeadura em profundidade. Incubação em anaerobiose à 30ºC por 72 horas. Diluente Ágar revestimento duplo Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. Ágar contagem de placa (PCA) revestimento duplo (3) Ágar Contagem de Placa (PCA) BK144HA frasco 500g Ágar Contagem em leite desnatado (PCA) BK161HA frasco 500g Ágar bacteriológico tipo A A1010HA frasco 500g A1010GC embalagem 5 kg Ágar bacteriológico tipo E A1012HA frasco 500g A1012GC embalagem 5 kg (1) (1) (2) (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (2) Em caso de análise de produtos láticos. (3) Se necessário (no caso de microrganismos que invadem a superfície do ágar para contagem).

42 XP NF V XP V (Setembro 2010) Enumeração de microrganismos por contagem de colônias obtidas à 30ºC depois de semeadas pelo método espiral Princípios: Semeadura automática. Incubação em anaerobiose à 30ºC por 48 horas. Diluente Ágar Ágar não nutritivo dito ágar branco Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. Ágar contagem de placa (PCA) revestimento duplo (3) Ágar Contagem de Placa (PCA) BK144HA frasco 500g Ágar Contagem em leite desnatado (PCA) BK161HA frasco 500g Ágar bacteriológico tipo A A1010HA frasco 500g A1010GC embalagem 5 kg Ágar bacteriológico tipo E A1012HA frasco 500g A1012GC embalagem 5 kg (1) (1) (2) (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (2) Em caso de análise de produtos láticos. (3) Se necessário (no caso de microrganismos que invadem a superfície do ágar para contagem). NF ISO V Método horizontal para a contagem de microrganismos psicotróficos (Novembro 2001) Princípios: Semeadura em superfície. Incubação em anaerobiose à 6,5ºC por 10 dias. Diluente contagem Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. Ágar contagem de placa (PCA) Ágar Contagem de Placa (PCA) BK144HA frasco 500g Ágar Contagem em leite desnatado (PCA) BK161HA frasco 500g (1) (1) (2) (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (2) Em caso de análise de produtos láticos.

43 NF EN ISO V Preparação da amostra, da suspensão mãe e das diluições decimais para a análise de microrganismos Parte 1: regras gerais para a preparação da suspensão mãe e das diluições decimais. (Setembro 1999) Princípios: Preparação da suspensão mãe. Preparação, se necessário, das diluições decimais. Solução peptonasalina Caldo TriptonaSal BK014HA frasco 500g Diluentes de uso geral Solução de água peptonada tamponada EPT (20g/L) (2) BK131HA frasco 500g BK131GC embalagem 5 Kg EPT (25g/L) (3) BK018HA frasco 500g BK018GC embalagem 5 Kg BM flaconetes 225 ml BM tubos 9 ml BM flaconetes 90 ml BM embalagens 3 L BM embalagens 5 L (1) Diluentes para as Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. necessidades particulares (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (2) Fórmula inclui 9,0 g/l de fosfato dissódico dodecaidratado (massa molar 358,14). (3) Fórmula inclui 3,56 g/l de fosfato dissódico anidro (massa molar 141,96). NF EN ISO V Preparação da amostra, da suspensão mãe e das diluições decimais para a análise de microrganismos Parte 2: regras específicas para a preparação de carnes e derivados. (Janeiro 2004) Princípios: Preparação da suspensão mãe. Preparação de uma suspensão de préenriquecimento ou enriquecimento. Preparação, se necessário, das diluições decimais. Diluentes de uso geral Diluentes para as necessidades particulares Solução peptonasalina Água peptonada tamponada Solução peptonasalina Suplemento roxo de bromocresol Se refere à NF EN ISO :1999, 5.2. pg 56 Caldo TriptonaSal BK014HA frasco 500g (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (1)

44 NF EN ISO V Preparação da amostra, da suspensão mãe e das diluições decimais para a análise de microrganismos Parte 3: regras específicas para a preparação de peixe. (Janeiro 2004) Princípios: Preparação da suspensão mãe. Preparação de uma suspensão de préenriquecimento ou enriquecimento. Preparação, se necessário, das diluições decimais. Diluentes de uso geral Diluentes para as necessidades particulares Solução peptonasalina Água peptonada tamponada Solução peptonasalina com roxo de bromocresol meio base Suplemento roxo de bromocresol Se refere à NF EN ISO :1999, 5.2. pg 56 Caldo TriptonaSal BK014HA frasco 500g Solução de peptona Água Peptonada BM frascos 3 L (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (1) NF EN *Disponíveis ISO 68873no Brasil os meios desidratados. V Preparação da amostra, da suspensão mãe e das diluições decimais para a análise de microrganismos Parte 4: regras específicas para outros produtos que não leite, carne, peixe e derivados. (Janeiro 2004) Princípios: Preparação da suspensão mãe. Preparação de uma suspensão de préenriquecimento ou enriquecimento. Preparação, se necessário, das diluições decimais. Diluentes de uso geral Diluentes para as necessidades particulares Solução peptonasalina Água peptonada tamponada Solução peptonasalina com roxo de bromocresol meio base Suplemento roxo de bromocresol Se refere à NF EN ISO :1999, 5.2. pg 56 Caldo TriptonaSal BK014HA frasco 500g Solução de peptona Água Peptonada BM frascos 3 L (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (1)

45 NF EN ISO V Preparação da amostra, da suspensão mãe e das diluições decimais para a análise de microrganismos Parte 5: regras específicas para a preparação de leite e derivados. (Outubro 2010) Princípios: Preparação da suspensão mãe. Preparação, se necessário, das diluições decimais. Solução peptonasalina Caldo TriptonaSal BK014HA frasco 500g (1) Solução de Ringer diluída à ¼ Solução de Ringer à ¼ BR comprimidos Diluentes de uso geral Solução de peptonasalina Água Peptonada BM frascos 3 L (1) Solução tampão fosfato Água peptonada tamponada EPT (20g/L) (2) BK131HA frasco 500g BK131GC embalagem 5 Kg EPT (25g/L) (3) BK018HA frasco 500g BK018GC embalagem 5 Kg BM flaconetes 225 ml BM tubos 9 ml BM flaconetes 90 ml BM embalagens 3 L BM embalagens 5 L Diluentes para as necessidades particulares Solução de citrato de sódio Solução de hidrogênio fosfato dipotássico Solução de hidrogênio fosfato dipotássico com agente antiespumante Solução de tripolifosfato Diluente de uso geral com solução de α amilase Água peptonada tamponada com roxo de bromocresol meio base EPT (20g/L) (2) BK131HA frasco 500g BK131GC embalagem 5 Kg EPT (25g/L) (3) BK018HA frasco 500g BK018GC embalagem 5 Kg BM flaconetes 225 ml BM tubos 9 ml BM flaconetes 90 ml BM embalagens 3 L BM embalagens 5 L Suplemento roxo de bromocresol (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (2) Fórmula inclui 9,0 g/l de fosfato dissódico dodecaidratado (massa molar 358,14). (3) Fórmula inclui 3,56 g/l de fosfato dissódico anidro (massa molar 141,96). (1)

46 NF V V Método de rotina para a enumeração de estafilococos coagulase + por contagem de colônias à 37ºC Parte 1: técnica com confirmação de colônias. (Janeiro 2004) Princípios: Semeadura em superfície de um meio seletivo. Incubação à 37ºC em anaerobiose por 24 à 48 horas. Confirmação por ensaio de coagulase. Diluente Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. Ágar BairdParker meio base Ágar BAIRDPARKER (base) BK055HA frasco 500g BK055GC embalagem 5 Kg (1) Ágar Solução de telurito de potássio Emulsão de gema de ovo Solução de sulfametazina (sulfametazina, sulfadimidina) (3) Emulsão de gema de ovo com telurito de potássio BS flaconetes 50 ml Suplemento Seletivo Sulfametazina 25 mg BS flaconetes qsp 500 ml (1) Meio completo Meio completo BAIRDPARKER gema de ovo telurito BM placas Ø 90 mm BM placas Ø 90 mm (1) Meios e Reagentes de confirmação base Ágar com plasma de coelho e fibrinogênio Solução de telurito de potássio Solução de fibrinogênio bovino Solução de plasma de coelho e inibidor de tripsina Meio completo Ágar BAIRDPARKER (base) BK055HA frasco 500g BK055GC embalagem 5 Kg Suplemento Plasma de Coelho Fibrinogênio BS flaconetes qsp 100 ml BS flaconetes qsp 500 ml Meio completo BAIRDPARKER BT00508 kit 6 frascos 90 ml + 6 suplementos qsp 100 ml BT01008 kit 6 frascos 190 ml + 6 suplementos qsp 200 ml BM placas Ø 90 mm BM placas Ø 55 mm (1) (1) Reagente de confirmação Caldo cérebrocoração Caldo CérebroCoração BK015HA frasco 500g (3) Reagente de confirmação Plasma de coelho Plasma de coelho liofilizado BR frascos / 20 reações (1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína. (2) Aditivo facultativo, justificado pela suspeita de presença de Proteus. (3) Presença de peptona pancreática de gelatina ao invés de tecido animal digerido enzimaticamente.

47 NF V08059 V Método de rotina para a enumeração de fungos e leveduras por contagem de colônias à 25ºC (Novembro 2002) Princípios: Semeadura em profundidade de um meio de cultura. Incubação à 25ºC em anaerobiose por 5 dias. Diluente cultura Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. Ágar glicose com Cloranfenicol Ágar glicose com oxitetraciclina (1) Ágar Glicose com Cloranfenicol (YGC) BK007HA frasco 500g Ágar Glicose com Oxitetraciclina (base OGA) BK053HA frasco 500g Solução de gentamicina (2) Suplemento Seletivo Gentamicina 25 mg BS flaconetes (1) O cloranfenicol pode ser substituído por oxitetraciclina. (2) Adição facultativa, justificada pela suspeita da presença de contaminação por bactérias gram positivas.

48 ANEXO A: outras normas de referência em microbiologia de alimentos Técnica de amostragem de superfícies, através de placas de contato e swabs NF ISO T Dezembro 2004 Determinação da atividade da água NF ISO T Janeiro 2005 Exigências gerais e recomendações NF EN ISO 7218 T Outubro 2007 Diretrizes para a preparação e produção de meios de cultura. Parte 1: diretrizes gerais que garantem a qualidade através da preparação de meios de cultura em laboratórios Guia para a preparação e produção de meios de cultura. Parte 2: guia geral para os ensaios de desempenho dos meios de cultura Emenda 1: microrganismos por análise recomendada e meios de cultura mais usados XP CEN ISO/TS T Março 2009 XP CEN ISO/TS T Janeiro 2004 XP CEN ISO/TS (A1) T (A1) Fevereiro 2011

49 ANEXO B: Métodos alternativos rápidos em microbiologia de alimentos Método COMPASS Bacillus cereus Ágar Método de referência: NF EN ISO 7932, pg 6. Método de contagem de Bacillus cereus presuntivo sem confirmação em produtos de alimentação humana e animal. BKR 23/06 02/10 Métodos alternativos de análise para produtos agroalimentares. Princípios: semeadura em superfície ou profundidade de COMPASS Bacillus cereus Ágar à 30 ± 1ºC por 24 à 27 horas. Diluente Meio seletivo Se refere à parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto à ser analisado. COMPASS Bacillus cereus Ágar BM flaconetes 100 ml Suplemento Seletivo para COMPASS Bacillus cereus Ágar BS flaconetes qsp 100 ml COMPASS Bacillus cereus Ágar BM placas Ø 90 mm

50 Método COMPASS Listeria Ágar (pesquisa) Método de referência: NF EN ISO /A1, pg Método de pesquisa de Listeria monocytogenes em produtos de alimentação humana e amostras de meio ambiente. BKR 23/02 11/02 Métodos alternativos de análise para produtos agroalimentares. Princípios: enriquecimento em caldo DemiFRASER 24 ± 2 h à 30 ± 1ºC. semeadura em COMPASS Listeria Ágar e incubação à 37 ± 1ºC por 24 ± 2 horas. confirmação de uma colônia característica. Caldo DemiFRASER BK173HA frasco 500g BK173GC frasco 5 Kg BM frascos 225 ml BM frascos 3L BM frascos 5 L Suplemento Seletivo DemiFRASER BS frascos qsp 500 ml BS frascos qsp 2,25L COMPASS Listeria Ágar BM placas Ø 90 mm BM placas Ø 90 mm Kit COMPASS Listeria Ágar BT frascos 200 ml (R1), 6 frascos suplemento seletivo qsp 200 ml (R2), frascos suplemento seletivo qsp 200 ml (R3) CONFIRM' L. mono Caldo BM frascos Ágar BM placas Ø 90 mm Ágar PALCAM BK145HA frasco 500g BS frascos qsp 500 ml BS frascos qsp 2,5 L BM placas Ø 90 mm

51 Método COMPASS Listeria Ágar (contagem) Método de referência: NF EN ISO /A1, pg Método de contagem de Listeria monocytogenes em produtos de alimentação humana e amostras de meio ambiente. BKR 23/05 12/07 Métodos alternativos de análise para produtos agroalimentares. Princípios: suspensão em água peptonada tamponada. semeadura em COMPASS Listeria Ágar e incubação à 37 ± 1ºC e leitura depois de 48 ± 3 horas. confirmação de uma colônia característica por repique. EPT (20g/L) BK131HA frasco 500g BK131GC embalagem 5 Kg EPT (25g/L) BK018HA frasco 500g BK018GC embalagem 5 Kg BM flaconetes 225 ml BM tubos 9 ml BM flaconetes 90 ml BM embalagens 3 L BM embalagens 5 L COMPASS Listeria Ágar BM placas Ø 90 mm BM placas Ø 90 mm Kit COMPASS Listeria Ágar BT frascos 200 ml (R1), 6 frascos suplemento seletivo qsp 200 ml (R2), frascos suplemento seletivo qsp 200 ml (R3) CONFIRM' L. mono Caldo BM frascos Ágar BM placas Ø 90 mm

52 Método IRIS Salmonella Ágar Método de referência: NF EN ISO 6579, pg Método de pesquisa de Salmonella spp. em produtos de alimentação humana e amostras de meio ambiente. BKR 23/07 10/11 Métodos alternativos de análise para produtos agroalimentares. Princípios: enriquecimento em meio seletivo Salmonella Enriquecimento 18 ± 2 h à 41,5 ± 1ºC. semeadura em IRIS Salmonella Ágar e incubação à 37 ± 1ºC por 24 ± 3 horas. confirmação de uma colônia característica por CONFIRM' Salmonella. Enriquecimento de Salmonella BK194HA frasco 500g BK194GC embalagem 5 Kg BM flaconetes 225 ml BM embalagens 3 L BM embalagens 5 L Enriquecimento de Salmonella + Tween 80 BM embalagens 3 L Suplemento IRIS Salmonella BS07708 embalagem com 120 comprimidos BS flaconetes 50 ml IRIS Salmonella Ágar BM placas Ø 90 mm BM placas Ø 90 mm CONFIRM' Salmonella BT01108 kit de aglutinação em latex (50 T)

53 ANEXO C: Lista dos principais meios de cultura para a microbiologia de alimentos. PRODUTO Ágar Seletivo B. Cereus segundo MOSSEL Ágar Triptonasoja Caldo Triptonacaseínasoja (TSB) Ágar Columbia Ágar MULLERHINTON Ágar Triptona Sulfito Cicloserina (TSC) Caldo Tioglicolato com resazurina Caldo LactoseSulfito Ágar VRBL Caldo lactose bile verde brilhante Caldo Laurilsulfatotriptose Água Peptonada Tamponada 20 g/l Água Peptonada Tamponada 25,5 g/l APRESENTAÇÃO BK116HA frasco 500g BM placas de Ø 90 mm Suplemento Seletivo Polimixina B BS flaconetes Emulsão estéril de gema de ovo BS frascos 50 ml Emulsão estéril de gema de ovo com polimixina B BS frascos 50 ml BK028HA frasco 500g BK046HA frasco 500g BK046GC embalagem 5 Kg BM tubos 10 ml BM embalagens 5 L BK019HA frasco 500g BK048HA frasco 500g BM flaconetes 200 ml BM tubos 20 ml Meio base desidratado (s/ Dcicloserina) BK031HA frasco 500g Suplemento Seletivo Dcicloserina 200 mg BS00608 kit com 10 frascos Emulsão gema de ovo BS frascos 50 ml BK017HA frasco 500g BK017GC embalagem 5 Kg BM tubos 10 ml BK140HA frasco 500g BK152HA frasco 500g BK152GC embalagem 5 Kg BM flaconetes 200 ml BK002HA frasco 500g BM tubos 10 ml com cloro BK010HA frasco 500g BM tubos 10 ml com cloro (concentração simples) BM tubos 10 ml com cloro (concentração dupla) BK131HA frasco 500g BK131GC embalagem 5 Kg BK018HA frasco 500g BK018GC embalagem 5 Kg BM flaconetes 225 ml

54 Caldo de enriquecimento para enterobactérias Caldo MüllerKauffmann tetrationatonovobiocina Caldo RappaportVASSILIADIS Ágar VRGB Caldo RappaportVASSILIADIS Soja (RVS) Ágar Nutriente à 2% Ágar Glicose Ágar TBX Caldo com glutamato Caldo caseínasoja modificado (mtbs) Ágar MacConkey Ágar MacConkey Sorbitol (CTSMAC) Caldo de triptofano Caldo EC Ágar DG 18 Ágar DRBC Caldo DemiFraser BM tubos 9 ml BM flaconetes 90 ml BM embalagens 3 L BM embalagens 5 L BK127HA frasco 500g Meio pronto para uso BM tubos 10 ml Meio base desidratado BK16908 frasco 500g Suplemento Seletivo Novobiocina 10 mg BS03308 embalagem com 10 frascos Suplemento Seletivo Novobiocina 40 mg BS05608 embalagem com 8 frascos BK136HA frasco 500g BK011HA frasco 100g BK011GC embalagem 5 Kg Meio pronto para uso BM tubos 10 ml sidratado BK148HA frasco 500g BK185HA frasco 500g BM tubos 10 ml BK146HA frasco 500g BK146HM frasco 100g BM flaconetes 100 ml BM flaconetes 200 ml Bk186HA frasco 500g BK150HA frasco 500g BK050HA frasco 500g BK147HA frasco 500g Suplemento Seletivo cefiximatelurito BS flaconetes qsp 500 ml BK163HA frasco 500g BM tubos 3 ml BK162HA frasco 500g BK170HA frasco 500g BM flaconetes 100 ml BK198HA frasco 500g BM flaconetes 200 ml Base sem citrato de ferro III amoniacal BK173HA frasco 500g BK173GC embalagem 5 Kg Base sem citrato de ferro III amoniacal, nem

55 Ágar Oxford Ágar Palcam Ágar TSI Ágar de Hektoen Ágar BAIRDPARKER Caldo CérebroCoração Caldo de GIOLITTI e CANTONI com Tween 80 Ágar bacteriológico tipo A Ágar bacteriológico tipo E Àgar TCBS Ágar KLIGLER Ágar TriptoCaseína Soja (TSA) Caldo TriptonaSalino Ágar TSC ácido nalidíxico e nem acriflavina BK133HA frasco 500g BK133GC embalagem 5 Kg BM tubos 10 ml Suplemento seletivo para Caldo Demi Fraser BS flaconetes qsp 500 ml BS flaconetes qsp 2,25 L Solução estéril de citrato férrico amoniacal 5% BS flaconetes 90 ml BS tubos 10 ml BK110HA frasco 500g Suplemento seletivo para ágar Oxford BS flaconetes 500 ml BK145HA frasco 500g BM placas Ø 90 mm Suplemento seletivo para ágar Palcam BS flaconetes qsp 500 ml BS flaconetes qsp 2,25 L BK059HA frasco 500g BK067HA frasco 500g BK055HA frasco 500g BK055GC embalagem 5 Kg BM placas Ø 90 mm BM placas Ø 55 mm BK015HA frasco 500g Plasma de coelho liofilizado BR flaconetes 20 reações BK159HA frasco 500g BM tubos 9 ml A1010HA frasco 500g A1010GC embalagem 5 Kg A1012HA frasco 500g A1012GC embalagem 5 Kg BK040HA frasco 500g BK034HA frasco 500g BK047HA frasco 500g BM flaconetes 100 ml BM flaconetes 200 ml BK014HA frasco 500g BM tubos 9 ml BM embalagens 3 L BM embalagens 5 L BK031HA frasco 500g BM tubos 9 ml

56 Ágar MRS Ágar Contagem de Placa (PCA) Ágar YGC Ágar OGA BK089HA frasco 500g BM flaconetes 200 ml BK144HA frasco 500g BK144GC embalagem 5 Kg BM flaconetes 100 ml BM flaconetes 200 ml BK007HA frasco 500g BM flaconetes 100 ml BM flaconetes 200 ml BK053HA frasco 500g BM flaconetes 110 ml Suplemento seletivo oxitetraciclina 50 mg BS flaconetes qsp 550 ml Suplemento Seletivo Gentamicina BS flaconetes

57 Apresentações A) Ágar: PRONTO: Placas de Petri (ainda não disponíveis no Brasil): Pacote com 120 unidades de Ø 55 e 90 mm; Pacote com 20 unidades de Ø 55 e 90 mm; Pacote com 10 unidades de Ø 55 e 90 mm. PRONTO PARA SOLUBILIZAR: Flaconetes (ainda não disponíveis no Brasil):: 10 flaconetes de 100 ml; 10 flaconetes de 200 ml; 10 flaconetes de 500 ml; DESIDRATADO: Frascos: Embalagem de 500g; Embalagem de 5 Kg.

58 Apresentações B) Caldos: PRONTO PARA USO: Frascos (ainda não disponíveis no Brasil): 10 frascos de 90 ml; 10 frascos de 100 ml; 10 frascos de 200 ml. Tubos (ainda não disponíveis no Brasil): 50 tubos de 9 ml; 50 tubos de 10 ml; 5 tubos de 5 e 7 ml. Embalagens flexíveis (ainda não disponíveis no Brasil): 3 embalagens de 3L; 2 embalagens de 5L. DESIDRATADO: Frascos: Embalagem de 500g; Embalagem de 5 Kg.

59 BIOKAR Diagnostics Qualidade O Controle de Qualidade da Biokar Diagnostics certifica o desempenho de seus produtos em conformidade com os padrões ISO: Testes de desempenho; Condições de transporte; Testes de esterilidade; Testes de neutralização; Análises das características físicoquímicas (ph, aspecto...). BIOKAR Diagnostics é certificada de acordo com as normas padrão de gerenciamento ISO 9001:2008. A Biokar Diagnostics propõe um acesso direto à documentação técnica de seus produtos nos sites: Ficha Técnica; Ficha de Segurança; Laudo de Análise. Acesse nossos sites: OU