MICROBIOLOGIA CLÍNICA PERGUNTAS & RESPOSTAS

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1 MICROBIOLOGIA CLÍNICA PERGUNTAS & RESPOSTAS 1) Quais as possíveis interpretações para um resultado negativo de cultura de urina de jato médio que mostra leucocitúria acentuada no exame de sedimento urinário? Diversas são possibilidades: Uso prévio de antimicrobianos Contaminação com material genital (coleta inadequada) Tuberculose renal Infecções por Clamydia trachomatis, Mycoplasma spp ou Ureaplasma urealyticum Microrganismos não são capazes de crescer nos meio para urocultura Calculose renal, nefrites ou glomerulonefrites proliferativas lúpicas Processos inflamatórios ou traumáticos vesicais (pósoperatórios) - A presença de leucocitúria tem alta sensibilidade (95%), mas baixa especificidade (70%), para indicar infecção do trato urinário. - Ao contrário, a presença de bactérias no exame microscópico direto tem alta especificidade (85-90%), mas baixa sensibilidade (40-70%).

2 2) Quais são os principais agentes bacterianos causadores de diarréia que devem ser pesquisados em cultura de fezes e qual a rotina laboratorial mais indicada? Os agentes mais freqüentemente associados à diarréia, no nosso meio, são: Salmonella spp Shigella spp. Escherichia coli diarreiogênicas Campylobacter spp. Vibrio spp. Aeromonas Plesiomonas Clostridium perfringens A amostra de fezes para cultura devem ser enviadas ao laboratório em temperatura ambiente (2h) ou em meio de transporte, refrigeradas (24h). Semear a amostras nos meios: Exceção: Vibrio spp.: TA/MeioTCBS Caldo de enriquecimento Selenito ou Tetrationato (35 o C;12-18h); MacConkey ou Teague e SS ou Hektoen (35 o C;18-24h); Meio para Campylobacter (AS Campy) - (42 o C;48h;microaerofilia). Colônias suspeitas submetidas a testes bioquímicos e soroaglutinação, quando indicado (Salmonella, Shigella, EPEC, EHEC, EIEC).

3 3) Como o número de amostras de sangue colhidas pode ajudar a interpretar o resultado de um exame de hemocultura? O número de amostras coletadas é importante no momento da interpretação de resultados. UMA amostra é o volume de sangue obtido por UMA PUNÇÃO VENOSA (que é inoculado em um ou mais frascos). De modo geral, em casos de bacteremia, uma amostra apresenta sensibilidade de 80% enquanto que em três amostras a sensibilidade pode chegar a 95%. Alguns microrganismos isolados em hemocultura sugerem ocorrência de contaminação (Staphylococcus coagulase-negativos, Micrococcus, bacilos difteróides). O número de amostras positivas pode ajudar na valorização ou não dos resultados. Ex.: O resultado de 2-3 amostras positivas para Staphylococcus coagulase-negativos pode apresentar grande valor preditivo positivo de infecção. A análise de resultados de hemoculturas deve considerar a condição clínica do paciente, o microrganismo isolado e o número de amostras positivas.

4 4) Como pode ser feito o diagnóstico microbiológico de infecções relacionadas a cateteres? A cultura de rotina de todos os cateteres removidos não é recomendada. Só devem ser processados aqueles provenientes de pacientes com suspeita de bacteremia. Método utilizado (Maki): rolamento do segmento distal do cateter, na superfície de uma placa de agar sangue e contagem de colônias após 24 horas de incubação. Crescimento > 15 UFC: sugestivo de infecção Pacientes com cateteres de longa permanência (CVC): cultura de amostras de sangue pareadas e simultaneamente obtidas (cateter central e de veia periférica). Alto valor preditivo de infecção associada ao cateter: Contagem de UFC/mL da amostra obtida de cateter central 5-10 vezes maior que a da amostra obtida de sangue periférico. Diferença no tempo de positividade entre o frasco de hemocultura com amostra do cateter e do sangue periférico maior que 2 horas (sistemas automatizados).

5 5) Vale a pena fazer a pesquisa direta de antígenos bacterianos no líquor? A análise microbiológica do líquor é um dos exames de maior urgência no laboratório de microbiologia clínica. Um diagnóstico rápido, mesmo sendo presuntivo pode direcionar corretamente o tratamento. A pesquisa de antígenos bacterianos é um teste rápido e simples e pode antecipar o diagnóstico de meningite em várias horas. Apresenta 90% de sensibilidade, para a detecção dos agentes etiológicos mais prevalentes no líquor. Em alguns casos é mais sensível que a cultura: - uso prévio de antimicrobianos; - demora no transporte do material para o laboratório; - refrigeração da amostra. Embora a pesquisa de antígenos direta do líquor seja uma metodologia de custo elevado, a sua utilização é de grande importância especialmente em serviços de emergência, particularmente de atendimento pediátrico.

6 6. Se um isolado de Staphylococcus spp. se mostrar resistente à oxacilina, por que pode-se extrapolar a resistência a todos os betalactâmicos? Staphylococcus spp. resistentes à oxacilina Gene meca Elemento Genético: cassete cromossômico mec ou SCCmec A aquisição do elemento genético é condição necessária para que uma cepa de S. aureus seja considerada ORSA (MRSA) resistente a TODOS antimicrobianos betalactâmicos. Brasil Cepa hospitalar de ORSA - clone endêmico brasileiro (CEB) SCCmec tipo III com múltiplos genes: resistência à oxacilina, sendo a maioria com resistência cruzada a outras classes de antibióticos (aminoglicosídeos, macrolídeos, tetraciclinas, etc.), exceto a vancomicina.

7 7. É possível um resultado de antibiograma de enterobactérias mostrar diferença de sensibilidade para os carbapenens? AmpC Confere resistência a todos os betalactâmicos, exceto carbapenens, sendo constitutiva ou induzida. ESBL Podem hidrolisar praticamente todos os betalactâmicos, com exceção apenas dos carbapenens (imipenem e meropenem) e das cefamicinas (cefoxitina). Mecanismos de Resistência: Diminuição da permeabilidade por perda de porinas A diminuição da permeabilidade da membrana externa se dá por perda de porina OprD. Produção de metalo-betalactamase (MBL) Confere resistência aos carbapenens e a todos os outros betalactâmicos, com exceção dos monobactâmicos. A diferença de perfil de sensibilidade entre os carbapenens é observada com maior frequência em bacilos gram-negativos não-fermentadores de origem hospitalar como Pseudomonas aeruginosa ou Acinetobacter spp. Cepas de enterobactérias que apresentam diferenças de perfis de sensibilidade entre os carbapenens é um evento raro e, quando ocorre, é observado mais comumente em amostras de Klebsiella pneumoniae.